钟大放；孙璐；刘磊；黄海华
目的:通过计算机辅助分子模拟,解析抗乙酰胆碱酯酶(AChE)单克隆抗体3F3抑酶的分子基础.方法:用柔性连接肽(Gly4Ser)3连接VH及VL设计3F3单链抗体(Sc3F3).将重组的Sc3F3的氨基酸序列进行计算机辅助分子模建,并与抗原分子AChE对接,模拟抗原抗体反应的三维模式.结果:模拟的Sc3F3结构具有经典抗体的共性特征,抗体的重链和轻链可变区都含有两个β片层和片层连接区.单链抗体与AChE相互作用对接图显示形成了稳定的结构.范德华力起着重要的作用,提示Sc3F3与AChE通过疏水作用形成复合物.结论:从Sc3F3与AChE形成复合物的空间结构看出Sc3F3结合在胆碱酯酶活性中心狭缝的入口处,对底物进入活性中心起到阻碍作用.
作者：郭崇志；武军华；王玉霞；胡远东；李松；孙曼霁 刊期： 2003年第05期
目的:研究罗格列酮逆转由慢性高浓度游离脂肪酸引起的胰岛素分泌的效果并探讨介导其作用的可能信号转导机制.方法:分离纯化的SD大鼠胰岛细胞用游离脂肪酸2 mmol/L或/和加用罗格列酮(0.05-10 μmol/L)培养.胰岛素释放功能采用放免法测定,胰岛素受体底物-2(IRS-2)蛋白的表达水平以及IRS-2与磷脂酰肌醇3激酶(PI 3K)的p85亚单位的相关作用通过免疫沉淀和蛋白质印迹分析法检测.结果:与对照组比较,对胰岛β细胞高浓度游离脂肪酸的慢性温育显著增加了基础胰岛素分泌而显著降低了葡萄糖刺激的胰岛素分泌(P＜0.01),IRS-2蛋白的表达水平降低了65%(P＜0.01),IRS-2与p85的相关作用降低了73%(P＜0.01).当加入罗格列酮继续培养后,基础和葡萄糖刺激的胰岛素分泌均恢复到接近对照水平(P＜0.01,P＜0.05),IRS-2蛋白的表达水平增加了2.6倍(P＜0.01),IRS-2与p85的相关作用增加了2.7倍(P＜0.01).PI 3K抑制物wortmannin 100 nmol/L抑制了罗格列酮逆转胰岛素分泌的作用.结论:罗格列酮逆转高浓度游离脂肪酸引起的胰岛素分泌改变,可能是通过与IRS-2相关的磷脂酰肌醇3激酶途径所介导.
作者：袁莉；安汉祥；邓秀玲；陈璐璐；李卓亚 刊期： 2003年第05期
目的:通过分离和鉴定萘普生由真菌转化生成的代谢产物,研究微生物转化和哺乳动物体内药物代谢之间的相似性.方法:选用3种小克银汉霉菌对萘普生进行微生物转化研究.采用液相色谱-质谱联用法检测代谢产物,并通过半制备高效液相色谱法分离出主要代谢物,经质谱和核磁共振光谱确证其结构.结果:萘普生被转化成去甲萘普生和去甲萘普生硫酸结合物,这两种代谢产物都是已知的哺乳动物代谢产物.其中去甲萘普生硫酸结合物是首次在微生物转化样品中发现.结论:小克银汉霉菌对萘普生的转化结果与哺乳动物的体内代谢有某些相似性,有可能成为一种新的体外模型进行药物代谢研究,用于预测和制备可能的药物代谢产物.
作者：钟大放；孙璐；刘磊；黄海华 刊期： 2003年第05期
目的:比较四个氟喹诺酮类抗生素的光毒性来确定体外实验的可靠性.方法:用体内Wistar大鼠光毒性实验,Balb/c小鼠光毒性实验和体外中国仓鼠V79细胞微核实验,NIH3T3 MTT实验在不同的UVA照射条件下测定四个氟喹诺酮类抗生素的光毒性.结果:在所有实验中,司帕沙星、洛美沙星显示出较强的光毒性,与对照组相比,均有非常显著?性差异(P＜0.01);环丙沙星光毒性较温和,有显著性差异(P＜0.05);诺氟沙星在体内实验中没有显示出光毒性,但在体外实验中较高剂量(10 μmol/L)能产生光毒性.结论:体内外测定药物光毒性有良好的相关性,因此体外检测氟喹诺酮类药物光毒性是可靠的.
作者：张婷；李俊岭；马小超；欣坚；屠曾宏 刊期： 2003年第05期
目的:研究烟碱与强直刺激在海马CA1区诱导的长时程增强是否具有不同机制.方法:细胞外记录离体海马脑片CAl区锥体细胞层群体峰电位.结果:烟碱10 μmol/L可易化强直刺激诱导的长时程增强,同样,强直刺激也可易化烟碱10 μmol/L诱导的长时程增强.MK-801 10 μmol/L或NG-nitro-L-arginine methyl ester(L-NAME)20 μmol/L可阻断强直刺激诱导的长时程增强,但不能抑制烟碱10 μmol/L诱导的长时程增强.结论:烟碱与强直刺激在海马CAl区诱导的长时程增强具有不同的突触机制.
作者：何进；邓春玉；朱小南；余剑平；陈汝筑 刊期： 2003年第05期
目的:研究妊娠恒河猴黄体中甾类激素灵敏调节蛋白(StAR)、转移生长因子(TGF-β1)及其Ⅱ型受体(TβR-Ⅱ)在妊娠早期恒河猴黄体中的表达和IFN-γ的调节作用.方法:利用原位杂交和免疫组化检测mRNA及其蛋白表达与定位.结果:StAR,TGF-β1及TβR-Ⅱ在妊娠恒河猴黄体中的表达随其功能从第15天到第35天逐渐降低;IFN-γ抑制TGF-β1、TβR-Ⅱ和StAR的表达.结论:TGF-β1及其受体对黄体的形成和功能维持可能起重要作用;IFN-γ下调StAR、TGF-β1及其受体的表达.
作者：陈鑫磊；高洪娟；魏鹏；宋欣欣；胡召元；刘以训 刊期： 2003年第05期
目的:研究苯妥英钠对慢性应激大鼠海马CA3区锥体神经元形态结构的影响.方法:采用M ssl染色,Golgi染色及电子显微镜技术观察各组大鼠海马CA3区锥体神经元的形态结构.结果:慢性应激引起了海马CA3区神经元的丢失(由39±4减少至35±4)、项树突总长度的缩短(由196 μm±35 μm缩短至156 μm±33 μm,P＜0.05),以及神经元超微结构的变性.苯妥英钠显著抑制了慢性应激所致海马CA3区神经元的减少(38.4±2.2)及顶树突总长度的缩短(198 μm±36 μm,P＜0.05),改善了神经元超微结构的变性.结论:慢性应激可导致大鼠海马CA3区锥体神经元损伤,苯妥英钠对应激状态下的海马CA3区锥体神经元具有保护作用.
作者：张艳美；杨权；许崇涛；李康生；李伟秋 刊期： 2003年第05期
目的:考察9-(4-乙氧羰基苯氧基)-6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢吖啶盐酸盐(EDT)对大鼠局灶性脑缺血及谷氨酸(Glu)和硝普钠(SNP)致鼠皮层神经元损伤的作用.方法:灼断小鼠一侧大脑中动脉形成局灶性脑缺血模型,用氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定脑梗塞率同时对神经症状进行评分.在原代培养的大鼠皮层神经细胞,采用MTT比色法,测定培养质内LDH及NO释放量.结果:EDT 2.5、5和10mg/kg及尼莫地平2 mg/kg灌胃5 d显著改善局灶性脑缺血小鼠的神经运动功能,缩小脑梗塞范围.在原代培养的鼠皮层神经细胞,EDT 0.01-3 μmol/L浓度依赖地对抗Glu诱发的NO过量形成,并提高MTT微量比色值,同时,减少SNP引起的LDH过量释放,提高细胞存活率.结论:EDT能有效对抗脑缺血损伤,其神经保护作用可能是通过阻断Glu受体及抑制N0生成而实现的.
作者：盛瑞；刘国卿 刊期： 2003年第05期
目的:研究noggin反义寡核苷酸对大鼠空间学习与记忆的影响.方法:用原位杂交技术检测大鼠海马内noggin mRNA的表达,Morris水迷宫检测大鼠空间学习与记忆.结果:Morris水迷宫训练引起大鼠海马齿回(DG)与CA3区nogginmRNA阳性神经元数明显增多.侧脑室注射noggin反义寡核苷酸,不仅抑制Morris水迷宫训练引起的海马noggin mRNA阳性神经元数增多,同时阻滞学习与记忆的形成.正义nog-gin寡核苷酸无此效应.结论:Noggin作为一胚胎基因,表达于成年大鼠的海马,并与其空间学习记忆行为有关.
作者：范晓棠；蔡文琴；杨忠；徐海伟；张金海 刊期： 2003年第05期
目的:研究放线菌素D对沙尔威辛诱导K562细胞凋亡和细胞毒性的影响.方法:采用四氮唑盐(MTT)还原法测定药物对K562细胞的生长抑制作用;凋亡诱导作用采用荧光显微镜术、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术进行评价.结果:药物处理K562细胞24 h后检测发现,放线菌素D能在一定程度上增强沙尔威辛6.25μmol/L的细胞毒性作用,平均生长抑制率由沙尔威辛单独应用时8%上升到联合应用放线菌素D 0.04、0.4和4 μmol/L时的69%、71%和70%.在沙尔成辛浓度大于6.25 μmol/L时,未见同样的增强作用,却也不减弱其抑制细胞生长的作用.这显示放线菌素D可以增强或至少不减弱沙尔威辛的细胞毒性作用.但荧光显微镜术、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术却表明,在同等条件下,放线菌素D抑制沙尔威辛诱导K562细胞凋亡.结论:放线菌素D可增强沙尔威辛适当浓度范围内的细胞毒性作用,但却抑制其诱导的白血病细胞凋亡,提示该过程中存在着除凋亡以外的其它细胞死亡方式.
作者：卿晨；缪泽鸿；童林江；张金生；丁健 刊期： 2003年第05期
目的:研究银杏叶提取物(GbE)对大鼠急性脑缺血的干预影响.方法:大鼠随机分成假手术组、缺血组、预防组和治疗组.用磁共振波谱分析动态观测脑缺血后48小时内生化代谢的变化及GbE(100 mg/kg,ip,qd)的干预影响.结果:(1)大鼠急性脑缺血后90 min梗塞区出现乳酸峰,并随着时间的延长而持续上升.预防组乳酸峰轻度升高(P＜0.0l,n=6);治疗组较预防组升高(P＜0.05,n=6).(2)缺血组在缺血后4 h内N-乙酰基天门冬氨酸下降(P＜0.05,n=6)并持续降低(P＜0.0l,n=6);治疗组及预防组24 h后N-乙酰基天门冬氨酸略下降(P＜0.05,n=6).(3)缺血后24h缺血组及治疗组胆碱略升高(P＜0.05,n=6),肌酸略降低(P＜0.05,n=6);预防组在48 h后才发生上述变化.结论:GbE对脑缺血具有预防及治疗作用,预防给药效果较佳.
作者：彭海；李月芬；孙圣刚 刊期： 2003年第05期
目的:探讨链尿佐菌素(STZ)诱导的早期糖尿病C57BL/6J小鼠胸主动脉内皮依赖性舒张增强机制.方法:采用放免法测定糖尿病(DM)和对照(Control)组小鼠血清中前列环素(PGI2)代谢物6-酮-前列环素F1α(6-keto-PGFlα)的含量,同时比较各组小鼠离体胸主动脉环对血管收缩剂、舒张剂的张力变化以及苯肾上腺素(PE)诱导的离体胸主动脉节律活动对各种阻断剂的反应性变化.结果:DM组小鼠血清6-keto-PGF1α的含量较Control组显著增强[(1.8±1.0)μg/L vs(0.5±0.3)μg/L,P＜0.01];PE能够诱导DM和Control组小鼠离体胸主动脉环的节律活动,而且DM组的胸主动脉环节律活动振幅显著增大[(4.9±1.7)% vs(12±5)%,P＜0.01].DM组胸主动脉环对收缩剂PE和KCl 60 mmol/L的反应性比Control组显著增强;对内皮依赖性舒张剂乙酰胆碱(ACh)的反应也比Control组显著增强[(56±10)% vs(8l±8)%,P＜0.01].一氧化氮合酶抑制剂(L-NAME)和鸟苷酸环化酶抑制剂(LY-83583)分别能完全阻断Control组的PE诱导的节律活动和ACh的舒张效应,而在DM组只能部分阻断.L-NAME和吲哚美辛联用可以显著减小节律活动振幅和ACh的舒张效应(P＜0.01).钙激活型钾通道阻断剂(TEA)可以阻断内皮依赖性舒张因子(EDHF)的效应,它与L-NAME联用可以完全阻断节律活动和ACh的舒张效应.结论:STZ诱导的糖尿病早期C57BL/6J小鼠胸主动脉内皮依赖性舒张功能增强是由于PGI2和EDHF增多引起的.这种现象只发生在糖尿病小鼠的早期.
作者：沈兵；叶春玲；叶开和；刘建军；孙鹏；蒋家华 刊期： 2003年第05期
目的:探讨异丙肾上腺素(I so)和氨茶碱(Ami)是否通过蛋白激酶A(PKA)通道激活高电导Ca2+活化钾通道(BKCa)来舒张支气管平滑肌.方法:运用等长张力记录和穿孔膜片箱技术,观察Iso和Ami对大鼠离体支气管平滑肌细胞BKCa的作用以及PKA抑制剂Rp-cAMP对该效应的影响.结果:(1)Iso和Ami均可诱发甲酰胆碱预收缩的离体支气管产生浓度依赖性舒张反应,BKCa阻断剂四乙胺(TEA)5 mmol/L使两者的量效曲线向右显著移位;(2)I so 1 μmol/L显著增加方波刺激时(从-60 mV到+50 mV)平滑肌细胞BKCa电流,该效应可被Rp-cAMP 100 μmol/L显著抑制,I so使BKCa电流电压关系曲线向上移位.在斜坡刺激时(从-100 mV到+100 mV)亦获得类似结果;(3)Ami 1 mmol/L显著增加支气管平滑肌细胞在方波刺激时的BKCa电流,该效应被Rp-cAMP 100μmol/L显著抑制,Ami使BKca电流电压关系曲线向上移位.在斜坡刺激时亦获得类似结果.结论:cAMP依赖性的气道舒张剂Iso和Ami对大鼠气道的舒张效应至少部分通过PKA的活化激活BKCa通道而实现的.
作者：刘先胜；徐永健；张珍祥；李超乾；杨丹蕾；张宁；倪望 刊期： 2003年第05期
AIM: The mechanism of tramadol-induced vasodilation was investigated using isolated rabbit thoracic aortic tings. METHODS: Aortic rings from 8 rabbits were placed in organ bath and precontracted with phenylephrine (10-5 mol/L) before addition of tramadol. Relaxation responses by tramadol were evaluated in the presence and absence of endothelium, indomethacin (an inhibitor of cyclooxygenase), NG-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME, a specific inhibitor of nitric oxide synthase), glibenclamide (an inhibitor of ATP-sensitive potassium channels), tetraethylammonium chloride (TEA, an inhibitor of calcium-sensitive potassium channels), and naloxone (an antagonist of opioid receptors). RESULTS: Tramadol (10-4 mol/L and 3×10-4 mol/L) caused significant vasodilation in endothelium-intact and endothelium-denuded aortic rings (P＜0.05). The relaxation response to tramadol was significantly greater in endothelium-intact rings than in endothelium-denuded rings. Pretreatment of aortic rings with indomethacin (10-5 mol/L), glibenclamide (10-5 mol/L), TEA (10-3 mol/L), and naloxone (10-4 mol/L) had no effect on the tramadol-induced relaxation. In endothelium-intact rings, L-NAME (10-4 mol/L) pretreatment caused marked inhibition of the relaxation induced by tramadol, but not endothelium-denuded rings. CONCLUSION: In the rabbit aorta, vascular relaxation induced by tramadol is due to both nitric oxide production from endothelium and a direct effect on smooth muscle.
作者：Tijen KAYA；Sinan GURSOY；Batis KARADAS；Bulent SARAC；Haluk KAFALI；Ahmet Serdar SOYDAN 刊期： 2003年第05期
中国药理学报（英文版）杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会和中科院上海药物研究所
