学术投稿

OPCML基因的克隆

姚德生;李力;Kenneth Garson;Barbara C.Vanderhyden

关键词:OPCML, 基因转移, 质粒
摘要:目的:建立OPCML真核细胞表达质粒.方法:利用计算机软件Vector NTI,根据GenBank中OPCML的序列,用RT-PCR法从小鼠大脑组织中扩增OPCML基因全长片段,将其克隆入真核细胞表达质粒pcDNA3,建立OPCML的表达质粒pcDNA3-OPCML,后将其转染入人胚胎肾细胞(293T),用Western blot检测OPCML蛋白在293T中的表达.结果:OPCML能被成功地从正常组织中克隆,构建了真核细胞表达质粒pcDNA3-OPCML,测序表明其携带有正常OPCML的全长序列;转导入人类细胞后有OPCML蛋白的高量表达.结论:pcDNA3-OPCML携带有正常的OPCML全长基因序列,其能在真核细胞中高量表达功能蛋白.
广西医科大学学报杂志相关文献
  • MAPK信号转导通路多基因多重RT-PCR方法的建立

    目的:建立检测MAPK激酶信号转导通路ERK1、JNK1、p38各基因mRNA表达情况的多重逆转录聚合酶链式反应(Multi RT-PCR)的方法.方法:自Genebank中获取大鼠及人源ERK1、JNK1及p38的基因序列,将大鼠与人的基因序列用Align X进行同源性比较,选取保守区应用primer 5软件设计3对引物,建立Multi RT-PCR检测体系,分别扩增ERK1、JNK1、p38基因,产物长度分别403、309、607 bp;对RT-PCR扩增产物分别切胶回收进行PCR产物测序进一步验证.结果:①应用Multi RT-PCR方法对11例大鼠及11例人肝细胞癌组织进行检测,琼脂糖电泳结果显示各基因产物条带清晰、无引物二聚体产生、无非特异性扩增产物,并对各基因产物片段分别切胶测序得到证实;②对22例肝癌组织检测结果表明在肝癌组织中ERK1、JNK1、p38mRNA阳性率分别为95.83%、100%、100%,且在表达丰度上有明显的变化.结论:所建立的MAPK Multi RT-PCR检测方法具有特异性强、效率高、简单易行、可靠的特点,对MAPK信号转导通路在疾病中的作用研究具有较强的应用价值.

    作者:陈茂伟;曹骥;苏建家;焦杨 刊期: 2006年第02期

  • 树鼩肝癌形成过程中红细胞免疫黏附肿瘤细胞功能的动态变化

    目的:探讨树鼩肝癌形成过程中红细胞免疫黏附肿瘤细胞功能的变化.方法:将实验树鼩随机分为4组:黄曲霉毒素(AFB1)组(A组)、乙型肝炎病毒(HBV)+AFB1组(B组)、HBV组(C组),空白对照组(D组).实验过程中所有动物定期抽血,用自然肿瘤红细胞花环试验(NTERT)检测树鼩的红细胞免疫黏附功能.结果:在实验过程中的不同阶段,各实验组的红细胞免疫黏附肿瘤细胞功能与对照组比较均明显不同.结论:在树鼩肝癌形成过程中,NTERT所反映的红细胞免疫功能,可灵敏地反映该过程不同时期的变化.

    作者:唐东平;李瑗;唐凯;苏建家;曹骥;欧超;杨春;岳惠芬 刊期: 2006年第02期

  • 不同化疗药物对人肝癌耐药细胞BEL-7404/ADM端粒酶活性抑制的研究

    目的:观察几种常用化疗药物对人肝癌耐药细胞BEL-7404/ADM端粒酶活性的影响.方法:利用端粒重复扩增实验(TRAP)结合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染法,测定BEL-7404/ADM耐药细胞经过多种化疗药物[顺铂(DDP)、阿霉素(ADM)、丝裂霉素(MMC)、长春新碱(VCR)]不同浓度和时间作用后端粒酶活性的变化.结果:当各种药物高浓度处理细胞24 h后再去除药物,DDP对端粒酶的活性完全抑制,MMC有部分抑制,ADM和VCR无抑制作用;低浓度药物处理细胞3 d,其结果同高浓度相似.结论:高浓度DDP和MMCC在短时间内或低浓度长时间作用对人肝癌耐药细胞BEL-7404/ADM端粒酶活性有显著抑制作用,抑制作用可能与药物的作用浓度和时间有关.

    作者:韦长元;莫军杨;黎丹戎;梁安民;曹骥 刊期: 2006年第02期

  • 胃癌患者术前血浆可溶性P2-选择素和唾液酸水平的变化

    目的:探讨胃癌患者术前检测血浆可溶性P2-选择素(sP2-selectin)和唾液酸水平的临床意义.方法:采用ELISA法、酶偶联法及比色法分别检测117例术前胃癌患者、45例良性胃部疾病患者及40例正常人血浆中sP2-selectin和总唾液酸(TSA)及脂结合唾液酸(LSA)水平并进行比较分析.结果:胃癌患者术前血浆中sP2-selectin、TSA及LSA含量显著高于良性胃部疾病患者及正常人(P<0.01或P<0.05),阳性率分别为72.6%、75.2%和66.7%,血浆sP2-selectin、TSA和LSA水平与临床分期有关(P<0.05),sP2-selectin和LSA水平与胃癌的转移有关(P<0.05).结论:术前血浆sP2-selectin、TSA及LSA检测对胃癌的临床诊断及预后判断有一定的价值.

    作者:劳明;吴芸;黄宁源;朱波;黄玲莎;赵惠柳 刊期: 2006年第02期

  • 稳定(牙合)垫加透明质酸钠关节腔注射治疗不可复性盘前移位26例

    目的:观察稳定(牙合)垫加透明质酸钠关节腔注射治疗不可复性盘前移位的疗效.方法:将52例不可复性盘前移位病人,随机分两组,每组26人,(牙合)垫组只戴用稳定(牙合)垫治疗,稳定(牙合)垫加透明质组同时进行透明质酸钠关节腔注射治疗.通过短期随访观察疗效.结果:采用(牙合)垫和透明质酸钠关节腔注射共同治疗的患者,其效果比单纯用(牙合)垫治疗效果好(治愈率比较,χ2=6.47,P=0.01,总有效率比较,χ2=5.03,P=0.025).结论:(牙合)垫与透明质酸钠关节腔注射共同治疗不可复性盘前移位可能具有协同作用.

    作者:麦志松;罗莉 刊期: 2006年第02期

  • 评估C-反应蛋白在急性胰腺炎中的作用

    临床诊断重型胰腺炎的指标多且繁杂,CT检查受医院条件及经济条件的限制.我们探讨C-反应蛋白(C-Creation Protein,CRP)作为一项观察指标,有助于观测急性胰腺炎的诊断及预后判断.

    作者:唐星火;覃山羽;宁红建 刊期: 2006年第02期

  • 新型隐球菌性脑膜炎的临床特点及影响预后的多因素分析

    新型隐球菌性脑膜炎(简称隐脑)为严重的机会感染性疾病,具有病程长、治疗效果差、死亡率高等特点.近年来随着艾滋病、器官移植长期使用免疫抑制剂人群的增加,隐脑的发病率有增高的趋势.为探讨隐脑的临床特点及影响预后转归的因素,本文对我院4年来收治的50例隐脑患者的临床特点及其影响预后的因素进行回顾性分析.

    作者:梁欣;罗光汉 刊期: 2006年第02期

  • 32例利培酮对心电图的影响分析

    利培酮和氯氮平同属非典型抗精神病药物,自从应用于临床以来,二者在治疗方面取得了卓越成效.有关利培酮对心电图的影响目前报道很少,笔者对32例服用利培酮的精神病患者进行心电图动态观察,并对心电图的异常变化与服药剂量、时间的关系进行分析,并与氯氮平进行比较,现报道如下.

    作者:褚水妹 刊期: 2006年第02期

  • 髂内动脉化疗栓塞和药泵植入联合手术治疗浸润性膀胱癌

    目的:寻求浸润性膀胱癌的有效治疗方法.方法:回顾性总结经手术、病理证实并获随访的40例浸润性膀胱癌患者资料.40例患者分为髂内动脉化疗栓塞和药泵植入联合手术治疗组(A组)20例和单纯手术治疗组(B组)20例,了解介入治疗对浸润性膀胱癌的效应,分析比较两组术后复发率、生存率的差异.结果:A组患者术前经髂内动脉化疗栓塞后,能使大部分膀胱肿瘤病灶缩小,控制严重血尿,提高手术中肿瘤的切除率,术后经药泵穿刺注射抗癌药物能更有效地清除残留肿瘤病灶和杀灭盆腔内转移病灶,预防肿瘤复发,提高病人生存率和生活质量.结论:髂内动脉化疗栓塞和药泵植入联合手术治疗膀胱癌安全有效,可以显著提高浸润性膀胱癌的治疗效果.

    作者:文斌;刘惕生;黄健辉;任占平;周苏斌;尼建平;韦力谦;许彪 刊期: 2006年第02期

  • EGCG对裸鼠移植瘤中人口腔表皮样癌耐药细胞凋亡的影响

    目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)增敏长春新碱(VCR)对人口腔表皮样癌多药耐药细胞株KBV200裸鼠移植瘤的抑瘤作用及与瘤细胞凋亡的关系.方法:采用KBV200接种于裸鼠皮下,建立耐药肿瘤模型;2周后,EGCG和VCR腹腔注射,联合处理2周;免疫组化法检测瘤组织Bcl-2,Bax的表达;TUNEL法检测细胞凋亡; 流式细胞仪进行细胞周期分析;透射电镜观察瘤组织细胞超微结构的改变.结果:EGCG联合VCR处理治疗后瘤重、肿瘤相对体积明显低于对照组和VCR组(P<0.05),且与EGCG的剂量呈正相关;低、中、高EGCG联合 VCR组Bcl-2的表达明显低于VCR组(P<0.01);低、中、高EGCG联合 VCR组Bax蛋白的表达明显高于VCR组(P<0.01);TUNEL法低、中、高EGCG联合 VCR组凋亡指数明显高于VCR组,与EGCG呈剂量依赖关系; 流式细胞技术显示低、中、高EGCG联合 VCR组G2/M期细胞高于VCR组(P<0.01); 电镜下三个联合用药组瘤组织中可见较多典型的细胞凋亡的形态学表现.结论:EGCG在体内具有增敏VCR对KBV200移植瘤的杀伤作用.机制可能是通过下调Bcl-2蛋白,上调Bax蛋白的表达,从而促进肿瘤细胞的凋亡.

    作者:林晓贞;梁钢;唐安洲;黎莉 刊期: 2006年第02期

  • 葛根素对大鼠脑缺血再灌注损伤后Fas 与HSP70表达的影响

    目的:探讨葛根素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用机制.方法:采用闭夹大脑中动脉后再通造成局部脑缺血再灌注模型,用免疫组化SP法测定Fas蛋白和热休克蛋白70(heat shock protein,HSP70)表达情况,光镜观察脑组织损伤程度.结果:保护组实验侧Fas表达程度弱于非保护组实验侧(P<0.01),而HSP70表达则保护组实验侧的水平强于非保护组实验侧(P<0.01),Fas 和HSP70表达无明显相关性(r=-0.688,P>0.05).光镜下保护组脑组织损伤程度较轻,无灶性坏死及出血.结论:葛根素对大鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用,其作用机制可能与下调Fas和上调HSP70表达、减少细胞凋亡、提高组织对应激的承受力等有关.

    作者:杨嘉珍;潘洪平;李吕力;莫祥兰;焦伟;黄进;董艳玲;黄振录 刊期: 2006年第02期

  • 尿激酶丹奥低分子肝素钙联合静脉溶栓治疗急性期脑梗死疗效及安全性

    目的:探讨尿激酶(UK)溶栓后继续用丹奥、低分子肝素钙后续抗栓治疗急性脑梗死的疗效和安全性,为急性脑梗死患者寻求一种更有效的联合溶栓治疗方案.方法:用UK对20例早期(6 h内)脑血栓形成患者进行静脉溶栓后,立即用丹奥注射液静滴及2 h后加用低分子肝素钙皮下注射作后续抗栓治疗,并进行疗效及副作用分析.结果:20例病人1周后基本痊愈13例(65%),总显效率90%,总有效率95%,且无明显的出血或其它不良反应.结论:小样本观察,UK溶栓后继续用丹奥及低分子肝素钙后续抗栓治疗急性脑梗死患者能促进血管完全再通,防止血管再闭塞,其疗效显著,副作用少,安全可靠.

    作者:韦冲;陈昌枝;何翠玲;甘斌;肖海 刊期: 2006年第02期

  • 腮腺良恶性肿瘤CT鉴别诊断

    腮腺肿瘤占全部唾液腺肿瘤的70%~80%,而腮腺肿瘤的80%是良性肿瘤[1].笔者结合临床及病理特征,回顾性分析18例经手术治疗及病理证实的腮腺肿瘤,总结其CT特征并加以鉴别诊断.

    作者:韦建林;李炳灿 刊期: 2006年第02期

  • 心脏不停跳冠状动脉旁路移植同时行主动脉瓣或联合瓣膜替换术

    目的:评价心脏不停跳冠状动脉搭桥同时行主动脉瓣置换或联合瓣膜置换术的临床价值及意义.方法:采用非体外循环心脏不停跳技术,对73例冠心病患者行冠状动脉搭桥术,另外2例在非体外循环下行冠状动脉搭桥术(OPCABG),然后经冠状静脉窦逆行持续灌注机器氧合血,在心脏有节律的空跳中完成主动脉瓣或联合瓣膜替换,1例在体外循环下行冠状动脉搭桥、二尖瓣和主动脉瓣替换.有8例患者术前使用主动脉内球囊反搏(IABP).结果:术后心绞痛症状全部缓解,全组无围术期急性心肌梗死,1例术前辅助呼吸、IABP +OPCABG者死亡.结论:心脏不停跳冠状动脉搭桥手术简便、安全、损伤轻、并发症少;同时行心瓣膜置换避免心脏停跳,极大程度地减少缺血缺氧损伤和再灌注损伤,缩短体外循环时间、减少并发症.

    作者:林辉;温昭科;李香伟;贺榜福;梁胜景;莫安胜 刊期: 2006年第02期

  • CLIA和RIA检测乳糜血清AFP含量及其临床意义

    对血清AFP的定量检测,常采用放射免疫分析(RIA)方法,但在临床工作中常发现,当血清中含有较高的血脂而呈乳白色时,AFP含量常出现非病理性的异常增高.化学发光免疫分析(CLIA)是近年来应用较多的超微量物质检测方法,具有快速、精确、重现性好及试剂有效期长、安全无毒等特点,但其对高脂血症患者的乳糜血清AFP定量的准确性鲜见报道.本文用CLIA和RIA法检测35份正常人血清和35份乳糜血清的AFP含量,并进行比较分析,现报道如下.

    作者:罗章伟;方文珠;吴毅 刊期: 2006年第02期

  • 诺维本联合顺铂方案治疗转移乳腺癌52例疗效观察

    诺维本(Navelbine,NVB)是一种新的半合成长春碱类抗癌药物,经研究表明,诺维本联合顺铂(DDP)方案即NP方案治疗转移乳腺癌有较好疗效.1999年6~12月,我们采用NVB联合DDP方案治疗转移乳腺癌52例,现报告如下.

    作者:黄羽;梁靖英;苏贞栋;陈卓明 刊期: 2006年第02期

  • 壮族大学生中HIV-1感染相关基因CCR5多态性的初步研究

    目的:了解CCR5Δ32基因突变在广西壮族人群基因组中的分布,初步估计壮族人群对人类免疫缺陷病毒(HIV-1)感染的遗传易感性.方法:分别抽取50名壮族大学生外周血6 ml,从血中提取DNA样品,对其基因组DNA中CCR5基因进行PCR扩增.结果:在50名壮族大学生外周血中未检测到CCR5Δ32基因突变.结论:50名壮族大学生对HIV-1可能较易感.

    作者:王宁;何海玲;王瑛瑛;刘梅玲;温彦;于志勇;陆海融;杨海波;赖振屏;樊晓晖 刊期: 2006年第02期

  • 开塞露联合生理盐水灌肠治疗化疗病人便秘30例

    便秘是恶性肿瘤患者的常见并发症之一,由于使用化疗药物,疾病本身的慢性消耗以及患者饮食营养不均衡等原因容易导致患者排便困难.部分恶性肿瘤病人在接受化疗后伴有肝功能损害,此时出现便秘,不适宜采用肥皂水灌肠.我科于2003年2月至2004年5月采用开塞露联合生理盐水灌肠治疗肿瘤病人便秘30例,疗效满意,现报告如下.

    作者:莫莉;曾国艳;邓家莲;王艳霞;农美华 刊期: 2006年第02期

  • 人血丙种球蛋白联合氢化可的松琥珀酸钠治疗特发性血小板减少性紫癜20例

    2000年4月至2002年6月我院采用中剂量人血丙种球蛋白联合氢化可的松琥珀酸钠治疗特发性血小板减少性紫癜(ITP)20例,取得满意效果,现报道如下.

    作者:李翠玉 刊期: 2006年第02期

  • LigaSureTM 在腹腔镜子宫切除术中应用的临床分析

    随着科学技术的日新月异,妇科内镜的发展和应用在一定的程度上提升了传统妇科疾病的诊断水平,也为传统治疗模式带来了革新.借助结扎速血管闭合系统(LigaSureTM)行腹腔镜下子宫切除术使手术操作难度明显减低,减少了副损伤,减少了术中的出血及缩短了手术时间,术后恢复更快,有较好的临床应用价值.现将我院2004年7月至2005年2月应用腹腔镜借助LigaSureTM 行子宫切除术52例,结果分析报道如下.

    作者:陈昌益;马刚;邬华 刊期: 2006年第02期

广西医科大学学报杂志

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主管:广西医科大学

主办:广西医科大学