学术投稿

金属硫蛋白非融合性原核表达载体的构建

TAN Jie-ying;付欣;LI Bing

关键词:金属硫蛋白, 基因重组, pBV220载体, 非融合表达
摘要:目的:构建表达金属硫蛋白(metallothionein,MT)的非融合性原核表达载体.方法:以大肠杆菌BL21中的PET-GST-MT质粒为模板,PCR扩增目的片段,双酶切,胶回收纯化,连接至pGEM-T载体扩增,双酶切,亚克隆至pBV220我体,转入大肠杆菌DH-5α中.结果:PCR产物大小符合要求.重组质粒PBV220-MT双酶切鉴定与其一致,测序结果正确.结论:成功构建MT原核表达载体,为下一步从DH-5α-pBV220-MT工程菌中表达并纯化非融合性MT打下基础.
实用医学杂志相关文献
  • 维生素K1佐治儿童支气管肺炎22例临床观察

    目的:观察维生素K1佐治儿童支气管肺炎22例的临床疗效.方法:选择42例支气管肺炎患儿分为治疗组22例和对照组20例,常规给予抗感染、抗病毒、雾化吸入止咳平喘、维持水电解质平衡和酸碱平衡等治疗,并视病情予以吸氧、吸痰、镇静等治疗,治疗组采用5%葡萄糖注射液50 mL+维生素K1针10 mg,对照组予以常规治疗,进行临床对比观察.结果:总有效率治疗组为90.9%,对照组为80.0%,差异有显著性(P<0.05).结论:维生素K1佐治儿童支气管肺炎疗效肯定,对早期阵发性刺激性干咳疗效更明显.

    作者:许国钧 刊期: 2008年第14期

  • 桩冠修复中根端微渗漏的观察

    目的:运用直流电路的改变观察不同的桩道长度根端微渗漏情况.方法:选用16颗上下颌前牙随机分为A、B两个实验组.将糊剂和牙胶尖按临床治疗操作要求侧方加压充填根管,A组充填至根尖孔,B组充填至根管3/4处.然后进行桩腔预备.A组再细分为A1和A2两个小组,分别预备至1/2、3/4根长度,B组则预备充填至3/4处.用直流电观察根管冠根向剩余充填材料封闭根尖的能力.结果:A2组与A1和B组间差异都存在显著性(P=0.000).而A1组和B组差异亦有显著性(P=0.048).结论:桩钉预备的长度在保证固位的前提下,根尖剩余充填材料越多越好.

    作者:邹亚光;王洪吉;段永利 刊期: 2008年第14期

  • 血浆肿瘤型M2丙酮酸激酶与其他肺癌标志物联合检测对肺癌的诊断价值

    目的:探讨血浆肿瘤型M2丙酮酸激酶(TuM2-PK)、神经元特异烯醇化酶(NSE)和细胞角蛋白19(CYFRA21-1)联合测定对肺癌的诊断价值.方法:用ELISA法分别检测肺癌患者组95例,良性肺部疾病组80例和健康体检组100名血中的TuM2-PK、NSE和CYFRA21-1的水平含量.结果:肺癌组3种指标水平均明显高于良性肺疾病组和健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01);TuM2-PK诊断肺癌的敏感性为66.3%,特异性为95%;TuM2-PK和NSE联合检测肺癌的阳性率高为81%.结论:3项指标对肺癌辅助诊断均有一定的价值,TuM1-PK和NSE联合检测可以提高对肺癌的阳性诊断,TuM2-PK可作为一种新肺癌标志物应用.

    作者:张健清;YE Man-man;王东;ZHANG Shi-hong;邓琅辉 刊期: 2008年第14期

  • 硬膜外与静脉注射舒芬太尼对预防阑尾牵拉反应的临床效果比较

    目的:观察并比较舒芬太尼硬膜外与静脉注射两种给药途径对预防阑尾牵拉反应的效果.方法:选择ASA Ⅰ~Ⅱ级在硬膜外阻滞下行阑尾切除术患者30例,分为硬膜外组和静脉组.切皮前分别经硬膜外和静脉注射20μg舒芬太尼,观察术中患者对牵拉阑尾的反应情况.结果:两种注射途径均有预防牵拉反应的效果,但硬膜外组优良率高于静脉组(P<0.05):两组患者注药后脉搏氧饱和度及平均动脉压均稍降,静脉组下降明显(P<0.05),硬膜外组不良反应较静脉组少.结论:舒芬太尼硬膜外和静脉注射均有预防阑尾牵拉反应的作用,但硬膜外注射更安全有效.

    作者:索琨;许立新;佘守章 刊期: 2008年第14期

  • 口服联合静脉注射钆喷酸葡胺改善磁共振胰胆管成像图像质量及临床应用

    目的:评价口服联合静脉注射钆喷酸葡胺(Gd-DTFIA)增强在抑制胃肠道高信号及腹部小血管高信号中的作用,改善磁共振胰胆管成像(MRCP)图像质量以提高对胰胆管病变的诊断及鉴别诊断水平.方法:在体外及临床实验的基础上,选取2 mL静脉用Gd-DTPA配制成100 mL浓度为0.01 mol/L的稀释液作为佳浓度和容量的MRCP口服用胃肠道阴性对比剂.对21例疑有胰胆管病变的患者行联合口服及静脉注射Gd-DTPA增强后10min行MRCP检查,分析增强前后胰胆管及病变的显示情况.结果:21例患者口服联合Gd-DTPA增强MRCP图像上,来自胰胆管树背景上的小血管信号影以及胃、十二指肠内潴留液高信号被明显抑制,肝脏和胰腺实质信号强度显著降低,使得胰胆管树各解剖结构的对比度提高,显示更加清楚,图像质量较口服联合Gd-DTPA增强前明显改善.结论:对于明确或高度怀疑有胰胆管病变的患者,口服联合静脉注射Gd-DTPA增强能抑制胃、十二指肠内潴留液的高信号以及胰胆管树背号上的小血管信号,能进一步改善MRCP图像质量,结合动态增强T1WT能为胰胆管病变的诊断及鉴别诊断提供更多帮助.

    作者:陈翼;ZHAO Yun-hui;许乙凯;WANG Gui-sheng 刊期: 2008年第14期

  • 吉非替尼治疗Ⅳ期耐药非小细胞肺癌33例

    目的:观察吉非替尼治疗Ⅳ期耐药非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效和不良反应.方法:对经过至少1次化疗无效的Ⅳ期耐药NSCLC患者33例,应用口服吉非替尼250 mg口服,每天1次,1粒/次,服药3个月后观察其疗效.结果:33例Ⅳ期耐药NSCLC患者中均可进行疗效评价,其中完全缓解1例(3%),部分缓解11例(33%),稳定9例(27%),无变化1例(3%),进展11例(33%),有效率为36%,疾病控制率为63%.与药物相关的不良反应,1例患者死于重症间质性肺病变(3%),痤疮样皮疹28例(85%),皮肤瘙痒31例(94%),四肢关节疼痛9例(27%),腹泻25例(76%),食欲减退29例(88%),大部分不良反应可以耐受,并且停药后多可自行停止.结论:吉非替尼治疗Ⅳ期耐药NSCLC肯定有效,能较好地缓解疾病相关症状,毒副反应轻微,患者耐受性和依从性好.

    作者:胡凤琼;林金容;张莉国 刊期: 2008年第14期

  • 血管内皮生长因子对神经细胞的保护作用及机制

    目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)对体外培养的神经元的保护作用及机制.方法:体外培养大鼠皮质神经元细胞,建立神经细胞缺氧缺糖/再灌注损伤模型(OGSD),在加入VEGF基础上,加入VEGFR-2/Flk-1受体抑制剂SU1498;检测(1)观察细胞形态学变化;(2)细胞活力;(3)线粒体跨膜电位;(4)凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达.结果:(1)OGSD组、VEGF164+SU1498组细胞损害重,VEGF组细胞损害轻(P<0.05);(2)OGSD组、VEGF164+SU1498组细胞活力下降明显(P<0.05),而VEGF组与正常组无明显区别:(3)OGSD组、VEGF164+SU1498组线粒体跨膜电位不稳定(P<0.05),VEGF组线粒体跨膜电位稳定;(4)OGSD组、VEGF164+SU1498组Bcl-2、Bax蛋白表达均增多,VEGF组Bcl-2蛋白表达增多明显(P<0.01),而Bax蛋白表达增多不明显(P<0.01).结论:VEGF对神经元起直接的保护作用,并通过与VEGFR-2受体结合减少了缺血、缺氧下培养的体外神经元细胞的凋亡.

    作者:林霞 刊期: 2008年第14期

  • 骨髓基质干细胞、骨诱导活性材料和两者复合物治疗兔早期股骨头坏死的疗效比较

    目的:比较骨髓基质干细胞(BMSC)、骨诱导活性材料(OAM)和两者复合物对早期股骨头坏死(ANFH)修复的疗效.筛选出佳方案,为临床应用提供依据.方法:28只新西兰大白兔随机分为A、B、C组,A、B组又分左、右侧组.采用液氮冷冻法建立双侧ANFH模型,A、B右侧组植入BMSC+OAM构建的组织工程复合物,A左侧组植入复合自体BMSC的明胶海绵,B左侧组植入OAMC组植入空白明胶海绵,术后2、4、6、8周随机取A、B两组各3只动物、C组1只动物,影像学检查后处死,取双侧股骨头标本进行组织学检查.结果:(1)X线显示,自实验第4周后A、B右侧组钻孔缺损区成骨明显优于左侧组及C组,表现为中心密度增高,缺损腔缩小,边缘模糊,6周时出现骨小梁结构,8周时有正常骨小梁结构;左侧组仅表现为随时间的延长,中心密度及边缘密度逐渐增高,形成硬化线,但无骨小梁结构,C组缺损区出现囊性变扩大并有塌陷.(2)组织学显示,A、B右侧组缺损区,2周时有成骨细胞,4周时有骨小梁及类骨质填充,6周时有成熟骨小梁和骨髓组织出现,8周时骨小梁成熟和骨髓组织形成:A、B左侧组在相同的时间内其组织学修复及新骨塑性与改建均不如各自的右侧组.结论:自体BMSC+OAM构建的组织工程复合物对兔早期ANFH修复作用优于单独应用BMSC和OAM,是目前治疗ANFH的佳治疗方法.

    作者:YANG Xin-ming;石蔚;DU Ya-kun;黄艳平;MENG Xian-yong;邹宇纬;YIN Yan-lin;李化光 刊期: 2008年第14期

  • 降压药物在清晨与睡前服用的疗效及安全性比较

    目的:探讨不同时间服用以培哚普利片(雅施达)为基础治疗用药的方案,对高血压患者采用不同时间用药的降压效果及安全性的影响.方法:2006年1月至2007年12月收集两家医院入选86例高血压患者,将其分为两组,分别在清晨或夜间口服雅施达4 mg/d,对部分血压仍未达标者加用利尿剂治疗,治疗前和疗程第12周进行动态血压监测.结果:应用雅施达降压治疗,夜间组与清晨组同组治疗前后比较,P<0.05,差异有显著性;夜间组与清晨组治疗后收缩压均值、平滑指数(SI)、血压变异性(BPV)比较,差异有显著性,而两组舒张压均值、SI、BPV比较P>0.05,差异无显著性.夜间组与清晨组服药组收缩压谷峰相比较P<0.05,差异有显著性,而两组舒张压谷峰比值相比较P>0.05,差异无显著性,两组在观察期内未发生心脑血管事件及症状性低血压不良反应.结论:根据患者及降压药物代谢动力学特点,合理安排用药时间,血压更有效平稳,从而达到保护靶器官的结构和功能,并降低发生心脏血管事件的危险性.

    作者:王海裕;陈林祥;王艺玲;刘锐棠;容文明 刊期: 2008年第14期

  • 三七总皂甙对佐剂性关节炎大鼠踝关节炎症及核因子-κB表达水平的影响

    目的:观察三七总皂甙对佐剂性关节炎(AA)大鼠踝关节炎症和核因子-κB(NF-κB)表达水平的影响,探讨三七总皂甙治疗类风湿关节炎(RA)可能的作用机制.方法:24只雄性lewis大鼠随机分为正常对照组、模型组、三七总皂甙组和地塞米松组.大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂建立AA模型,采用关节炎指数评估大鼠关节炎的情况,将大鼠踝关节病理切片分别做常规HE染色和免疫组化染色,对HE染色切片用光镜观察炎细胞浸润和滑膜细胞增生的情况,对免疫组化染色切片进行NF-κB表达的半定量分析.结果:三七总皂甙治疗2周后,大鼠多发性关节炎指数有所下降,与模型组比较差异有显著性(P<0.05),HE染色切片显示三七总皂甙组与模型组比较,关节炎症差异有显著性(P<0.05),免疫组化染色切片显示三七总皂甙组NF-κB表达下调,与模型组比较,差异有显著性(P<0.05).结论:三七总皂甙有改善大鼠关节滑膜炎症,抑制NF-κB表达的作用,这可能是三七总皂甙治疗RA的作用机制之一.

    作者:姚茹冰;QIAN Shan-feng;赵智明;GUO Jun-hao;胡兵;CAI Hui 刊期: 2008年第14期

  • 痰热清注射液雾化吸入治疗小儿麻疹合并肺炎49例

    支气管肺炎为麻疹常见的并发症,多见于5岁以下特别是2岁以下小儿.我们近3年来用痰热清雾化吸入治疗麻疹肺炎49例,疗效满意,报告如下.

    作者:张伯鹏;赵艳 刊期: 2008年第14期

  • 心脑血管病的一级预防

    心脑血管事件是全球性的重大公共卫生问题,其死亡率高,但美国和加拿大等发达国家自20世纪60年代末以来心脑血管病发病率出现下降趋势.

    作者:高红伟 刊期: 2008年第14期

  • 宫颈分泌物FFN、IGFBP-1及宫颈Bishop评分对足月妊娠临产时间的预测

    目的:通过检测宫颈分泌物胎儿纤连蛋白(FFN)、磷酸化胰岛素样生长因子-1(IGFBP-1)及宫颈Bishop评分进行足月妊娠,临产时间的预测,旨在寻找一种简便、快捷、客观、有效的预测方法.方法:选择符合条件的72例孕妇进行宫颈分泌物FFN、IGFBP-1检测及宫颈Bishop评分,并不给予任何干预等候自然临产.结果:随着宫颈成熟度的增加,宫颈分泌物IGFBP-1、FFN阳性率逐渐升高,宫颈成熟度与宫颈分泌物IGFBP-1、FFN阳性率呈正相关.FFN在预测分娩发动时间上的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别是91.3%、83.3%、95.5%、71.4%.而IGFBP-1的是86.7%、76.9%、92.9%、62.5%,宫颈Bishop评分是86.5%、66.7%、82.1%、73.7%.结论:宫颈分泌物FFN、IGFBP-1不仅反映宫颈成熟度,也反映子宫下段的生理变化过程,可作为产程发动的指标.选择宫颈分泌物FFN或IGFBP-1联合宫颈Bishop评分进行分娩预测,可大大提高分娩预测的准确性.

    作者:朱宇;管华;黎敏球 刊期: 2008年第14期

  • 核素肺灌注显像对血压正常伴右室功能不全的急性肺栓塞症溶栓疗效的评价

    目的:运用核素肺灌注显像对血压正常伴右室功能不全的急性肺栓塞患者溶栓治疗前后肺血流灌注进行观察和定量分析,为临床疗效评价提供准确和直观的客观依据.方法:36例急性肺栓塞患者分为溶栓组和抗凝组,在治疗前后均行肺灌注显像.应用半定量法计算全肺灌注缺损百分数(percentage of pulmonary defect score,PPDs)和灌注改善百分数(percentage of pulmonary improve score,PPIs).治疗前、治疗后7~10 d及25~30 d的PPDs分别记为PPDsD0、PPDsD10和PPDsD30.各组PPDsD0与PPDsD30之差、PPDsD0与PPDsD10之差、PPDsD10与PPDsD30之差分别记为PPIS、PPIsl1、PPIsI2.结果:溶栓组、抗凝组PPDs在治疗后均随时间显著降低(P<0.001);溶栓组PPIsI1明显大于抗凝组;两组PPIsI2无明显差异.在整个观察期间(治疗后1个月),溶栓组PPIs明显大于抗凝组.结论:溶栓治疗较单抗凝治疗能够更加迅速而持续地改善肺栓塞患者的肺血流灌注,应用肺灌注显像可以准确地评价患者治疗前后的肺血流变化.

    作者:FENG Yong;张汝森;HU Ying-jian;何红园 刊期: 2008年第14期

  • 异位妊娠与生殖道解脲支原体和沙眼衣原体感染的关系分析

    目的:探讨生殖道解脲支原体和沙眼衣原体感染与异位妊娠发生的关系.方法:回顾性分析5年以来我院150例异位妊娠患者的临床资料,探讨生殖道解脲支原体和沙眼衣原体感染与异位妊娠发生的关系,采用聚合酶链反应技术对175例异位妊娠患者进行生殖道解脲支原体和沙眼衣原体检测,结果:在150例异位妊娠患者中解脲支原体及沙眼衣原体的阳性率分别为43%和25%.结论:生殖道解脲支原体沙眼衣原体感染可导致急慢性输卵管炎症及盆腔炎发生,与异位妊娠的关系密切.

    作者:曾禄贤 刊期: 2008年第14期

  • 氟比洛芬酯超前镇痛用于小儿扁桃体切除术的临床观察

    目的:观察氟比洛芬酯注射液(凯纷)超前镇痛用于小儿扁桃体切除术的镇痛效果及安全性.方法:择期行扁桃体切除术小儿60例,随机分为3组.A组于麻醉诱导前、B组于麻醉拔管后缓慢静注凯纷1 mg/kg(用生理盐水稀释至5 mL),C组以生理盐水5 mL缓慢静注,注药时间均为2 min.观察术后1、2、4、8、12、24 h疼痛评分:凝血功能异常及恶心、呕吐等不良反应.结果:A组、B组术后各时点疼痛评分明显低于C组,A组也明显低于B组(P<0.05).3组各时点均无呼吸抑制、凝血功能异常发生,3组术后恶心、呕吐等不良反应发生率差异无显著性(P>0.05).结论:氟比洛芬酯超前镇痛较术后应用能有效减轻扁桃体切除术患儿术后急性疼痛,且无明显不良反应,可安全用于小儿术后镇痛.

    作者:曾睿峰;NI Yu-Fei;王建光;LI Jun;连庆泉 刊期: 2008年第14期

  • 浅低温体外循环心脏不停跳下心内直视手术的临床应用

    目的:通过测定心脏不停跳与心脏停跳手术两组患者的血浆肌钙蛋白(cTn-I)值以及心肌活检,评价心脏不停跳手术对心肌保护的效果.方法:选择40例心脏病患者于浅低温体外循环心脏不停跳下心内直视手术作为实验组,同期选择40例于低温心脏停跳下心内直视手术作为对照组,测定两组患者术前、术中、术后各时相的cTn-I值,以及心肌活检病理进行比较研究.结果:两组术前cTn-I值和心肌活检病理显示心肌超微结构差异无显著性(P>0.05);转机后两组cTn-I值均升高,对照组比实验组增高明显,差异有显著性(P<0.05);而心脏活检病理显示心肌超微结构上实验组优于对照组,差异有显著性(P<0.05).结论:浅低温体外循环心脏不停跳手术可明显减轻心肌缺血再灌注损伤,对心肌起到良好的保护作用.

    作者:周建平;李伟阳;曾朝辉;辛军;王厚强;周伟;杜巍 刊期: 2008年第14期

  • 桥本病并发原发性甲状腺恶性淋巴瘤10例临床分析

    目的:总结桥本病并发甲状腺恶性淋巴瘤的诊治经验.方法:对80例桥本病中并发原发性甲状腺恶性淋巴瘤的10例患者的临床资料进行回顾性分析.结果:80例患者术后病理均示桥本病,其中lO例合并甲状腺恶性肿瘤,其中术前3例确诊,误诊7例.术前诊断主要依靠B超、CT和甲状腺相关实验室检查.术后8例行放疗和化疗,9例获得随访.结论:桥本病易并发甲状腺恶性淋巴瘤.一旦确诊应积极手术治疗,术后常规放化疗是提高疗效的关键.

    作者:郭辉光;周逢强;王强;高峰;丁宝忠;徐宏 刊期: 2008年第14期

  • CXCR4和血管内皮生长因子在胆管癌中的表达及其临床意义

    目的:探讨CXCR4和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白在肝外胆管癌中的表达相关性及其与胆管癌发展和预后的关系.方法:应用免疫组化技术SP法检测CXCR4和VEGF蛋白在35例胆管癌标本、10例正常胆管标本中的表达.结果:胆管癌组织中CXCR4的阳性表达率为54%(19/35),VEGF的阳性表达率为77%(27/35);在正常胆管组织中未检测到CXCR4和VEGF的表达.癌组织中cxcR4和VEGF蛋白的表达呈正相关(r=0.715,P<0.05).CXCR4和VEGF蛋白表达与肿瘤转移与否、复发关系密切,但与患者的性别、年龄、肿瘤大小及分化无关.结论:CXCR4和VEGF在胆管癌中高表达,两者表达呈正相关;与胆管癌的转移和预后关系密切.

    作者:霍胜军;TANG Hui-huan;魏伟 刊期: 2008年第14期

  • 儿童注意缺陷多动障碍与微量元素的关系

    目的:探讨微量元素的水平与注意缺陷多动障碍(ADHD)的关系.方法:采用原子吸收分光光度法对128例ADHD患儿和95例健康儿童进行末梢全血Zn、Cu、Fe、Ca、Mg、Pb水平分析.结果:ADHD组儿童全血中的Zn、Cu、Fe、Ca、Mg、Pb水平分别为(72.24±7.03)μmol/L、(14.97±3.51)μmol/L、(7.64±0.59)mmol/L、(1.619±0.16)mmol/L、(1.49±0.13)mmol/L、(108.70±32.67)μg/L.Zn、Fe、Ca、Mg含量低于正常对照组(P<0.01或P<0.05).而Pb含量明显高于正常对照组(P<0.01),Cu与正常对照组的差异无统计学意义.结论:Zn、Fe、Ca、Mg、Pb等微量元素的失调与儿童ADHD有关.

    作者:黄健红;周才;司徒坚墉;罗有文 刊期: 2008年第14期

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主办:广东省医学情报研究所