学术投稿

Cofilin的表达对人肝细胞增殖和抗损伤能力的影响

陈天宇;余元龙;胡泽民

关键词:肝细胞生长因子, 肝细胞, 基因转染
摘要:目的:构建丝切蛋白(cofilin)真核细胞表达载体,并观察其在人正常肝细胞中的表达以及对细胞增殖和抗损伤能力的影响.方法:利用基因重组技术将cofilin与绿色荧光蛋白融合并构建真核细胞表达质粒,通过脂质体介导法导入正常人肝细胞系.用荧光显微镜观察表达情况.采用3H-TdR掺入DNA法、PCNA免疫组织化学观察肝细胞DNA合成,了解肝细胞增殖能力的变化.用CCl4造成急性肝细胞损伤模型,通过测定细胞存活率、细胞内丙氨酸氨基转移酶(ALT)、K+的漏出量了解肝细胞的抗损伤能力.结果:双酶切鉴定证实cofilin片段已克隆到pEGFP-N3载体的BamH Ⅰ和Sal Ⅰ位点之间,转染人正常肝细胞后,利用荧光显微镜观察可见到绿色荧光蛋白的表达.转导cofilin的肝细胞DNA合成明显增加(转染96 h后,3H-TdR掺入量为对照组的4.5倍).PCNA免疫组化结果显示转导cofilin的肝细胞增殖活性增加.肝细胞抗CCl4损伤的能力明显增强,肝细胞存活率显著提高(83%vs 61%,P<0.05).细胞内ALT、K+的漏出显著降低(分别为35.2 U/L vs 61.3 U/L,P<0.01;5.59 mmol/L vs 6.02mmol/L,P<0.01).结论:基因转染cofilin可在肝细胞中表达并有促细胞分裂活性,而且转染cofilin后的肝细胞抗损伤能力增强.
实用医学杂志相关文献
  • 干扰素治疗宫颈持续性高危型人乳头瘤病毒感染的研究

    目的:探讨干扰素治疗宫颈持续性感染高危型人乳头瘤病毒(high-risk types human papillomavirus,hr-HPV)的有效性和可行性.方法:将170例宫颈持续性hr-HPV感染患者分为3组,治疗一组用干扰素栓阴道用药,治疗二组用干扰素肌注,对照组不用任何治疗,检测6个月后hr-HPV有无转阴.结果:治疗一组、治疗二组、对照组hr-HPV的转阴率分别为77%、80%、11%,治疗一组、治疗二组与对照组比较差异有显著性(P<0.005);治疗一组与治疗二组比较,差异无显著性(P>0.5).宫颈上皮内瘤变(CIN)治疗后的hr-HPV持续感染与无CIN的hrHPV亚临床的持续感染,干扰素治疗后阴转率无统计学差异(P>0.05).结论:干扰素能有效地治疗宫颈持续性hr-HPV感染,局部用药简单、方便、副反应少.

    作者:谢红;杨菊芳;马利国;张金玲;王莉菲 刊期: 2007年第09期

  • 术中用过氧化氢冲洗致心跳呼吸骤停4例并文献复习

    目的:探讨过氧化氢引起心跳呼吸骤停的原因与规律,以指导临床合理用药.方法:回顾性分析我院2005年8月至2006年1月术中用过氧化氢冲洗致心跳呼吸骤停4例病例资料,并对1994-2006年《中国医院数字图书馆CHKU》进行文献检索出6例过氧化氢冲洗致心跳呼吸骤停报道进行分析和总结.结果:术中用过氧化氢冲洗致心跳呼吸骤停与肺气体栓塞有关.结论:过氧化氢可引起致命性严重后果,且发生突然,出现的时间短,常危及生命,临床医师应引起高度重视.

    作者:吴先荣;唐培佳 刊期: 2007年第09期

  • IL-5基因启动子多态性与Graves病相关性探讨

    目的:检测皖南地区正常人群和Graves病患者中IL-5基因的启动子区的多态性,并分析该基因遗传多态性与Graves病易感性之间的关系.方法:采用直接测序法在华东地区汉族人群中检测369例Graves病患者和374例正常对照人群IL-5基因启动子区的多态性位点,并分析其与Graves病的相关性.结果:皖南地区汉族人群IL-5基因启动子区仅检测到1个单核苷酸多态性(SNP):-746 T>C.在病例组等位基因频率为0.69和0.31,在对照组频率为0.70和0.30,差异无统计学意义.结论:皖南地区汉族人群的IL-5基因的启动子区多态位点可能与Graves病的易感性无关.

    作者:孙玲玲;褚迅;黄薇;毕富勇 刊期: 2007年第09期

  • 饮水低张薄层螺旋CT增强扫描在乳头型壶腹癌中的应用价值

    目的:探讨饮水低张薄层螺旋CT增强扫描在乳头型壶腹癌中的应用价值.方法:回顾性分析15例经手术病理证实的乳头型壶腹癌的CT表现,所有病例均经常规CT扫描后,后行饮水低张薄层螺旋CT增强扫描.结果:饮水低张薄层螺旋CT增强扫描不仅能准确确定梗阻的平面,还能显示十二指肠乳头部壶腹癌强化的肿块影,对肿块的显示和定性明显优于常规扫描.结论:饮水低张薄层螺旋CT增强扫描在乳头型壶腹癌的诊断和鉴别诊断中起着重要的作用,是可靠而有效的方法.

    作者:符有文;刘文慈;罗泽斌 刊期: 2007年第09期

  • 甘草酸二铵佐治小儿病毒性心肌炎30例

    病毒性心肌炎是由各种病毒感染引起的心肌急性或慢性炎症,临床上常对症治疗,并辅以一些营养心肌、改善心脏功能的药物.甘草酸二铵具有抗炎、抗病毒、免疫调节等作用,我们采用该药佐治小儿病毒性心肌炎,取得较好疗效,现报告如下.

    作者:袁静;朱建峰 刊期: 2007年第09期

  • 舒芬太尼与芬太尼复合罗哌卡因用于腹部手术后硬膜外镇痛的比较

    目的:对比观察等效剂量的舒芬太尼与芬太尼复合罗哌卡因用于腹部手术后硬膜外镇痛的临床效果.方法:选择ASA Ⅰ~Ⅱ级,择期在硬膜外麻醉下行腹部手术的患者60例,随机分为两组(每组n=30),术后行患者自控硬膜外镇痛(PCEA).参数设置为负荷剂量(5 mL)+持续剂量(3 mL/h)+PCA剂量(2 mL/次),锁定时间为30min.A组镇痛药物为0.2%罗哌卡因+0.4 μg/mL舒芬太尼,B组为0.2%罗哌卡因+2μg/mL芬太尼.随机双盲对比观察术后4、8、12、24 h内按压PCA的次数、视觉模拟评分(VAS)、舒适评分,并比较两组患者术后恶心、呕吐、嗜睡等不良反应的发生率及运动神经阻滞情况.结果:(1)两组患者年龄、体重等一般情况和术中局麻药用量无明显差异(P>0.05);(2)前24 h内A组的PCA按压次数为(5.2±3.8)次,较B组(7.4±4.6)次明显减少(P<0.05),且A组在术后4、8、12、24h时疼痛评分均略低于B组(P<0.05);(3)术后12、24h舒适评分A组显著高于B组(P<0.05);(4)A组术后恶心、呕吐显著少于B组(P<0.05),嗜睡等不良反应的发生率在两组之间也没有明显差异(P>0.05).结论:0.4 μg/mL舒芬太尼和2μg/mL芬太尼复合0.2%罗哌卡因均可满足术后硬膜外镇痛的需要,但舒芬太尼的镇痛效果明显优于芬太尼.

    作者:于代华;柴伟;孙绪德;姚立龙;彭德民;高昌俊;杨永惠 刊期: 2007年第09期

  • 慢性阻塞性肺疾病呼吸康复治疗进展

    慢性气道炎症和不完全可逆性气流受限是慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)的两个主要的病理生理特征,病变呈进行性发展,终导致不可逆的肺功能丧失和肺组织毁损,严重影响了患者的身体健康和日常活动能力.

    作者:刘华;王华;陈艳波;李兰英;崔小湖;张柏芳;赵泳谊;康健;陈荣昌 刊期: 2007年第09期

  • 131I治疗少年儿童Graves病73例

    目的:探讨131I治疗少年儿童Graves病的疗效.方法:对73例7~18岁儿童及青少年Graves病患者(男11例,女62例)进行131I治疗,治疗后随访6~84个月.结果:治愈57例,好转7例,甲亢复发1例,甲减8例.随访期内未见患儿生长发育受影响,除甲低外无其他不良反应和并发症.结论:131I治疗少年儿童Graves病安全有效.

    作者:蔡斯俏;吴育平 刊期: 2007年第09期

  • 锌指蛋白A20 RNAi腺病毒的制备及其对人脑胶质瘤细胞系U87细胞功能的影响

    目的:进一步探讨A20与促进脑胶质瘤恶性增殖和抗细胞凋亡之间的关系,尝试今后在动物体内进行脑胶质瘤基因治疗的研究,通过构建针对A20基因的重组腺病毒干涉载体感染U87细胞系,观察其对细胞生存状态的影响.方法:在前期预实验的基础上构建对A20干涉效果好的腺病毒干涉表达载体pSilencerTM adeno 1.0-CMV-A20R1,通过HEK-293细胞的包装后收获腺病毒并进行纯化,后用此腺病毒再次感染人脑胶质母细胞瘤细胞U87,经RT-PCR、Western blot确认干涉效果;通过流式细胞术(FCM)观察A20表达抑制对U87细胞周期和细胞凋亡的影响.结果:完成了重组腺病毒干涉表达载体pSilencerTM adeno 1.0-CMV-A20R1在HEK-293细胞内的包装;对病毒进行纯化后获得了高滴度(1.1×1011 pfu/mL)的感染病毒,将其感染U87细胞系后,RT-PCR和Western blot结果证实U87细胞中A20 mRNA和蛋白的表达均受到明显抑制;FCM结果也证实U87-A20R1细胞内凋亡细胞明显增多.结论:重组A20腺病毒干涉载体可很好地抑制U87细胞内A20的表达且能导致细胞凋亡,该研究结果为临床上用新思路治疗脑胶质瘤提供了实验依据.

    作者:郭庆东;张伟;王春梅;李兵;曹卫东;李侠;章翔 刊期: 2007年第09期

  • 烧伤方对实验性烫伤小鼠超氧化物歧化酶的影响

    目的:观察烧伤方外涂治疗实验性烫伤小鼠的作用机制.方法:采用烧伤方和京万红软膏外涂实验性烫伤小鼠的背部皮肤,与对照组比较,观察其对小鼠机体抗氧化防卫系统超氧化物歧化酶(SOD)的影响.结果:烧伤方组和京万红软膏组能提高实验性烫伤小鼠血清SOD含量,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论:烧伤方对实验性烫伤小鼠SOD有升高作用.

    作者:刘心亮;曾小粤;温志鹏;熊益群;邸振福;王重阳;徐绍钢 刊期: 2007年第09期

  • 2型糖尿病患者超敏C反应蛋白和血脂检测的临床应用

    目的:探讨血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)与血脂联合检测在2型糖尿病及其血管并发症中的应用.方法:用日立7600-110全自动生化分析仪和Beckman Immage测定35例2型糖尿病患者、40例冠心痛患者、30例2型糖尿病并发冠心病患者和45例体检健康者血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和hs-CRP水平.结果:3个疾病组hs-CRP水平及血脂各项(TC、TG、LDL-C)均比健康对照组高,差异有统计学意义(P<0.05),2型糖尿病组与冠心病组比较差异无统计学意义;3个疾病组HDL-C比健康对照组低,差异有统计学意义(P<0.05).结论:hs-CRP作为一个炎症因子,在预测糖尿病及其并发心血管疾病中具有重要的临床意义;2型糖尿病患者常伴有血脂紊乱,与hs-CRP联合应用能判断患者动脉粥样硬化的危险性.

    作者:孙芹敏;孙国华;吕璘琳 刊期: 2007年第09期

  • 卵巢黄体囊肿破裂的阴道超声特征

    目的:探讨卵巢黄体囊肿破裂的阴道超声(TVS)特征.方法:结合病理生理和临床特点,对经手术病理确诊的39例患者的声像图进行回顾性分析.结果:超声显示卵巢黄体囊肿破裂患者子宫大小基本正常,盆腔内可见囊实性包块伴不同程度的盆腹腔积液.结论:TVS对诊断卵巢黄体囊肿破裂有重要价值,应作为首选的诊断和动态观察方法.

    作者:陈青 刊期: 2007年第09期

  • 脑灰质异位症伴枕大池囊肿1例

    患者女,21岁,主因发作性全身抽搐1年就诊.1年来患者经常无明显诱因突发全身抽搐,不省人事,口吐白沫,大小便失禁,每次持续2~5 min,发作可自行缓解,患者对发作的过程无法回忆,发作后异常疲惫.

    作者:陈志勇;陈善成 刊期: 2007年第09期

  • N-乙基-N-亚硝基脲对兔牙髓干细胞侵袭和黏附能力诱变的体外研究

    目的:通过体外诱瘤技术,利用N-乙基-N-亚硝基脲(ENU),诱导兔的牙髓干细胞形态学和生物学行为发生变化.方法:在兔牙髓干细胞经ENU诱导后,通过增殖曲线、侵袭和黏附实验对诱导后的牙髓干细胞进行形态学和生物学行为观察.结果:牙髓干细胞诱变后增殖、侵袭和黏附能力都明显增强,细胞形态改变明显.结论:ENU有将牙髓干细胞诱导成为成釉细胞瘤肿瘤干细胞的趋势.

    作者:周岚;郑根建;罗军;林肖南;应于康;吴伟力 刊期: 2007年第09期

  • 黏膜内注射联合金属钛夹治疗Dieulafoy病42例

    目的:探讨经内镜下黏膜内注射联合金属钛夹治疗Dieulafoy病的效果.方法:均采用Olympus XQ240电子胃镜,一次性注射针和Olympus钛夹(HX-600-090)及推送器(HX-5LR-1型),术前予以积极补液纠正低血容量,术前准备同胃镜检查,对难以耐受者予以芬太尼0.05 mg及多美康0.05 mg/kg静推作清醒镇静,观察42例Dieulafoy病患者止血效果.结果:止血成功率为95%(40/42),其中一次止血成功率为90%(38/42).结论:内镜下黏膜内注射联合金属钛夹止血治疗Dieulafoy病所致上消化道出血疗效高、创伤小、适应证广、并发症少、费用较低,值得临床推广运用.

    作者:林茂华;黎民希;邓彪 刊期: 2007年第09期

  • Cofilin的表达对人肝细胞增殖和抗损伤能力的影响

    目的:构建丝切蛋白(cofilin)真核细胞表达载体,并观察其在人正常肝细胞中的表达以及对细胞增殖和抗损伤能力的影响.方法:利用基因重组技术将cofilin与绿色荧光蛋白融合并构建真核细胞表达质粒,通过脂质体介导法导入正常人肝细胞系.用荧光显微镜观察表达情况.采用3H-TdR掺入DNA法、PCNA免疫组织化学观察肝细胞DNA合成,了解肝细胞增殖能力的变化.用CCl4造成急性肝细胞损伤模型,通过测定细胞存活率、细胞内丙氨酸氨基转移酶(ALT)、K+的漏出量了解肝细胞的抗损伤能力.结果:双酶切鉴定证实cofilin片段已克隆到pEGFP-N3载体的BamH Ⅰ和Sal Ⅰ位点之间,转染人正常肝细胞后,利用荧光显微镜观察可见到绿色荧光蛋白的表达.转导cofilin的肝细胞DNA合成明显增加(转染96 h后,3H-TdR掺入量为对照组的4.5倍).PCNA免疫组化结果显示转导cofilin的肝细胞增殖活性增加.肝细胞抗CCl4损伤的能力明显增强,肝细胞存活率显著提高(83%vs 61%,P<0.05).细胞内ALT、K+的漏出显著降低(分别为35.2 U/L vs 61.3 U/L,P<0.01;5.59 mmol/L vs 6.02mmol/L,P<0.01).结论:基因转染cofilin可在肝细胞中表达并有促细胞分裂活性,而且转染cofilin后的肝细胞抗损伤能力增强.

    作者:陈天宇;余元龙;胡泽民 刊期: 2007年第09期

  • 前列腺素E1联合α硫辛酸治疗糖尿病周围神经病变的疗效

    目的:探讨前列腺素E1(PGE1)联合α硫辛酸治疗糖尿病合并的周围神经病变的临床效果.方法:40例糖尿病周围神经病变的患者随机分为两组,联合用药组给予PGE1和α硫辛酸,对照组单用PGE1,其他治疗方案相同,疗程均为2周.比较两组治疗前后症状、体征和神经传导速度.结果:两组治疗后症状、体征和神经传导速度均有明显改善(P<0.05);联合用药组改善幅度明显高于单药组[症状评分(2.7±0.2 vs 3.8±0.3,P<0.05);体征评分(4.3±0.4 vs 5.6±0.3,P<0.05);正中神经传导速度(45.7±4.8)m/s vs(41.1±2.0)m/s,P<0.05].结论:PGE1联合α硫辛酸治疗糖尿病周围神经病变具有协同效应.

    作者:王晶;宋薇;黄璟;屈玉春 刊期: 2007年第09期

  • 不典型急性心肌梗死临床误诊20例分析

    目的:探讨不典型急性心肌梗死的临床误诊原因.方法:回顾性分析临床误诊的20例不典型急性心肌梗死患者临床资料,总结其误诊原因.结果:在20例不典型急性心肌梗死患者中,无胸痛和胸痛症状、疼痛部位不典型导致误诊各3例,以晕厥、失语、肢体活动障碍等神经系统症状为主误诊为急性脑血管意外3例,以胸闷、气促、呼吸困难等急性左心衰竭和以急性胃肠道症状为主而误诊各3例,以心律失常为首发症状误诊者3例,多种心脏病并存过于重视原发疾病导致误诊2例.结论:通过不典型急性心肌梗死误诊原因的回顾性分析,可以加强对该病的进一步认识,提高诊断的准确率.

    作者:黄新宇;陈祖华 刊期: 2007年第09期

  • 吉西他滨联合卡铂治疗老年晚期非小细胞肺癌的临床研究

    目的:观察吉西他滨联合卡铂治疗老年人晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效和毒副反应,并与长春瑞滨联合卡铂方案比较,探索适合老年人NSCLC的治疗方案.方法:75例患者分为GC组40例[吉西他滨1 000mg/m2第1、8天,卡铂浓度/时间曲线下面积(AUC)=5,静滴第1天],NC组35例(长春瑞滨25 mg/m2第1、5天,卡铂AUC=5,静滴第1天),均治疗2个周期以上.结果:GC组,CR 1例、PR 16例、SD 17例、PD 6例,总有效率43%,1年生存率53%,中位生存期13.2个月.NC组,CR 0例、PR 13例、SD 14例、PD 8例,总有效率37%,1年生存率46%,中位生存期11个月.两组有效率、1年生存率、中位生存期差异无显著性(P>0.05).毒副反应,GC组Ⅲ~Ⅳ度血小板减少发生率高于NC组(30% vs 9%,P<0.05),GC组Ⅲ~Ⅳ度白细胞减少发生率低于NC组(13% vs 37%,P<0.05).结论:吉西他滨联合卡铂治疗老年人晚期NSCLC的疗效肯定,毒副反应轻,治疗耐受性好,值得临床推广.

    作者:沈浮;茅国新;李梅;钱俐 刊期: 2007年第09期

  • 动态心电图在晕厥病因中的诊断

    目的:探讨动态心电图在晕厥病因诊断中的应用价值.方法:对56例疑为严重心律失常所致的1次或多次晕厥的患者观察24 h动态心电图.嘱其尽量以诱因促使晕厥发作,并记录发作时间.结果:(1)56例经动态心电图均检出有严重心律失常,13例(23%)晕厥发作与心律失常有关,其中尤其是与缓慢心律失常关系密切.心源性晕厥的发生系停搏或心动过速时间过长,有效心搏出量减少致脑部供血不足所致.(2)能够引起心源性晕厥的心律失常多见于40岁以上的患者,并随着年龄的增加而增多.结论:动态心电图检查可为心源性晕厥患者获得可靠的病因诊断.临床对发作性晕厥患者,尤其是中老年患者有必要进行动态心电图检查以明确病因,并给予及时治疗.

    作者:李琼 刊期: 2007年第09期

实用医学杂志

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主管:广东省卫生厅

主办:广东省医学情报研究所