碱性磷酸酶直接标记核酸探针检测乙型肝炎病毒DNA

陈压西；黄爱龙；齐珍元；单幼兰；孙航

关键词：肝炎病毒, 乙型, 碱性磷酸酶, 核酸, 标记

摘要：目的建立快速、特异、灵敏的碱性磷酸酶直接(AlkPhos Direc)标记核酸探针检测血清中乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)方法.方法应用AlkPhos DirecTM将碱性磷酸酶直接标记在HBV DNA全基因序列上制备探针,与目标核酸杂交后加入CDP-Star化学发光试剂,用胶片放射自显影检测HBV DNA.同时检测探针的灵敏度和特异性.比较AlkPhos Direc标记HBV DNA探针与地高辛标记的HBV DNA探针检测临床血清标本80份结果,并对70份临床血清标本的荧光定量PCR方法检测的结果与AlkPhos Direc标记HBV DNA探针斑点杂交检测的结果作相关性分析.结果探针灵敏度至少为10pg,与地高辛探针比较,用AlkPhos Direct标记探针检测方法的灵敏度为100%,特异性为100%,符合率为100%,用HBV DNA荧光定量PCR方法和A1kPhos Direct标记探针核酸斑点定量方法检测的结果进行相关性比较,r=0.98,P＜0.0l.结论AlkPhos Direc标记HBVDNA探针检测血清中HBV DNA方法灵敏、特异,与地高辛标记的HBV DNA探针检测结果完全符合,与HBVDNA荧光定量PCR方法检测的结果有良好的相关性.

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目的建立快速、特异、灵敏的碱性磷酸酶直接(AlkPhos Direc)标记核酸探针检测血清中乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)方法.方法应用AlkPhos DirecTM将碱性磷酸酶直接标记在HBV DNA全基因序列上制备探针,与目标核酸杂交后加入CDP-Star化学发光试剂,用胶片放射自显影检测HBV DNA.同时检测探针的灵敏度和特异性.比较AlkPhos Direc标记HBV DNA探针与地高辛标记的HBV DNA探针检测临床血清标本80份结果,并对70份临床血清标本的荧光定量PCR方法检测的结果与AlkPhos Direc标记HBV DNA探针斑点杂交检测的结果作相关性分析.结果探针灵敏度至少为10pg,与地高辛探针比较,用AlkPhos Direct标记探针检测方法的灵敏度为100%,特异性为100%,符合率为100%,用HBV DNA荧光定量PCR方法和A1kPhos Direct标记探针核酸斑点定量方法检测的结果进行相关性比较,r=0.98,P＜0.0l.结论AlkPhos Direc标记HBVDNA探针检测血清中HBV DNA方法灵敏、特异,与地高辛标记的HBV DNA探针检测结果完全符合,与HBVDNA荧光定量PCR方法检测的结果有良好的相关性.

作者：陈压西；黄爱龙；齐珍元；单幼兰；孙航刊期： 2002年第06期
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作者：朱幼芙；骆抗先；于立新刊期： 2002年第06期
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