谢国旗；蒋建新；朱佩芳；王正国；邱俊
目的探讨己酮可可碱（pentoxifylline，PTX）对人α1(Ⅰ)前胶原（COL1A1）基因启动子活性的作用及其机制。方法构建含人COL1A1基因启动子序列-2483～+42bp片段与氯霉素乙酰基转移酶（CAT）报告基因的重组体pCOLH2.5，将其瞬时转染至人皮肤成纤维细胞，加入PTX或/和胰岛素样生长因子-1（IGF-1）及胰岛素，测定CAT活性。结果 0.4mmol/L、2mmol/L和10mmol/L的PTX使pCOLH2.5的活性降至对照的（82±9）%、（58±8）%与（32±13）%。IGF-1与胰岛素能促进pCOLH2.5的活性。PTX能拮抗IGF-1与胰岛素的这一促进作用。结论 PTX能下调人COL1A1启动子的活性，而IGF-1与胰岛素能上调该启动子的活性。PTX 能拮抗IGF-1与胰岛素的这一上调作用。
作者：伍严安；高春芳；万伟东；仲人前；孔宪涛 刊期： 2001年第02期
我们利用Vero、 HepG2两种细胞系同时来验证人乳铁蛋白的抗HCV作用并初步确定蛋白的作用对象—细胞还是病毒，以此为该蛋白用于抗HCV临床治疗提供理论依据。一、材料与方法 1．细胞和血清：HepG2细胞系（Dr. Schinazi馈赠），Vero细胞系（由湖北医科大学病毒研究所保存）；细胞培养方法见文献[1]。阳性血清：７份HCV患者血清，混合后作为病毒接种物（测得HCV阳性混合血清的+RNA阳性，-RNA阴性；HCV RNA 拷贝数为5×104；HAV和HBV阴性）由湖北医科大学附属第一和第二医院传染科提供；阴性血清：2份（HCV和抗-HCV均为阴性）来自一健康体检者。
作者：洪俊；林雨霖；洪流 刊期： 2001年第02期
目的探讨经输血传播病毒（TTV）在肝及肝外组织的定位、分布及其意义。方法采用PCR及原位杂交方法，对13例非甲－非庚型病毒性肝炎患者的尸解肝、胰、肾、脾、睾丸和心脏石蜡包埋组织中的TTV DNA进行了检测。结果 5例肝组织、3例肾脏及胰腺、脾脏组织各2例中检出了TTV核酸杂交信号，2例睾丸及心肌组织各检出1例。阳性信号主要定位于肝及肝外组织实质细胞的核内。这些肝外组织未见明显的病理损伤改变。PCR的检出率与原位杂交基本一致。结论 TT病毒能感染肝及肝外组织，肝外组织中的感染可能与TT病毒的再度感染及在不同人群中的较高感染率有关。
作者：郎振为；金荣华；阎惠平；罗朝霞；黄德庄；王勇；周育森 刊期： 2001年第02期
对慢性肝炎肝纤维化及早期肝硬化之中医治疗多以活血化瘀为主，兼以益气补虚、养血柔肝或滋补肝肾。国内研究发现抗肝纤维化有效的单味中药有丹参、黄芪、柴胡、桃仁、当归、冬虫夏草、齐墩果酸、葫芦素Ｂ等；而各家根据中医理论、临床经验或动物实验研究结果所拟定的中药复方，亦取较好的效果，并运用现代细胞及分子生物学手段对其抗纤维化机理进行了较为深的研究。比较有代表性抗肝纤维化中药复方有861合剂、319方、鳖甲软肝片等。
作者：贾继东；王宝恩 刊期： 2001年第02期
国家科学技术部近公布1999年科技论文统计与分析度研究报告。1999年度我国已有科技期刊4400余种，进入国家统计源期刊的为1372种。1999年中华肝脏病杂志影响因子为0.897,排序第12名,在医学同类期刊中排名第7.
作者： 刊期： 2001年第02期
目的观察内毒素血症时肝组织和游离肝细胞中CD14基因和CD14蛋白的表达。方法经尾静脉注入脂多糖（LPS，E coli O111.B4）建立大鼠急性内毒素血症动物模型，并用原位胶原酶灌注法分离肝细胞。用流式细胞仪（FCM）测定异硫氢酸荧光素（FITC）-CD14阳性肝细胞数及其荧光强度。同时用逆转录-PCR和Western blot法测定肝组织和肝细胞中CD14 mRNA和CD14蛋白的表达。结果 FCM显示：内毒素血症大鼠6h和12h FITC-CD14阳性细胞数明显增多，荧光强度也明显增加。RT-PCR显示，肝组织和肝细胞中CD14 mRNA的表达在3h时明显增强，6h达高峰，24h恢复正常水平；Western blot分析示肝组织和肝细胞中CD14蛋白的表达在6h明显增高，12h达高峰，24h仍有一定表达，各时相点间比较有显著差别（P＜0.01)。结论内毒素血症时能明显上调肝细胞CD14基因和CD14蛋白的表达。
作者：李生伟；吴传新；石毓君；刘长安 刊期： 2001年第02期
目的对11株经输血传播病毒（transfusion transmit virus，TTV）进行基因型分析。方法用巢式PCR扩增不同地区不明病因的急、慢性肝炎，肝硬化、肝癌和自然健康人群TTV DNA片段，并对此巢式PCR产物进行克隆，测序分析和同源性比较。结果 11例标本的222bp（引物序列除外）的TTV DNA同源性比较结果为：武汉WH1、WH2、WH3 3个患者血清中TTV DNA序列与N22同源性分别为97.0%、97.0%和98.0%；广州GZ1、GZ2、GZ3 3患者血清中TTV DNA 序列与N22同源性分别为98.0%、95.0%和95.0%；山东SD2、SD3 TTV DNA序列与N22同源性分别为94.6%和95.5%；广州GZ4、山东SD1，新疆XJ1患者TTV DNA序列与TX011同源性分别为98.0%、98.0%和95.0%。结论根据 Okamoto的分类方法，这11株TTV可属于两个亚型，即基因1型的a和b亚型。
作者：肖红；梁蔚芳；王燕军；张建树；骆抗先 刊期： 2001年第02期
我们检测了慢性乙型肝炎（慢乙肝）患者血清TNF-α水平，并同步观察了肝组织FasL的表达，现将结果报告如下。一、资料与方法 1. 病例来源：我院1999年3月～2000年3月经过肝穿刺活检确诊的28例慢乙肝患者。男23例，女5例。年龄18～56岁。慢性轻度8例，中度10例，重度10例。肝组织病理学改变符合1995年病毒性肝炎修订的诊断标准。
作者：郑瑞丹；张闽峰；徐忠玉；林福地；饶日春；张阳根 刊期： 2001年第02期
目的研究醛固酮合成酶基因-CYP11B2在大鼠肝组织中的表达与肝纤维化的关系及安体舒通抗肝纤维化的作用。方法取雄性Wistar大鼠120只，随机分为3组，每组40只。模型组：CCl4油0.25ml/100mg皮下注射，3次/周；安体舒通组：CCl4油注射的同时予以安体舒通20mg·kg-1·d-1灌胃，1次/日；对照组：橄榄油皮下注射。光镜下动态观察组织学改变，图像分析系统测量胶原面积。RT-PCR和原位杂交检测CYP11B2的表达。结果原位杂交及RT-PCR显示CYP11B2表达定位于肝星状细胞胞浆，在纤维化形成时表达增强。第4周、6周，安体舒通组肝纤维化分级、胶原面积低于模型组（P＜0.05）。第8周，安体舒通组与模型组相比差异无显著性意义（P＞0.05）。结论 CYP11B2在纤维化肝脏的肝星状细胞中表达增强。安体舒通对早中期肝纤维化具有一定的治疗作用。
作者：李旭；杨希山；孟莹；吴平生；李素梅；赖文岩；张虹 刊期： 2001年第02期
目的研究大鼠肝再生增强因子（augmenter of liver regeneration，ALR）在大鼠基因组中的存在方式。方法以大鼠基因组DNA为模板，根据ALR cDNA序列设计引物，用多聚酶链反应（PCR）扩增产物，连入pGEM Teasy Vector后测序。结果 PCR法扩增出两条产物，其一经测序发现为ALR的假基因，预测氨基酸序列与ALR的同源性为88.8%。结论作为肝细胞再生过程中重要的生长刺激因子，大鼠ALR存在假基因，提示可能存在ALR多基因家族。为研究ALR分子的进化规律提供了依据。
作者：董菁；成军；刘友昭；王刚；施双双；王勤环；斯崇文 刊期： 2001年第02期
一、材料与方法 1. 病例选择：1997年9月～1999年3月中山医科大学附属第三医院住院的患者，入选并完成疗程者50例，全部符合1995年北京全国传染病与寄生虫病学术会议肝硬化诊断标准。且入选病例还需满足下列条件之一：(1)门静脉内径（DPV）≥14mm或脾静脉内径（DSV）≥9mm；(2)脐静脉开放；(3)食道胃底静脉曲张；(4)无腹水或少量腹水。剔除标准：合并上消化道出血、大量腹水、有明显出血倾向或PT显著延长（PT≥18s）。
作者：杨桂林；陆玮伦；郑荣琴；谢冬英；崇雨田 刊期： 2001年第02期
目的对肝豆状核变性（WD）基因编码产物WD蛋白进行检测，探讨WD的发病机制。方法应用Western-blot蛋白印迹技术对诊断为WD的患者进行WD蛋白的研究。结果发现患者WD蛋白在肝内表达缺失或者含量改变。结论 WD患者可能同时存在有WD基因exon8和 exon5的突变，直接检测WD基因产物为进一步研究WD的病理机制奠定了基础。
作者：梁秀龄；陈嵘；徐评议；黄帆；王莹；闫振文；欧翠华；侯国庆 刊期： 2001年第02期
目的探讨bcl-2、bax及肝细胞凋亡在丁型肝炎发病机理中的作用。方法采用免疫组织化学单、双标记染色和TUNEL技术，检测77例丁型肝炎患者肝组织HDAg、bcl-2、bax及肝细胞凋亡表达，以67例乙型肝炎作对照。结果 bcl-2和bax均以肝细胞浆表达为主。HDAg以肝细胞核表达为主。HDAg和Bax与凋亡细胞表达及分布有相关性，三成分在各型肝炎中的表达强度差异有显著意义（P＜0.05）。结论 HDAg、bax和肝细胞凋亡表达强度和阳性细胞分布均与肝组织炎症活动及病理损害程度相关，HDV感染可诱导肝细胞表达bax，增强肝细胞凋亡，这一机制在丁型肝炎发病机理中可能有一定重要作用。
作者：顾小红；李奇芬；王宇明 刊期： 2001年第02期
肝纤维化是肝脏对各种原因所致肝损伤的修复反应，其形成与发展是肝病慢性化的重要成因。肝纤维化的治疗包括病因防治、抗肝纤维化及对症治疗三方面，但不少病例祛除原发病因后，主动性肝纤维化仍继续发展，故抗肝纤维化治疗成为控制慢性肝病进展不可缺少的环节。
作者：曾民德 刊期： 2001年第02期
业已肯定肝纤维化及早期肝硬化尚有逆转的可能。通过抗肝纤维化治疗可使肝纤维化程度明显减轻，早期肝硬化者肝脏假小叶消失。 1. 抗肝纤维化治疗的某些新的认识：(1)肝纤维化的治疗与抗肝纤维化治疗两者含义不同，前者即为慢性肝病的治疗，目的是祛除原发病因和减轻、中止、逆转肝脏的病理改变（包括抗炎、抗肝损伤与抗肝纤维化）；后者指用抗肝纤维化药物进行治疗。
作者：蔡卫民 刊期： 2001年第02期
目的探讨肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC) 热休克蛋白70（heat shock proteins 70，HSP70）的表达及其与自发性癌细胞凋亡的关系。方法采用免疫组化SP法和原位末端转移酶标记法（TUNEL）检测68例HCC手术标本中HSP70表达和细胞凋亡指数，以癌旁肝组织作为对照。结果 HCC和癌旁组织中HSP70阳性率分别为71%和28%，过表达分别为53%和21%，两组之间差异有非常显著意义（P＜0.01)，HSP70阳性率和凋亡指数有正相关关系（r＝0.8765，P＜0.05)，两者都随HCC 组织学分级增高而增加。结论 HCC组织中存在HSP70过表达和自发性癌细胞凋亡，两者正相关性机理尚不明了，可能是HCC生物学恶性行为的标志。
作者：尹燕明；秦庆亮；赵晶；张长丽；张伟；于建国 刊期： 2001年第02期
目的观察内毒素（LPS）对肝细胞的直接作用及重组人生长激素（rhGH）的干预效果。方法内毒素诱导肝细胞损害，HepG2细胞传代培养24h后，换用含内毒素（20μg/ml）和/或rhGH、肝细胞生长因子（HGF）的新鲜培养液继续培养16h，观察药物对LPS作用的干预效果。结果 HepG2细胞经 LPS作用16h，透射电镜观察既有形态正常的细胞，同时也出现典型的凋亡细胞：表现为胞浆浓缩核凝聚成块状，凋亡小体形成，细胞器（包括线粒体）结构基本正常；TUNEL标记后胞核呈棕褐色染色，而对照细胞无阳性染色信号，证实LPS作用16h后HepG2细胞已发生凋亡。将rhGH与LPS同时加入培养液中共同作用16h， rhGH可明显减少HepG2细胞经LPS诱导的细胞凋亡数量对照组为（99±0.8）%, rhHG处理组为（36±5.6）%, P＜0.001。结论重组人生长激素可以抑制LPS致肝细胞凋亡作用。
作者：张大志；张定凤；任红；周卫平 刊期： 2001年第02期
目的尝试用抗体工程技术研制乙型肝炎导向干扰素。方法利用PCR技术进行体外重组，将α-2b干扰素（IFN-α2b）基因分别与抗-HBsAg人源抗体的轻链及重链Fd基因融合，IFN-α2b基因位于融合基因的3'端，为避免干扰素结构域与抗体结构域在空间上互相影响，在二者之间引入一条15个氨基酸的柔性短肽。分别构建上述融合肽链的CHO表达质粒（轻链-IFN表达质粒pLIC以pcDNA3.1(+)为载体，重链Fd-IFN表达质粒pFID以pCdhfr1为载体），表达质粒以下述三种组合转染CHO(dhfr-)细胞：I, pLIC + pHFD; II, pLIC + pFID; III, pLFC + pFID。其中pLFC为抗-HBsAg轻链全长表达质粒，pHFD为抗-HBsAg重链全长表达质粒。结果 I组和II组上清液具有干扰素活性，但仅I组具有HBsAg结合活性。结论用基因工程的手段成功地在CHO细胞中表达了具有HBsAg结合能力的融合干扰素分子。
作者：童贻刚；王海涛；徐静；付玲；于长明；刘国奇 刊期： 2001年第02期
我们于1999年上半年用IFN-γ开始进行临床研究。对象为中度慢性乙型肝炎与部分早期肝硬化者，肝功能失代偿者不列为研究对象。治疗周期共9个月，停药后观察3个月。疗效的主要考核依据为治疗前后的肝活组织检查，通过组织病理学检查结合相关免疫组化指标观察IFN-γ治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的终疗效。另外，将透明质酸、层粘蛋白、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原等血清肝纤维化指标和B超检查作为参考指标。我们组织了3位肝脏病理专家对60例IFN-γ治疗病例和34例对照病例的治疗前后两次肝活组织检查结果进行读片，从组织病理学上证明IFN-γ有较好的抗肝纤维化作用。 在进行IFN-γ治疗肝纤维化临床研究的同时我们还对IFN-γ抗肝纤维化的机理进行了初步探索，发现下列现象值得重视：(1)IFN-γ治疗后活化HSC（肌成纤维化细胞）明显减少；(2)IFN-γ治疗后炎症坏死有明显好转，碎屑坏死好转尤为明显；(3)IFN-γ治疗后肝细胞再生明显；(4)肝窦毛细血管好转；(5)抑制细胞外间质合成，促进其降解。
作者：蔡卫民；翁红雷 刊期： 2001年第02期
目的为激发机体对HBsAg的CTL反应，寻求对慢性乙型肝炎更有效的治疗方法。方法构建了共表达HBsAg及B7-2抗原的E1区插入重组腺病毒载体，用脂质体法转染293细胞，经空斑筛选表达目的抗原的重组腺病毒，用ELISA法及Western blotting法分别检测HBsAg及B7-2抗原表达。在293细胞中扩增，再纯化、浓缩后，体内感染C57小鼠，检测体液免疫反应和细胞免疫反应。结果重组腺病毒在体外培养的293细胞及HepG2细胞中高效表达HBsAg及B7-2抗原。感染小鼠体液免疫较弱，但可通过注射乙型肝炎疫苗而加强；重组腺病毒载体能诱导强而有效的细胞免疫反应；未观察到明显毒副作用。结论 HBsAg及B7-2抗原重组腺病毒载体体外感染293、HepG2细胞后高效表达目的抗原，感染免疫后诱导有效的细胞免疫反应。初步结果显示腺病毒载体是一种高效、安全的载体系统。
作者：周智；张定凤；任红 刊期： 2001年第02期
中华肝脏病杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
