学术投稿

大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养纯化及冻存

杨亚冬;张文元;房国坚;贺晨;陈勇

关键词:间充质干细胞, 细胞培养, 细胞分离, 冻存, 纯化
摘要:目的:建立大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)体外分离培养及冻存的方法.方法:用密度梯度离心法及贴壁培养法分离纯化大鼠骨髓MSCs,并对其形态学特征进行观察,比较两种分离培养法的细胞生长增殖情况.大鼠MSCs在12.5%二甲亚砜(DMSO)保护下放入液氮冻存,6个月后复苏,测其成活率及观察生长增殖情况.结果:用密度梯度离心法及贴壁培养法均能有效地分离大鼠骨髓MSCs,细胞活力好,增殖能力强.大鼠MSCs可用液氮保存,且复苏后细胞生长增殖旺盛,形态无明显的变化.结论:采用密度梯度离心法及贴壁培养法成功地建立了大鼠骨髓MSCs体外分离和培养体系;采用液氮冻存大鼠MSCs的方法十分有效可行.
实用医学杂志相关文献
  • 阿奇霉素致急性呼吸困难2例

    例1患者男,54岁,以发热咳嗽2d来院.诊断为上感.既往无药物过敏史.当时T37.4℃ BP 140/80mmHg 双肺呼吸音粗,心律整,心率 88次/min.血常规:白细胞12.8×109/L,中性粒细胞0.84,淋巴细胞0.16,给予0.9%氯化钠注射液250mL,阿奇霉素注射液0.5g静点,30滴/min.当静点液体100mL时病人自诉胸闷气短,即刻出现大汗淋漓面色紫绀,张口呼吸,烦躁不安,双肺喘鸣音.立刻给予停用阿奇霉素,静推地塞米松10mg.静推葡萄糖酸钙10mL, 25%葡萄糖20mL,氨茶碱注射液0.25g,仍无缓解,分别静推肾上腺素0.5mg3次,吸氧.

    作者:崔修环 刊期: 2005年第16期

  • 颞侧角膜隧道切口前房冲洗治疗外伤性前房积血的临床观察

    目的:评价颞侧角膜隧道切口前房冲洗治疗外伤性前房积血的临床效果,探讨颞侧角膜隧道切口前房冲洗术式的临床应用价值.方法:对照观察颞侧角膜隧道切口前房冲洗术与常规前房冲洗术的术后视力、手术并发症及手术操作时间.结果:颞侧角膜隧道切口组术后视力显著优于常规前房冲洗组(P<0.05),手术并发症明显少于常规前房冲洗组,而手术操作时间两组差异无显著性.结论:颞侧角膜隧道切口前房冲洗术是一种安全有效的手术方法,值得临床推广.

    作者:余洪华;陆晓和;易魁先 刊期: 2005年第16期

  • 重度妊高征终止妊娠时间及分娩方式的选择

    目的:通过对重度妊高征的围产儿预后分析、探讨重度妊高征终止妊娠的时间及方式.方法:对120例重度妊高征进行了回顾性分析研究,观察新生儿窒息率及死亡率.结果:36~36+6孕周组新生儿窒息率及围产儿死亡率均低于<36孕周和≥37孕周组.剖宫产组新生儿窒息率及围产儿死亡率明显低于阴道分娩组.结论:重高妊高征36~36+6孕周终止妊娠对围产儿影响小,剖宫产是重度妊高征患者终止妊娠的主要措施.

    作者:周晓莉;廖再成;袁雪蓉 刊期: 2005年第16期

  • 超声诊断原发于右髂总动脉异位脾脏1例

    患者女,38岁,以主诉月经紊乱,停经49d来我院就诊.妇科检查:于前位子宫处可触及孕3个月大小的包块,边界清晰,表面光滑,质地中度偏硬,活动度不明显,无压痛,双侧附件未触及肿块.拟诊为:早孕?因子宫大小与孕龄不符,申请B超检查.

    作者:韩宁;吕永智;史晓丽;胡泽华 刊期: 2005年第16期

  • 整合素α6β1与肝癌侵袭转移的关系

    原发性肝细胞癌( hepatocellular carcinoma,HCC)是人类常见肿瘤,预后远较其它癌症差,其原因是多方面的,但早期侵袭转移是重要因素之一 , 导致其 5年生存率极低.对于 HCC侵袭转移的分子机制尚不十分明确.

    作者:王旦;陈向荣;吴建胜 刊期: 2005年第16期

  • 经皮肝射频治疗肝癌22例

    目的:总结多弹头电极射频治疗肝癌的疗效.方法:对22例32个肝癌病灶进行射频治疗,对射频前后肿瘤血运、坏死情况和肿瘤标志物等进行观察对比.结果:25/32个病灶完全坏死,7/32个病灶部分坏死,原肿瘤标志物升高者治疗后下降,与术前相比瘤体内血供不同程度减少甚至消失.无严重并发症发生.结论:多弹头电极射频治疗肝癌近期效果确切无严重并发症,值得在临床推广.

    作者:王军华;陈焕伟;甄作均;苏树英;许卓明;费凛;计勇 刊期: 2005年第16期

  • 大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养纯化及冻存

    目的:建立大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)体外分离培养及冻存的方法.方法:用密度梯度离心法及贴壁培养法分离纯化大鼠骨髓MSCs,并对其形态学特征进行观察,比较两种分离培养法的细胞生长增殖情况.大鼠MSCs在12.5%二甲亚砜(DMSO)保护下放入液氮冻存,6个月后复苏,测其成活率及观察生长增殖情况.结果:用密度梯度离心法及贴壁培养法均能有效地分离大鼠骨髓MSCs,细胞活力好,增殖能力强.大鼠MSCs可用液氮保存,且复苏后细胞生长增殖旺盛,形态无明显的变化.结论:采用密度梯度离心法及贴壁培养法成功地建立了大鼠骨髓MSCs体外分离和培养体系;采用液氮冻存大鼠MSCs的方法十分有效可行.

    作者:杨亚冬;张文元;房国坚;贺晨;陈勇 刊期: 2005年第16期

  • 鼻内窥镜术治疗孤立性蝶窦病变

    目的:探讨孤立性蝶窦病变的临床表现及影像学特点,提高孤立性蝶窦病变的诊断率和治疗率.方法:回顾分析1999年1月至2004年1月经鼻内窥镜治疗的21例孤立性蝶窦病变的临床资料.结果:随访6~12个月,18例治愈,3例好转.无一例出现并发症.结论:孤立性蝶窦病变的主要临床症状为头痛,CT可提高本病的诊断率,鼻内窥镜结合切割吸引器治疗孤立性蝶窦病变有明显的优越性.

    作者:李界;程容荃 刊期: 2005年第16期

  • 单侧臀大肌肌皮瓣修复骶尾部巨大褥疮

    目的:探讨单侧臀大肌肌皮瓣转移术治疗骶尾部巨大褥疮的临床效果.方法:通过回顾总结单侧臀大肌肌皮瓣转移术治疗骶尾部巨大褥疮29例的成功经验.结果:本组共29例,创面均以单侧臀大肌肌皮瓣转移修复,伤口Ⅰ期愈合24例,Ⅱ期愈合5例,其中再次清创缝合3例.术后死亡2例,1例死于肺部感染,1例死于误吸,其余病例随访3个月至2年,有5例再发Ⅰ、Ⅱ度褥疮,平均住院时间34d.结论:单侧臀大肌肌皮瓣转移术是治疗骶尾部巨大褥疮的较好方法,良好的护理是预防术后褥疮复发的根本.

    作者:吕玉明;李健;高粱斌;曾勉东;张志;潘永谦;张平;张亮;张在恒 刊期: 2005年第16期

  • 儿童大面积皮肤撕脱伤的修复治疗

    目的:探讨儿童大面积皮肤撕脱伤的治疗措施.方法:38例儿童大面积皮肤撕脱伤,22例采取皮片移植修复,16例应用皮瓣修复.结果:皮片一期成活率达82%(18/22),皮瓣成活率达94%(15/16).结论:对于儿童大面积皮肤撕脱伤,应根据损伤程度和血供情况,采取皮片移植和皮瓣修复,可取得良好的效果.

    作者:张培华;罗少军;汤少明;梁杰;左强;李瑾 刊期: 2005年第16期

  • 尿道外口成形术治疗女性尿道综合征

    目的:探讨女性尿道综合征手术治疗的疗法.方法:对252例女性尿道综合征施行尿道外口成形术,延长尿道口-阴道口间距.结果:252例病人中,随访228例,痊愈者183例,治愈率为73%,好转27例,占10%,无效者18例,占7%.总有效率83%.结论:尿道外口成形术是治疗女性尿道综合征的一种简单、有效的治疗方法.

    作者:杨峰涛;邓汪东;洪汉业;何学军 刊期: 2005年第16期

  • 高强度聚焦超声治疗肝细胞癌的MRI观察

    目的:分析原发性肝细胞癌高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound, HIFU)治疗后的早期MRI表现.方法:29例经病理诊断为肝细胞癌患者在HIFU治疗前、后行腹部轴位T1WI,轴位T2WI,冠状位SPIR,以及Gd-DTPA增强后T1WI轴位、FFE序列冠状位扫描.观察HIFU治疗前后肿瘤的大小及MRI信号改变.结果:HIFU治疗36个瘤灶,其中28个缩小(77.8%),5个增大(13.9%),3个无明显变化(8.3%);T1WI增强30个瘤灶(83.3%)出现无信号增强区,12个瘤灶无增强区周围见环状增强,7个强化环内见低信号环(T1WI、T2WI、SPIR).治疗后T1WI19个(52.8%)信号强度增加,T2WI17个(47.2%)信号强度减弱.结论:HIFU治疗后,肝癌瘤灶内可出现多种MRI信号改变,MRI是HIFU治疗效果评估的一种无创而有效的影像学方法.

    作者:柏沙美;谢琦;陈胜利;江新青;郑力强 刊期: 2005年第16期

  • 严重胸部创伤救治中的三管护理体会

    2004年1月至2004年6月,我科救治的严重胸部创伤为主的多发伤复合伤 84例,其中同时应用中心静脉置管、气管插管和胸腔闭式引流管16例,现将三管的护理体会报告如下.

    作者:李君;王雪芹;张青 刊期: 2005年第16期

  • 急诊经皮经肝胃冠状静脉栓塞术联合食道静脉套扎治疗食管静脉曲张出血14例

    目的:评价经皮经肝食管胃底静脉栓塞术(PTVE)联合食道静脉曲张套扎(EVL)在重度肝硬化患者急性食管胃底静脉曲张破裂出血中的应用价值.方法:14例食管胃底静脉曲张破裂出血肝硬化患者,肝功能评价均为ChildC级,行急诊经皮经肝食管胃底静脉栓塞联合食道静脉曲张套扎治疗.结果:14例门脉穿刺及曲张静脉栓塞手术联合食道静脉曲张套扎均获成功.13例即刻止血成功;1例无效,行手术治疗.1~6个月随访期内,再出血2例;严重合并症1例,为腹腔内出血,行开腹探查.结论:对于ChildC级肝硬化食管胃底静脉曲张破裂出血患者,急诊条件下经皮经肝食管胃底静脉栓塞术止血联合食道静脉曲张套扎效果肯定,当手术禁忌时,可为首选治疗方法.

    作者:李楠;敖国昆;吴凯;黄芩;朱建华 刊期: 2005年第16期

  • 非典型急性阑尾炎294例临床分析

    目的:研究分析非典型急性阑尾炎的发病机制、临床特点、诊断及手术治疗.方法:回顾分析1995年5月至2004年5月以来共收治的1916例阑尾炎当中的294例非典型急性阑尾炎手术治疗后病例进行分析.结果:165例术前诊断为腹痛查因,有129例误诊,共294例术后才证实为非典型急性阑尾炎.术后的病理结果为化脓性阑尾炎196例,坏疽性阑尾炎71例,单纯性阑尾炎10例;72例术后出现了并发症.结论:对非典型急性阑尾炎的临床特点、诊断依据、手术特征进行分析,我们认为非典型急性阑尾炎应尽早手术,对于难于确诊又不能除外的急腹症,应尽早剖腹探查为宜.

    作者:徐可强;谈瑞芳;谢广文;刘明建;冯朝毅 刊期: 2005年第16期

  • 雷诺氏征手术治疗分析12例

    雷诺氏征病因不明,多见于青年女性,在寒冷和精神刺激等因素作用下引起指(趾)小动脉阵发性痉挛收缩或闭塞,肢体远端皮肤出现对称性、阵发性的苍白-紫绀-潮红的临床症群,本病初认为发病机制是由于自主神经功能紊乱引起,过去常用单纯药物治疗,效果欠佳,自1999年开始,开展典型病例手术治疗,采用指(趾)动脉周围交感神经末梢切除术进行治疗[1],取得良好疗效.

    作者:刘也;姜守忠;付东军;刘丽 刊期: 2005年第16期

  • 白内障摘除人工晶体植入术后复视的临床分析

    目的:探讨白内障术后复视的发病原因及防治办法.方法:采用眼球后局部麻醉,进行白内障摘除及人工晶体植入手术,对术后出现复视的患者21例进行全身检查;眼科常规视力、矫正视力、裂隙灯及眼底检查;眼位及眼肌功能检查,屈光、眼肌运动和复视像检查.结果:在双眼复视中,13例斜视性复视,2例融合无力性复视;斜视性复视包括眼肌运动障碍(10例)及间歇性外斜视(3例),眼肌运动障碍主要是术眼眼外肌麻痹8例,其中下直肌麻痹3例、上直肌麻痹1例、外直肌麻痹2例、上直肌+下直肌麻痹1例和下直肌+外直肌麻痹1例;单眼复视6例均为术后人工晶体偏位所致.结论:白内障术后复视可有多种原因引起,如麻醉和固定缝线的副损伤、局麻药对眼肌的毒性作用、人工晶体位置异常、既往有斜视病史等,应采取多项措施积极进行预防和治疗.

    作者:徐敏;许美燕 刊期: 2005年第16期

  • 核因子-κB在角膜移植排斥反应中作用的初步实验研究

    目的:研究核因子κB在角膜移植排斥反应中的作用,为进一步研究角膜移植排斥反应发病机制及治疗提供新的思路.方法:建立大鼠穿透性角膜移植动物模型,用免疫组织化学染色法检测角膜移植术后植片中核因子-κB表达,并以植片排斥反应指数(RI)及病理学表现作参照.结果:同基因移植组角膜植片中的角膜基质细胞及内皮细胞有核因子-κB的微弱表达;同种异体移植组角膜上皮细胞、内皮细胞、基质层细胞及新生血管内皮细胞核因子-κB表达增强.各组间核因子-κB的表达强度差异有显著性(P<0.01).且核因子-κB的表达强度与排斥反应指数(RI)具有明显的正相关性(r=0.883,P<0.01).结论:核因子-κB可能通过调控免疫和炎症相关基因的表达,参与角膜移植排斥反应的发生,在角膜移植免疫中起着中心调控者的作用.

    作者:郑鲜娜;余洪华 刊期: 2005年第16期

  • 小儿美克尔憩室的临床病理

    目的:研究美克尔憩室溃疡出血、穿孔的病理与临床的关系.方法:收集我院6年来57例小儿美克尔憩室,经病理证实.结果:证实57例美克尔憩室中31例含有异位胃黏膜或胰腺组织,26例无异位胃、胰腺组织.结论:57例经外科手术切除憩室,无并发症,无死亡.

    作者:严文波;祝明洁;施诚仁;潘伟华;金惠明;余世耀 刊期: 2005年第16期

  • 绞股蓝总皂甙对单侧输尿管结扎大鼠肾组织结缔组织生长因子表达的影响

    目的:研究绞股蓝总皂甙(GPs)对单侧输尿管结扎(UUO)大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)表达及肾间质纤维化的影响.方法:采用UUO大鼠模型,将大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、GPs组、缬沙坦组.假手术组和模型组仅给予标准饲料30g,GPs组和缬沙坦组于术前3d至术后9d每天分别给予GPs200mg/(kg·d)、缬沙坦24mg/(kg·d)灌胃,第9天处死各组大鼠.免疫组化法检测各组肾组织CTGF、转换生长因子β1(TGFβ1)和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;RT-PCR方法检测各组CTGFmRNA含量;Masson染色评定各组肾小管间质损害程度.结果:模型组CTGF、TGFβ1、α-SMA的表达及肾小管间质损伤指数明显高于假手术组(P<0.01),而GPs组和缬沙坦组各项指标明显低于模型组(P<0.01);GPs组与缬沙坦组差异无显著性(P>0.05).各项指标作相关分析,CTGF与肾小管间质损伤指数(r=0.756,P<0.01)、TGFβ1(r=0.879,P<0.01)、α-SMA(r=0.892,P<0.01)为正相关关系.结论:GPs可以抑制肾纤维化时CTGF表达,从而遏制肾纤维化的进展.

    作者:张永;丁国华;张建鄂;肖厚勤;吴平勇;乐发国 刊期: 2005年第16期

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