张兴梅；邵宁生；池木根；孙曼霁
目的:探讨Ⅰ组亲代谢型谷氨酸受体(mGluR)配基对6羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的PC12细胞死亡及谷氨酸(Glu)释放的影响.方法:培养PC12细胞，以100 μmol/L Ⅰ组mGluR激动剂(RS)-3，5-dihydroxyphenylglycine(DHPG)和拮抗剂DL-2-amino-3-phosphonopropionic acid(DL-AP3)预先刺激细胞1 h，再加入6-OHDA100 μmol/L共孵育24 h，显微镜下观察细胞形态变化，用TUNEL法检测凋亡细胞，用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率，并用高效液相色谱检测Gl u的释放量.结果:6-OHDA降低PC12细胞存活率(P＜0.01)，其诱导的Glu释放呈浓度和时间依赖性.Ⅰ组mGluR配基不能减少6-OHDA引起的PC12细胞死亡，也不影响6OHDA引起的Glu释放量.结论:Ⅰ组mGluR配基对6-OHDA引起死亡的PC12细胞无保护作用.
作者：李皓；丁建花；胡刚 刊期： 2003年第07期
目的:研究三氧化二砷在诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4分化过程中基因表达谱的改变.方法:通过逆转录方法将经过及未经过三氧化二砷处理的NB4细胞mRNA制备成两种探针，应用Cy3和Cy5两种荧光染料分别标记这两种探针，随后与包含1003条待研究人类基因的表达谱基因芯片杂交，通过扫描和计算机软件分析，寻找经三氧化二砷作用后表达有差异的基因.结果:NB4细胞在三氧化二砷(0.5 μmol/L)作用后3条基因上调，18条基因下调.1条参与蛋白酶体降解途径的基因显著上调，多条与细胞信号传导、RNA加工及蛋白质合成相关基因下调.结论:PSMB6及ITGB1基因的表达改变可能与NB4细胞的凋亡和/或分化有密切关系.
作者：王怀宇；刘陕西；张梅 刊期： 2003年第07期
目的:探讨CD40-CD40配体(CD40L)相互作用是否能激活人外周血单核细胞(PBMC)内二酰基甘油(DAG)-蛋白激酶C(PKC)信号通路.方法:细胞内DAG含量采用放射酶标记、薄层层析和放射自显影方法检测.细胞PKC活性及胞内游离钙分别采用[γ-32P]ATP磷酸转移法和Fluo-3荧光负载流式细胞术检测.结果:CD40L以剂量依赖方式刺激人外周血单核细胞合成DAG，并具有双时限性变化，第一峰值在20 s，第二峰值在10 min时出现.然后DAG水平缓慢下降，至少持续20-30 min.单核细胞蛋白激酶C总活性受CD40L刺激后明显增加，峰值在12 min，持续20 min以上.并且这种作用主要是胞浆PKC活性向胞膜PKC活性转位所致.CD40L能刺激胞内游离Ca2+出现短暂的快速升高，继之为持续阶段.移去细胞外Ca2+，胞内快速阶段无影响，而持续阶段明显受到抑制.抗CD40抗体能显著抑制CD40L引起的胞内DAG-PKC信号通路激活及[Ca2+]i的动态变化.结论:CD40-CD40L相互作用能激活人外周血单核细胞[Ca2+]i动态变化及二酰基甘油-蛋白激酶C信号通路.
作者：严金川；吴宗贵；孔宪涛；仲人前；张玲珍 刊期： 2003年第07期
目的:探索上海地区农民人群中α-雌激素受体基因(ER-α)及芳香烃受体基因(Ahr)不同基因形态和老年痴呆症高发风险的可能联系.方法:分别以PCR-RFLP和AS-PCR方法分析一组老年痴呆症患者(n=52)ER-α基因及Ahr基因的多态位点，同一地区的健康人群(n=125)为对照.结果:Alzheimer症病人ER-α基因两个位点突变形态频率显著高于对照人群(Pvu Ⅱ位点:P=0.023，OR=2.94，95％CI 1.13-7.71；XbaⅠ位点:P=0.046，OR=2.28，95％CI 1.003-5.17).AhrG1721A位点基因型频率在病人组和对照组间无显著差异.结论:ER-α基因多态性可能与Alzheimer症易感性个体差异有关，本工作不支持Ahr基因多态性与老年痴呆症高发风险间的可能关联.
作者：林国芳；马晴雯；张东升；查永林；娄克俭；沈建华 刊期： 2003年第07期
目的:研究激活补体对血小板的作用和随后对血管内皮细胞和血管平滑肌细胞的作用.方法:用酵母多糖A激活补体观察血小板变形、凝血活酶表达和膜粘度的改变，观察酵母多糖A处理的富血小板血浆对内皮细胞和血管平滑肌细胞的生长、DNA含量和膜微粘度的影响.结果:酵母多糖A能引起富血小板血浆的血小板明显变形、膜微粘度增加和凝血活酶表达增加，但不引起经洗脱的血小板变形，新鲜的贫血小板血浆能恢复酵母多糖A引起的作用，但经眼镜蛇毒因子预处理后作用消失.酵母多糖A引起的血小板变形能被依他酸5 mmol/L、Mn2+10 nmol/L、河豚毒素40μmol/L或吲哚美辛100 μmol/L阻断.酵母多糖A处理的富血小板血浆上清液能抑制血管内皮细胞生长，但对血管平滑肌细胞生长有促进作用，促使血管平滑肌细胞进入G2期和M期，同时内浆网变粗和游离的核糖体出现，而内皮细胞的线粒体出现空泡.结论:激活补体引起血小板显著变形，损伤血管内皮细胞并使血管平滑肌细胞增殖.
作者：撒亚莲；黄守坚 刊期： 2003年第07期
目的:研究17β-雌二醇对体内单核细胞趋化因子受体CXCR2表达的影响.方法:流式细胞仪测定单核细胞趋化因子受体CXCR2的蛋白表达、逆转录PCR测定其mRNA水平.结果:在卵巢完整和切除卵巢的大鼠中，喂养富含胆固醇饮食6周增加单核细胞趋化因子受体CXCR2 mRNA和蛋白水平.在切除卵巢的大鼠，注射17β-雌二醇(5和20μg·kg-1·d-1)显著减少了胆固醇诱导的CXCR2 mRNA及蛋白表达的增加.正常饮食的大鼠，切除卵巢增加了趋化因子受体CXCR2 mRNA和蛋白水平的表达，但是注射17β-雌二醇可以防止它表达的增加.结论:生理性浓度的雌激素调节基础及胆固醇诱导的趋化因子受体CXCR2表达.
作者：雷著斌；付绪杰；卢兆桐；王宝成；刘现亮；尤乃桢 刊期： 2003年第07期
目的:研究星形孢菌素是否能引起NG108-15细胞的凋亡及它对数种与凋亡相关基因蛋白表达水平的影响.方法:用相差显微镜、荧光显微镜和透射电镜观察形态学变化；琼脂糖凝胶电泳检测DNA梯带；免疫印迹法检测凋亡相关基因蛋白的表达水平.结果:经星形孢菌素0.1 μmol/L处理后NG108-15细胞呈典型的凋亡形态学变化.星形孢菌素处理后6 h即出现DNA凋亡梯带，可持续至24 h.Bax蛋白表达在星形孢菌素处理后6 h开始上升，12 h至高峰，24 h后下降.Bcl-2蛋白表达在星形孢菌素处理后3 h明显上升，随后逐渐下降.星形孢菌素处理后6 h可见caspase-3切割产物出现，但Cdk5蛋白的表达水平未见明显变化.p53蛋白表达在星形孢菌素处理12 h后下降.结论:星形孢菌素诱导了NG108-15细胞的凋亡，可能与Bax蛋白表达的增加及caspase-3切割有关，而与p53和Cdk5无明显相关性.
作者：张百芳；彭芳芳；章江洲；武栋成 刊期： 2003年第07期
目的:观察内源性过氧亚硝基阴离子(ONOO-)在博莱霉素A5诱发大鼠肺损伤和肺纤维化中的作用.方法:通过测定出肺血脂质过氧化物水平和观察肺组织学变化(包括用偏振光显微镜观察天狼猩红染色的Ⅰ、Ⅲ型胶原的变化)来判断肺损伤和肺纤维化；用硝基酪氨酸的免疫组化判断过氧亚硝基阴离子的表达.结果:气管内给予博莱霉素A5第14天观察到(1)出肺血脂质过氧化物含量升高；肺泡壁增厚，肺间质巨噬细胞浸润，且其邻近有成纤维细胞及增多的Ⅰ、Ⅲ型胶原.(2)肺泡上皮细胞和肺间质细胞内ONOO-高表达.(3)诱导型一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂氨基胍减轻上述变化.结论:内源性ONOO-介导BLM-A5的肺毒性作用；氨基胍对肺损伤和肺纤维化的治疗部分是通过减少内源性ONOO-的形成实现的.
作者：陈晓玲；李文斌；周爱民；艾洁；黄善生 刊期： 2003年第07期
目的:研究褪黑素对不同月龄小鼠免疫反应的影响及其作用机制.方法:淋巴细胞增殖采用MTT法;IL-2活性检测采用激活小鼠脾淋巴细胞增殖法;cAMP测定用竞争蛋白结合法;甲硫氨酸脑啡肽的测定采用放免法.结果:6月龄和11月龄BALB/c小鼠胸腺淋巴细胞增殖能力和IL-2的产生均降低,褪黑素(5 mg/kg或30 mg/kg,ig×7 d)对上述指标有不同程度的改善作用.在体外,11月龄小鼠胸腺淋巴细胞增殖反应明显降低,而其产生的cAMP则明显升高,褪黑素(0.1 nmol/L和1 μmol/L)对此有反向调节作用.弗司可林(10 μmol/L)(腺苷酸环化酶选择性激活剂)能够增强2月龄和11月龄BALB/c小鼠胸腺淋巴细胞内的cAMP水平,褪黑素可部分拮抗此作用,褪黑素的这一作用可被百日咳毒素(1 mg/L)完全取消.同时发现褪黑素(1 μmol/L和0.1nmol/L)能够明显提高2月龄和11月龄BALB/c小鼠胸腺淋巴细胞的甲硫氨酸脑啡肽含量,这一作用能被硝苯地平(1μmol/L)所阻断,提示褪黑素促进淋巴细胞甲硫氨酸脑啡肽释放可能由Ca2+通道介导.结论:褪黑素对不同月龄小鼠具有免疫调节作用;G蛋白偶联的AC-cAMP信号转导通路和淋巴细胞甲硫氨酸脑啡肽的释放可能是褪黑素发挥免疫调节作用的重要机制之一.
作者：魏伟；沈玉先；戴敏；陈群 刊期： 2003年第07期
近年研究表明某些药物尽管不能与阿片受体发生相互作用，但能对阿片药理作用产生重要的调节.特别是有些药物能对阿片功能产生双向调节作用，即增强阿片镇痛，对抗阿片耐受和躯体依赖.我们将这些不与阿片受体发生作用，但具有双向调节阿片功能的药物称之为双向阿片功能调节剂(biphasic opioid function modulator，BOFM).基于我们的研究工作，可以认定胍丁胺就是一个典型的双向阿片功能调节剂.胍丁胺本身有弱的镇痛作用，它能增强吗啡镇痛，对抗吗啡耐受和依赖；胍丁胺产生上述作用的主要机制与抑制阿片长期作用下在阿片受体信号转导系统产生的代偿性适应过程相关.
作者：苏瑞斌；李锦；秦伯益 刊期： 2003年第07期
目的:研究氯雷他定(LOR)及其活性代谢物去羧乙氧基氯雷他定(DCL)在中国健康受试者体内的药动学.方法:20名健康中国男性受试者口服氯雷他定20 mg.采用液相色谱-质谱-质谱联用法测定血浆中LOR和DCL的药物浓度.结果:LOR和DCL的Cmax分别为(17±14)和(16±9)μg/L；Tmax分别为1.2和1.5 h；AUC0-∞分别为(47±49)和(181±122)μg·h·L；LOR的T1/2平均为(6±4)h，DCL的T1/2平均为(13.4±2.6)h；AUCDCL/AUCLOR比值的范围从0.36到54.5.结论:中国受试者口服单剂量氯雷他定片后，在体内迅速吸收并转化为DCL，母体药物AUC的个体差异极为显著，而活性代谢物DCL的AUC则只表现出中等强度的个体差异.
作者：张逸凡；陈笑艳；钟大放；董玉梅 刊期： 2003年第07期
The fate of a cell following stimulation by the prostanoid prostacyclin is cell specific, depending not only onthe ability of prostacyclin to activate the cell surface prostacyclin (IP) receptor and regulate its coupling to variousG proteins, but also on its ability to act intracellularly via the nuclear peroxisome proliferator-activated receptorfamily (PPAR). This review will highlight the different signalling options available to prostacyclin, and discuss theconsequences for cell responses.
作者：Helen WISE 刊期： 2003年第07期
目的:构建一个新型的携带有人内皮一氧化氮合酶(eNOS)cDNA的质粒载体并研究其体外表达，以用于基因治疗.方法:eNOS cDNA插入到腺相关病毒质粒pSNAV-1的EcoR Ⅰ位点.该质粒的启动子为CMV启动子，并携带有腺相关病毒的末端重复序列.构建好的质粒转染到两种哺乳动物细胞BHK和C2C12细胞中，通过PCR和RT-PCR分别检测eNOS cDNA和mRNA.结果:限制性内切酶分析证明，eNOS cDNA以正确的方向插入到pSNAV-1质粒中.PCR检测表明pSNAV-eNOS被转入BHK和C2C12细胞中.RT-PCR检测表明转染有pSNAV-eNOS的细胞可表达eNOS mRNA.结论:成功构建的pSNAV eNOS可在体外培养的哺乳动物细胞中表达人eNOS mRNA.
作者：贺晨霞；缪朝玉；姚纪花；陈浩明；卢大儒；苏定冯；薛京伦 刊期： 2003年第07期
目的:探讨脊髓损伤(SCI)后使用白藜芦醇(resveratrol，Res)对继发性脊髓水肿、受损脊髓组织中乳酸脱氢酶(LDH)与Na+，K+-ATP酶活性及早期脂质过氧化反应的影响.方法:采用重物下落撞击法制备成年大鼠的脊髓损伤模型，于损伤后即刻腹腔注射Res(50 mg/kg，100 mg/kg)或甲基强的松龙(MPSS，100 mg/kg)，观察给药后1 h、24 h、48 h时Res组受损脊髓组织含水量、LDH与Na+，K+-ATP酶活性及MDA水平的变化，同时用电子显微镜观察超微结构的变化，并与MPSS组进行疗效对比.结果:Res显著抑制SCI后继发性水肿，48 h明显(P＜0.05)，抑制率为11.5％；显著降低LDH活性，24 h时大(P＜0.01)，抑制率大于40％；明显改善Na+，K+-ATP酶活性，以48 h显著(P＜0.01)，大改善率在60％以上；显著抑制SCI后MDA产生，48小时为明显(P＜0.01)，Res在50 mg/kg和100 mg/kg的剂量情况下所表现的上述作用比100 mg/kg的MPSS更佳.电子显微镜的结果表明，Res和MPSS能有效保护SCI后脊髓组织的超微形态结构的正常性.结论:Res有效抑制脊髓损伤后的水肿和早期受损局部脂质过氧化反应并改善能量代谢系统，因此对脊髓损伤有潜在的治疗作用.
作者：杨迎暴；朴英杰 刊期： 2003年第07期
目的:研究扇贝多肽(PCF)对中波紫外线(UVB)辐射人真皮成纤维细胞线粒体的影响.方法:检测丙二醛(MDA)含量以及细胞内抗氧化酶(SOD、GSH-PX)的活性；流式细胞术测定线粒体膜电位；透射电镜观察细胞超微结构的变化.结果:UVB(1.176×10-4 J·cm-2)导致真皮成纤维细胞线粒体损伤，PCF(0.25％-1％)剂量依赖性地减轻UVB对线粒体的损伤；而且，PCF也可剂量依赖性地维持线粒体膜电位的相对稳定.PCF能够减少MDA的生成量，提高SOD及GSH-PX的活性.PCF各组与UVB模型组相比差异有显著性(P＜0.05，P＜0.01).结论:PCF保护成纤维细胞的线粒体免受UVB的损伤.
作者：王春波；丁擘晓；郭沈波；王玉贞；韩彦弢；王跃军 刊期： 2003年第07期
目的:获得针对人红细胞乙酰胆碱酯酶(AChE)的特异性核酸配基.方法:利用微孔板法筛选人红细胞膜AChE的核酸配基.利用凝胶阻滞实验检测核酸配基与AChE特异性的结合.微量碱羟胺比色法测定AChE的活性.结果:经过9轮筛选得到针对人红细胞AChE的核酸配基.在相同浓度(2.25 μmol/L)下，它们不与人重组丁酰胆碱酯酶(rhBChE)作用，而与人RBC AChE特异结合并抑制AChE的活性.结论:用SELEX技术可以高效地从大容量寡核苷酸组合文库中得到AChE特异性抑制剂.
作者：张兴梅；邵宁生；池木根；孙曼霁 刊期： 2003年第07期
目的:研究家兔心肌肥厚时三层心肌细胞延迟整流钾电流慢激活成分异质性的改变及长期应用咪达普利(Imi)对此变化的作用.方法:缩窄兔单侧腹主动脉制备心肌肥厚模型，同时设Imi治疗组和假手术组.采用全细胞膜片箝技术记录兔心肌细胞动作电位和钾电流.结果:(1)肥厚心肌细胞的膜电容明显高于假手术组和Imi治疗组；其动作电位时程(APD)显著延长，尤其是中层细胞(M)延长为显著；应用Imi后可逆转此延长效应；(2)肥厚心肌细胞上IKs,tail密度均不同程度的降低，外膜和内膜细胞分别降低25.3％±2.9％和20.3％±4.7％，而M降低为显著为38.0％±3.7％；用Imi后电流密度降低程度明显被缓解，该电流的跨室壁异质性减少.(3)在三层心肌细胞上IKr,tail的差异不明显，且IKr,tail密度在三组也改变较小.结论:长期应用Imi可以减少兔肥厚心肌细胞延迟整流钾电流慢激活成分的跨室壁异质性改变.
作者：李泱；陆再英；肖建民；马杰；牛惠燕；刘念；阮燕菲 刊期： 2003年第07期
目的:在单个培养的大鼠颈上交感神经元上研究失敏烟碱受体(N受体)对毒蕈碱受体(M受体)活性的影响.方法:采用全细胞膜片箝技术.结果:对神经元喷射烟碱可激活N受体诱发一内向电流，烟碱持续作用导致N受体快速失敏.氧化震颤素和毛果芸香碱均能激活M受体诱发一外向电流，M受体没有出现失敏现象.长时间持续喷射烟碱使N受体完全失敏后M受体激活所诱发外向电流的幅度与正常相比明显增大，而一旦去除烟碱，失敏的N受体对烟碱的敏感性将会逐步恢复，在此过程中M受体增加的活性也随之消失；另外，失敏的N受体对M受体活性的增强作用还可被美加明阻断.结论:大鼠交感神经元N受体失敏后M受体对其激动剂的反应增强.
作者：万勤；罗质璞；汪海 刊期： 2003年第07期
中国药理学报（英文版）杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会和中科院上海药物研究所
