学术投稿

慢病毒介导TIEG1基因乳腺癌靶向载体的构建及活性测定

蒋磊;林飞燕;王福乐;叶爱芳;吴建波

关键词:乳腺肿瘤, Survivin启动子, TIEG1, 慢病毒载体
摘要:目的:构建慢病毒介导的TIEG1基因乳腺癌特异性靶向载体,并鉴定其活性.方法:将乳腺癌特异性survivin启动子片段和TIEG1基因先后克隆进带有绿色荧光蛋白的慢病毒载体中,构建survivin启动子驱动的TIEG1基因慢病毒表达载体,酶切及测序鉴定.包装纯化慢病毒颗粒,感染人脐静脉内皮细胞HUVEC和乳腺癌细胞SK-BR-3,观察绿色荧光蛋白的特异性表达.结果:成功构建带有肿瘤特异性survivin启动子驱动的TIEG1基因慢病毒表达载体.感染细胞后,乳腺癌SK-BR-3细胞可观察到绿色荧光表达,而人正常脐静脉内皮细胞基本无表达.半定量RT-PCR证实TIEG1基因在乳腺癌SK-BR-3细胞中过表达.结论:构建的survivin启动子驱动的慢病毒表达载体具有一定的肿瘤特异性,将为实现以慢病毒为载体的TIEG1基因肿瘤靶向治疗提供良好的实验基础.
实用医学杂志相关文献
  • 血管加压素治疗感染性休克时对重要脏器的影响

    感染性休克是一种血管舒张性休克,特征性表现是系统性血管舒张,心肌功能抑制导致的持续低血压,在病因治疗的同时需要血管紧张性物质如多巴胺,去甲肾上腺素(NE)或(及)血管加压素(AVP)维持平均动脉压,但在感染性休克中使用AVP有效维持平均动脉压的同时是否减少重要器官血流量,影响器官功能导致器官损伤仍然存在争议,因此本文对此进行如下综述.

    作者:赵颖莹 刊期: 2011年第11期

  • Mauriac 综合征1例

    患者女,28岁.8岁确诊为1型糖尿病,不规则短效胰岛素(国产)治疗,胰岛素平均用量50 ~ 60 U/d, 3次/d或4次/d,血糖长期控制不佳,随机血糖介于12 ~ 33 mmol/L之间,曾多次发生酮症酸中毒住院.智力正常,生长发育迟缓,28岁尚无第二性征发育.本次住院前10 d不规则使用胰岛素后再次出现四肢乏力、头晕、恶心,2 d前出现咳嗽伴发热.体检:体温 38.2℃,血压99/69 mmHg(1 mmHg = 0.133 kPa).精神萎靡,面色潮红,说话童音,身材矮小,无畸形,身高126 cm,体重41 kg.

    作者:余鲜艳;王冬英;吴惠珍;严美珍 刊期: 2011年第11期

  • GnRH-a减量疗法用于重度子宫内膜异位症术后的临床疗效

    目的:探讨重度子宫内膜异位症保守手术后,运用促性腺激素释放类似物(GnRH-a)减量疗法的临床疗效.方法:重度子宫内膜异位症患者24例,经腹腔镜保守手术治疗后随机分为3个小组,组A为常规剂量治疗组;组B减量疗法治疗组;组C为反加疗法治疗组.比较各组间在疼痛缓解程度、复发率、低雌激素表现、雌激素水平等方面是否有统计学差异.结果:腹腔镜手术联合GnRH-a减量疗法能有效缓解疼痛,防止复发,B组与其他两组相比,无明显差异;并能有效减少低雌激素表现;GnRH-a减量疗法治疗后,监测血E2的均值介于20 ~ 50 pg/mL这一治疗的窗口域值内.结论:重度子宫内膜异位症患者,经腹腔镜保守手术治疗后,运用GnRH-a减量疗法在预防复发的同时,能有效防止低雌激素的表现.

    作者:徐晓武 刊期: 2011年第11期

  • P120ctn在ER、PR阴性乳腺癌中的表达及其意义

    目的:检测雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)阴性乳腺癌组织中连环蛋白P120(P120ctn)的表达,分析其与临床病理因素的关系.方法:采用免疫组织化学染色的方法对比分析了52例ER、PR阴性乳腺癌组织和23例癌旁正常乳腺组织及21例乳腺纤维腺瘤组织中P120ctn的表达.结果:52例ER、PR阴性乳腺癌组织中有32例P120ctn(61.53%)膜表达弱阳性或阴性表达,29例(52.76%)胞质表达阳性,总异常表达35例(67.30%).21例乳腺纤维腺瘤组织中膜表达弱阳性6例(28.57%),胞质无表达.23例癌旁正常乳腺组织仅有2例为膜表达弱阳性(8.69%),其余均为胞膜正常表达.三者比较差异有显著性.29例组织分级Ⅰ~Ⅱ和23例组织分级Ⅲ中P120ctn的异常表达率分别为48.27% vs 78.26%(P < 0.05);30例有淋巴结转移和22例无淋巴结转移的癌组织P120ctn的异常表达率分别为76.66% vs 40.90% (P < 0.05);17例临床分期Ⅰ~Ⅱ和35例临床分期Ⅲ~Ⅳ组织中P120ctn的异常表达率分别为58.82% vs 65.71%(P > 0.05).P120ctn的异常表达与ER、PR阴性乳腺癌的组织学分级、淋巴结转移密切相关(P < 0.05),与临床分期无关(P > 0.05).结论:P120ctn在 ER、PR阴性乳腺癌的异常表达明显,可作为评估预后的一项有价值指标.

    作者:邹三鹏;魏涛;章志福;宁宇;刘倩平;陈维 刊期: 2011年第11期

  • 内窥镜下鼻泪管联合逆行置管术治疗慢性泪囊炎的护理

    目的:总结内窥镜下钻通鼻泪管联合逆行置管术治疗慢性泪囊炎的护理体会.方法:回顾性分析我院自2010年1-6月对应用内窥镜下钻通鼻泪管联合逆行置管术治疗慢性泪囊炎54例(58只眼)病例的护理经验.结果:治愈54只眼,好转2只眼,无效2只眼,治愈率93.1%,总有效率为96.55%.结论:内窥镜下钻通鼻泪管联合逆行置管术治疗慢性泪囊炎具有安全、有效、微创等优点,术前术后系统的、有针对性的护理对于提高手术效果、减少并发症的发生有着重要的意义.

    作者:汪平意 刊期: 2011年第11期

  • 系统性红斑狼疮的心脏损害临床分析

    目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)的心脏受累的临床特点以及发病因素.方法:回顾性总结分析2007年1月至2010年12月40例SLE患者的临床资料.结果:40例SLE患者中22例具有心脏损害,心脏损害表现在心电图(ECG)异常13例,心包积液9 例,肺动脉高压7 例,心肌损害8 例,瓣膜病11 例.心脏损害组与无心脏损害组之间年龄、性别差异无显著性(P > 0.05),心脏损害组起病至免疫抑制剂治疗前的时间、开始误诊率、确诊后开始未予免疫抑制剂治疗所占比例高于无心脏损害组(P < 0.05).结论:SLE可以累及心脏各个部分,其中以心包积液以及瓣膜返流以及ECG异常为常见.SLE的早期诊断、早期治疗可防治SLE心脏损害的发生.

    作者:黄映红;黄征宇;黎娇艳;郭宁 刊期: 2011年第11期

  • 漏斗胸Nuss矫形术43例护理体会

    目的:漏斗胸是小儿常见的一种胸壁畸形病变,严重影响患儿的生存质量.我们通过对实施Nuss矫形术的漏斗胸患儿实行针对性的心理护理,结合术前术后周密的护理,取得良好的效果.方法:男31例,女12例,年龄:12 ~ 25岁,在胸腔镜直视下将钢板支架置入,术后2年左右拆除支架.结果:手术时间26 ~ 50 min,平均37 min.术后2年拆除支架,漏斗胸矫形良好.43例全部随访至今,手术均获成功,术后随访效果满意.结论:胸腔镜微创漏斗胸Nuss矫形术,加强心理护理,充分的术前准备及完善的术后护理,远期的健康教育指导是保证手术成功的关键.

    作者:冯秀琴;王俊杰 刊期: 2011年第11期

  • HPLC 法测定间歇性高容量血液滤过患者血清、尿液及置换液中莫西沙星浓度

    目的:建立高效液相色谱法(HPLC)测定间歇性高容量血液滤过(PHVHF)患者血清、尿液及置换液中莫西沙星浓度.方法:PHVHF联合莫西沙星治疗肾衰合并感染患者8例,测定肾功、电解质.采用依利特SinoChrom ODS-BP色谱柱(5 μm,4.6 mm × 150 mm)测定莫西沙星浓度,流动相为乙腈:(10 mmol/L磷酸二氢钾、1.5 mmol/L四丁基硫酸氢胺) = 25:75(v/v),柱温 40℃,检测波长 290 nm,流速 1 mL/min.结果:血BUN 及SCr、血清K+ 水平显著下降(P < 0.05).血清莫西沙星在0.1 ~ 10.0 mg/L范围的线性回归方程为:y = 4.49x-0.257,r = 0.999 86.准确度为98.7% ~ 101%,日内和日间RSD为1.12% ~ 5.7%.置换液在0.1 ~ 10.0 mg/L范围的线性回归方程为:y = 3.877x-0.249,r = 0.998 5.准确度为85.7% ~ 95.7%,日内和日间RSD 为1.34% ~ 8.9%.尿液在0.1 ~ 10.0 mg/L范围的线性回归方程为:y = 3.565x-0.270,r = 0.986 8.准确度为97.4% ~ 101.7%,日内和日间RSD为1.51% ~ 11.6%.结论:HPLC方法检测血滤患者血清、尿液及置换液中莫西沙星浓度,方法简便、快速、重复性好,可满足临床研究血滤时莫西沙星药代动力学变化的要求.

    作者:李莉;史伟;陈铁锋;刘双信 刊期: 2011年第11期

  • 六味地黄丸对OLETF大鼠脂肪组织脂联素mRNA转录水平的影响

    目的:研究六味地黄丸对自发性2型糖尿病大鼠脂肪组织脂联素的影响.方法:OLETF鼠40只,分为干预组和对照组,LETO鼠10只作为正常对照组.干预组于8周龄起以六味地黄丸灌胃给药.监测不同周龄体质量、血糖、血浆胰岛素水平,并于8、32和40周分批宰杀大鼠,检测其脂肪组织脂联素mRNA.结果:8周龄OLETF鼠和LETO鼠脂肪组织脂联素mRNA水平差异无显著性,32和40周时OLETF 鼠脂肪组织脂联素mRNA水平显著低于LETO鼠(均P < 0.01).六味地黄丸可显著升高32和40周龄的OELTF鼠脂肪组织脂联素水平(均P < 0.05).OLETF鼠胰岛素敏感指数在32和40周龄显著低于LETO鼠(均P < 0.01),六味地黄丸可显著增高胰岛素敏感指数(ISI)(均P < 0.05).各周龄OLETF鼠脂肪组织脂联素mRNA水平与ISI显著相关(P < 0.01).结论:OLETF鼠脂肪组织脂联素mRNA水平与胰岛素敏感性呈正相关.六味地黄丸早期干预能显著增加OLETF鼠脂脂肪组织脂联素mRNA水平,改善OLETF鼠胰岛素抵抗.

    作者:郭煜;朱波;李晨钟;潘永华;张燕;薛耀明 刊期: 2011年第11期

  • 过度通气对控制性降压下颅内动脉瘤夹闭术中脑氧代谢的影响

    目的:研究过度通气对控制性降压下颅内动脉瘤夹闭术中脑氧代谢的影响.方法:择取颅内动脉瘤患者36例,ASAⅠ~Ⅱ级,随机分为正常通气组(A组,PaCO2 35 ~ 40 mmHg)、轻度通气组(B组,PaCO2 30 ~ 35 mmHg)和中度通气组(C组,PaCO2 25 ~ 30 mmHg).各组应用硝酸甘油控制性降压,降压幅度在基础值的20% ~ 25%,在降压达到目标值15 min后进行过度通气.各组于降压前(T0)、降压达到目标血压15 min后(T1)、过度通气使PaCO2达到各组预定值15 min后(T2)、MAP恢复且PaCO2恢复到35 ~ 40 mmHg 后15 min(T3)抽取桡动脉血和颈内静脉血进行血气分析,计算动脉血氧含量(CaO2)、静脉血氧含量(CjvO2)、动脉-静脉血氧含量差(Da-jvO2)和脑氧摄取率(CERO2).结果:与T0比较,各组T1、T2时MAP显著降低(P < 0.05),T3时MAP差异无统计学意义(P > 0.05).与T0比较,A组和B组其余时点各项指标差异无统计学意义(P > 0.05);与T0比较,C组各时点CaO2差异无统计学意义(P > 0.05),T2时C组CjvO2明显降低(P < 0.05)、Da-jvO2和CERO2显著升高(P < 0.05).结论:控制性降压下颅内动脉瘤夹闭术中保持PaCO2在(30 ± 2)mmHg时脑氧代谢障碍,维持PaCO2在(35 ± 2) mmHg以上是安全的.

    作者:刘永哲;高明龙;潘宁玲 刊期: 2011年第11期

  • 臭氧介入治疗腰椎间盘突出症临床分析

    目的:探讨腰椎间盘突出症臭氧介入治疗疗效.方法:在C臂机透视引导下臭氧介入治疗腰椎间盘突出症153例.结果:153例患者治疗后6 ~ 12个月随访,按MacNab疗效标准评定:显效47例,有效78例,无效28例,总有效率达81.7%.结论:臭氧介入治疗腰椎间盘突出症是一种操作简单、创伤小、安全、疗效确切的方法.

    作者:胡广健;冯锡光;陈俊柱;李伟明;蒋佑升 刊期: 2011年第11期

  • 糖尿病肾病中肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化的意义

    目的:通过糖尿病肾病(DN)患者肾脏标本及DN大鼠模型,探讨肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化(EMT)在DN中的意义.方法:肾穿刺活检取DN患者肾脏组织,通过Western blot检测E-cadherin及α-SMA蛋白的表达,免疫组化观察E-cadherin及α-SMA的表达,Real time-PCR检测ColⅠ RNA基因的表达,并检测空腹血糖、血清肌酐及24 h尿蛋白水平.注射链脲佐菌素建立大鼠DN模型,分别于建模后1、2、4、8、12及24周处死动物并取肾脏组织,并用上述同样方法检测相关指标.结果:DN患者中E-cadherin表达下降,α-SMA及Col I mRNA表达上调.DN组大鼠肾组织α-SMA蛋白及ColⅠ mRNA水平明显高于正常对照组(P < 0.05),E-cadherin蛋白表达显著低于正常对照组(P < 0.05);相关分析结果提示,DN组大鼠α-SMA、ColⅠ的变化趋势与血糖、24 h尿道白及肌酐的变化呈正相关; E-cadherin蛋白表达与上述生化指标的变化呈负相关.结论:EMT能够导致DN患者肾功能的下降,在DN进展中起重要作用.

    作者:钟雯;曾姣娥;宁尚侠;李又空 刊期: 2011年第11期

  • 血清抑制素B、卵泡刺激素和精浆中性α-葡萄糖苷酶在无精子症中的诊断意义

    目的:测定血清抑制素B(INHB)、卵泡刺激素(FSH)和精浆中性α-葡萄糖苷酶(α-Glu),评价其在诊断梗阻性和非梗阻性无精子症中的意义.方法:测定30例正常生育者(正常对照组),37例梗阻性无精子症以及33例非梗阻性无精子症患者的血清INHB、FSH和精浆中性α-Glu,采用受试者工作特征曲线(ROC),分析评价检测指标的敏感性和特异性.结果:血清INHB,血清FSH,精浆中性α-Glu在梗阻性无精症组与非梗阻性无精症组间差异均有显著性(P < 0.01),其中,血清INHB的曲线下面积大(0.962),诊断价值高,敏感性为95.5%,特异性为94.1%.结论:血清INHB可用于无精症的诊断,比血清FSH、精浆中性α-Glu在鉴别梗阻性无精症和非梗阻性无精症有更好的敏感性和特异性.

    作者:向代军;高文;穆莎;李纬 刊期: 2011年第11期

  • 甲状旁腺次全切除术治疗尿毒症继发性甲状旁腺功能亢进

    目的:研究甲状旁腺次全切除术对维持性血液透析患者继发性甲状旁腺功能亢进(SHPT)的临床疗效.方法:对2003年1月至2009 年12月期间在我院接受甲状旁腺次全切除术治疗的维持性血液透析患者13例进行回顾性分析,对手术前及手术后3 d、1周、1个月、3个月、6个月的全段甲状旁腺激素(iPTH)、血钙、血磷及钙磷乘积进行统计学分析,统计术前及术后骨痛缓解情况及手术并发症.结果:患者术后骨痛明显缓解,无一例出现手术并发症.13例患者均有完整统计学数据.患者术后3 d、1周、1个月、3个月、6个月的iPTH较术前明显下降,有统计学意义;术后3个月、6个月iPTH较术后1月升高,有统计学意义;术后血钙、血磷及钙磷乘积较术前明显下降,有统计学意义.术后6个月有4例复发,复发率30.8%.结论:甲状旁腺次全切除术能有效治疗维持性血液透析患者SHPT,短期治疗效果满意,手术安全,尽管远期有一定复发率,但仍能较好地控制血钙和血磷.

    作者:马锦华;唐晓虹;苏振国;莫靖梧;陈立英 刊期: 2011年第11期

  • 多重荧光STR-PCR方法在血友病A携带者产前基因诊断中的应用

    目的:通过血友病A家系遗传连锁分析,建立血友病A携带者产前诊断方法.方法:采用多重荧光STR-PCR方法对50例正常女性进行检测和20个血友病A家系进行连锁分析.结果:DXS15、DXS9901、G6PD、DXS1073、DXS1108和F8Civs13的杂合率分别为88%、84%、20%、62%、22%和30%;用这6个位点提供的遗传信息成功为20个血友病A携带者进行了产前诊断.结论:多重荧光STR-PCR方法是一种快速、简便、实用的血友病A产前诊断方法.

    作者:李少英;马晓燕;张慧敏;王晓蔓;黎青 刊期: 2011年第11期

  • 雷公藤内酯醇对系统性红斑狼疮患者树突状细胞Toll样受体-9表达的影响

    目的:检测雷公藤内酯醇对体外培养的系统性红斑狼疮(SLE)患者树突状细胞(DC)Toll样受体-9(TLR9)表达的影响.方法:体外培养SLE患者DC,用终浓度分别为20、40、60 μg/L的雷公藤内酯醇刺激细胞3、6、12 h,混合淋巴细胞反应观察DC刺激T细胞后T细胞增殖的变化,RT-PCR检测TLR9 mRNA在DC中的表达情况.结果:与健康对照者相比,SLE患者DC表达CD11c+、CD123+ 的百分率明显下降(P < 0.05);雷公藤内酯醇以剂量依赖的形式抑制SLE患者DC刺激同种T细胞增殖;以剂量和时间依赖的形式下调SLE患者DC TLR9 mRNA表达.结论:雷公藤内酯醇可抑制SLE患者DC刺激同种T细胞增殖,雷公藤内酯醇可能通过下调SLE患者DC TLR9的表达而发挥免疫抑制作用.

    作者:刘冬舟;刘翠莲;洪小平;褚爱春 刊期: 2011年第11期

  • 改良式平导矫治恒牙期安氏Ⅱ1S错(合)的疗效观察

    目的:评价改良式平导矫治恒牙期安氏Ⅱ1S错(合)的疗效.方法:恒牙期安氏Ⅱ1S错(合)患者30例,分成两组,分别采用普通平导和改良平导技术矫治,观察其打开咬合时间、后牙稳定性、前牙唇倾情况并作X线头影测量分析,评价两种方法的矫治效果.结果:两组矫治后SNA、SNB、ANB和UI-SN与术前比较,差异均有显著性(P < 0.05=.改良平导组矫治后SNA、SNB、ANB和UI-SN与普通平导组矫治后比较,差异均有显著性(P < 0.05=.改良平导组打开咬合时间明显短于普通平导组.结论:改良式平导可加强上颌后牙支抗,显著改善了覆(合),提高了安氏Ⅱ1S错(合)正畸效果.

    作者:范红燕;王月辉 刊期: 2011年第11期

  • 亲环素A在动脉粥样硬化形成和发展中的作用

    亲环素A(cyclophilin A,CyPA)是一种在生物界广泛存在、高度保守的蛋白质,初作为环孢素A(cyclosporin A, CsA)的细胞受体被发现.CyPA具有肽酰脯氨酰顺反异构酶(PPIase),在细胞内与CsA结合,介导免疫抑制;参与胆固醇转运,维持细胞内胆固醇的动态平衡;诱导炎性细胞聚集,发挥前炎性因子功能;刺激血管平滑肌细胞增殖参与血管损伤后重塑等多种病理过程,促进动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)的发生发展.本文就CyPA在AS形成中的病理作用机制作一综述.

    作者:李蓉 刊期: 2011年第11期

  • 培美曲塞与多西紫杉醇二线治疗复发性非小细胞肺癌临床疗效比较

    目的:比较培美曲塞与多西紫杉醇二线治疗体力状况评分(ECOG)0 ~ 2分晚期复发性非小细胞肺癌的临床疗效和安全性.方法:38例ECOG 0 ~ 2分晚期复发性非小细胞肺癌患者,随机分为两组,培美曲塞组:18例,培美曲塞500 mg/m2,第1天;多西紫杉醇组:20例,多西紫杉醇75 mg/m2,第1天.均21 d为一个周期.结果:可评价疗效的患者共38例,其中培美曲塞组与多西紫杉醇组疾病有效率分别为16.7%与15.0%(P > 0.05),疾病控制率分别为55.6%与55.0%(P > 0.05),中位生存期分别为8.6个月与8.4个月(P > 0.05).两组的不良反应主要为骨髓抑制、疲劳、脱发和消化道反应,培美曲塞组不良反应明显小于多西紫杉醇组,培美曲塞组Ⅲ~Ⅳ度中性粒细胞减少的发生率明显低于多西紫杉醇组(5.6% vs.25.0%,P < 0.05),培美曲塞组粒细胞减少性发热的发生率明显低于多西紫杉醇组(5.6% vs.20.0%,P < 0.05).结论:培美曲塞与多西紫杉醇治疗ECOG 0 ~ 2分晚期复发性非小细胞肺癌的临床疗效相似,但培美曲塞的血液毒性低,患者耐受性好,值得临床进一步探讨使用.

    作者:巴楠;吴敏;郑晓珂;王利娟 刊期: 2011年第11期

  • 新鲜冰冻血浆治疗重度有机磷农药中毒的临床研究

    目的:观察新鲜冰冻血浆治疗重度有机磷农药中毒的效果.方法:将我院收治的50例重度有机磷农药中毒患者随机分为对照组和血浆组,各25例,两组患者入院后常规给予洗胃、胆碱酯酶复能剂、阿托品等综合治疗,血浆组在常规治疗基础上新鲜冰冻血浆液500 mL静脉滴注(1次/d),连续5 d.结果:血浆组患者第3、5、7天血浆组血清胆碱酯酶水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05);血浆组患者住院时间、机械通气时间较对照组显著缩短,差异有统计学意义(P < 0.05);治愈率显著高于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05).

    作者:王妙淑 刊期: 2011年第11期

实用医学杂志

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主管:广东省卫生厅

主办:广东省医学情报研究所