蒋幼凡；薛亚梅
目的：建立用反相高效液相色谱法(HPLC)测定肠道杆菌胞内药物浓度的方法。方法：将待测肠道杆菌与环丙沙星在37℃振荡温育，不同时段各取出1ml菌液超声裂解，取上清以HPLC法测定浓度，以ODS-C18作固定相，流动相组成为甲醇/0.008M磷酸缓冲液/四丁基溴化铵(25：75：v/v/v)，荧光检测激发波长278nm，发射波长445nm。结果：低检出限0.06mg/L，线性范围0.154～12.5mg/L，r=0.9997，日内精密度2.66％，日间精密度4.15％。摄取曲线表明各菌株在10min处达大峰浓度。结论：高效液相色谱法测定细菌胞内药物浓度能更好的避免干扰，准确检测药物浓度，可用于氟喹诺酮类药物耐药机制的研究。
作者：贾蓓；钱元恕；来晓云 刊期： 2001年第01期
目的：通过AEEG监测，了解颅内占位性疾病手术前后的脑机能变化特点。方法：选择260例颅内占位性疾病者，术前1～3天、术后1周、术后1～3月分别观察其AEEG表现。结果：(1)AEEG术前、术后1周或术后1～3月异常率分别为88.1％、97.7％、77.7％。(2)术前无癫痫发作组，术后新发癫痫17例，提示手术对大脑皮质的损害，可能增加致痫机会。结论：AEEG对颅内占位性疾病术前术后的监测，可在一定程度上反映病灶及手术对脑机能的影响，为临床治疗提供参考。
作者：但炜；唐文渊；何建国 刊期： 2001年第01期
目的：研究超声波照射对小鼠胚胎表达整合素α1、α5、β1、β3的影响以及与其着床能力的关系。方法：取小鼠二细胞胚经超声波照射后体外培养至囊胚期，用免疫组化法检测其整合素α1、α5、β1、β3的表达及其着床能力的改变，并与未经照射的正常胚胎比较。结果：1、超声波照射组胚胎贴附率、滋养细胞外延生长率均显著低于正常胚胎。2、正常胚胎桑椹胚期即有α5、β1、β3整合素表达，而无α1表达；囊胚期α5、β1、β3表达增强，仍无α1表达；α1只出现在外延生长的滋养细胞。3、超声波照射组胚胎β3整合素的表达明显弱于正常组，且未见α1表达；而α5、β1的表达两组间无差异。结论：超声波照射使胚胎着床能力明显降低，可能与其影响胚胎细胞α1、β3整合素的正常表达有关。
作者：李真；顾美礼；王智彪；胡凯；艾玲；杜永洪 刊期： 2001年第01期
我科在行经股动脉插管选择性脊髓血管造影术中发生导管断裂一例，以非手术方法取出。现报道如下：1 临床资料 患者，女性，13岁。因左上肢、双下肢乏力伴麻木二周，加重一周入院。查体：左上肢肌力Ⅳ级，双下肢肌力0级，剑突以下痛觉减退，右下肢明显，左膝腱反射亢进，双侧病理征阳性。颈部MRI示：颈3-胸2髓内病变，考虑隐匿性血管瘤。诊断考虑为颈3-胸2脊髓血管畸形可能性大。入院后在局麻下行经股动脉插管脊髓血管造影术。术中将导管送至左锁骨下动脉，用高压枪注入两次造影剂，显影不满意，在调整导管位置时，发现导管前端已经断裂。
作者：何朝晖；支兴刚 刊期： 2001年第01期
目的：检测羟基喜树碱(Hydroxycamptothecine，HCPT)对体外培养的兔晶体上皮细胞(rabbit lens epithelial cells，P.LECs)增殖的影响。方法：取2～3代的RLECs在96孔板中培养24h后，用不同浓度的HCPT分别作用24及72h，用甲基噻唑基四唑(Methylthiazolyltetrazolium，MTT)测定法观察HCPT对RLECs增殖及贴壁的影响。结果：HCPT既能抑制RLECs的增殖，还可抑制RLECs的贴壁，24h的半数抑制量(IC50)为96.041μg/ml，72h的IC50为1.34μg/ml。结论：一定浓度的HCPT能有效抑制RLECs的生长。
作者：罗莉霞；李平华；彭惠；骆云鹏；汤为学 刊期： 2001年第01期
目的：探讨原发性纵隔肿瘤及囊肿的诊断和外科治疗，特别是术中防治意外损伤及保证手术安全的技术问题。方法：对我院手术治疗的原发性纵隔肿瘤及囊肿272例患者的临床资料进行分析。结果：272例中神经源性肿瘤占28.3％，其次为胸腺肿瘤或囊肿(27.6％)和畸胎样瘤(20.2％)：X线检查与术后病理诊断的基本符合率为73.9％(201例)；均在全麻下施行手术，其中开胸手术266例，经颈部手术4例，颈胸分别切口同期手术2例；手术方式包括肿瘤或囊肿完全切除、大部切除和开胸探查等。术中上腔静脉损伤4例，其中1例经右心耳上腔静脉插管后修补，二期(术后2周)拔除上腔静脉插管治愈。手术死亡6例，手术死亡率为2.2％。结论：在原发性纵隔肿瘤及囊肿中，神经源性肿瘤的发病率居首位，其次为胸腺瘤和畸胎样瘸：胸部X线检查是诊断本病的主要手段；充分的围手术期处理，认真选择切口，在手术操作中防治重要组织器官损伤是保证手术安全的关键。
作者：吴庆琛；李良彬；温剑虎 刊期： 2001年第01期
目的：研究顺铂(Cisplatin，PDD)，米托蒽醌(Mitoxantrone，Mit)，阿糖胞苷(Cytosine Arabinoside，Ara-C)对兔晶体上皮细胞(rabbit lens epithelial cells,RLECs)增殖的抑制作用。方法：分离兔晶体囊膜行组织细胞培养，传代的2～3代RLECs在96孔板培养24h，然后用不同浓度的PDD、Mit及Ara-c作用细胞24h及72h，用MTT(methyl thiazolyl tetrazolium)比色法进行测定。电镜观察细胞超微结构，流式细胞仪观察细胞周期的变化。结果：PDD及Mit作用于传代培养RLECs 24h IC50分别为38.92 μg/ml、8.92 μg/ml；72h的IC50分别为6.7lμg/ml、2.04μg/Ml。结论：PDD及Mit均为剂量依赖型和时间依赖型药物，均能有效抑制兔晶体上皮细胞的生长，在此试验条件下Ara-C对兔晶体上皮细胞增殖无明显抑制作用。
作者：彭惠；李平华；罗莉霞；骆云鹏；汤为学 刊期： 2001年第01期
目的：进一步探讨川崎病(KD)急性期患者外周血淋巴细胞凋亡延迟的机理。方法：采用斑点杂交(Dot-blot)检测淋巴细胞p53基因mRNA表达水平；流式细胞仪(FCM)检测p53蛋白质表达阳性细胞百分率。结果：KD患者外周血淋巴细胞p53基因mRNA和p53蛋白质表达水平降低，与正常儿童比较差异显著(P＜0.005)；当给予静脉注射免疫球蛋白(IVIG)治疗后或加入抗IL-6单抗培养时，外周血淋巴细胞p53基因mRNA和P53蛋白质表达水平提高。结论：KD急性期患者外周血淋巴细胞p53基因表达水平降低，其原因可能与本病患者异常升高的IL-6有关。p53基因具有促进细胞凋亡的作用，KD患者外周血淋巴细胞凋亡延迟可能与高浓度IL-6抑制p53基因的表达有关。
作者：易岂建；杨锡强；李成荣；张远维；王莉佳 刊期： 2001年第01期
目的：在体外从人外周血中培养扩增树突状细胞。方法：从正常人外周血分离PBMC，经两次孵育粘附，弃去悬浮细胞后加细胞因子(GM-CSF，IL-4)和培养液进行培养，并对培养过程进行观察鉴定。结果：培养l周后即可培养出典型的树突状细胞，经FITC-CDla单抗标记后用流式细胞仪检测DC的CDIa表达率为65％，并能刺激同种淋巴细胞增殖反应。结论：利用GM-CSF和IL-4可以从人外周血中扩增出大量DC，可为后续研究做准备。
作者：李用国；罗云萍；梁增伟；任红 刊期： 2001年第01期
目的：建立小鼠→大鼠异种心脏移植动物模型。方法：选择NIH小鼠和Wistar大鼠分别作为供体和受体。小鼠升主动脉与大鼠右颈总动脉端端吻合，小鼠肺动脉与大鼠右颈外静脉端端吻合以建立小鼠→大鼠颈部异位心脏移植模型。排斥后取移植心脏作病理学检查。结果：移植成功率87％(13/15)。移植心脏平均存活时间2.15±0.90天。病理检查发现排斥心脏中广泛血管内血栓形成，出血及炎症细胞浸润，部分心肌有局灶性梗塞和凝固性坏死。结论：本模型容易操作，易于观察，稳定可靠，是研究异种移植较理想的动物模型。
作者：黄平；姚榛祥 刊期： 2001年第01期
l 历史回顾 自1953年Gibbon应用体外循环技术为一房间隔缺损患者直视修补成功，体外循环心内直视手术经历了40多年的发展，与之相随的心肌保护技术也不断发展。首先在手术过程中是否维持心肌供血方面经历了供血－缺血－供血的过程；其次心脏停跳也有化学－非化学－化学的反复；然后体外循环过程的全身及心肌温度也出现常温－低温－浅低温变化[1]。而在心脏静止与跳动方面，出现停跳与不停跳的研究。自1950年Bigerlow，Lindsay和Greeword把低温技术导入心脏手术，1973年Gay成功应用冷钾晶体心停跳液术中心肌保护以来，传统的低温停跳液便成了心肌保护的重要措施。由于心肌不可避免缺血，缺氧和再灌注损伤，及低温所致全身生理紊乱，心肌保护效果欠佳，术后低心排血量综合征和严重心律失常仍是主要死亡原因[2]。
作者：谢晓阳；李朝先 刊期： 2001年第01期
目的：观察全脑缺血再灌流后Bak和Bad基因在脑内表达的变化规律和意义。方法：采用大鼠4血管结扎全脑缺血30min再灌流模型，用免疫组织化学染色法观察Bak和Bad基因在脑内的表达。结果：全脑缺血再灌流后12h开始在皮质和海马等缺血易损部位：Bak表达降低，24h达低点；而Bad则表达升高，24h达高点；表达变化明显的时间均是24～48h，此时间与脑缺血后脑细胞凋亡发生的高峰时间一致。结论：脑缺血再灌流可以诱导Bak和Bad基因在脑内表达发生变化，这种变化与脑细胞凋亡的发生关系密切。Bak在脑缺血后表达降低说明其在脑内表达可抑制细胞凋亡。
作者：刘颖菊；蒋远明；薛春生；周歧新 刊期： 2001年第01期
目的：研究自发性高血压大鼠(SHR)心肌细胞Bax和Bcl-2基因蛋白表达的变化及其与心肌细胞凋亡的关系。方法：采用免疫组化和末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测Bax和Bcl-2基因蛋白及凋亡细胞。结果：(1)心肌细胞凋亡和Bax基因蛋白表达在1月龄SHR组(NLVH组)和18～20月龄SHR组(CHF组)显著增高且Bax基因蛋白表达与心肌细胞凋亡呈显著正相关(P均＜0.01)。(2)在10月龄SHR组(LVH组)，心肌细胞凋亡显著降低但Bcl-2基因蛋白表达显著增高且Bcl-2基因蛋白表达与心肌细胞凋亡呈显著负相关(P均＜0.01)。(3)NLVH组和CHF组Bcl-2/Bax比例显著降低，但LVH组Bcl-2/Bax比例显著增高且Bcl-2/Bax比例与心肌细胞凋亡呈显著负相关(P均＜0.01)。结论：SHR心肌细胞Bax和Bcl-2基因蛋白表达及心肌细胞凋亡存在动态变化，且Bax基因蛋白表达上调可能与SHR心肌细胞凋亡增加和CHF相关而Bcl-2基因蛋白表达上调则可能与SHR心肌细胞凋亡减少和LVH有关。因此，Bax和Bcl-2基因蛋白表达的动态变化可能在SHR心肌细胞凋亡和心脏重构中起重要作用。
作者：李法琦；陈运贞 刊期： 2001年第01期
目的：由于硬件及软件系统的局限性，在图像输入过程中存在诸多误差，给今后工作带来许多不准确性，甚至导致错误的结果。本文着重讨论了彩色显微图像输入过程中，光学系统所产生的误差极其消除方法。方法：分别采用图像相减，栅格插值及直方图均衡法消除了光学系统所产生的误差。结果：上述二种方法基本满足消除图像输入过程中所产生的误差的要求，达到了再现图像的目的。结论：此方法的建立为以后的数据处理、图像分析打下了良好的基础。
作者：鲍依稀；罗春丽；康格非 刊期： 2001年第01期
目的：观察顺铂、5-氟尿嘧啶及甲氨喋呤在体外对人宫颈肿瘤细胞(Hela细胞)的作用。并观察顺铂、5-氟尿嘧啶配伍对Hela细胞的相互作用。方法：采用MTT例定法观察顺铂、5-氟尿嘧啶及甲氨喋呤单用及合用对Hela细胞的影响，流式细胞仪观察凋亡及细胞周期的变化。并利用中效原理判定顺铂和5-氟尿嘧啶合用的效果。结果：顺铂和5-氟尿嘧啶单独应用时随着药物剂量增加，其抑制作用也增加，两药大剂量(大于中效剂量)合用时可产生拮抗作用(CI＞1)，小剂量(小于中效剂量)合用时可产生协同作用(CI＜1)。甲氨喋呤在本实验条件下未见明显抑瘤作用。结论：顺铂和5-氟尿嘧啶合用小剂量产生协同作用，大剂量产生拮抗作用。
作者：彭勤；彭惠；骆云鹏；汤为学 刊期： 2001年第01期
目的：用阴离子交换HPLC分析环核苷酸磷酸二酯酶反应体系。方法：用Shim-Pak WAX-I柱，30 mmol/L的pH 4.0磷酸钾为流动相，洗脱速度0.5 ml/min，254 nm检测，峰面积定量。结果：上述离子交换HPLC体系可分离并定量测定cAMP和AMP。在硫酸铵分级粗制兔肝PDE反应混合物中，cAMP和AMP同杂质完全基线分离；随反应进行，cAMP逐步下降，AMP上升到平台后再下降。用米氏酶的积分速度方程作图分析cAMP下降的进程曲线，发现硫酸铵分级粗制的兔肝PDE的米氏常数为负数。结论：此离子交换HPLC方法可以分析无杂酶干扰时PDE对cAMP的水解。
作者：廖飞；张晓萍；周岐新；杨俊清；曾昭淳；陈文缘；汤先觉 刊期： 2001年第01期
目的：对心脏不停跳、浅低温体外循环下行心脏瓣膜替换术中相关的心肌保护、空气栓塞等问题进行探讨。方法：常规建立体外循环，维持全身浅低温32～33℃；心脏缓慢跳动，进行二尖瓣替换；若行主动脉瓣替换，则钳夹主动脉的同时，进行冠状静脉窦逆灌，维持心脏缓慢跳动。结果：40例手术全部成功，无术后脑部并发症及低心排并发症。结论：采用这种新技术能够在术中对心肌进行良好的保护，术中空气栓塞是可以避免的。
作者：李强；李朝先；向小勇；杨双强；李良彬 刊期： 2001年第01期
BAEP的研究中很少涉及BAEP的波幅问题。本文结合93例不同预后颅脑损伤病例BAEP检查数据，从波幅和潜伏期两方面进行了探讨。1 对象和方法1.1 研究对象1.1.1 病例93例，男50例，女43例，平均年龄45岁。诊断以CT、MRI为据。手术治疗57例，非手术治疗36例。检查于伤后24小时内完成。
作者：李建伟；程兴玉；唐文渊 刊期： 2001年第01期
幽门螺杆菌(Hp)是一种革兰氏阴性的微需氧菌，它是引起慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌及粘膜相关淋巴样组织(MALT)淋巴瘤等的重要病因[1～4]。Hp感染可持续数十年甚至终生，但感染所造成的结果却有很大的不同，一些感染者只表现为无症状的带菌者，而另一些则表现为慢性胃炎、消化性溃疡甚至发展为胃癌。对于这些不同的结果，有以下几点解释：①感染的Hp菌株不同，其致病性不同而造成不同的结果；②感染宿主不同，其炎症反应、免疫反应不同而造成不同的结果；③Hp感染后胃粘膜细胞的增殖程度增加，环境中的某些因素如亚硝胺、高盐等造成不同的结果；④感染的阶段不同，早期感染特别是儿童期感染增加了胃癌的发生，却减少了溃疡病的发生。近年来，Hp毒素的致病作用越来越受到人们的重视。
作者：张霞；沈鼎明 刊期： 2001年第01期
目的：测定热休克蛋白(heat shock protein HSP)在肺癌组织及正常肺组织中的表达，藉以探讨其在肺癌增殖、分化中的作用。方法：采用S-P免疫组化法，观察HSP70和PCNA在43例非小细胞肺癌(NSCLC)及5例小细胞肿癌(SCLC) 中的表达情况。结果：NSCLC中HSP70表达较正常肺组织高；HSP70表达与PCNA表达有正相关关系；有淋巴结转移组HSP70表达高于无转移组；NSCLC中吸烟组HSP70表达高于不吸烟组。结论：HSP70在NSCLC组织中的高表达与癌细胞的增殖、转移有关，可能是调控肿瘤细胞增殖及凋亡的重要基因，可作为NSCLC的辅助诊断及判断预后的参考指标。
作者：蒋幼凡；薛亚梅 刊期： 2001年第01期
重庆医科大学学报杂志
主管:重庆市教育委员会
主办：重庆医科大学
