NKG5SV裸基因抑制裸鼠体内人肝癌细胞生长及转移

孙婧璟；吴志勇；吴孟超；沈锋；钱其军；贺平；阎振林；崔贞福；薛会斌

关键词：癌, 肝细胞, 肿瘤转移, 肿瘤复发, NKG5SV, 基因

摘要：目的研究NKG5SV裸基因直接注射抗肝细胞肝癌生长及转移复发的作用.方法以常规方法将NKG5SV装入逆转录病毒载体,扩增提取NKG5裸基因,以LacZ为对照基因.将不同裸基因和生理盐水与LCI-D20裸鼠人肝癌同时皮下接种或待LCI D20肿瘤成瘤后瘤内注射,观察对肿瘤成瘤和生长的影响.LCI-D20肿瘤裸鼠皮下接种后10 d,分别瘤内注射不同裸基因,观察对肿瘤生长转移的影响.LCI-D20肿瘤肝内接种,接种后22d行肝癌切除术,术中经切缘或脾内注射不同裸基因,观察其对术后转移复发的影响.结果不同裸基因与LCI-D20肝癌同时皮下接种对照组、LacZ组、NKG5SV组,肿瘤直径(cm)分别为1.76±0.11、1.51±0.34、0.33±0.04.裸基因肿瘤内注射对照组、LacZ细胞组、NKG5SV组,肿瘤直径(cm)分别为0.87±0.08、0.83±0.05、0.26±0.04.瘤重(g)分别为0.43±0.06、0.38±0.04、0.08±0.06.肝癌切除术中应用裸基因转移灶累及部位数、切缘复发瘤直径、肝内转移灶数目、转移灶累及肝叶数在对照组、LacZ组、NKG5SV组分别为,切缘注射肝外转移灶数目(个):4.25±1.48、4.25±1.04、0.63±0.51,切缘肿瘤直径(cm):1.51±0.27、1.35±0.17、0.81±0.17,肝内转移灶数目(个)2.50±1.41、2.38±1.06、1.25±0.71,转移灶累及肝叶数(个):2.13±0.99、2.00±0.75、1.38±0.74.脾内注射肝外转移灶数目(个):4.38±1.85、4.25±1.48、1.00±0.75,切缘肿瘤直径(cm):1.13±0.23、0.97±0.29、0.76±0.16,肝内转移灶数目(个):2.50±1.41、2.05±1.12、0,转移灶累及肝叶数(个):2.13±0.83、1.75±0.88、0.结论NKG5SV基因注射具有抑制LCI-D20肝癌生长及防治肝癌切除术后转移复发的作用.

中华肝脏病杂志相关文献

薏苡仁油注射液和超液化碘油介入治疗大鼠肝癌的研究

目的研究薏苡仁油注射液+超液化碘油介入治疗肝癌的疗效.方法复制大鼠移植性肝癌模型,用大鼠肝动脉灌注给药方法,以化疗药、超液化碘油作对照,评价薏苡仁油作为介入药物治疗大鼠肝癌的疗效.结果单用薏苡仁油与单用碘油肿瘤增殖率分别为13.89%、14.05%,肿瘤生长抑制率分别为38.10%和37.49%.薏苡仁油+碘油组肿瘤增殖率和生长抑制率分别为3.36%、85.03%,优于薏苡仁油组和碘油组(P＜0.01),但与丝裂霉素(MMC)+碘油组之间无明显差异,生存时间亦较其他各组显著延长(P＜0.0l或P＜0.05).结论经肝动脉灌注薏苡仁油+碘油对大鼠肝肿瘤的生长有较好的抑制作用,疗效与MMC+碘油相仿,优与单纯薏苡仁油及碘油组.对大鼠的生存时间也有明显的延长,优于单纯薏苡仁油、碘油及MMC+碘油组.

作者：黄挺；吴万垠；李勇；张建刚；黄伶刊期： 2002年第06期
肝衰竭预后判断研究进展

虽然世界各国肝衰竭组成上有一定差异,但主要病因不外乎病毒性(主要是乙型肝炎及丙型肝炎)、药物性及酒精性.与欧美日国家相比,我国除了乙型肝炎所致肝衰竭较多外,其他病因则向其靠拢,呈上升趋势.

作者：王宇明刊期： 2002年第06期
IL-2和B7-1基因联合修饰瘤苗预防小鼠肝癌形成的研究

目的研究IL-2和B7-1基因联合修饰的肝癌瘤苗预防肝癌形成的作用.方法用重组腺病毒为载体,将目的基因导入小鼠Hepal-6肝癌细胞株,MMC处理后制成肝癌瘤苗,免疫同系小鼠,观察抗亲代Hepal-6细胞攻击的免疫保护作用,并检测免疫小鼠的细胞免疫功能.共设6个实验组:IL-2和B7-1双基因修饰瘤苗组(Hep6-IL2/B7),IL-2基因瘤苗组(Hep6-IL2),B7-1基因瘤苗组(Hep6-B7),BGFP基因瘤苗组,野生瘤苗组和培养液对照组.结果各组瘤苗的免疫保护作用:上述6组小鼠的中位生存期分别为68、59、54、51、48、38 d,其中Hep6-IL2/B7瘤苗组生存期长,且瘤体积小(Z值为3.20～44.10,P＜0.05).经细胞免疫功能检测和细胞毒活性实验显示以Hep6-IL2/B7瘤苗免疫后可诱导显著提高的NK、LAK和CTL活性(分别为29.0%±2.5%、65.0%±2.9%和83.1%±1.5%,与其它实验组比P＜0.05).结论IL-2和B7-1双基因肝癌瘤苗可诱导小鼠产生活化的针对亲代癌细胞的特异性CTL细胞,具有比单基因及常规瘤苗更强的防癌的作用,有希望成为预防肝癌复发转移的治疗手段.

作者：葛宁灵；叶胜龙；刘银坤；汤钊猷刊期： 2002年第06期
慢性乙型肝炎患者重叠感染对HBV DNA水平和病情的影响

为探讨慢性乙型肝炎患者重叠感染时血清HBV DNA水平及其与病情的关系,我们对207例慢性乙型肝炎患者血清采用定量PCR检测HBV DNA含量及ELISA方法检测甲、乙、丙、丁、戊、庚型肝炎病毒、巨细胞病毒、EB病毒标志物,并观察重叠感染与病情的关系.

作者：黄力毅；罗光汉；吴继周；吴健林；玉艳红刊期： 2002年第06期
人肝癌顺铂耐药细胞模型的建立及耐药机制的初步探讨

多药耐药性(multidrug resistarce,MDR)的产生常常导致化疗失败.

作者：杨俊霞；汤为学刊期： 2002年第06期
原发性肝癌抑癌基因和自杀基因治疗的研究

原发性肝细胞癌(HCC)是我国常见的恶性肿瘤之一,病死率高,预后凶险.

作者：房殿春刊期： 2002年第06期
肝源性糖尿病的研究进展

肝脏是葡萄糖代谢的重要器官,当其功能因各种肝病而受损时,往往影响正常糖代谢,甚至出现糖耐量减退或糖尿病,这种继发于慢性肝实质损害的糖尿病统称为肝源性糖尿病.

作者：张霞；沈鼎明刊期： 2002年第06期
酒精性肝病的内毒素及细胞因子改变

酒精性肝病(ALD)的发病机制中,内毒素血症,枯否细胞激活,细胞因子网络改变起重要作用,现综述如下.

作者：李国钦刊期： 2002年第06期
肝星状细胞受体研究现状

肝星状细胞(HSCs)表面受体在肝纤维化的发生与发展中可能起着重要作用.HSCs受体至少可分为三大类,即整合素类、血管活性物质受体和酪氨酸/丝氨酸激酶类受体,现综述如下.

作者：申凤俊；阴赪宏；贾继东；王宝恩刊期： 2002年第06期
醛糖还原酶相似基因转染细胞对含碳酰基抗癌药物耐药的研究

目的研究醛糖还原酶相似蛋白(aldose reductase like protein,ARL-1)在肝癌细胞中的功能及ARL-1基因高表达与肝癌耐药之间的关系.方法通过阳离子脂质体转染法将ARL-1基因导入HepG2细胞,建立稳定表达该基因的细胞株,采用MTT法检测细胞对含醛基药物的耐药变化情况.结果转染细胞与未转染细胞相比,对含醛基的抗肿瘤药物如阿霉素、丝裂霉素的耐药性明显增强,其半数抑制浓度(IC50)分别提高到2.6倍和3.1倍,ADM组t=6.39,P＜0.05,MMC组t=30.06,P＜0.01.用不含醛基的5-氟尿嘧啶处理两组细胞,则未发现有明显的耐药差异(t=0.684,P＞0.05).结论ARL-1的表达上调可能是肿瘤细胞对含醛基抗肿瘤药物耐药的主要原因之一.

作者：王建；万腊香；吴孟津；万载阳；危当恒；杨永宗刊期： 2002年第06期
碱性磷酸酶直接标记核酸探针检测乙型肝炎病毒DNA

目的建立快速、特异、灵敏的碱性磷酸酶直接(AlkPhos Direc)标记核酸探针检测血清中乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)方法.方法应用AlkPhos DirecTM将碱性磷酸酶直接标记在HBV DNA全基因序列上制备探针,与目标核酸杂交后加入CDP-Star化学发光试剂,用胶片放射自显影检测HBV DNA.同时检测探针的灵敏度和特异性.比较AlkPhos Direc标记HBV DNA探针与地高辛标记的HBV DNA探针检测临床血清标本80份结果,并对70份临床血清标本的荧光定量PCR方法检测的结果与AlkPhos Direc标记HBV DNA探针斑点杂交检测的结果作相关性分析.结果探针灵敏度至少为10pg,与地高辛探针比较,用AlkPhos Direct标记探针检测方法的灵敏度为100%,特异性为100%,符合率为100%,用HBV DNA荧光定量PCR方法和A1kPhos Direct标记探针核酸斑点定量方法检测的结果进行相关性比较,r=0.98,P＜0.0l.结论AlkPhos Direc标记HBVDNA探针检测血清中HBV DNA方法灵敏、特异,与地高辛标记的HBV DNA探针检测结果完全符合,与HBVDNA荧光定量PCR方法检测的结果有良好的相关性.

作者：陈压西；黄爱龙；齐珍元；单幼兰；孙航刊期： 2002年第06期
肝癌的基因治疗:瓶颈与前景

基因治疗是以导入外源遗传物质,达到治疗疾病的一种方法.

作者：顾健人刊期： 2002年第06期
成人型尼曼-匹克病1例分析

1.病例:男,19岁,学生,汉族,湖南长沙人.因发现丙氨酸转氨酶升高3年多,于2001年7月23日入院.

作者：沙新平；谭德明；胡国龄；吴晓英；彭建武刊期： 2002年第06期
供肝冷热缺血移植后损伤与炎症细胞的关系

目的探讨冷、热缺血移植术后引起供肝损伤的炎性细胞是否相同.方法雄性SD大鼠随机分成2组,每组各24只.供肝分别在乳酸林格氏中保存120或240 min后行原位肝移植术;另雄性SD大鼠随机分成3组,每组各24只供肝分别经心跳停搏90、120和150 mm后行原位肝移植术.大鼠分别于术后1、3、6和24 h处死采样.结果随着冷、热缺血时间的延长,移植后血清ALT等值不断升高,如冷缺血120 min和240 mm移植术后1 h ALT值(U/L)分别为454.8±45.2和1063.0±166.1,3 h分别为712.0±65.9和1 639.0±241.2,6 h分别为1 702.0±169.2和4 193.0±672.7,24 h分别为1 067.0±141.2和1316.7±205.2,热缺血90、120和150mm移植术后1 hALT值(U/L)分别为5035.2±786.7、6075.3±1613.1和7449.5±1 052.0,3 h分别为5 564.5±696.4、7 900.7±863.0和8 854.8±2089.3,6 h分别为7 363.8±616.7、10 459.3±1 573.7和10 294.0±530.0,24 h 90 mm组为1 942.5±188.5;且术后移植肝的病理损害也逐渐加重.冷缺血移植术后3、6 h肝细胞出现坏死,且有大量中性粒细胞浸润;热缺血移植术后3、6 h肝细胞也有大量坏死,但却出现淋巴细胞浸润.电镜表现与镜下基本一致,且电镜证实热缺血移植后浸润的淋巴细胞为T淋巴细胞.结论冷、热缺血移植术后供肝的损伤似乎是由两种不同的炎性细胞所介导;中性粒细胞介导冷缺血再灌注损伤而T淋巴细胞介导心跳停搏热缺血再灌注损伤.

作者：邵堂雷；蔡伟耀；杨卫平；张明钧；陈皓；狄忠民；周光文；李宏为刊期： 2002年第06期
转4-1BBL基因细胞诱导带瘤宿主抗瘤效应的体内研究

目的观察协同刺激分子4-1BB L1gand(4-1BBL)基因导入小鼠肝癌细胞Hepal-6后在小鼠体内诱导的抗瘤效应.方法应用逆转录病毒载体,将小鼠4-1BBL导入小鼠肝癌细胞Hepal-6细胞中,Histidirol(HisD)筛选后获高表达4-lBBL分子阳性细胞克隆,经丝裂霉素C(MMC)处理制备成肿瘤细胞瘤苗TCV4-lBBL,观察其对不同动物模型的体内免疫保护作用和免疫治疗作用.结果(1)能对同系肝癌细胞产生完全的免疫保护作用,并能保持无瘤状态长期存活(100d以上).(2)对早期(接种7 d)形成的肿瘤有强的治疗作用.(3)对晚期(接种14d)肿瘤,有明显的治疗作用,使大部分小鼠的肿瘤消退.结论4-1BBL修饰的肿瘤细胞疫苗能明显刺激增强带瘤宿主的抗瘤效应.

作者：李晓虹；李晓冬；黄建勇；卫立辛；陈列平；吴孟超；郭亚军刊期： 2002年第06期
胸腔镜对肝性胸水病人诊断和治疗的价值

我们对23例肝硬化伴顽固性胸水病人进行胸腔镜检查,并对14例病人用经胸腔镜滑石粉喷撒胸膜腔闭锁法进行治疗,以探讨胸腔镜对顽固性肝性胸水病人诊断和治疗的价值.

作者：林殿杰；孙洪军；黄琛；王茂芬；田广燕；薛立福；刘庆华；刘莹刊期： 2002年第06期
中国大陆1b型丙型肝炎病毒3'非编码区序列变异研究

丙型肝炎病毒(HCV)是一类有包膜的单股正链RNA病毒,其基因组全长约9 600bp,5'端和3'端各有一非编码区,3'非编码区(3'UTR)长约220～272 bp[1].

作者：秦兆习；丛旭；蒋栋；哈明昊；陈红松；魏来刊期： 2002年第06期
肝窦内皮细胞损伤在大鼠肝纤维化形成中的作用

目的研究肝窦内皮细胞损伤在二甲基亚硝胺大鼠肝纤维化形成中的作用.方法采用二甲基亚硝胺(dimethvlnitrosamine,DMN)4周12次腹腔注射制备大鼠肝纤维化模型,应用电镜技术、免疫组织化学及图像分析方法结合血清生化测定,24周动态观察肝纤维化形成过程中肝窦内皮细胞损伤及其表型的改变.结果造模2 d后肝结构未见明显改变,肝窦内皮细胞(sinusoidal endothelial cell,SEC)远侧胞浆窗孔数减少、造模1周SEC失窗孔更明显,肝组织内未见明显变性坏死及纤维间隔形成,造模4周时见肝组织内大片出血坏死,有大量假小叶形成,内皮下出现SEC窗孔减少.SEC失窗孔早于肝细胞发生较为严重的坏死、肝纤维化的形成以及肝窦内皮下基底膜的形成.造模4周HA(ng/ml)和肝羟脯氨酸(μg/g)平均含量分别为231.30±143.80和223.04±37.09,对照组分别为56.50±18.10和61.55±20.85,t值在3.14～8.28,P＜0.05.结论DMN引起大鼠肝窦内皮细胞损伤及其表型改变可能是其诱导肝纤维化重要的始动机制之一.

作者：陆雄；刘平；刘成海；徐光福；王宪波；陈文慧；李风华刊期： 2002年第06期
肝癌免疫基因治疗的研究现状

免疫基因治疗主要包括细胞因子基因治疗及基因修饰树突状细胞肿瘤疫苗两个方面,是目前肿瘤基因治疗研究的重要组成部分,也是多年来肝癌基因治疗研究的重点之一[1].

作者：叶胜龙刊期： 2002年第06期
肝穿术并发血管迷走神经反应1例报道

患者,男性,25岁,乏力、食欲不振7 d,丙氨酸氨基转移酶78 U/L,HBsAg阳性、HBeAg阳性、抗-HBc阳性,HBVDNA(荧光PCR法)6.6 x 108拷贝/L,临床诊断:慢性乙型肝炎,门诊给予肝穿术.患者既往无心、血管系统疾病史,术前血压13.5/9.5 kPa(1 kPa=7.5 mm Hg),心率75次/min.

作者：郑瑞丹；饶日春；陈碧芬刊期： 2002年第06期