学术投稿

大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养纯化及冻存

杨亚冬;张文元;房国坚;贺晨;陈勇

关键词:间充质干细胞, 细胞培养, 细胞分离, 冻存, 纯化
摘要:目的:建立大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)体外分离培养及冻存的方法.方法:用密度梯度离心法及贴壁培养法分离纯化大鼠骨髓MSCs,并对其形态学特征进行观察,比较两种分离培养法的细胞生长增殖情况.大鼠MSCs在12.5%二甲亚砜(DMSO)保护下放入液氮冻存,6个月后复苏,测其成活率及观察生长增殖情况.结果:用密度梯度离心法及贴壁培养法均能有效地分离大鼠骨髓MSCs,细胞活力好,增殖能力强.大鼠MSCs可用液氮保存,且复苏后细胞生长增殖旺盛,形态无明显的变化.结论:采用密度梯度离心法及贴壁培养法成功地建立了大鼠骨髓MSCs体外分离和培养体系;采用液氮冻存大鼠MSCs的方法十分有效可行.
实用医学杂志相关文献
  • 小儿美克尔憩室的临床病理

    目的:研究美克尔憩室溃疡出血、穿孔的病理与临床的关系.方法:收集我院6年来57例小儿美克尔憩室,经病理证实.结果:证实57例美克尔憩室中31例含有异位胃黏膜或胰腺组织,26例无异位胃、胰腺组织.结论:57例经外科手术切除憩室,无并发症,无死亡.

    作者:严文波;祝明洁;施诚仁;潘伟华;金惠明;余世耀 刊期: 2005年第16期

  • 自发性2型糖尿病大鼠病程进展与胰腺形态学改变

    目的:研究自发性2型糖尿病大鼠OLETF鼠胰腺随病程进展的组织形态学改变.方法:自发性2型糖尿病大鼠OLETF鼠20只,同系健康对照LETO鼠10只.每周监测体重,定期行口服葡萄糖耐量试验检测血糖,胰腺切片用HE染色观察病理组织学改变.结果:随病程进展,OLETF鼠体重和血糖显著高于对照组.胰岛在病程早期表现为肥大增生,晚期破坏、纤维化程度明显高于LETO鼠.结论:胰腺的组织形态学变化反映了2型糖尿病病程不同阶段的病机特点.

    作者:朱波;薛耀明;李晨钟;潘永华;张燕 刊期: 2005年第16期

  • 雷诺氏征手术治疗分析12例

    雷诺氏征病因不明,多见于青年女性,在寒冷和精神刺激等因素作用下引起指(趾)小动脉阵发性痉挛收缩或闭塞,肢体远端皮肤出现对称性、阵发性的苍白-紫绀-潮红的临床症群,本病初认为发病机制是由于自主神经功能紊乱引起,过去常用单纯药物治疗,效果欠佳,自1999年开始,开展典型病例手术治疗,采用指(趾)动脉周围交感神经末梢切除术进行治疗[1],取得良好疗效.

    作者:刘也;姜守忠;付东军;刘丽 刊期: 2005年第16期

  • FRIII矫治轻度骨性安氏III类错牙合临床疗效的头影测量分析

    目的:探讨FRIII矫治轻度骨性三类错牙合所产生的硬组织变化特征.方法:选择31例替牙期轻度骨性三类错牙合患者,使用FRIII治疗并对治疗前后的头颅侧位片通过头影测量技术进行比较分析.结果:(1)SNA、ANB显著性增大(P<0.001);Cd-A显著性增大(P<0.01);SNB、Cd-Gn治疗前后差异无显著性.(2)U1-SN显著性增大(P<0.01)、IMPA显著性减小(P<0.01).(3)OP-SN显著性增大(P<0.001)、PP-FH治疗后变化无显著性.(4)FMA、Y轴角显著性增大(P<0.05).(5)N-Me、ANS-Me显著性增大(P<0.05),N-ANS治疗前后差异无显著性.结论:使用FRIII治疗骨性三类错牙合能使上颌骨前向生长量明显增加,下颌骨产生一定的向下向后旋转;治疗后上前牙唇倾、下前牙舌倾,牙合平面产生一定的顺时针旋转而腭平面无明显变化;患者前面高在治疗后增大且主要表现为前下面高增加.

    作者:冯忠;梁国谦 刊期: 2005年第16期

  • 内镜下球囊扩张治疗贲门失弛缓症68例

    目的:探讨内镜下球囊扩张术治疗贲门失弛缓症的临床疗效.方法:对68例临床确诊为贲门失弛缓症的患者采用美国Rigiflex球囊扩张器,扩张压力10~15psi,平均扩张次数3~4次.结果:扩张后临床效果良好,近期疗效100%,未见严重并发症.结论:内镜下球囊扩张术治疗贲门失弛缓症是一种有效、安全且创伤小,治愈率高,治疗周期短的方法.

    作者:陈素钻;钟敏;曾少敏;李悦虹;郭光华 刊期: 2005年第16期

  • 宫颈癌11例阴道镜图像回顾分析

    目的:探讨宫颈癌的阴道镜图像,以提高阴道镜对宫颈癌的检出率.方法:对2000年11月至2004年10月间阴道镜检查并经病理检查证实为宫颈癌患者的11例阴道镜图像进行回顾分析.结果:11例宫颈癌患者的阴道镜图像均有浓厚持久不退的醋酸白色上皮及碘试验无染色区出现呈芥茉黄改变,大部分有血管增粗、镶嵌或边界改变.CCT检查3例有不典型细胞,2例中度发炎,1例低度鳞状上皮内病变.结论:结合细胞学检查,重视阴道镜下宫颈异常图像,并在异常部位取活检,能提高宫颈癌的检出率.

    作者:吴海雅 刊期: 2005年第16期

  • 内镜下乳头括约肌切开术治疗急性胆源性胰腺炎56例

    目的:探讨内镜下行乳头切开术(EST)治疗因胆总管下端由结石、蛔虫引起嵌顿及缩窄性Vater乳头炎等所致急性胰腺炎的价值.方法:本组56例由上述病因起病,患者于入院6~12h行内镜ERCP证实后,同时行EST及网篮取石、蛔虫,同时置鼻胆管引流术(ENBD),使胰液及胆汁引流通畅,从而解除梗阻,达到胰胆管减压.结果:本组47例急诊I期治愈,9例结石较大或不能耐受I期取石,行II期取石,无严重并发症.结论:EST是一种有效治疗急性胆源性胰腺炎的微创方法.针对病因治疗,对病人创伤轻,易恢复,治疗效果确切.

    作者:许超贵;陈赞雄;吴振华;胡宾;任伟旺 刊期: 2005年第16期

  • 白内障摘除人工晶体植入术后复视的临床分析

    目的:探讨白内障术后复视的发病原因及防治办法.方法:采用眼球后局部麻醉,进行白内障摘除及人工晶体植入手术,对术后出现复视的患者21例进行全身检查;眼科常规视力、矫正视力、裂隙灯及眼底检查;眼位及眼肌功能检查,屈光、眼肌运动和复视像检查.结果:在双眼复视中,13例斜视性复视,2例融合无力性复视;斜视性复视包括眼肌运动障碍(10例)及间歇性外斜视(3例),眼肌运动障碍主要是术眼眼外肌麻痹8例,其中下直肌麻痹3例、上直肌麻痹1例、外直肌麻痹2例、上直肌+下直肌麻痹1例和下直肌+外直肌麻痹1例;单眼复视6例均为术后人工晶体偏位所致.结论:白内障术后复视可有多种原因引起,如麻醉和固定缝线的副损伤、局麻药对眼肌的毒性作用、人工晶体位置异常、既往有斜视病史等,应采取多项措施积极进行预防和治疗.

    作者:徐敏;许美燕 刊期: 2005年第16期

  • 引起眼部症状的鼻窦黏液囊肿28例

    目的:总结对引起眼部症状的鼻窦黏液囊肿的误诊教训,明确其相关性,减少误诊率.方法:回顾性分析28例鼻窦黏液囊肿所引起的眼部症状及误诊原因.结果:本组病例的主要眼部症状为眼球突出或移位、眼球活动受限、复视、视力下降、眼胀痛、内眦肿块等,其中23例首诊于眼科,占82.1%.结论:鼻窦黏液囊肿能引起眼部症状,尤其是额、筛、蝶窦黏液囊肿,其误诊率较高,应引起临床重视.

    作者:刘金斌;甄浩林 刊期: 2005年第16期

  • 还原型谷胱甘肽结合三联疗法提高十二指肠球部溃疡愈合质量初探

    目的:探索还原型谷胱甘肽(GSH)结合三联疗法治疗十二指肠球部溃疡(DU),提高DU溃疡愈合质量(QOUH)的方案.方法:将60例DU患者随机均分2组,每组30例.对照组为单三联疗法,治疗组为三联疗法加用GSH.2组经治疗后停药1个月均复查,对比每组及2组间血清表皮生长因子(EGF)的变化、2组临床及胃镜下疗效、幽门螺杆菌(HP)根除率,复查对比2组愈合病例1年后复发率.结果:(1)治疗后停药1个月,EGF治疗组明显高于对照组,且治疗组EGF较用药前明显升高(均P<0.005),对照组EGF较用药前稍升高(P>0.05);临床及胃镜下疗效、HP根除率治疗组均优于对照组(均P<0.05).(2)2组愈合病例1年后复发率治疗组低于对照组(P<0.05).结论:GSH结合三联疗法治疗DU可提高QOUH,可作为治疗DU的选择方法之一.

    作者:刘进 刊期: 2005年第16期

  • 肱骨干骨折钢板内固定术并发桡神经损伤16例原因分析

    四肢骨折内固定术并发周围神经损伤时有报道,而从目前临床不完全统计,肱骨干骨折钢板内固定术并发桡神经损伤概率高,值得注意.我院自 1995年至2004年共收治16例(外院转入9例),对其损伤原因予以分析,报告如下.

    作者:符史发;尹庆水;章莹 刊期: 2005年第16期

  • 颞侧角膜隧道切口前房冲洗治疗外伤性前房积血的临床观察

    目的:评价颞侧角膜隧道切口前房冲洗治疗外伤性前房积血的临床效果,探讨颞侧角膜隧道切口前房冲洗术式的临床应用价值.方法:对照观察颞侧角膜隧道切口前房冲洗术与常规前房冲洗术的术后视力、手术并发症及手术操作时间.结果:颞侧角膜隧道切口组术后视力显著优于常规前房冲洗组(P<0.05),手术并发症明显少于常规前房冲洗组,而手术操作时间两组差异无显著性.结论:颞侧角膜隧道切口前房冲洗术是一种安全有效的手术方法,值得临床推广.

    作者:余洪华;陆晓和;易魁先 刊期: 2005年第16期

  • 表现为肺野孤立性结节或肿块的胸腔良性疾病35例临床诊治分析

    目的:探讨表现为外周型肺野孤立性结节或肿块的良性疾病病例的临床诊断和治疗.方法:分析总结35例表现为外周型肺野孤立性结节或肿块的良性疾病病例的临床资料及手术方式.结果:35例病种分布依次为炎性假瘤、肺囊肿、肺硬化性血管瘤、结核球、错构瘤、神经鞘瘤、肺隔离症、支气管腺瘤.行肺叶切除术25例,肺楔形切除术6例,胸腔镜下肺楔形切除术1例,胸壁肿块切除术3例,均痊愈出院.结论:在表现为肺野孤立结节的疾病中,良性疾病只占少数,在不能明确诊断的情况下,在短期观察排除肺炎的可能性后积极地考虑手术探查总体是有益的.手术方式以尽量小的创伤先明确诊断后再决定是否扩大手术范围为宜.

    作者:戚维波;胡奕;王明堂;王志恒 刊期: 2005年第16期

  • 手术治疗158例腮腺肿瘤临床分析

    目的:探讨腮腺肿瘤不同病理类型的术式选择及其疗效.方法:回顾性总结分析手术治疗的158例腮腺肿瘤患者其手术方式与疗效的关系.结果:不同的术式其术后肿瘤复发率及并发症发生率明显不同,并与疗效密切相关.结论:腮腺肿瘤患者术前应综合分析判断其性质并采用适宜的手术方式,首次手术和术式选择至关重要.良性肿瘤应采用保留面神经、肿瘤及腮腺浅叶(或全叶)摘除术.对于局限、表浅者可采用区域性切除术,单纯肿瘤剜除术不宜采用.恶性肿瘤应行腮腺全叶摘除术,必要时联合颈淋巴清扫术.术后配合放、化疗可提高疗效.

    作者:杨长湖;李三军;何三虎;何家秀 刊期: 2005年第16期

  • 妇科良性卵巢囊肿腹腔镜与剖腹手术的对比分析

    目的:比较腹腔镜术与剖腹术两种方法行良性卵巢囊肿手术的效果.方法:将妇科手术治疗的101例良性卵巢囊肿患者随机分为腹腔镜组48例和剖腹术组53例,对两组患者的特征及手术效果进行回顾比较分析.结果:两组在年龄、剖腹术史、囊肿大小、病理类型、手术时间等方面差异无显著性(P>0.05).而在术后发热率、对镇痛药的需求、术后住院日及恢复时间,腹腔镜组显著减少(P<0.01,或P<0.05).结论:在严格选择病例的前提下进行腹腔镜下卵巢囊肿的手术,创伤小,术后恢复快,优于传统的剖腹手术,有较大的应用价值.

    作者:顾立芳;何群双;李艳梅 刊期: 2005年第16期

  • 阿奇霉素致急性呼吸困难2例

    例1患者男,54岁,以发热咳嗽2d来院.诊断为上感.既往无药物过敏史.当时T37.4℃ BP 140/80mmHg 双肺呼吸音粗,心律整,心率 88次/min.血常规:白细胞12.8×109/L,中性粒细胞0.84,淋巴细胞0.16,给予0.9%氯化钠注射液250mL,阿奇霉素注射液0.5g静点,30滴/min.当静点液体100mL时病人自诉胸闷气短,即刻出现大汗淋漓面色紫绀,张口呼吸,烦躁不安,双肺喘鸣音.立刻给予停用阿奇霉素,静推地塞米松10mg.静推葡萄糖酸钙10mL, 25%葡萄糖20mL,氨茶碱注射液0.25g,仍无缓解,分别静推肾上腺素0.5mg3次,吸氧.

    作者:崔修环 刊期: 2005年第16期

  • IL-1β对糖皮质激素受体的影响及与Graves眼病激素治疗的关系

    目的:研究IL-1β通过细胞信号转导通路对外周血单核细胞糖皮质激素受体表达的影响以及与Graves眼病激素治疗的关系.方法:取健康成人的单核细胞,采用半定量RT-PCR的方法检测,A组:IL-1β刺激组;B组:正常对照组;C组:SB203580+IL-1β组;D组:SP600125+IL-1β组;E组:PD98059+IL-1β组;F组:SB203580+SP600125+IL-1β组糖皮质激素受体表达的改变情况.结果:IL-1β组和正常对照组比较差异有显著性(P<0.01);PD98059+IL-1β组和正常对照组比较差异有显著性(P<0.01),SB203580+IL-1β组、SP600125+IL-1β组分别和IL-1β刺激组比较差异有显著性(P<0.01);SB203580+IL-1β组、SP600125+IL-1β组分别和SB203580+SP600125+IL-1β组比较差异有显著性(P<0.01).IL-1β刺激组和PD98059+IL-1β组比较差异没有显著性(P>0.05);SB203580+IL-1β组和SP600125+IL-1β组比较差异没有显著性(P>0.05);正常对照组和SB203580+SP600125+IL-1β组比较差异没有显著性(P>0.05).结论:IL-1β可以引起糖皮质激素受体表达的减少,这种作用是通过p38MAPK信号转导通路、JNK/SAPK信号转导通路作用,并且2者有协同作用.而ERK信号转导通路在此过程中基本不起作用.并由此推测:在Graves眼病炎症早期预先使用信号转导通路特异性阻滞剂可能会减少激素的用量,增加治愈率.

    作者:魏民;薛耀明;沈洁;张燕 刊期: 2005年第16期

  • 儿童声嘶506例诊治分析

    目的:总结儿童声嘶的病因、检查方法及综合治疗的效果,以指导临床防治工作.方法:回顾分析506例声嘶儿童病史、临床表现和检查、治疗的结果,并据病程、病因等进行分类比较.结果:过度用嗓是儿童声嘶的主要病因,部分呼吸道疾病参与发病;男性发病率明显高于女性.急性声嘶以炎症多见,予药物(全身用药及雾化吸入)、用声指导、行为疏导和卫生保健宣教相结合的保守治疗,治愈率为炎性疾病96.0%(120/125),声带小结72.3%(214/296),声带息肉22.2%(10/45),其它100%(14/14);慢性声嘶以声带小结多见,治疗以手术为主,术后辅以保守治疗,治愈率为声带小结100%(36/36),声带息肉85.7%(18/21),其它57.7%(15/26).结论:儿童声嘶应针对不同病因施治,并注意防范、疏导与恰当的治疗相结合的办法,才能达到大效果.儿童嗓音疾病更重于防范.

    作者:李嘉;李铎贤;陈凯;张志雄;黎雄文;叶远航 刊期: 2005年第16期

  • 人工流产术期间脑电双频谱指数和血液动力学变化的相关性研究

    目的:研究人工流产术期间脑电双频谱指数(BIS)变化趋势以及与血液动力学变化相关性,评估此时BIS监测麻醉深度的作用.方法:早孕妇女60例,ASAⅠ-Ⅱ级,静注芬太尼1μg/kg及丙泊酚1.5mg/kg.术中根据患者体动追加丙泊酚,均予45~60s内推入.记录诱导前(T0),诱导后1min(T1)、2min(T2)、扩张宫颈(T3)、手术结束(T4)及清醒(T5)时BIS、心率(HR)、无创血压(NIBP)值.结果:(1)T0BIS92.2±6.2,T2明显降低至42.4±10.6(P<0.01);T3BIS56.4±18.25,较T2增高,差异有极显著性(P<0.01).(2)NIBP和BIS变化趋势一致,BIS与SBP变化呈正相关(r=0.893,P=0.017),与DBP变化无明显相关(r=0.668,P=0.148).(3)HR诱导后进行性下降,伤害刺激后更显著(P<0.01).(4)患者均无术中知晓.结论:BIS预测SBP变化较好,与DBP、HR变化无关,BIS无法评估此时的麻醉深度.

    作者:徐明;张芝芳;张婉芬 刊期: 2005年第16期

  • 急性胆囊炎腹腔镜胆囊切除术后脐部切口感染分析

    目的:总结急性胆囊炎腹腔镜胆囊切除术(LC)后脐部切口感染的发生因素,提出预防措施.方法:回顾我院2002年10月至2005年1月265例行LC的急性胆囊炎病例,分析并发脐部切口感染的原因.结果:265例患者中感染18例,脐孔感染率为6.79%.结论:脐部切口感染与切口污染、切口压榨损伤、脐部解剖特点、术中缝合方式等多种因素有关.针对这些因素,预防脐部切口感染需采取综合措施.

    作者:秦安;孙键 刊期: 2005年第16期

实用医学杂志

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主管:广东省卫生厅

主办:广东省医学情报研究所