学术投稿

应用抑制消减杂交技术构建哮喘病人嗜酸细胞差异表达基因消减cDNA文库

徐劲松;蔡绍曦;邹飞;佟万成;万为人;赵海金

关键词:哮喘, 嗜酸细胞, 基因文库, 抑制消减杂交
摘要:目的:构建哮喘病人治疗前后嗜酸细胞差异表达基因的消减cDNA文库.方法:采用新近建立的抑制消减杂交方法,哮喘治疗前后的嗜酸细胞为试验和对比材料,分离哮喘病人嗜酸细胞中差异表达基因的cDNA片段,将其与T载体进行T/A连接构建文库,将连接产物用氯化钙转化法转化大肠杆菌进行文库扩增和蓝白斑筛选,随机挑取100个白色克隆用菌落PCR进行鉴定.结果:扩增消减cDNA文库获得300余个白色阳性克隆,随机挑取100个白色克隆用PCR进行扩增,90%的克隆中均有200~600 bp的插入片段,这些片段可能是哮喘嗜酸细胞差异表达基因的cDNA片段.结论:用SSH法及T/A克隆技术成功构建了哮喘病人治疗前后嗜酸细胞差异表达基因消减cDNA文库,该消减cDNA文库的建立为进一步筛选、克隆哮喘病人嗜酸细胞差异表达的新基因奠定了基础.
实用医学杂志相关文献
  • 《实用医学杂志》2003年年度文献年计量指标及Web下载量报告

    作者: 刊期: 2004年第08期

  • 113C-UBT和RUT检测幽门螺杆菌分析

    目的:评价目前临床上常用的两种诊断幽门螺杆菌(HP)感染方法的敏感性、特异性.方法:对186例因消化道症状就医的老年患者行胃镜检查,同时行13C-尿素呼气试验(13C-UBT),快速尿素酶(RUT)试验检查,用活检钳钳取胃窦黏膜组织行病理学检查3结果:13C-UBT较RUT检查的敏感性、特异性高.结论:13C-UBT和RUT具有安全、简便、可靠、无创的特点,是较好的HP检测方法,对于老年病人13C-UBT尤为适合.

    作者:徐丽姝;麦韵屏;张瑛华 刊期: 2004年第08期

  • 男性静脉吸毒人员中弓形虫感染的调查

    弓形虫是一种世界性分布的专性细胞内寄生原虫,可感染包括人类在内的几乎所有哺乳动物,人体所有器官都可受累.许多欧美国家血清阳性率达25%~30%,国内血清阳性率为4%~9%[1,2].对于吸毒人员中弓形虫的感染情况,目前国内尚未见报道.为此,我们对我市男性静脉吸毒人员进行了弓形虫感染状况的调查,现报道如下.

    作者:陈桂轩 刊期: 2004年第08期

  • 内镜下129枚食管内支架术后并发症因素分析

    目的:分析内镜下129枚食管内支架术后并发症的原因及防治方法;方法:77例病人中良性狭窄14例,恶性狭窄63例,其中伴瘘道形成者8例.共内窥镜下置入各种支架129枚.随访观察3~24个月.结果:内支架置入全部成功,术后患者症状改善.术后1~16周出现并发症包括胸痛及异物感77例、支架阻塞14例、便血7例、支架移位9例、新瘘形成2例、反流性食管炎7例.经过相应的治疗,并发症均得到纠正.结论:食管内支架植入术是治疗食管良、恶性狭窄有效的非手术方法.有利于延长生存时间.

    作者:李楠;吴凯;敖国昆;徐冰;钱虹霞;朱建华;黄庆 刊期: 2004年第08期

  • 高位腰椎间盘突出症的手术治疗

    目的:探讨高位腰椎间盘突出症的临床特点、诊断及治疗.方法:根据椎间盘突出部位与程度,分别采用3种手术方式治疗高位腰椎间盘突出症36例,其中采用单开窗法21例,双开窗法9例,半椎板切除法6例.结果:36例患者获随访,平均随访时间31个月,优良率91.7%.结论:高位腰椎间盘突出症的临床表现复杂,强调早期手术以及术中注意保持脊柱稳定性,术中仔细探察椎管和切除突出的髓核是治疗本病的关键.

    作者:李健;颜登鲁;高梁斌;谭平先;张在恒 刊期: 2004年第08期

  • 巨大儿并发窒息症17例的护理

    目的:将我科2002年1月至2003年12月共收治的17例并发新生儿窒息症的巨大儿进行护理观察.方法:应用ABCDE复苏方案对新生儿窒息症的巨大儿进行复苏,保持呼吸道畅通,建立有效的静脉通路,监测血糖,通过静脉输液和哺乳使血糖维持在正常范围内.监测生命体征,降低患儿耗氧量,提高抗病能力.密切观察患儿病情变化,予抬高头部,减少噪音,保持头呈正中位,以降低颅内压,建立静脉通路,改善循环,根据病情纠正酸中毒,注意低血糖、低血压,降低颅内压,维持内环境稳定.开展健康宣教.结果:复苏后可及时纠正患儿的缺氧,减少脑损害,纠正低血糖,避免医源性高血糖的出现,及时开始肠道内喂养,避免造成胃肠道功能紊乱;同时,进行健康宣教,使其家属得到心理上的支持,以减少巨大儿并发窒息症的神经系统后遗症的发生.结论:监测巨大儿窒息后的血糖,生命体征,发现问题及时处理,从而减轻家庭和社会的负担,提高生命质量和人口素质,对患儿具有重要的意义.

    作者:黄笑群;卢蕴瑜;张若彤 刊期: 2004年第08期

  • T管窦道的解剖与临床意义

    目的:了解胆道术后不同时期T管窦道的解剖并探讨其临床意义.方法:选择胆总管切开探查T管引流术病人.术中测量胆道压力及术后测量胆道压力和T管窦道的牢固性;检查拔T管后胆漏的位置;对术后行纤维胆道镜检查者,测T管窦道的长度和宽度,取部分窦道壁组织进行病理检查;对再次手术者,术中解剖窦道,术后对窦道壁进行病理检查.结果:T管窦道的长度为(6.3±4.1)cm,宽度为(0.74±0.09)cm,厚度及牢固性术后不同时期各不相同,并受一些因素影响,窦道与胆总管和腹壁连接处较薄弱.结论:T管窦道有其本身的解剖特点,了解T管窦道的解剖对术后胆汁漏的防治以及选择时期经T管窦道行胆道内的各种检查和治疗有意义.

    作者:董米连;施维锦 刊期: 2004年第08期

  • 心脏黏液瘤的诊断与外科治疗

    目的:探讨心脏黏液瘤的诊断与外科治疗.方法:回顾性分析我院自1980年5月至2003年5月手术治疗的116例心脏黏液瘤患者的临床资料,其中左房黏液瘤102例,右房黏液瘤14例.所有病例均经彩色超声心动图明确诊断.结果:均在体外循环下完整切除肿瘤,115例痊愈出院,1例死亡,病死率0.86%.随访5个月至23年未见复发.结论:心脏黏液瘤临床少见,其中左房黏液瘤占75%以上,因随时可能发生栓塞,甚至猝死,一旦明确诊断,应行急诊手术;因有复发可能,即使良性肿瘤也应适当扩大手术范围.

    作者:罗立国;景华;胡小南;李忠东;李德闽;董国华;申翼 刊期: 2004年第08期

  • 子宫动脉结扎宫腔填纱治疗剖宫产术中大出血7例分析

    剖宫产手术的常见并发症之一是出血,近年来随着剖宫产率的不断升高,及时正确地处理各种原因引起的术中、术后出血,对保留产妇子宫这一重要器官的完整性显得非常重要[1],我院对7例剖宫产术中大出血的高危产妇施行了联合应用双侧子宫动脉上行支结扎和宫腔纱布填塞术,取得了比较满意的效果.

    作者:林传喜 刊期: 2004年第08期

  • 大面积烧伤病者的院前急救处理

    大面积烧伤病者病情重而凶险,易并发烧伤休克、MODS,病死率高.如能早期有效地处理,可以降低并发症和病死率.现将我院成功救治56例烧伤面积>80%病例进行分析,总结如下.

    作者:彭志刚;曾汉;马盛刚;查国庆;杨小斌;张国柱 刊期: 2004年第08期

  • 减量FLAG方案治疗难治性急性白血病

    目的:观察减量FLAG方案对难治性急性白血病(AL)的疗效、骨髓抑制时间以及不良反应.方法:氟达拉滨(Flu)50 mg/d,5~6 d;阿糖胞苷(Ara-C)0.5~2.0 g/d,5~6 d;WBC<1.0×109/L时用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)300μg/d直至WBC>1×109/L,治疗14例难治性AL.结果:14例AL中,总有效率为28.5%,其中完全缓解(CR)率为14.3%,部分缓解(PR)率为为14.3%.中性粒细胞低时间在开始用药后5~9 d,持续时间7~30d;血小板低时间在开始用药后5~10 d,持续时间6~30 d;感染率100%,重度感染率37.5%,2例早期治疗相关死亡.结论:减量FLAG方案治疗难治性AL,疗效不理想,骨髓抑制严重.

    作者:翁建宇;杜欣;陆泽生;黄梓伦;林伟 刊期: 2004年第08期

  • 小儿有机磷中毒14例误诊分析

    小儿有机磷中毒临床表现不典型,且可表现为多个系统症状,而又偶有患儿以单个系统症状或体征为主要表现,因此易被误诊多种疾病,如脑炎、肺炎、胃肠炎、肾炎、癫痫、低钙惊厥、肠蛔虫、药物中毒、中毒性菌痢、急性感染性多发性神经根神经炎[1]等,而支气管异物、狂犬病、捂热症较少报道.我院儿科从1995-2003年收住有机磷中毒147例,误诊14例,误诊率9.72%.有4例误诊为上述报道较少的3种疾病.

    作者:易爱华 刊期: 2004年第08期

  • 吻合器痔上黏膜钉合术中合理麻醉平面的探讨

    目的:探讨吻合器痔上黏膜钉合术(PPH)中不同麻醉平面对麻醉效果的影响.方法:选择120例病人,随机分成4组,每组30例,均在椎管内麻醉下施行PPH,调整麻醉平面上界,使各组不同,观察记录各组达高阻滞平面时及击发钉合器时的平均动脉压(MAP)、心率(HR)、阿托品用量,观察术中恶心呕吐、腹部牵拉不适等不良反应的发生情况.结果:在4组病人中,当麻醉阻滞平面在L1~T11范围时,病人麻醉诱导期和击发钉合器时血压、心率稳定,牵拉反应轻.结论:通过调整麻醉推药速度及调整病人体位,调整麻醉平面在L1~T11之间,既能达到平稳的较好的麻醉效果,又能减少不良反应,值得推广.

    作者:游玉媛;区锦燕;陈增宝;廖荣宗 刊期: 2004年第08期

  • 小儿噬血细胞综合征6例报告

    目的:探讨噬血细胞综合征的临床表现以及诊断治疗.方法:对6例病人临床资料进行回顾,并结合文献进行总结分析.结果:噬血细胞综合征是一种以发热、肝脾淋巴结肿大、出血、全血细胞减少为特征的罕见的临床综合征;6例病例中,1例治愈,1例好转,1例放弃,3例死亡.结论:本病发病多与感染有关,病情重,预后不良,病死率高;治疗要采用综合治疗措施,对因治疗,针对性的抗感染结合抑制免疫反应治疗,加强对症支持治疗.

    作者:李栋方;罗向阳;李文益 刊期: 2004年第08期

  • 抗CCP、抗RA33抗体与RF联合检测在RA中的意义

    目的:同时检测抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)、抗RA33抗体和类风湿因子(RF)在类风湿关节炎(RA)中的敏感性及特异性,探讨两者联合检测在RA中的意义.方法:采用ELISA检测抗CCP抗体及抗RA33抗体,乳胶凝集试验检测类风湿因子(RF).共检测105例RA病人、40例非RA弥慢性结缔组织病、35例非风湿性疾病中的抗CCP抗体、抗RA33抗体及RF的分布.比较三者之间的敏感性、特异性及三者联合检测的结果.结果:抗CCP抗体、抗RA33抗体及RF对RA的敏感性分别为42.9%、28.6%、47.6%,特异性分别为96%、92%、56.0%oRF与抗CCP抗体结果差异无显著性(P>0.25),与抗RA33抗体结果比较差异有显著性(P<0.025).抗CCP抗体和抗RA33抗体与RF的关系不密切.结论:抗CCP抗体和RA33抗体具有良好的敏感性及特异性,可视为RA早期诊断新的血清学指标,和RF联合检测能提高诊断RA的敏感性和特异性.抗CCP抗体和抗RA33抗体与RF的关系不密切.

    作者:钟亮尹;曾智华;李瑞莹 刊期: 2004年第08期

  • 锁孔手术治疗前部颅底和脑深部肿瘤25例

    目的:探讨锁孔神经外科手术治疗前部颅底及脑深部肿瘤的手术技巧和适应证.方法:对25例前部颅底及脑深部肿瘤行锁孔开颅显微神经外科切除术,其中部分使用内窥镜及术时超声辅助技术.结果:20例实体瘤中17例全(或等体积)切除,3例次全切除,其余5例囊实性肿瘤全切除,无手术死亡、致残及相关并发症.结论:锁孔手术是治疗前部颅底和脑深部肿瘤的微创治疗技术,恰当选择适应证尤其重要,神经内镜及术时超声的应用可帮助提高手术疗效.

    作者:周迩;麦洁文;梁艺湖;李林繁;邓岳桥;古奕冕;钟桂年 刊期: 2004年第08期

  • 小儿急性阑尾炎及阑尾穿孔的治疗对策

    目的:对小儿急性阑尾炎及阑尾穿孔的病人的诊断治疗情况提出佳的方法.方法:对本院1999-2003年409例小儿阑尾炎患者的治疗情况进行回顾性的分析研究.结果:患儿的平均年龄是7.48岁,误诊率是0.49%,就诊三大症状为腹痛、发热及呕吐.阑尾穿孔率是12.9%,穿孔患儿起病至手术平均时间为2.82 d,穿孔的平均年龄是6.17岁,穿孔阑尾炎患儿的住院时间及并发症发生率与其它类型阑尾炎无统计学差异.结论:利用超声检查提高阑尾炎的早期确诊率,减少穿孔的发生;尽早确诊阑尾炎后尽快手术治疗,术中原则上不放置引流管,术后静脉使用联合抗生素,可提高治疗效果和缩短住院时间.

    作者:邹焱;夏慧敏;李瑞琼;王浩然;余家康;唐志贤 刊期: 2004年第08期

  • 老年2型糖尿病患者细胞免疫功能的临床观察

    目的:观察老年2型糖尿病患者的细胞免疫功能.方法:抽血检测老年2型糖尿病患者及非糖尿病患者(对照组)的T淋巴细胞亚群、空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血红蛋白、血浆总蛋白、白蛋白.结果:(1)老年2型糖尿病组的空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血红蛋白值显著高于对照组(P<0.05).2型糖尿病组中糖耐量异常患者餐后2 h血糖、糖化血红蛋白显著高于对照组(P<0.05).(2)老年2型糖尿病患者的淋巴细胞免疫功能指标中除早期活化T淋巴细胞与对照组间差异有显著意义(P<0.05),余指标之间的差异均无显著意义.(3)糖耐量异常患者淋巴细胞、自然杀伤细胞、CD4/CD8、抑制性T细胞、杀伤性T细胞较对照组低(P<0.05).(4)糖耐量异常患者的CD4/CD8、淋巴细胞低于其他老年2型糖尿病患者(P<0.05).(5)有并发症的老年2型糖尿病患者CD4/CD8、抑制性T细胞、杀伤性T细胞低于没有并发症老年2型糖尿病患者(P<0.01).(6)各组间血浆总蛋白、白蛋白差异无显著意义.结论:老年2型糖尿病患者体内T淋巴细胞亚群异常情况与患者病程及是否存在并发症、血糖情况有关,而与患者的血浆白蛋白、血浆蛋白的关系不明显.老年2型糖尿病患者糖耐量异常阶段体内细胞免疫功能已出现异常.

    作者:林凯;邓海鸥;黎映兰;韩梅清 刊期: 2004年第08期

  • 鼻内镜鼻窦手术中鼻腔鼻窦解剖变异的处理

    目的:探讨鼻腔鼻窦解剖变异与慢性鼻窦炎的关系及鼻内镜鼻窦手术中鼻腔鼻窦解剖变异的正确处理的重要性.方法:360例慢性鼻窦炎、鼻息肉患者,以冠状位鼻窦CT分析鼻腔鼻窦解剖变异,并在鼻内镜鼻窦手术中分别予以矫正.结果:鼻腔鼻窦解剖变异包括鼻中隔高位偏曲(21.3%)、中鼻甲气化(18.5%)、反向弯曲(7%)、中鼻甲肥大(55.8%)、钩突气化(3.3%)、钩突偏移(9.7%)、钩突肥大(23.1%)、鼻丘过度气化(6.1%)、Haller气房(11%).结论:鼻腔鼻窦解剖变异与慢性鼻窦炎和鼻息肉发病相关,鼻腔解剖变异的正确处理是鼻内镜鼻窦手术成功的重要条件之一.

    作者:梁健刚;黄郁林;卢建鹏;崔少云;黎志辉 刊期: 2004年第08期

  • 腹针治疗神经根型颈椎病42例临床观察

    颈椎病是临床常见病,神经根型颈椎病是其中的一种类型,多见于中年以上的人群.近几年有年轻化的趋势.临床主要表现为:颈部肌肉紧张,颈肩部疼痛和手指麻木感,部份病人出现上肢肌力减弱,肌肉萎缩等一系列症状,对患者的工作、生活造成比较严重的影响.薄智云教授[1]发明的腹针疗法治疗颈椎病,疗效确切,本文通过设立对照组较系统地观察该疗法的临床疗效.

    作者:祝晓忠 刊期: 2004年第08期

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主办:广东省医学情报研究所