学术投稿

慢病毒介导TIEG1基因乳腺癌靶向载体的构建及活性测定

蒋磊;林飞燕;王福乐;叶爱芳;吴建波

关键词:乳腺肿瘤, Survivin启动子, TIEG1, 慢病毒载体
摘要:目的:构建慢病毒介导的TIEG1基因乳腺癌特异性靶向载体,并鉴定其活性.方法:将乳腺癌特异性survivin启动子片段和TIEG1基因先后克隆进带有绿色荧光蛋白的慢病毒载体中,构建survivin启动子驱动的TIEG1基因慢病毒表达载体,酶切及测序鉴定.包装纯化慢病毒颗粒,感染人脐静脉内皮细胞HUVEC和乳腺癌细胞SK-BR-3,观察绿色荧光蛋白的特异性表达.结果:成功构建带有肿瘤特异性survivin启动子驱动的TIEG1基因慢病毒表达载体.感染细胞后,乳腺癌SK-BR-3细胞可观察到绿色荧光表达,而人正常脐静脉内皮细胞基本无表达.半定量RT-PCR证实TIEG1基因在乳腺癌SK-BR-3细胞中过表达.结论:构建的survivin启动子驱动的慢病毒表达载体具有一定的肿瘤特异性,将为实现以慢病毒为载体的TIEG1基因肿瘤靶向治疗提供良好的实验基础.
实用医学杂志相关文献
  • 灯盏花素联合α-硫辛酸治疗糖尿病周围神经病变的疗效

    目的:评价灯盏花素联合α-硫辛酸对糖尿病周围神经病变的治疗效果.方法:80例糖尿病性周围神经病变患者随机分为两组,治疗组每日给予灯盏花素40 mg,α-硫辛酸600 mg,甲钴胺500 μg治疗15 d;对照组每日给予α-硫辛酸600 mg,甲钴胺500 μg治疗15 d.治疗前后分别进行神经传导速度及感觉症状比较.结果:15 d治疗后,与对照组相比,治疗组在感觉症状及神经传导速度方面改善更明显 (P < 0.05).结论:临床使用灯盏花素联合α-硫辛酸治疗糖尿病合并周围神经病变效果明显.

    作者:姜海波;王小川;钱达元;尹厚民;冯蔚 刊期: 2011年第11期

  • 食管鳞状细胞癌中SFRP1、Wnt-1的表达及临床意义

    目的:研究分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)和Wnt-1在食管鳞癌中的表达情况,探讨其在食管鳞状细胞癌发生发展及与临床病理特征的关系.方法:应用免疫组织化学法(SP法),检测60例食管鳞状细胞癌组织和40例正常食管黏膜中SFRP1和Wnt-1蛋白的表达.结果:食管鳞状细胞癌中SFRP1的阳性表达率为25.0%,显著低于癌旁正常组织黏膜中的92.5%(χ2 = 43.81),Wnt-1在食管鳞状细胞癌中的阳性表达率为73.3%,显著高于癌旁正常组织中的17.5%(χ2 = 29.94).在食管鳞癌组织中,SFRP1的表达与临床病理因素无相关性,Wnt-1的表达与组织分化程度有关.结论:SFRP1和Wnt-1在食管鳞癌的发生、发展中起一定的作用,它们有望成为辅助参考指标应用于临床,并可能为食管鳞癌的生物治疗和预后判断提供部分理论依据.

    作者:马传香;王美红;张式暖;刘慧荣 刊期: 2011年第11期

  • 糖尿病肾病中肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化的意义

    目的:通过糖尿病肾病(DN)患者肾脏标本及DN大鼠模型,探讨肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化(EMT)在DN中的意义.方法:肾穿刺活检取DN患者肾脏组织,通过Western blot检测E-cadherin及α-SMA蛋白的表达,免疫组化观察E-cadherin及α-SMA的表达,Real time-PCR检测ColⅠ RNA基因的表达,并检测空腹血糖、血清肌酐及24 h尿蛋白水平.注射链脲佐菌素建立大鼠DN模型,分别于建模后1、2、4、8、12及24周处死动物并取肾脏组织,并用上述同样方法检测相关指标.结果:DN患者中E-cadherin表达下降,α-SMA及Col I mRNA表达上调.DN组大鼠肾组织α-SMA蛋白及ColⅠ mRNA水平明显高于正常对照组(P < 0.05),E-cadherin蛋白表达显著低于正常对照组(P < 0.05);相关分析结果提示,DN组大鼠α-SMA、ColⅠ的变化趋势与血糖、24 h尿道白及肌酐的变化呈正相关; E-cadherin蛋白表达与上述生化指标的变化呈负相关.结论:EMT能够导致DN患者肾功能的下降,在DN进展中起重要作用.

    作者:钟雯;曾姣娥;宁尚侠;李又空 刊期: 2011年第11期

  • 鼻咽联合同期手术治疗阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的体会

    目的:总结采用鼻咽联合同期手术治疗阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS )的体会.方法:自2006年5月至2010年9月采用鼻咽联合同期手术治疗52例OSAHS患者,52例中男48例,女4例,男女比例12∶1,年龄27 ~ 65岁,中位数46岁,平均47岁,其中40岁以上占80%.术式特点:鼻咽同期手术,术后大部分即时拔管.结果:术后患者恢复良好,主观症状明显改善.结论:多平面狭窄的中重度OSAHS患者可同期手术,并可即时拔管,术后效果良好.

    作者:宋任东;林拥军;肖跃华;李爱君;丁丽英;杨凤;张海东;刘伟 刊期: 2011年第11期

  • 胃镜引导下放置瘘口引流管治疗食管癌术后胸内吻合口瘘的作用

    目的:探讨食管癌术后发生胸内吻合口瘘时,胃液及脓液有效引流的途径.方法:回顾性分析我科41例食管癌术后发生胸内吻合口瘘在胃镜引导下置入瘘口引流管患者的临床资料.结果:经胃镜引导下可在准确位置放置瘘口引流管,成功率100%(41/41),平均置管时间12 min,无并发症发生.结论:食管癌术后胸内吻合口瘘发生时,经胃镜引导下放置瘘口引流管,大程度保障胃液及脓液引流,加快瘘口愈合,促进患者康复,对治疗食管癌术后胸内吻合口瘘极具意义.

    作者:李桂珍;赵芳;魏薇;王雨;薛孟华 刊期: 2011年第11期

  • 内窥镜下鼻泪管联合逆行置管术治疗慢性泪囊炎的护理

    目的:总结内窥镜下钻通鼻泪管联合逆行置管术治疗慢性泪囊炎的护理体会.方法:回顾性分析我院自2010年1-6月对应用内窥镜下钻通鼻泪管联合逆行置管术治疗慢性泪囊炎54例(58只眼)病例的护理经验.结果:治愈54只眼,好转2只眼,无效2只眼,治愈率93.1%,总有效率为96.55%.结论:内窥镜下钻通鼻泪管联合逆行置管术治疗慢性泪囊炎具有安全、有效、微创等优点,术前术后系统的、有针对性的护理对于提高手术效果、减少并发症的发生有着重要的意义.

    作者:汪平意 刊期: 2011年第11期

  • HepG2.2.15细胞系中HBV复制相关抑制因素的变化

    目的:研究HBV对其自身复制相关抑制因素的影响,为今后探索提高抗病毒治疗的疗效提供基础.方法:采用实时荧光定量RT-PCR技术检测原蛋白转化酶(PCs)、肝细胞核因子(HNF)3*9茁和转化生长因子(TGF)*9茁1等HBV复制相关抑制因素的mRNA表达,采用Western印迹技术检测部分PCs的蛋白表达,通过比较模型细胞HepG2.2.15和其前体细胞HepG2的表达差别来判断HBV对其自身复制相关抑制因素的影响.结果:HepG2.2.15和HepG2细胞均相对高表达furin和PACE4,但HepG2细胞还高表达PC1/2.与HepG2细胞相比,HepG2.2.15细胞的PC1/3和PC7/8在mRNA水平显著被下调(均P < 0.05),且PC1/3在蛋白水平的表达也显著减少.HepG2.2.15细胞的HNF3β和TGFβ1的mRNA表达水平也发生了显著改变,分别增加到5.22倍和降低到0.35倍.结论:HBV的存在对其自身复制相关抑制因素可产生显著影响.下调部分PCs和TGF*9茁1表达可能有利于HBV自身复制,但上调HNF3*9茁的意义值得深入研究.

    作者:谢霞;陈燕;顾琳;雷瑞祥;彭晓谋 刊期: 2011年第11期

  • 颗粒细胞凋亡在卵泡闭锁中的研究进展

    青春与美丽是女性永恒的追求,然而因年龄渐长,卵巢衰老却不可避免.卵巢衰老导致心血管疾病、骨折、老年痴呆等发病率增加,严重影响女性的生存质量.卵泡数目的减少、周围微环境的改变及其对外界刺激的反应力降低是卵巢衰老的主要原因,而卵泡数目的减少与卵泡闭锁密切相关.女性一生中能够发育成熟并终释放的卵泡仅400 ~ 500个.因此,有超过99.9%的卵泡发生闭锁并终消失.颗粒细胞凋亡是启动卵泡闭锁的重要机制.卵泡闭锁受到多种因素调控,如下丘脑-垂体-性腺轴、卵巢微环境、各种调节因子等.本文就与颗粒细胞凋亡相关的因素在卵泡闭锁中的研究进展进行综述.

    作者:杨书红;罗爱月;王世宣 刊期: 2011年第11期

  • In-Fusion技术构建Ⅰ型钠通道与红色荧光蛋白共表达载体及其突变载体

    目的:构建Ⅰ型钠通道(NaV1.1)与红色荧光蛋白(DsRed)共表达载体及其突变载体.方法:利用In-Fusion技术将SCN1A基因亚克隆到DsRed真核细胞表达载体(pCMV-IRES-DsRed).限制性内切酶对载体进行酶切并回收线性载体片段,PCR扩增SCN1A基因(与线性载体对应两端有15个相同碱基),In-Fusion技术进行融合即得到pCMV-SCN1A-IRES-DsRed.将其转染HEK293T细胞,Western blot检测NaV1.1的表达.定点诱变试剂盒对其进行定点诱变.结果:成功构建NaV1.1与DsRed共表达载体,SCN1A基因所编码的第1 623位密码子由谷氨酸(Glu)突变为丙氨酸(Ala).结论:NaV1.1与DsRed共表达载体及其突变载体的构建成功,为进一步研究该突变位点导致NaV1.1功能的改变奠定了基础.

    作者:刘超;汤斌;曾杨;于美娟;石奕武;廖卫平 刊期: 2011年第11期

  • 雷公藤内酯醇对系统性红斑狼疮患者树突状细胞Toll样受体-9表达的影响

    目的:检测雷公藤内酯醇对体外培养的系统性红斑狼疮(SLE)患者树突状细胞(DC)Toll样受体-9(TLR9)表达的影响.方法:体外培养SLE患者DC,用终浓度分别为20、40、60 μg/L的雷公藤内酯醇刺激细胞3、6、12 h,混合淋巴细胞反应观察DC刺激T细胞后T细胞增殖的变化,RT-PCR检测TLR9 mRNA在DC中的表达情况.结果:与健康对照者相比,SLE患者DC表达CD11c+、CD123+ 的百分率明显下降(P < 0.05);雷公藤内酯醇以剂量依赖的形式抑制SLE患者DC刺激同种T细胞增殖;以剂量和时间依赖的形式下调SLE患者DC TLR9 mRNA表达.结论:雷公藤内酯醇可抑制SLE患者DC刺激同种T细胞增殖,雷公藤内酯醇可能通过下调SLE患者DC TLR9的表达而发挥免疫抑制作用.

    作者:刘冬舟;刘翠莲;洪小平;褚爱春 刊期: 2011年第11期

  • 甲泼尼龙对脊髓损伤线粒体凋亡相关基因表达的影响

    目的:探讨甲泼尼龙(MP)对脊髓损伤(SCI)早期线粒体凋亡相关基因表达的作用.方法:6只日本大耳兔随机分为两组:模型组和药物组(每组3只),行L4椎板切除后采用Allen法建立SCI模型.药物组于造模后2 h按人-兔等效剂量给予MP冲击治疗.造模后8 h处死分别获取损伤区长约8 mm的脊髓组织Trizol 法提取总RNA,经质检合格后采用Agilent 兔子表达谱芯片进行检测.采用GeneSpring 11.0软件,绘制箱线图和火山图;以P < 0.05 且FC ≥2为差异表达基因的筛选条件,本文针对线粒体凋亡相关基因进行分析.结果:成功建立SCI的动物模型.抽提的6个RNA样品的2100 RIN > 7.0 并且28S/18S > 0.7;重复探针点信号CV 值< 15%.在线粒体凋亡相关基因中VDAC5P、SLC25A5药物组和模型组比较呈现显著的差异性表达.VDAC5P和SLC25A5构成线粒体膜转化孔(PTP)的主要成分,二者构象的改变可引起线粒体转化孔的高通透状态.结论:MP能对线粒体凋亡相关基因的表达进行调节,可能是其发挥神经保护的机制之一.

    作者:黄颖;郑燕科;张春强;王兵;黄河;赵学凌 刊期: 2011年第11期

  • 空泡蝶鞍综合征的诊疗特点

    空泡蝶鞍合征(empty-sella syhdrome,ESS)系因垂体萎缩、鞍隔缺如,脑脊液压力使蛛网膜下腔疝入鞍内,并使其内填充脑脊液,使垂体受压变平,鞍蝶扩大、变形而产生相应的一组临床表现.其中原发性者主要与蛛网膜憩室通过扩大的漏斗孔从鞍上池突入到垂体窝有关.继发性者主要常见于鞍上的蛛网膜借助鞍内病变术后或放疗后扩大的蝶鞍疝入.本文主要综述原发性空泡蝶鞍综合征的诊疗特点.

    作者:严斌;彭巧玲;段立晖;任苏虹;赵文新;周国庆 刊期: 2011年第11期

  • 过度通气对控制性降压下颅内动脉瘤夹闭术中脑氧代谢的影响

    目的:研究过度通气对控制性降压下颅内动脉瘤夹闭术中脑氧代谢的影响.方法:择取颅内动脉瘤患者36例,ASAⅠ~Ⅱ级,随机分为正常通气组(A组,PaCO2 35 ~ 40 mmHg)、轻度通气组(B组,PaCO2 30 ~ 35 mmHg)和中度通气组(C组,PaCO2 25 ~ 30 mmHg).各组应用硝酸甘油控制性降压,降压幅度在基础值的20% ~ 25%,在降压达到目标值15 min后进行过度通气.各组于降压前(T0)、降压达到目标血压15 min后(T1)、过度通气使PaCO2达到各组预定值15 min后(T2)、MAP恢复且PaCO2恢复到35 ~ 40 mmHg 后15 min(T3)抽取桡动脉血和颈内静脉血进行血气分析,计算动脉血氧含量(CaO2)、静脉血氧含量(CjvO2)、动脉-静脉血氧含量差(Da-jvO2)和脑氧摄取率(CERO2).结果:与T0比较,各组T1、T2时MAP显著降低(P < 0.05),T3时MAP差异无统计学意义(P > 0.05).与T0比较,A组和B组其余时点各项指标差异无统计学意义(P > 0.05);与T0比较,C组各时点CaO2差异无统计学意义(P > 0.05),T2时C组CjvO2明显降低(P < 0.05)、Da-jvO2和CERO2显著升高(P < 0.05).结论:控制性降压下颅内动脉瘤夹闭术中保持PaCO2在(30 ± 2)mmHg时脑氧代谢障碍,维持PaCO2在(35 ± 2) mmHg以上是安全的.

    作者:刘永哲;高明龙;潘宁玲 刊期: 2011年第11期

  • 主动脉瓣二叶畸形合并右侧冠状动脉瘘1例

    患者男,39岁,因心悸憋喘1周入院.患者无明显诱因1周前出现心悸憋喘,进行性加重,夜间不能平卧.门诊予心脏彩超检查示:主动脉瓣二叶畸形伴重度狭窄,瓣环直径约2.4 cm,大血流3.65 m/s,平均2.64 m/s,大压差53 mmHg,平均32 mmHg.左室室壁运动减弱,左房左室内径增大,EF:41%.心电图示:ⅡⅢaVR aVL aVF R波粗顿,ⅡⅢaVF、V4 ~ V6导联T波倒置.既往无高血压、糖尿病史,吸烟史20余年,6 ~ 12支/d.入院体检:BP 80/60 mmHg,双肺呼吸音清晰,未闻及明显干湿啰音.心前区无隆起及异常搏动,心界稍大,HR 75次/min,律齐,胸骨右缘2、3肋间可闻及Ⅳ/6级吹风样杂音,性质粗糙.入院查血生化未见明显异常.入院诊断为:先天性心脏病、主动脉瓣二叶畸形伴狭窄(重度)、心力衰竭(NYHAⅢ级).

    作者:唐敏;夏勇 刊期: 2011年第11期

  • 臭氧介入治疗腰椎间盘突出症临床分析

    目的:探讨腰椎间盘突出症臭氧介入治疗疗效.方法:在C臂机透视引导下臭氧介入治疗腰椎间盘突出症153例.结果:153例患者治疗后6 ~ 12个月随访,按MacNab疗效标准评定:显效47例,有效78例,无效28例,总有效率达81.7%.结论:臭氧介入治疗腰椎间盘突出症是一种操作简单、创伤小、安全、疗效确切的方法.

    作者:胡广健;冯锡光;陈俊柱;李伟明;蒋佑升 刊期: 2011年第11期

  • 漏斗胸Nuss矫形术43例护理体会

    目的:漏斗胸是小儿常见的一种胸壁畸形病变,严重影响患儿的生存质量.我们通过对实施Nuss矫形术的漏斗胸患儿实行针对性的心理护理,结合术前术后周密的护理,取得良好的效果.方法:男31例,女12例,年龄:12 ~ 25岁,在胸腔镜直视下将钢板支架置入,术后2年左右拆除支架.结果:手术时间26 ~ 50 min,平均37 min.术后2年拆除支架,漏斗胸矫形良好.43例全部随访至今,手术均获成功,术后随访效果满意.结论:胸腔镜微创漏斗胸Nuss矫形术,加强心理护理,充分的术前准备及完善的术后护理,远期的健康教育指导是保证手术成功的关键.

    作者:冯秀琴;王俊杰 刊期: 2011年第11期

  • 甲状旁腺次全切除术治疗尿毒症继发性甲状旁腺功能亢进

    目的:研究甲状旁腺次全切除术对维持性血液透析患者继发性甲状旁腺功能亢进(SHPT)的临床疗效.方法:对2003年1月至2009 年12月期间在我院接受甲状旁腺次全切除术治疗的维持性血液透析患者13例进行回顾性分析,对手术前及手术后3 d、1周、1个月、3个月、6个月的全段甲状旁腺激素(iPTH)、血钙、血磷及钙磷乘积进行统计学分析,统计术前及术后骨痛缓解情况及手术并发症.结果:患者术后骨痛明显缓解,无一例出现手术并发症.13例患者均有完整统计学数据.患者术后3 d、1周、1个月、3个月、6个月的iPTH较术前明显下降,有统计学意义;术后3个月、6个月iPTH较术后1月升高,有统计学意义;术后血钙、血磷及钙磷乘积较术前明显下降,有统计学意义.术后6个月有4例复发,复发率30.8%.结论:甲状旁腺次全切除术能有效治疗维持性血液透析患者SHPT,短期治疗效果满意,手术安全,尽管远期有一定复发率,但仍能较好地控制血钙和血磷.

    作者:马锦华;唐晓虹;苏振国;莫靖梧;陈立英 刊期: 2011年第11期

  • 糖尿病和非糖尿病患者尿路感染的临床分析

    目的:通过对糖尿病患者与非糖尿病患者之间尿路感染的临床分析,探讨糖尿病患者的尿路感染特点,为进一步临床诊治提供依据.方法:将确诊为尿路感染的230例住院患者,分为糖尿病组和非糖尿病组,通过病例对照研究两组的症状、病原菌分布及药敏情况.结果:糖尿病组的尿路感染无临床症状的占21.1%,高于非糖尿病组(2.6%),两组尿路感染均以大肠埃希菌为主,但糖尿病组大肠埃希菌的比例较高,药敏以对舒普深敏感.结论:糖尿病患者无症状性菌尿发生率较高,感染产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌及真菌的几率高,总的治愈率较低,住院时间长.因此要重视糖尿病患者中段尿的培养,选择敏感抗生素或抗真菌药.

    作者:廖慧华;蔡德鸿 刊期: 2011年第11期

  • ABO血型正反定型不符41例原因分析及解决方法

    目的:分析ABO血型正反定型不符的原因,寻找解决问题的方法,并初步建立起血型正反定型不符时的操作规程.方法:对41例ABO血型正反定型不符的标本分别选用洗涤、改变反应温度、吸收放散试验,直接、间接抗人球蛋白实验,以及检测血型物质等实验方法.结果:经确认试验,分别判定为:22例抗体减弱,13例冷凝集,2例红细胞抗原表达减弱,2例白蛋白/球蛋白比例失调引起正反定型不符,1例由于血液中可溶性血型物质过多引起正反定型不符,1例金黄色葡萄球菌感染引起血型抗原改变.结论:ABO血型鉴定出现正反定型不符时,应根据表现型的具体情况和患者的临床资料设计血清学试验,正确鉴定ABO血型.

    作者:曹越;蔡元菊;刘彦明 刊期: 2011年第11期

  • 手足口病后肢体瘫痪20例临床分析

    目的:探讨手足口病后肢体瘫疾的临床诊治特点.方法:对2010年1-6月间曾于广州市妇女儿童医疗中心住院治疗的手足口病患儿追踪随访,对康复治疗3个月,仍伴有肢体瘫痪的20例患儿临床病例进行回顾性分析.结果:20例患儿病程早期11例需呼吸机支持治疗,发病10 d内头颅和(或)脊髓MR检查18例出现异常信号改变;经过3个月康复治疗,18例遗留肢体迟缓性瘫痪,其中单肢瘫占13例,双下肢瘫3例,四肢瘫2例,且近端肌力较远端差;1例为右上肢上运动神经元瘫;1例右上肢上运动神经元瘫,伴左下肢迟缓性瘫.结论:对手足口病并发神经系统损伤高危患儿密切观察,早期发现神经系统损伤,及时治疗,积极防治肢体瘫痪的发生,对改善预后有重要意义.

    作者:戴津;李小晶 刊期: 2011年第11期

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主办:广东省医学情报研究所