学术投稿

shRNA抑制外源绿色荧光蛋白在肝癌细胞株中的表达

闫歌;黄爱龙;唐霓;张秉强;向明确;蒲丹

关键词:RNA干扰, 绿色荧光蛋白, 短发夹状RNA
摘要:目的:构建绿色荧光蛋白(GFP)的短发夹状RNA(shRNA),观察其在哺乳动物细胞中抑制外源GFP的表达.方法:设计、合成含GFP编码基因片段,中间被4个bp间隔的反向重复序列,与转录载体pTZU6+1连接,构建pshRNA-GFP重组质粒,与pEGFP-C1共转染肝癌细胞株HepG2和SMMC-7721,检测其对GFP表达的影响.结果:pshRNA-GFP对共转染的pEGFP-C1中的绿色荧光蛋白有明显的抑制作用,抑制率达70%~85%.结论:构建的pshRNA-GFP重组质粒能有效地抑制GFP在哺乳动物细胞中的表达.
重庆医科大学学报杂志相关文献
  • 血尿酸水平与冠心病的关系

    目的:研究血尿酸水平与冠心病的关系.方法:212例住院病人,分为非冠心病组(91例)和冠心病组(121例);冠心病组又分为单支病变亚组(50例)、两支病变亚组(30例)和三支病变亚组(41例);比较在不同分组条件下各组间血尿酸水平的差别.多元逐步回归分析血尿酸水平与冠状动脉病变积分间的相关性,Logistic回归分析血尿酸水平与冠心病发病间的相关性.结果:冠心病组血尿酸水平[(378±100)μmol/L]非常显著高于非冠心病组[(345±77)μmol/L](P<0.01):单支病变亚组、两支病变亚组和三支病变亚组血尿酸水平分别为(348±88)μmol/L、(397±104)μmol/L和(407±109)μmol/L,两支病变亚组和三支病变亚组均显著高于单支病变亚组(P<0.05;P<0.01);血尿酸水平与冠状动脉病变积分非常显著相关(P<0.01);Logistic回归分析结果表明,调整年龄、性别、BMI、SBP、DBP、PP、TC、TG、HDL、LDL、ApoA1、ApoB、Lp(a)、Glu后,血尿酸水平与冠心病的发病间无显著相关性(P>0.05).结论:血尿酸水平随冠心病人病情严重程度而增加,但不是冠心病的独立危险因素.

    作者:刘剑;雷寒;覃数;马康华 刊期: 2003年第06期

  • 髋部和骨盆骨折患者肿瘤坏死因子-α、粘附分子-1的测定及其与静脉血栓形成的关系

    目的:探讨髋部和骨盆骨折患者血清中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、粘附分子-1(ICAM-1)的测定值变化与深静脉血栓形成的关系及其临床意义.方法:本科髋部及骨盆骨折患者,根据静脉造影分为血栓组和无血栓组,于术前、术后1天、术后3天、术后7天、术后14天抽清晨肘静脉空腹血,测定血清TNF-α、ICAM-1的含量.结果:血栓发生组和无血栓发生组TNF-α、ICAM-1浓度较正常对照组明显升高(P<0.01).结论:TNF-α、ICAM-1在严重损伤患者血清中明显升高,和静脉血栓形成有关.

    作者:陈世荣;黄朝梁;邓忠良;张进禄 刊期: 2003年第06期

  • 用结核分枝杆菌HSP70启动子构建分枝杆菌穿梭表达质粒的研究

    目的:用结核分枝杆菌HSP70(Heat shock protein70,HSP70)启动子改建分枝杆菌穿梭质粒pJEM11为分枝杆菌穿梭表达质粒.方法:利用聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)扩增H37Rv基因组419607~419835位的HSP70启动子及调控序列,末端引入一个多克隆位点(Multiple clone sites,MCS),再定向克隆入pJEM11的ApaI位点与XbaI位点之间,构建pJCH02载体,并对载体进行酶切鉴定及序列测定.将lhp-esat6融合基因克隆入pJCH02载体,评价其在BCG中的表达情况.结果:HSP70启动子、调控序列及引入的多克隆位点完全正确,lhp-esat6基因在BCG中成功表达.结论:成功改建穿梭质粒pJEM11为穿梭表达质粒pJCH02.本研究为构建BCG多价疫苗奠定了基础.

    作者:陈全;朱道银;骆旭东;蒋英;江山 刊期: 2003年第06期

  • 硫酸镁对大鼠创伤性脑损伤兴奋性氨基酸的影响

    目的:观察兴奋性氨基酸(EAA)在创伤性颅脑损伤(TBI)后的变化,探讨硫酸镁对EAA的调节作用.方法:采用自由落体脑损伤模型,应用氨基酸微量分析仪检测正常组、假损伤组、损伤及损伤给药组脑脊液中谷氨酸(Glu)和天门冬氨酸(Asp).结果:1.伤后2h EAA升高明显(P<0.05),随后逐渐降低,12h与正常组、假损伤组比较无显著性差异(P>0.05).2.硫酸镁对伤后2hEAA的抑制作用显著(P<0.05),在12 h、24 h、48 h、72 h对EAA抑制作用无显著性(P>0.05).结论:TBI早期EAA大量释放.镁剂可抑制早期EAA释放,达到脑保护作用.

    作者:石全红;支兴刚;唐文渊;何朝晖 刊期: 2003年第06期

  • 腹后区下腔静脉及其属支的解剖及意义

    目的:为临床腹膜后手术中下腔静脉的定位和保护提供解剖学基础.方法:解剖50具成人尸体标本,在下腔静脉起始段(左右髂总静脉汇合处至左肾静脉上缘之间)对下腔静脉及其属支进行定位观测.结果:(1)该段下腔静脉长13.12±1.51cm,管径2.25±0.24cm.静脉属支8.75±2.02支,66.3%开口于该段静脉后壁,66.4%位于肾段.(2)静脉属支:①右睾丸(卵巢)静脉(84.9%),距左肾静脉上缘3.56±0.85cm,汇入该段下腔静脉前壁;②腰静脉(100%),变异大,均不成对,左腰静脉(3~4支)较右侧(2~3支)多;③肠系膜外科静脉(86%),距左肾静脉上缘6.54±1.21cm,从下腔静脉前壁左侧汇入;④右肾上腺静脉(20%);⑤右付肾静脉(25%);⑥右肾周静脉(36%);⑦右膈下静脉(6%).结论:以上对下腔静脉起始段及属支的观测结果,为临床腹膜后影像学及各类手术提供了新的解剖学基础.

    作者:赵俊;孙善全;郭学利 刊期: 2003年第06期

  • 小肠良性肿瘤31例临床分析

    目的:总结小肠良性肿瘤的病理类型、临床特征及诊断方法.方法:回顾性分析我院1978年1月~2002年6月收治并经病理证实的31例小肠良性肿瘤.结果:病理类型以平滑肌瘤、血管瘤、腺瘤、神经鞘膜瘤为主,部位:空肠13例,回肠10例,十二指肠8例.主要临床表现为腹痛、出血、贫血、肠梗阻等,易与其他消化系统疾病混淆.诊断方法常规内镜及胃肠钡餐阳性率不高.结论:小肠良性肿瘤以平滑肌瘤、血管瘤、腺瘤、神经鞘膜瘤为主,临床表现缺乏特异性,易延误诊断.检查手段相对不足,小肠镜及选择性腹腔动脉造影可提高诊断率.

    作者:刘胜春;姚榛祥;刘金彪 刊期: 2003年第06期

  • 非线性生物模型回归参数计算的一个新方法及应用

    目的:研究变量代换对非线性生物模型回归参数的干扰,寻找消除或减少该干扰的新方法.方法:利用空间变换、泰勒(Taylor)级数和加权处理的组合方式消除或减少变量代换带来的严重影响.结果:给出一个计算非线性生物模型回归参数的新方法.结论:新方法消除或减少了变量代换带来的严重影响,保留了变量代换便于计算的优点;不但显著提高了非线性生物模型回归参数的精度,而且还能发现原始数据中隐藏的问题.

    作者:张世强 刊期: 2003年第06期

  • 骶管麻醉在婴幼儿先天性马蹄内翻足手术中的应用

    目的:探讨垂直进针骶管麻醉在婴幼儿先天性马蹄内翻足手术中的可行性.方法:婴幼儿先天性马蹄内翻足择期手术60例,在硫喷妥钠(SP)和羟丁酸钠基础麻醉下,随机分为硬膜外麻醉组(n=30)和改进了的垂直进针骶管麻醉组(n=30),局麻药用(0.8~1.25)%盐酸利多卡因8~10mg·kg-1.记录SP诱导入睡后、切开皮肤、打克氏针、缝合皮肤等时点的BP、RR、HR、SpO2变化及不良反应和辅用镇痛药情况,比较两种麻醉方式的麻醉效果.结果:观察到硬膜外组有2例镇痛不全,而骶管组镇痛完善.两组在切开皮肤、打克氏针、缝合皮肤分别与同组SP诱导入睡后比较,其呼吸循环功能均波动不大,无显著性差异(P>0.05).两组均未出现全脊麻及局麻药中毒等严重不良反应.结论:采用基础麻醉加垂直进针骶管麻醉行婴幼儿先天性马蹄内翻足手术是可行的,而且具有简单、省时、经济、较安全、损伤小等优点,有较高的临床应用价值.

    作者:徐红珍;叶茂;徐颖;李大珍 刊期: 2003年第06期

  • 右室流出道频发室性早搏射频消融治疗的临床疗效观察

    目的:观察导管射频消融治疗右室流出道频发室性早搏(简称室早)的疗效及安全性.方法:选择右室流出道频发室早患者32例,随机分为常规标测组(16例)和冠状窦电极标测组(16例),按常规方法进行射频消融,平均随访22±14月,观察射频消融的即刻和远期成功率及安全性和临床症状改善情况,并比较常规标测组与冠状窦电极标测组标测时间.结果:①射频消融即刻和远期成功率分别为100%、93.8%,无1例发生并发症;成功术后,由室早引起的症状消失.②冠状窦电极标测组标测时间明显少于常规标测组.结论:右室流出道频发室早射频消融治疗成功率和安全性高;灵活应用常规导管引导标测可明显减少标测时间,亦即明显减少X射线的辐射能量.

    作者:刘增长;殷跃辉;佘强;罗开良 刊期: 2003年第06期

  • 生长因子在实验性尿酸盐肉芽肿形成和转归中的作用

    目的:探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)与尿酸盐肉芽肿形成和转归之间的关系.方法:采用免疫组化及原位杂交法观察30例尿酸性肾病大鼠肾小管周围肉芽肿形成过程中TGF-β1、PCNA、α-SMA及Ⅲ型胶原在不同时段的表达情况.结果:肉芽肿形成的整个过程中受损伤的肾小管上皮细胞及肉芽肿内单核细胞均有TGF-β1mRNA及TGF-β1蛋白和PC-NA的表达.且TGF-β1的表达与肉芽肿内Ⅲ型胶原沉积程度一致.结论:TGF-β1可能通过自分泌和旁分泌刺激尿酸盐结晶周围单核细胞原位增殖而促进异物肉芽肿形成,且在肉芽肿纤维化过程中发挥了重要作用.

    作者:徐曼;孙铭柱 刊期: 2003年第06期

  • 灌肠致肛直肠损伤的观察及护理

    灌肠致肛直肠损伤是临床上较常见的并发症之一.肛直肠损伤主要是灌肠操作不当,用力过大;肛管材料质地较硬,插入端不光滑等引起的.作者从1996年2月~2001年10月对315例纤维结肠镜检查前曾行灌肠者观察发现,143例(45.39%)有不同程度的肛管皮肤或/和直肠粘膜损伤,其中直肠粘膜损伤121例(38.41%),肛管皮肤损伤22例(6.98%).可见,临床上灌肠后造成直肠机械性损伤的发生率是较高的.现就其发生原因、急救护理体会报告如下.

    作者:张华;何代文;陈绪碧 刊期: 2003年第06期

  • 曲美他嗪对冠心病心力衰竭患者心脏收缩和舒张功能的影响

    目的:探讨曲美他嗪对冠心病慢性心力衰竭患者心脏收缩和舒张功能的影响.方法:观察冠心病慢性心力衰竭患者45例,其中曲美他嗪组23例,对照组22例.分别测定用药前及用药6月后两组患者的超声心动图心功能指标SV,CO,CI andLVEF,VA,VE,VA/VE.结果:用药6月后曲美他嗪组患者的SV,CO,CI及LVEF较对照组显著增高(P<0.05),但VA,VE及VA/VE与对照组相比无显著性差异(P>0.05).结论:曲美他嗪通过改善缺血心肌细胞的能量代谢,可保护缺血心肌细胞的功能,从而改善心脏的收缩功能.

    作者:刘东;黄晶;邓昌明;高大中;李增高 刊期: 2003年第06期

  • 胸大肌的肌内神经分支分布和肌构筑特征及其临床应用

    目的:为胸大肌肌移植的临床应用提供解剖学依据.方法:解剖并观察测量人胸大肌的肌内神经分支分布及肌构筑特征.结果:1.胸大肌锁骨部和胸肋部各有单独的神经支配,胸肋部各肌齿均有细长的神经分支分布.2.胸大肌锁骨部肌重45.9±10.8g,肌长18.5±2.1cm,肌纤维长10.7±1.4cm,生理横切面积4.1±1.1cm2;胸肋部上述指数分别为220.4±44.3g,21.4±1.6cm,17.2±2.6cm,12.4±3.1cm2.结论:1.胸大肌锁骨部和胸肋部两个肌亚部,可单独取材用于肌移植,也可按肌齿(条)取材.2.胸大肌胸肋部产生的肌力是锁骨部的3倍,位移幅度是锁骨部的1.6倍左右.

    作者:李平;薛黔;谢鹏 刊期: 2003年第06期

  • 气管插管引起杓状软骨脱位2例

    1临床资料病例1:女,45岁,诊断胆囊结石,选择气管内全身麻醉,行腹腔镜胆囊切除术.以咪唑安定6mg,维库溴铵6mg,芬太尼0.2mg快速诱导后,喉镜显露良好,Cormack and Lehane分级1级,气管插管1次成功(导管内径为8.0mm).插管后患者取平卧右侧头位麻醉总时间2h.术后第3天出现声嘶,请耳鼻喉科会诊,间接喉镜下见左声带固定于旁正中位,声门闭合不全.诊断为左杓状软骨脱位.经2次杓状软骨拨动术后,发音明显好转.

    作者:曹宇;刘丹彦 刊期: 2003年第06期

  • 小儿胆道葡萄状肉瘤(附1例及文献复习)

    目的:提高对小儿胆道胚胎型横纹肌肉瘤(葡萄状肉瘤)的认识,减少误诊.方法:对本病例及国内文献报道的胆道胚胎型横纹肌肉瘤(葡萄状肉瘤)病例共16例进行分析.结果:男11例,女5例.年龄1~6岁.黄疸16例,发热8例,右上腹痛6例,陶土色大便9例,尿黄6例.肝肿大13例,脾肿大2例,右上腹肿块2例.临床误诊为肝炎5例.B超考虑葡萄状肉瘤仅2例,CT考虑胆总管横纹肌肉瘤仅1例.病检诊断:胚胎型横纹肌肉瘤3例,葡萄状肉瘤13例.7例切除并化疗、放疗,随访长的8个月未复发.1例部分切除并化疗,3个月后随访残留灶缩小,病情稳定.2例行姑息手术后2个月左右死亡.1例切除后2个月检查已复发.结论:小儿胆道横纹肌肉瘤为胚胎型横纹肌肉瘤(葡萄状肉瘤),发病年龄1~6岁,男性比女性多见.其主要症状为阻塞性黄疸,常伴有发热、肝肿大等,临床易误诊为肝炎.B超、CT等辅助检查有助于诊断,确诊需经病理检查.本病恶性程度高,预后差,应积极外科治疗并配合化疗、放疗,可延长生存时间.

    作者:刘斌;易永芬;李园园;廖晓刚 刊期: 2003年第06期

  • 应用含氟牙膏预防固定正畸患者牙釉质脱矿的临床研究

    目的:本研究通过指导接受固定矫治器治疗的患者使用含氟牙膏刷牙,以期找到一种简便有效的方法来预防牙釉质脱矿.方法:随机选择使用固定矫治器治疗的患者60名分为氟化物组和对照组.氟化物组采用含氟牙膏刷牙,对照组采用不含氟牙膏刷牙,分别比较矫治前后两组患者及被观察牙齿牙釉质脱矿发病率和脱矿程度,患者牙釉质脱矿程度用釉质脱矿指数(EDI)代表.结果:矫治前两组患者及被观察牙齿牙釉质脱矿发病率和脱矿程度均无明显差异(P>0.05).矫治后患者牙釉质脱矿发病率氟化物组低于对照组(P<0.05),被观察牙齿牙釉质脱矿发病率氟化物组显著低于对照组(P<0.01),发生1度脱矿的牙数氟化物组高于对照组(P<0.05),发生3度脱矿的牙数氟化物组低于对照组(P<0.05),2度脱矿两组发病无明显差异(P>0.05),氟化物组EDI小于对照组(P<0.05).结论:在固定正畸治疗中,含氟牙膏能有效预防牙釉质脱矿.

    作者:张定铭;刘朝霞;戴红卫;冯刚;吴杨 刊期: 2003年第06期

  • NF-кB和ICAM-1在喉癌中的表达及其意义

    目的:研究体内核转录因子NF-κB和细胞间粘附分子ICAM-1在喉癌组织中表达及意义.方法:采用免疫组织化学染色S-P法检测40例喉癌组织和20例正常成年人喉粘膜组织的NF-kappaB P65蛋白及细胞间粘附分子-I(ICAM-1)的表达水平.结果:(1)与正常喉粘膜组织相比较,喉癌组织中NF-kappaB P65蛋白和ICAM-1表达水平均呈显著性增强(P<0.001).(2)40例喉癌组织检测数据提示NF-kappaB蛋白表达和ICAM-1表达呈直线回归关系(6=0.975,P<0.001).结论:(1)NF-kappaB可能参与喉癌发生发展机制;(2)NF-kappaB的激活导致喉癌患者体内ICAM-1表达增强,促进了机体自身细胞免疫抗肿瘤的作用.

    作者:朱江;胡国华;孙余才;邓靖宇 刊期: 2003年第06期

  • 健侧半喉重建晚期梨状窝癌术后的咽部及颈段食管缺损

    目的:探讨健侧半喉重建晚期梨状窝癌术后咽部缺损的治疗方法及治疗效果.方法:对12例晚期梨状窝癌患者行半喉半咽切除术,2例同时行颈段食管切除术,并用健侧半喉重建咽部及颈段食管缺损.结果:术中无死亡病例.仅1例术前放疗的病人术后发生咽漏,全部病例愈合后均可进普通饮食,也无吞咽梗阻.目前,所有病例随访时间均超过2年,其2年生存率为75%,长存活5年.结论:利用半喉半咽切除术后残存的正常喉粘膜瓣重建晚期梨状窝癌术后咽部及颈段食管缺损,取材方便,操作简单,创伤小,并发症少.

    作者:胡国华;魏莲枝;朱江 刊期: 2003年第06期

  • 小儿骨髓增生异常综合症(MDS)13例临床分析

    目的:探讨小儿骨髓增生异常综合症(MDS)的实验室检查特征及临床特点.方法:对13例诊断为MDS患儿的外周血、骨髓像及临床表现进行回顾性分析.结果:13例患儿11例为男性,2例女性.临床以发热、贫血、肝脾肿大为主要表现.13例患儿均为中重度贫血,外周血见有核红细胞,白细胞表现为增高、正常或减低.4例患儿外周血见幼稚细胞,血小板可正常或减低,网织红细胞多数偏高.骨髓均增生活跃,有红系或粒系病态造血,以巨幼样改变为主;诊断为RA10例,RAEB2例,RAEB-t1例.结论:小儿MDS诊断仍主要靠骨髓检查,骨髓至少一系出现病态造血,巨幼样改变较易见,并除外其他引起病态造血的疾病,需注意和再障相鉴别.

    作者:陆玲玲;刘筱梅;徐酉华 刊期: 2003年第06期

  • 血清铁蛋白测定在肝损伤中的临床意义

    目的:探讨血清铁蛋白(SF)在肝损伤时的变化,将SF用于肝损伤评估的可能性.方法:对71例乙型病毒性肝炎(HB)、78例甲型病毒性肝炎(HA),3例药物性肝炎(DIH)患者用ELISA法定量测定其血清铁蛋白,用化学法测定其谷丙转氨酶(ALT)、血清总胆红素(TB).结果:HA,HB及DIH的急性期SF和ALT均明显增高(P<0.01).HA恢复初期多数患者ALT恢复正常,SF虽然有下降但仍未正常,与对照组比较仍有显著性(P<0.01).ALT、TB正常的HB患者有SF增高(P<0.05),ALT、TB异常的HB患者SF明显增高(P<0.01),并与ALT和/或TB呈正相关.DIH急性期SF极度增高.重症肝炎ALT下降时,有SF持续升高.结论:血清铁蛋白检测是评价肝功能的又一实验室指标,其比ALT更能反映肝损害的实际情况.

    作者:夏吉荣 刊期: 2003年第06期

重庆医科大学学报杂志

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主管:重庆市教育委员会

主办:重庆医科大学