胡兰靛；郑广勇；江海松；夏煜；张艺；孔祥银
目的:研究编码白介素-10(IL-10)质粒DNA对由多次、低剂量链脲佐菌素(STZ)诱发的自身免疫性糖尿病小鼠的作用.方法:连续5天将STZ(每次40 mg/kg)腹腔注射入小鼠体内,于第1、14天将100 mg表达人IL-10-pcDNA3质粒(IL-10处理组)或pcDNA3质粒(对照组)注射入骨骼肌内.测定小鼠血糖水平.第28天处死小鼠,检测小鼠血清干扰素-γ(IFN-γ)水平、胰腺IL-1β和TNF-αmRNA表达,测定脾CD4+和CD8+淋巴细胞的数量,同时进行胰腺组织学检查.结果:IL-10质粒DNA注射后,骨骼肌有IL-10 mRNA的持久表达,血浆IL-1 0水平明显升高,而且对迟发性超敏反应具抑制作用.IL-10处理组,在14、21和28天小鼠血糖显著降低,在21、28天时糖尿病发病率分别为33.3%和40.0%,显著低于对照组(P＜0.05);胰腺IL-1β和TNF-αmRNA表达、血清IFN-γ水平,以及脾CD4+和CD8+淋巴细胞数量均低于对照组,胰岛炎症程度也明显轻于对照组(P＜0.01).结论:IL-10基因治疗能减轻实验性自身免疫性糖尿病小鼠的胰岛炎症,降低糖尿病发生的机率.
作者：章振林；沈水仙；林波；余路阳；朱丽华；王卫平；罗飞宏；郭礼和 刊期： 2003年第08期
目的:研究辣椒素对离体家兔窦房结起搏细胞的电生理效应及其作用机制.方法:应用经典玻璃微电极方法.结果:辣椒素(10μmol/L)使窦房结起搏细胞的零相大上升速度(Vmax)由(2.4±0.5)V/s降至(1.7±0.2)V/s(P＜0.05);舒张期除极速度(VDD)由(91±34)mV/s降至(70±30)mV/s(P＜0.01);起搏放电频率(RPF)由(186±14)beat/min降至(162±10)beat/min(P＜0.01);大舒张电位(MDP)绝对值由(49±3)mV降至(44±2)mV(P＜0.01);动作电位幅度(APA)由(55±4)mV降至(49±4)mV(P＜0.05).复极化90%时间(APD90)则由(149±21)ms延长至(167±27)ms(P＜0.01).应用辣椒素受体阻断剂钌红(10μmol/L)对辣椒素的上述电生理效应无影响.提高灌流液中钙离子浓度(5 mmol/L)以及应用L型钙通道开放剂Bay-K-8644(0.5μmol/L)均可抑制辣椒素对起搏细胞的电生理效应.β-肾上腺素能受体激动剂异丙1肾上腺素(20 nmol/L)可逆转辣椒素所引起的除极化时间延长和MDP的降低.结论:辣椒素对家兔窦房结细胞有负性变时作用,这些效应可能与其抑制钙离子内流及/或钾离子外流有关,而非由辣椒素受体介导.
作者：程岩萍；王义和；程利萍；何瑞荣 刊期： 2003年第08期
目的:探讨大鼠原代培养肝细胞免疫性损伤模型病理特征,评价甘利欣(Grz)护肝作用.方法:用卡介苗(BCG)整体致敏,脂多糖(LPS)离体攻击(BCG+LPS)致肝细胞损伤.常规测AST,LDH活性,Griess法测N0含量;免疫细胞化学法测ICAM-1表达,丫啶橙荧光染色法和流式细胞仪测肝细胞凋亡率,评价Grz护肝作用.结果:LPS对上清AST无显著影响.BCG+LPS使上清AST,LDH,N0,肝细胞ICAM-1表达及凋亡率均明显高于正常对照组;Grz抑制AST和LDH的同时,使NO和12 h肝细胞凋亡率显著降低.氨基胍对NO也有显著抑制.结论:ICAM-1高表达,大量N0生成和肝细胞凋亡可能是BCG+LPS诱发大鼠原代肝细胞免疫性损伤的病理现象;Grz可显著抑制NO生成和肝细胞凋亡.
作者：郑芹珠；楼宜嘉 刊期： 2003年第08期
目的:近,有越来越多的SARS-CoV病毒基因组序列释放到GenBank数据库中.我们这项研究的目的是通过分析病毒基因组的变异揭示病毒的进化规律.方法:我们从GenBank数据库中获得20条SARS-CoV病毒基因组序列,计算病毒基因非同义突变频率(Ka)和同义突变频率(Ks)之比.结果:复制酶ORF1a,ORF1b和Spike蛋白基因的Ka/Ks之比分别是0.94(p=0.4606),0.38(p=0.0074),0.48(p=0.0685).结论:SARS-CoV复制酶ORF1b在宿主体内正在经历负选择;这种负选择的力量可能也作用于Spike基因.这一发现为治疗SARS药物和抗SARS疫苗研制提供了新的基础.
作者：胡兰靛；郑广勇；江海松；夏煜；张艺；孔祥银 刊期： 2003年第08期
目的:血管紧张素Ⅱ和AT1受体是肾素血管紧张素系统(RAS)的主要效应组分,也是心血管系统的重要生长刺激因子.本研究观察去窦弓神经大鼠肥厚心室和主动脉组织中这两因子的改变.方法:大鼠去窦弓神经(SAD)后2、10、16周进行检测.以器官体重比评价肥厚.血管紧张素Ⅱ和AT1受体mRNA分别采用放射免疫测定法和逆转录-聚合酶链反应分析法进行检测,并设坎替沙坦治疗作为阳性对照.结果:主动脉肥厚存在于2、1 0、1 6周SAD大鼠,左心室肥厚存在于10、16周SAD大鼠,右心室肥厚存在于16周SAD大鼠.与相应的假手术对照大鼠比较,三种不同时间SAD大鼠的血浆血管紧张素Ⅱ水平无明显改变,提示SAD慢性期循环RAS维持在正常水平.但是,心血管组织RAS处于激活状态,表现为SAD后10、16周主动脉血管紧张素Ⅱ水平升高,SAD后16周主动脉和左心室AT1受体mRNA表达上调.结论:在SAD大鼠上,心血管组织RAS激活落后于肥厚,提示它不是心血管肥厚触发因素,而很可能在心血管肥厚维持中起一定作用.
作者：缪朝玉；张黎明；袁文俊；苏定冯 刊期： 2003年第08期
目的:研究多药耐药基因mdr1特异性肽核酸(MDR1-PNA)和反义寡脱氧核苷酸(MDR1-ASODN)对耐药白血病K562/ADM细胞耐药性和凋亡抑制的逆转效应.方法:合成互补于mdr1基因mRNA的PNA和硫代ASODN,直接转染细胞,MTT比色法检测细胞增殖活性;流式细胞仪检测细胞周期和P-糖蛋白(P-gp)表达;激光共聚焦显微镜观察细胞内多柔比星(ADM)含量和分布.结果:MDR1-PNA 1-10 μmol/L和MDR1-ASODN 2-20 μmol/L不抑制K562/ADM细胞的增殖,但下调K562/ADM细胞P-gp的表达,增加细胞内ADM的含量,提高K562/ADM细胞对ADM诱导凋亡的敏感性而逆转其耐药性.PNA的作用较ASODN高3.1倍,无论是PNA还是ASODN均不能完全阻断P-gp的合成.结论:mdr1基因特异性PNA和反义ODN抑制耐药白血病细胞P-gp的表达而逆转其耐药性和凋亡抑制,PNA的活性高于相同序列的ASODN.
作者：魏虎来；吴勇杰；景涛；白德成；马兰芳 刊期： 2003年第08期
目的:研究家兔体内酮康唑肝毒性和毒代动力学的关系.方法:健康家兔一次灌胃给予酮康唑40,80和160 mg/kg,HPLC法检测酮康唑血浆浓度,用3P97软件进行动力学分析和计算毒代动力学参数;药后36 h测定血清谷丙转氨酶及谷草转氨酶活性和肝组织病理学变化,并对肝脏毒性与毒代动力学参数进行相关分析.结果:酮康唑3个剂量组血浓-时间曲线变化符合二室模型,当剂量＞80 mg/kg时,浓度-时间曲线下面积(AUC)的增加比例高于剂量的增加比例;酮康唑引起血清酶活性升高和肝细胞损害;以血清转氨酶升高为评价指标,酮康唑肝脏毒性与剂量、清除率(CL)、大血浆浓度(Gax)相关,与AUC相关程度密切.结论:酮康唑引起的肝毒性的严重程度与其暴露水平(AUC)密切相关.
作者：马越鸣；马张庆；桂常青；姚建设；孙瑞元 刊期： 2003年第08期
目的:观察N-正丁基氟哌啶醇碘化物(F2)对大鼠心肌缺血再灌注损伤及大鼠心室肌细胞L-型钙电流(Ica)的影响.方法:大鼠冠脉左前降支结扎30 min后恢复灌注30 min,于缺血前分别静脉注射F2(1,2,和4 mg/kg).测定血浆CK、CK-MB、LDH、HBDH、GOT、MDA的含量及SOD活性;观察心肌的形态学改变.采用酶急性分离的大鼠单个心室肌细胞,应用膜片箝全细胞记录技术,观察F2对Ica的影响.结果:F2呈量效依赖地降低缺血再灌注心肌酶CK、CK-MB、LDH、HBDH、GOT的释放,保护SOD的活性,降低MDA的产生;电镜下可见F2减轻心肌的形态学改变.F21 μmol/L明显抑制Ica,使峰电流从(1775±360)pA减少至(464±129)pA(n=8,P＜0.01),并使得Ica的I-V曲线上移,但不改变其电压依赖特征.结论:F2对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有拮抗作用,并可抑制大鼠心室肌细胞L-型钙电流.F2对心肌缺血再灌注损伤的拮抗作用及其扩张血管的机制可能与其阻断L-型钙通道有关.
作者：黄展勤；石刚刚；郑锦鸿；刘冰 刊期： 2003年第08期
目的:预测石杉碱甲可能的药物相互作用和确保石杉碱甲的用药安全.方法:检测石杉碱甲对肝细胞色素P450不同亚型酶活性和表达的影响.大鼠灌胃0,0.1(药理学剂量),1或2 mg/kg石杉碱甲,连续2周.苯巴比妥、3甲基氮蒽、乙醇和地塞米松作阳性对照.制备肝细胞微粒体和总mRNA,CO差示光谱法测定总细胞色素P450含量,特异性底物代谢法测定细胞色素P450的活性,蛋白质印迹法和反转录PCR检测细胞色素450的表达.结果:0.1 mg/kg石杉碱甲对细胞色素P450的活性和表达无影响.1,2 mg/kg组大鼠肝CYP1A2活性,CYP1A2蛋白和mRNA含量增加,但与3-甲基氮蒽的诱导效应相比作用微弱.1,2 mg/kg石杉碱甲对CYP2C11,CYP2B1/2,2E1和3A活性以及表达无明显变化.结论:药理学剂量石杉碱甲对大鼠肝细胞色素P450活性和表达无影响,毒理学剂量石杉碱甲可轻微的诱导CYP1A2.石杉碱甲对CYP1A2的诱导与转录增强有关.
作者：马小超；王海学；张欣坚；张婷；屠曾宏 刊期： 2003年第08期
目的:研究脂多糖(LPS)对胰腺腺泡细胞钙稳态的影响,及胞浆内钙超载时钙离子的来源,以探讨LPS致胰腺腺泡细胞损伤的机制.方法:胶原酶法分离胰腺腺泡细胞,F1 uo-3/AM负载后,在无钙或含生理钙离子浓度的培养液中加入不同浓度LPS,采用激光共聚焦显微镜观察单个胰腺腺泡细胞[Ca2+]I.另外采用MTT法检测LPS作用的不同时间点胰腺腺泡细胞的活性.结果:LPS可致胰腺腺泡细胞损伤、细胞内[Ca2+]I显著升高,且呈浓度依赖性(P＜0.05);在含1mmol/L依他酸的培养液中,LPS致腺泡细胞损伤程度明显减轻(P＜0.05)、仅引起胰腺腺泡细胞[Ca2+]I缓慢、微弱的升高,而再次恢复培养液中Ca2+至生理浓度,引发快速、幅度更高而持久的[Ca2+]I变化.腺泡细胞内[Ca2+]I的变化明显先于腺泡细胞的损伤.结论:LPS导致胰腺腺泡细胞内钙超载,主要源于胞外Ca2+内流.钙超载作为早期的病理事件参与腺泡细胞损伤的发生,钙稳态失衡是LPS致胰腺细胞损伤的主要因素之一.
作者：张红；李永渝；王升年；张孔华；吴咸中 刊期： 2003年第08期
AIM: To investigate modulation of antagonist and agonist binding to adenosine A1 receptors by MgCl2 and 5'-guanylimidodiphosphate (Gpp(NH)p) using rat brain membranes and the A1 antagonist [3H]-8-cyclopentyl-1,3-dipropylxanthine ([3H]DPCPX) and the A1 agonist [3H]-2-chloro-N6-cyclopentyladenosine ([3H]CCPA). METHODS:Parallel saturation and inhibition studies were performed using well-characterised radioligand binding assays and aBrandel Cell Harvester. RESULTS: MgCl2 produced a concentration-dependent decrease (44 %), whereasGpp(NH)p increased [3H]DPCPX binding (19 %). In [3H]DPCPX competition studies, agonist affinity was 1.5-14.6-fold higher and 4.6-10-fold lower in the presence of 10 mmol/L MgCl2 and 10 μmol/L Gpp(NH)p respectively;antagonist affinity was unaffected. The decrease in agonist affinity with increasing Gpp(NH)p concentrations wasdue to a reduction in the proportion of binding to the high affinity receptor state. In contrast to [3H]DPCPX, MgCl2produced a concentration-dependent increase (72 %) and Gpp(NH)p a decrease (85 %) in [3H]CCPA binding.Using [3H]CCPA, agonist affinities were 5-17-fold higher than those for [3H]DPCPX, consistent with binding onlyto the high affinity receptor state. Agonist affinity was 1.3-10.5-fold higher and 2.4-4.7-fold lower on addingMgCl2 or Gpp(NH)p respectively; antagonist affinities were as for [3H]DPCPX. CONCLUSION: The inconsisten-cies surrounding the effects of MgCl2 and guanine nucleotides on radioligand binding to adenosine A1 receptorswere systematically examined. The effects of MgCl2 and Gpp(NH)p on agonist binding to A1 receptors are consis-tent with their roles in stimulating GTP-hydrolysis at the G-protein α-subunit and in blocking formation of the highaffinity agonist-receptor-G protein complex.
作者：Keith FINLAYSON；MAEMOTO Takuya；Steven P BUTCHER；John SHARKEY；Henry J OLVERMAN 刊期： 2003年第08期
目的:探讨大鼠尾端延髓腹外侧区(CVLM)非N-甲基-D-天门冬氨酸(non NMDA)受体在介导压力反射中的作用.方法:在戊巴比妥钠和氨基甲酸乙酯麻醉、制动和人工呼吸的SD大鼠,观察CVLM内局部给予non-NMDA受体选择性阻断剂CNQX对刺激主动脉神经导致的减压反应和头端延髓腹外侧区(RVLM)神经元的压力敏感性的作用.结果:双侧CVLM微量注射CNQX(每侧200 pmo1/100 nL)后明显(P＜0.01)地增高基础血压(BP)和心率,而且显著(P＜0.01)地减弱刺激主动脉神经导致的降压反应.单侧CVLM内给予CNQX(200 pmol/100 nL)明显(P＜0.01)增高同侧RVLM压力敏感性神经元的基础放电频率,但显著(P＜0.01)减弱刺激主动脉神经和升高血压导致的神经元活动的抑制效应和部分抑制神经元的心性节律.结论:大鼠尾端延髓腹外侧区non-NMDA受体在维持紧张性兴奋的心血管活动和传递压力感受器信息中具有重要的意义.
作者：王伟忠；袁文俊；潘燕霞；白洁；廖茂瑶；唐朝枢 刊期： 2003年第08期
目的:观察和比较手性3-n丁基苯酞(NBP)对大鼠局灶性脑缺血再灌注诱导的凋亡的影响.方法:插线法制备大脑中动脉阻断(MCAO)模型,原位末端标记(TUNEL)和琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂,蛋白质印迹和免疫组化方法检测细胞色素c及caspase-3蛋白的表达.结果:大鼠局灶性脑缺血2小时,再灌注开始后24小时可见明显的TUNEL阳性染色和DNA ladder.s-(-)-NBP 5,10 mg/kg显著减少TUNEL阳性细胞数和DNA ladder,s-(-)-NBP 10 mg/kg几乎完全抑制DNA片段化,而r-(+)-NBP 10 mg/kg仅有轻度抑制作用.(±)-NBP(20 mg/kg)对DNA片段化的抑制作用介于s-(-)-NBP(10 mg/kg)和r-(+)-NBP(10 mg/kg)之间.脑缺血过程中可见到线粒体细胞色素c的释放及caspase-3的激活,s-(-)-NBP能明显抑制这一效应,r-(+)-NBP和(±)-NBP对细胞色素c和caspase-3作用的强弱与它们抑制DNA片段化的作用强度相似.结论:NBP,尤其是s-(-)-NBP能够抑制脑缺血诱导的DNA片段化,细胞色素c释放和caspase-3激活.
作者：常青；王晓良 刊期： 2003年第08期
目的:通过观察胍丁胺对大鼠海马神经元电压门控性离子通道的影响来探讨其作用机制.方法:使用膜片箝全细胞记录技术,采用压力注射给药的方法,在培养的新生大鼠海马神经元上观察胍丁胺对其电压门控性钠、钾、钙离子通道的作用.结果:胍丁胺(500 μmo1/L)对钠、钾通道(快速失敏钾通道IA和延迟整流钾通道IK)没有显著的作用.胍丁胺能抑制钙电流,其抑制作用随浓度增加而加强.在胍丁胺浓度为0.1,0.5,1.5,10.0,50.0和100μmol/L时,其对电压门控性钙电流的抑制率分别为(21±4)%,(35±6)%(49±6)%,(67±4)%,(69±6)%,(86±8)%和(87±9)%.IC50为1.2±0.4 μmol/L.双因素方差分析显示,细胞膜不同箝制电压水平和不同浓度胍丁胺对钙电流的抑制效应之间存在着明显的交互作用.结论:胍丁胺以浓度依赖性和电压依赖性方式,可逆性地抑制海马神经元电压门控性钙通道.对钙通道的阻断作用可能是胍丁胺产生生理和药理学作用的机制之一.
作者：翁谢川；盖晓丹；郑建全；李锦 刊期： 2003年第08期
目的:研究胞内钙动员在硝普钠(SNP)增加豚鼠胃窦环行平滑肌细胞钙敏感性钾电流[IK(Ca)]中的作用.方法:采用传统全细胞膜片箝技术,并用胶原酶急性分离单细胞.用硝普钠作为一氧化氮供体.结果:SNP100 μmol/L明显增加钙敏感性钾电流,同时也可以显著地增加瞬间外向性钾电流(STOC).SNP引发Ik(Ca)增加效应不能被胞外无钙液(含依他酸10 μmol/L)和L-型钙通道阻断剂尼卡地平5μmol/LL所阻断.SNP100μmol/L可以明显地抑制钙电流.SNP引发STOC增加效应可以明显地被三磷酸肌醇受体特异性阻断剂肝素3 g/L所阻断,却不能被兰尼碱10μmo1/L所阻断.亚甲基蓝1 μmol/L,特异性胞内鸟苷酸环化酶抑制剂,也可以显著地抑制上述效应.结论:SNP引发钙敏感性钾电流的增加可能是胞内第二信使cGMP通过激活胞内三磷酸肌醇诱导的钙释放的途径而实现的,而胞外钙离子不参与这一过程.
作者：禹永春；郭慧淑；李英；朴琳；李林；李在琉；许文燮 刊期： 2003年第08期
目的:用大鼠皮肤严重烫伤及延迟复苏模型,观察锌7-金属硫蛋白(Zn7-MT)对烫伤后肝脏氧化应激的拮抗作用.方法:观察在复苏液中给予与不给予Zn7-MT对烫伤后肝脏抗氧化物、抗氧化酶活性、脂质过氧化的变化以及内源性MT表达的影响.结果:伤后肝脏抗氧化物、抗氧化酶活性、脂质过氧化的变化以及内源性MT表达明显增强,说明肝脏有氧化应激反应.给予Zn7-MT后,肝脏抗氧化物降低的幅度以及GSH-抗氧化酶活性下降的幅度减少,脂质过氧化部分被抑制,MT-1 mRNA高表达部分被抑制,Zn7-MT的抗氧化应激作用呈剂量依赖性,浓度为10 μmol/L时效果强.结论:外源性Zn7-MT拮抗严重烫伤后肝脏氧化应激反应.
作者：周智波；丁海勤；覃凤均；柳林；程时 刊期： 2003年第08期
中国药理学报（英文版）杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会和中科院上海药物研究所
