长白山白眉蝮蛇蛇毒中类凝血酶的分离纯化方法研究

钟读波；吴远双；余旭亚；孟庆雄

关键词：长白山白眉蝮蛇, 蛇毒, 纤维蛋白原, 类凝血酶, 离子层析, 分离纯化

摘要：目的:研究长白山白眉蝮蛇蛇毒中类凝血酶的简单分离纯化方法.方法:采用DEAE-Sephadex A-25及Sephadex G-25层析的方法,比较二者对长白山白眉蝮蛇蛇毒中类凝血酶简单分离纯化的效果.结果:从长白山白眉蝮蛇蛇毒中分离出类凝血酶,SDS-PAGE电泳显示为一条带,分子量大约为35.5 kDa,达到电泳纯.理化性质研究表明,此类凝血酶具有体外凝血活性,体外凝血酶比活力为12.57IU·mg-1,用N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐测得该酶的精氨酸酯酶比活力为137.65IU·mg-1.用蛋白酶抑制剂和乙二胺四乙酸对该酶进行抑制实验,结果表明该酶属于丝氨酸蛋白酶,而不是金属蛋白酶.结论:本方法可用于长白山白眉蝮蛇蛇毒中类凝血酶的分离纯化.

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参莲颗粒抗突变和抑瘤作用研究

目的:研究参莲颗粒的抗突变和抑瘤作用.方法:以小鼠骨髓细胞微核实验和睾丸染色体畸变实验观察参莲颗粒的抗突变作用;并观察参莲颗粒对S180和H22移植性肿瘤的抑制作用.结果:参莲颗粒对环磷酰胺诱发的小鼠骨髓细胞微核发生和丝裂霉素诱发的小鼠睾丸细胞染色体畸变均有显著的抑制效果;对S180和H22移植性肿瘤的生长有显著的抑制作用.结论:参莲颗粒对体细胞和生殖细胞的DNA损伤均有保护作用,对小鼠移植性肿瘤有较好的抑制作用.

作者：陈桂红；黄清松；曾繁涛刊期： 2007年第36期
GC-MS法测定冰硼含片中冰片的含量

目的:建立以气相色谱-质谱联用技术测定冰硼含片中冰片含量的方法.方法:色谱柱为DB-5型石英毛细管(30m×0.32mm×0.25μm),样品用乙醚超声提取,采用选择离子监测(SIM)法定量.结果:冰片检测浓度在10.0～500.0μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.999 9);平均加样回收率为98.55%,RSD=1.13%(n=6);低检测限为10pg.结论:本方法简便、快速,结果准确,可用于冰硼含片的质量控制.

作者：张晓川；陈琴华；张卓；朱军刊期： 2007年第36期
苏红透骨摩药治疗风湿痹痛诸症临床疗效观察及透皮吸收功能研究

目的:观察苏红透骨摩药治疗风湿痹痛的临床疗效,并研究其透皮吸收功能.方法:应用中药外用摩药剂-苏红透骨摩药治疗风湿痹痛诸症(骨刺、跌打损伤、肩周炎、关节周围软组织急性损伤或慢性劳损)患者300例,并以苏红透骨散治疗的120例患者作对照,观察2组的临床疗效.通过小鼠透皮实验考察苏红透骨摩药中有效成分麝香酮、冰片、薄荷脑对本制剂透皮行为的影响.结果:治疗组总有效率为93.24%,对照组总有效率为80.00%,2组比较有显著性差异(P＜0.05).麝香酮、冰片、薄荷脑对苏红透骨摩药有一定的促渗效果.结论:苏红透骨摩药是治疗风湿痹痛诸症较理想的外用制剂.以麝香酮、冰片、薄荷脑为复方时苏红透骨摩药的透皮吸收速率较好.

作者：郭雪申；王津文；张云丽；于青云刊期： 2007年第36期
润肠通便合剂对小鼠肠推进影响的研究

目的:研究润肠通便合剂对小鼠肠推进的影响.方法:比较计算给药组(给予润肠通便合剂)、模型组(给予肠推进抑制药物)与空白对照组小鼠小肠中的炭黑推进百分率,并进行数据统计.结果:与空白对照比较,润肠通便合剂有显著促进小鼠小肠推进的作用(P＜0.01).结论:本实验结果可为临床应用提供理论依据.

作者：陈彦清；曾雪斌；叶敏馥刊期： 2007年第36期
CO2超临界流体萃取法提取杜衡挥发油化学成分的分析

目的:促进杜衡在医药和精细化工等领域中的应用.方法:采用CO2超临界流体萃取法从杜衡中提取挥发油,并用气相色谱-质谱联用技术对其化学成分进行分析.结果:共鉴定出22种成分,主要有1,2-邻苯二酸二异辛酸二酯(质量分数为20.47%)、丁香酚甲醚(15.37%)、油酸(13.21%)、亚油酸(12.53%)、榄香素(11.05%)、十六碳酸(7.59%)和十八碳酸(4.36%).结论:本方法可为杜衡的进一步开发和利用提供参考.

作者：陈健；潘艺；林庆生刊期： 2007年第36期
RP-HPLC法测定调经祛斑片中芍药苷的含量

目的:建立以反相高效液相色谱法测定调经祛斑片中芍药苷含量的方法.方法:色谱柱为VP-ODS(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(25:75),检测波长为230nm,流速为1.0mL·min-1.结果:芍药苷检测浓度在24.8～198.4μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.999 9);平均加样回收率为99.36%,RSD=0.86%(n=6).结论:本法准确、快速、灵敏度高、重现性好,可用于调经祛斑片的质量控制.

作者：刘平；王艳君刊期： 2007年第36期
浅谈西医师临床应用中成药的几点注意事项

目的:为临床合理应用中成药提供借鉴.方法:结合中医药基本理论,分析目前综合性医院西医师应用中成药的常见问题,总结中成药临床应用的注意事项.结果与结论:西医师应结合具体情况,详细了解中成药的成分组成及有关临床资料,严格按照药品说明书规定用药.

作者：徐小燕；周骏刊期： 2007年第36期
微波辅助提取双糖饮中多糖的工艺研究

目的:研究微波技术对双糖饮中多糖成分提取工艺的辅助效果,并筛选佳提取工艺.方法:采用正交试验考察不同因素对微波辅助提取双糖饮中多糖含量的影响,优选其佳提取工艺条件.结果:微波辅助提取双糖饮中多糖的佳条件为提取时间20min、微波功率300W、提取温度100℃、料液比1:8.结论:微波提取技术具有省时、高效、节能等优点,适用于双糖饮中多糖的提取.

作者：王敏；赵倩刊期： 2007年第36期
芍药总苷调控巨噬细胞核因子-кB p65蛋白核转移作用的研究

目的:研究芍药总苷调控巨噬细胞核因子-кB(NF-кB)p65蛋白核的转移作用,探讨芍药总苷对NF-кB活化的影响.方法:原代培养大鼠腹腔巨噬细胞,经脂多糖和芍药总苷作用后,用Western blot方法观察NF-кB亚基p65蛋白在胞浆和胞核的表达.结果:经脂多糖刺激后,p65蛋白在胞浆中表达显著减少,在胞核中表达显著增多;芍药总苷显著增加了脂多糖刺激后p65蛋白在胞浆中的表达,并减少了其在胞核内的表达.结论:芍药总苷可抑制NF-кB p65蛋白从胞浆向胞核的转移,提示其具有抑制NF-кB活化的作用.

作者：贾萍；荣晓凤；丁燕；刘岳凤；田杨；张永如刊期： 2007年第36期
清络通痹颗粒对佐剂性关节炎大鼠骨质破坏影响的研究

目的:研究清络通痹颗粒(QLT)对佐剂性关节炎大鼠骨质破坏的影响.方法:制备佐剂性关节炎(AIA)大鼠模型.自模型制备第7天开始给予不同剂量的QLT,持续49d.各组大鼠进行关节摄片,观察骨质破坏情况.取各组大鼠滑膜细胞培养上清液,分别加入体外培养的软骨细胞中,观察软骨细胞增殖反应、软骨细胞上清液中一氧化氮(NO)含量及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的变化情况.结果:QLT3个剂量组可不同程度地改善AIA大鼠后肢关节的骨密度降低、关节腔间隙增宽、关节结构破坏等表现;QLT 7.2、14.4g·kg-1给药的AIA大鼠滑膜细胞培养上清液可增强软骨细胞的增殖能力,降低其iNOS的表达和NO的含量.结论:一定剂量的QLT对AIA大鼠的软骨和骨质破坏有抑制作用.

作者：韩越；王逸萍；周玲玲刊期： 2007年第36期
叶下珠的研究现状

叶下珠Phyllanthus urinaria L.为大戟科植物叶下珠的带根全草[1].《纲目拾遗》云:此草背有小珠,昼开夜闭,高三四寸,生人家墙脚下,处处有之.

作者：万红波刊期： 2007年第36期
天花粉蛋白的药用研究概况

天花粉(Radix trichosanthis)是我国传统中药,采自葫芦科植物栝楼的块根.其用药早见于《神农本草经》;李时珍在《本草纲目》中肯定了天花粉具有治疗胞衣不下和通月水的功效.

作者：李枝玲；丁玉；白云峰；刘晓娟刊期： 2007年第36期
益气明目口服液对光化学损伤大鼠视网膜保护作用的研究

目的:研究益气明目口服液对光化学损伤大鼠视网膜的保护作用.方法:48只SD大鼠随机分为阴性对照组、模型组及益气明目口服液高、低剂量组.除阴性对照组外,各组大鼠接受(1 900±106.9)Lux绿色荧光灯24h持续光照射,制备大鼠视网膜光化学损伤模型.益气明目口服液高、低剂量组分别于光照前7d灌胃给药30、15mL·kg-1·d-1;阴性对照组及模型组予以等量生理盐水灌胃.光照后6h、6d、14d检测视网膜组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,并进行视网膜透视电子显微镜和光学显微镜的组织学观察.结果:光化学损伤后6d及14d,益气明目口服液高剂量组视网膜中SOD的活性显著高于模型组(P＜0.05),益气明目口服液高、低剂量组视网膜中MDA的含量均显著低于模型组(P＜0.05);通过视网膜透视电子显微镜和光学显微镜的组织学观察,益气明目口服液高、低剂量组的病理组织学损害较模型组显著减轻.结论:益气明目口服液对视网膜光化学损伤有显著的保护作用.

作者：唐细兰；王延东；吴伟；叶成添；唐仕波刊期： 2007年第36期
中药饮片水试鉴别法介绍

目的:为药剂人员提供参考.方法:对25种中药饮片的水试鉴别法进行归纳和介绍.结果与结论:水试鉴别法是传统的经验鉴别法,能有效鉴别药材饮片质量,保证用药安全,值得推广.

作者：董玲婉刊期： 2007年第36期
常通口服液制备工艺研究

目的:优化常通口服液的制备工艺.方法:采用正交设计法研究水提取与乙醇提取的佳条件,比较2条提取工艺路线、2条醇沉路线以及3种醇沉浓度(50%、65%、75%)对常通口服液中丹参素、大黄素含量的影响;采用高效液相色谱(HPLC)法测定丹参素与大黄素的含量.结果:以12倍量水、提取2次、每次提取3.5h时丹参素含量高;以6倍量、70%乙醇提取1h时大黄素含量高;先醇提后水提与水提取路线的丹参素含量无显著性差异(P＞0.05);先醇提后水提的大黄素含量显著高于水提取路线(P＜0.05);先醇沉后合并、先合并后醇沉路线的丹参素与大黄素含量无显著性差异(P＞0.05).3种醇沉浓度的丹参素含量无显著性差异(P＞0.05),大黄素含量有显著性差异(P＜0.05),以50%醇沉浓度时损失少.根据佳工艺路线制备常通口服液,3批成品的丹参素含量无显著性差异(P＞0.05);薄层鉴别、澄明度与pH值检查均符合质量标准规定.结论:按照佳工艺路线制备的常通口服液成品质量可控、稳定性良好.

作者：曾煦欣；杨西晓；王春霞；黄嗣航；赵洁；侯连兵刊期： 2007年第36期
金刚藤分散片抗炎镇痛作用的药效学研究

目的:研究金刚藤分散片(JDT)的抗炎镇痛作用.方法:采用小鼠耳廓肿胀模型、大鼠足跖肿胀模型和大鼠棉球肉芽肿模型来进行JDT的抗炎作用研究;采用小鼠扭体反应实验来进行JDT的镇痛作用研究;同时与阳性对照药金刚藤胶囊(JC)进行比较.结果:JDT对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀、蛋清所致大鼠足跖肿胀、大鼠棉球所致肉芽肿、醋酸所致小鼠扭体反应均有显著抑制作用,其效果均优于阳性对照药JC(P＜0.05).结论:JDT具有良好的抗炎镇痛作用.

作者：向海燕；侯连兵；黄嗣航；西娜；张守华；王羽伦；张薇刊期： 2007年第36期
我院2004～2006年心脑血管类中成药应用分析

目的:了解我院心脑血管类中成药应用情况,保证患者用药安全、有效、经济.方法:调查我院2004～2006年心脑血管类中成药的年销售量和销售金额,采用DDDs分析方法对药物的应用情况进行分析.结果:我院2004～2006年心脑血管类中成药的应用呈上升趋势.结论:我院中成药的应用基本合理;疗效确切、价格低廉的中成药在临床应用中占有优势.

作者：苏琼华；郭海鸥刊期： 2007年第36期
银杏叶提取物治疗阿尔茨海默病的研究进展

银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract761,EGb761)是从银杏科植物银杏叶中提取的有效成分,主要含有24%黄酮苷类和6%萜烯酯类.

作者：王志娟；高尔；法志强刊期： 2007年第36期
长白山白眉蝮蛇蛇毒中类凝血酶的分离纯化方法研究

目的:研究长白山白眉蝮蛇蛇毒中类凝血酶的简单分离纯化方法.方法:采用DEAE-Sephadex A-25及Sephadex G-25层析的方法,比较二者对长白山白眉蝮蛇蛇毒中类凝血酶简单分离纯化的效果.结果:从长白山白眉蝮蛇蛇毒中分离出类凝血酶,SDS-PAGE电泳显示为一条带,分子量大约为35.5 kDa,达到电泳纯.理化性质研究表明,此类凝血酶具有体外凝血活性,体外凝血酶比活力为12.57IU·mg-1,用N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐测得该酶的精氨酸酯酶比活力为137.65IU·mg-1.用蛋白酶抑制剂和乙二胺四乙酸对该酶进行抑制实验,结果表明该酶属于丝氨酸蛋白酶,而不是金属蛋白酶.结论:本方法可用于长白山白眉蝮蛇蛇毒中类凝血酶的分离纯化.

作者：钟读波；吴远双；余旭亚；孟庆雄刊期： 2007年第36期
HPLC法测定炎热清胶囊中黄芩苷的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定炎热清胶囊中黄芩苷含量的方法.方法:色谱柱为Hypersil BDS C18(150ram×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-磷酸(47:53:0.2),流速为1.0mL·rain-1,柱温为室温,检测波长为280nm.结果:黄芩苷进样量在0.101～1.01μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.999 6);平均回收率为99.67%,RSD=0.82%(n=9).结论:本方法简便、准确、灵敏、重现性好,可用于本制剂的质量控制.

作者：张湛睿；李巧如；杜洪霞；索小薇；李钊刊期： 2007年第36期