学术投稿

蒿甲醚自微乳化释药系统的制备及体外评价

张亚红;林凤云;邱妍川;朱照静

关键词:蒿甲醚, 自微乳化释药系统, 伪三元相图, 体外评价
摘要:目的 研究蒿甲醚自微乳化释药系统处方组成和体外特性.方法 通过溶解度实验、伪三元相图绘制和正交实验设计筛选优化蒿甲醚自微乳化处方.以自乳化速率、粒径、稳定性和体外溶出度为指标评价自乳化微乳系统体外特性.结果 蒿甲醚自微乳化释药系统的佳处方选择Lauroglycol 90为油相,Cremophor RH 40为乳化剂,Gelucire 44/14为助乳化剂,佳配比为4∶4∶2,其中蒿甲醚的载药量为80 mg/g.自制的ARM-SMEDDS均在2 min以内完成自微乳化,粒径为(61.50±8.66) nm,常温下3个月基本保持稳定,体外溶出度结果显示120 min即能达到>99.5%的溶出率,累积溶出百分率为原料药的7倍.结论 所制备的ARM-SMEDDS外观和稳定性良好,能显著提高体外溶出度.
第三军医大学学报杂志相关文献
  • 贝伐单抗联合化疗一线治疗转移性实体瘤有效性和安全性的Meta分析

    目的 评价贝伐单抗联合化疗一线治疗转移性实体瘤的有效性和安全性.方法 计算机检索Cochrane图书馆、PubMed、EMbase、CNKI、万方等数据库,收集贝伐单抗联合化疗一线治疗转移性实体瘤的随机对照试验,由2名研究者独立评价纳入研究的质量,采用RevMan 5.2软件进行Meta分析,主要结局指标包括无进展生存期(progression free survival,PFS)、总生存期(overall survival,OS)及毒性反应.结果 共计16项随机对照试验纳入分析,包括6种恶性肿瘤和10917例病例;结果显示,与单纯化疗方案比较,贝伐单抗联合化疗一线治疗可以降低转移性实体瘤患者疾病进展风险(HR =0.70,95% CI:0.67 ~ 0.73,P<0.001)和疾病死亡风险(HR =0.89,95% CI:0.85 ~ 0.94,P<0.001),差异有统计学意义;在3~4级毒性反应方面,2组高血压(RR=6.58,95%CI:4.97~ 8.71,P<0.001)、蛋白尿(RR=10.85,95% CI:6.33~ 18.61,P<0.001)和出血(RR=1.76,95%CI:1.34 ~2.32,P<0.001)的发生率差异具有统计学意义,而静脉血栓栓塞(RR =1.00,95%CI:0.76 ~ 1.31,P=0.98)和动脉血栓栓塞(RR =1.28,95% CI:0.90~ 1.82,P=0.17)的发生率差异无统计学意义.结论 贝伐单抗联合化疗一线治疗转移性实体瘤可延长患者无进展生存期和总生存期,但出现高血压、蛋白尿和出血的危险性更高,而不增加血栓栓塞的发生率.

    作者:张旭东;董昱;米坤;杨晓军 刊期: 2013年第21期

  • 泻剂结肠大鼠模型阿片受体表达变化

    目的 探讨3种阿片受体亚型(MOR、DOR、KOR)在泻剂结肠大鼠模型结肠内的表达变化及意义.方法 使用7~8周龄Wistar大鼠20只,体质量(200±20)g,雌雄各半,按随机数字表法分为对照组(n=10)及泻剂结肠组(n=10),单只分笼饲养(环境温度18 ~28℃,相对湿度40%~ 80%).对照组饲以普通饲料,泻剂结肠组饲以含酚酞饲料.通过RT-qPCR及Western blot法对阿片受体在结肠中的表达进行相对定量分析.结果 3种阿片受体亚型在泻剂结肠组及对照组大鼠结肠内均有不同程度的表达.RT-qPCR检测显示泻剂结肠组MOR、DOR及KOR mRNA相对表达水平均明显高于对照组[(5.093±1.410) vs (1.092±0.222),(2.612±0.612) vs (1.032±0.082),(2.607±0.327) vs (0.995±0.109),P<0.01].Western blot检测显示泻剂结肠组MOR、DOR及KOR的表达较对照组明显升高[(0.361 ±0.023) vs (0.152 ±0.021),(0.246 ±0.059) vs (0.159 ±0.005),(0.309 ±0.018) vs(0.201 ±0.015),P<0.01].结论 各阿片受体亚型在泻剂结肠大鼠结肠中表达均明显增强,提示其对泻剂结肠大鼠结肠运动及分泌功能可能存在明显的抑制作用.

    作者:吴劲松;刘宝华;童卫东;李凡;张安平;付涛;李春穴 刊期: 2013年第21期

  • 结肠传输试验在慢传输型便秘诊断中的应用

    目的 探讨结肠传输试验在慢传输型便秘(slow transit constipation,STC)诊治中的价值和意义.方法 收集2007年9月至2013年5月于我院行结肠传输试验的414例受检者的资料,包括男性87例,女性327例,年龄13~82岁,平均45.9岁,临床表现大便次数减少、便意减弱,可伴随有大便于结、排便费力,部分患者需要手助排便,病程3~37年,平均10.7年,病情符合罗马Ⅲ诊断标准.受检者口服含有20粒不透光标记物的胶囊,观察其在服药后24、48、72 h腹部立位片中标记物的分布情况,比较各组标记物数量的差异.结果 414例按72 h残留于大肠的标记物的数量进行分组,>20%为阳性组,≤20%为阴性组,阳性组197例,阴性组217例.两组在各时间点差异具有统计学意义(P<0.05).结论 结肠传输试验可以如实地反映在人群结肠传输功能方面确实存在的不同程度的异常,结肠传输试验宜反复、多次检查,使结果更为准确.

    作者:赵松;刘宝华;付涛;李光焰;龚水根;王郜 刊期: 2013年第21期

  • 多功能超声检测胎儿右室双出口及法洛四联症右心室功能

    目的 探讨脉冲多普勒(PW)、M型(MME)、实时三维容积(RT-3 DE)超声心动图在右室双出口及法洛四联症胎儿右心功能检测中的应用价值.方法 采用PW、MME、RT-3DE三种方法,分别测量30例右室双出口及法洛四联症胎儿和30例正常胎儿的Tei指数、右室舒张末期容积(right ventricular end-diastolic volume,RVEDV)、收缩末期容积(right ventricular end-systolic volume,RVESV)、每搏量(stroke volume,sv)和射血分数(ejection fraction,EF)等指标,并进行对比分析.结果 PW测量异常组胎儿右室Tei指数为(0.48±0.09),正常组为(0.36±0.05),异常组测值明显高于正常组;MME与RT-3DE测量的异常组胎儿右室EF分别为(60.04 ±7.69)、(52.04 ±7.26),差异有统计学意义(P<0.05);PW测量的Tei指数与RT-3DE的ROC诊断曲线较一致,与MME差异较大.结论 RT-3DE可不依赖于任何解剖假设准确地评价胎儿心功能,且具有较好的重复性;由于右心室形态的不规则,MME在心室内径的测量上存在较大的误差,其相关测值的准确性和可重复性均较RT-3DE差.

    作者:李晓瑜;郑俊平;蒋演;李佩倞;高云华;夏红梅 刊期: 2013年第21期

  • 枕下乙状窦后入路显露颈静脉孔区的虚拟现实模拟研究

    目的 利用虚拟现实技术模拟人体枕下乙状窦后入路显露颈静脉孔区的局部解剖特征.方法 5例成人尸体头颅行头颅CT和MRI扫描,动脉系统和静脉系统依次灌注混合造影剂乳胶.分别于2次灌注后再次行头颅CT扫描.按照枕下乙状窦后入路解剖两侧尸体头颅,切除部分小脑半球显露脑干和颅神经,再次行头颅MRI扫描,影像数据输入Vitrea虚拟现实系统构建颈静脉孔区三维解剖模型并且模拟枕下乙状窦后入路.分别于尸体头颅和计算机模型中选择内听道入口上缘,颈静脉孔前缘,颈静脉孔后缘为骨性标志点测量距离,采用Bland-Altman方法进行测量结果一致性检验.结果 虚拟现实颈静脉孔区三维解剖模型中神经、血管和骨性结构的空间关系清晰显示,尸体头颅标本和计算机模型中测量内听道入口上缘-颈静脉孔前缘、内听道入口上缘-颈静脉孔后缘以及颈静脉孔前后缘之间连线距离,经Bland-Altman检验,偏倚分别为0.060、0.062和0.017,95%可信区间分别为-0.255 ~0.375、-0.357~0.481和-0.265~0.299,绘制散点图显示一致性良好.结论 颈静脉孔区的三维解剖模型数据测量经尸体头颅解剖验证其准确性良好.

    作者:汤可;周敬安;周青;赵亚群;刘策 刊期: 2013年第21期

  • 不同术式对慢传输型便秘患者的疗效、营养和健康状况的影响

    目的 观察全结肠切除回直肠吻合术(ileorectal anastomosis,IRA)和次全结肠切除盲直肠吻合术(caeco-rectal anastomosis,CRA)治疗慢传输型便秘患者的效果,以及对患者营养状况和健康状况的影响.方法 收集5家医院提供的行全结肠切除回直肠吻合术的40例患者,以及行次全结肠切除盲直肠吻合术的32例患者临床资料,对手术资料和术后随访资料进行统计分析,观察患者术前和术后的血红蛋白、总蛋白和白蛋白含量;采用术后全身情况调查表、MNA营养状况调查表、健康调查评分量表(SF-36)、社会生活情况调查表,分析两种手术治疗效果,以及对患者营养状况和健康状况的影响.结果 IRA组和CRA组术后3个月患者对手术满意度为87.5%,术后6个月都在90.0%以上.两组大便次数增多的例数随术后时间延长而减少,与各自术后3个月的例数相比,IRA组术后1年的例数显著减少(P<0.01),CRA组术后6个月的例数也显著减少(P<0.05).IRA组和CRA组术后1年应用止泻剂例数显著少于各自术后3个月的例数(P<0.05,P<0.01).IRA组术后的血红蛋白和白蛋白含量较CRA组显著增高(P<0.05).两组MNA营养状况调查指标数值之间无统计学差异(P>0.05),两组各指标得分均接近高分.两组健康调查评分量表数值之间无统计学差异(P>0.05).两组的健康状况、情绪问题和对周围生活的感受的得分只有高分的68.8% ~ 82.4%.结论 IRA和CRA手术能缓解患者便秘症状,术后营养状况良好,健康状况和社会生活受到一定程度的影响.IRA和CRA手术都适用于治疗慢传输型便秘,可根据患者的个体情况选择手术方式.

    作者:刘宝华;魏东;杨向东;高峰;钱群;李凡;付涛;屈景辉;任彦武 刊期: 2013年第21期

  • EphrinB2/EphB4在牙槽骨吸收-重建过程中的作用

    目的 初步探讨EphrinB2/EphB4信号在牙槽骨吸收及骨重建过程中的表达及其意义.方法 采用RT-PCR及Western blot方法分别检测小鼠RAW264.7细胞体外诱导前后、小鼠MC3T3-E1细胞骨吸收上清处理前后EphrinB2及EphB4的表达情况.以免疫组化(S-P)法、免疫荧光等方法检测大鼠实验性牙槽骨吸收模型牙体牙周联合标本中EphrinB2、EphB4的表达情况.结果 EphrinB2和EphB4在小鼠RAW264.7细胞、MC3T3-E1细胞中均有明显的表达,骨吸收上清作用于MC3T3-E1细胞后,分化的成骨细胞EphrinB2表达量(17.53±0.43)较阴性对照组(15.67±0.45)有显著升高(P<0.01);采用E-LPS注射法成功制备了稳定、可靠的实验性大鼠牙槽骨吸收模型,模型中免疫荧光结果可见EphB4和EphrinB2分别在牙槽骨缘成骨细胞及破骨细胞存在区的高信号.结论 EphrinB2/EphB4信号参与了骨吸收-重建过程,成骨细胞和破骨细胞均可共表达EphrinB2/EphB4并可能存在成骨细胞间的EphrinB2/EphB4传导完成促进成骨活动.

    作者:雷利红;黄玫;吴燕岷;陈莉丽 刊期: 2013年第21期

  • 3.0T常规MRI与髋关节镜检查髋臼唇撕裂的对比分析

    髋臼唇撕裂是临床上引起髋关节疼痛的常见原因之一,如果不及时诊断、治疗,终可引起关节软骨损伤,导致骨关节炎[1-2].关节镜是检查髋臼唇撕裂的金标准,髋关节MRI造影被认为是髋臼唇撕裂的首选影像学检查技术[3-4].但是,髋关节MRI造影与关节镜属于有创性检查,本研究采用3.0T常规MRI与髋关节镜检查髋臼唇撕裂,结果报告如下.

    作者:杨琴;刘杰;杜明珊;候文静;陈康;陈光兴;陈伟 刊期: 2013年第21期

  • 腹腔镜结肠旷置逆蠕动盲直肠吻合术治疗老年慢传输型便秘的临床效果

    目的 观察结肠旷置逆蠕动盲直肠吻合术治疗老年慢传输型便秘的效果,患者生活质量改善情况,以及对患者预后的影响.方法 收集2007年4月至2010年4月本研究所行腹腔镜结肠旷置逆蠕动盲直肠吻合术治疗70岁以上老年顽固性慢传输型便秘患者26例的临床资料,包括术中出血量、手术时间、首次排气时间、住院时间,以及术前和术后3、6、12个月的每天排便次数(BM)、Wexner肛门失禁评分(WIS)、Wexner便秘评分(WCS)、胃肠生活质量指数(GIQLI)、0~10数字疼痛强度量表(NRS)、腹胀和腹痛频率评分、Clavien-Dindo手术并发症分级(CD)变化.结果 26例患者包括男性9例,女性17例,年龄(72.9±2.7)岁,术前便秘症状严重,WCS值为(16.62±1.24),生活质量较差,GILQI 值非常低,为(63.58±4.84).患者都安全、顺利进行腹腔镜手术,手术时间(41.85±3.73) min,首次排气排便时间(3.92±1.92)d,住院时间(8.62±1.70)d,没有发生吻合口瘘,CD>Ⅰ级并发症3例,均为肺部感染,经治疗痊愈,无粘连性肠梗阻.术后3、6个月无严重腹泻,无肛门失禁.术后6个月每天排便(3.20±2.02)次,WIS评分为(2.50±1.94).患者术后临床症状明显改善,术后3、6、12个月WCS评分、GIQLI指数、腹痛和腹胀频率与术前比较明显改善,差异有统计学意义(P<0.01),术后3、6、12个月腹痛强度NRS值比较差异无统计学意义(P值分别为0.752、0.245、0.501),其中NRS≥7的仍有7例占26.92%.结论 腹腔镜结肠旷置逆蠕动盲直肠吻合术对于老年人,尤其是伴有心肺脑疾病严重的原发性慢传输型便秘患者是较理想的方法,但是在应用过程中应严格掌握手术适应证,确保术后效果.

    作者:魏东;蔡建;赵艇;张剑锋;张远耀;杨维维 刊期: 2013年第21期

  • 直肠内脱垂患者直肠顺应性变化与肠黏膜中TRPV1、5-HT表达的关系

    目的 探讨直肠内脱垂(internal rectal prolapse,IRP)患者直肠顺应性改变与TRPV1、5-HT在直肠黏膜层表达的关系.方法 选择临床诊断IRP的患者20例及对照组20例先进行肛管直肠测压,然后行结肠镜检查,在齿状线上方4cm处下段直肠取黏膜活检,行TRPV1和5-HT免疫组化染色,采用图像分析法分析免疫反应阳性情况.结果 与对照组比较,IRP组初始感觉容积明显增高(Z=-3.710,P<0.01),大感觉耐受容积明显降低(Z=-5.181,P<0.01),直肠顺应性明显降低;对照组黏膜层仅有少量TRPV1表达,IRP组直肠黏膜腺体可见大量TRPV1阳性染色,与对照组相比,IRP组直肠黏膜层TRPV1的表达显著增强(Z=-5.085,P<0.01);对照组黏膜层5-HT免疫阳性染色很少,而IRP组黏膜层腺体细胞内5-HT表达量显著升高(Z=-4.734,P<0.01).结论 IRP患者直肠顺应性明显低于对照组,与直肠黏膜层TRPV1和5-HT免疫反应阳性显著增强导致直肠高敏感有关,可能是IRP患者肛门坠胀、便意频繁等排便功能障碍的机制之一.

    作者:张鑫;田跃;童卫东;李凡;王李;赵松;叶景旺;刘宝华 刊期: 2013年第21期

  • 下颌第一前磨牙显微根管治疗1例

    1 临床资料患者,男性,43岁,主诉:左下后牙疼痛3d.现病史:患者自述1年前左下后牙曾于外院行充填治疗,2周前充填物脱落,3d前感左下后牙冷热刺激痛,偶有自发痛,来我院就诊.既往史:平时体质较好,自述有支气管炎症史,否认传染病病史,否认药物过敏史.检查:全口卫生差,牙石Ⅱ度,软垢Ⅰ度,色素Ⅰ度,牙龈充血,无退缩.34牙颊侧楔形缺损,已累及髓腔,冷(+),探(+),叩(+),松动度(-),牙龈未见明显异常(图1A).

    作者:刘建党;王慧霞;陈永进;张旻 刊期: 2013年第21期

  • 慢传输型便秘的药物治疗新进展

    作者:方秀才 刊期: 2013年第21期

  • 复方利多卡因乳膏在白癜风自体表皮移植术中的临床应用

    近年来,自体表皮移植术治疗白癜风在临床上已得到广泛应用,已成为治疗稳定期局限型白癜风的有效治疗方法[1].但在治疗过程中,因负压吸疱及表皮磨削产生的疼痛常常使患者难以忍受,影响治疗的顺利进行.我科术前采用复方利多卡因乳膏表面麻醉的方法,取得满意疗效报告如下.

    作者:唐莉;施宗平;林琳;肖艳;翟志芳 刊期: 2013年第21期

  • 消极情绪体验在表达抑制与军人心理应激水平中的中介作用

    目的 调查军人情绪调节、情绪体验和心理应激水平的关系.方法 采用军人心理应激自评问卷(psychological stress self-evaluation test,PSET),积极消极情绪量表(the positive and negative affect schedule,PANAS)和情绪调节量表(emotion regulation questionnaire,ERQ)对153名男性通信兵进行问卷调查.结果 ①心理应激与消极情绪体验存在显著正相关(r =0.62,P<0.01),与表达抑制使用频率存在显著正相关(r=0.22,P<0.01),与积极情绪和认知重评使用频率不存在相关(P>0.05);②消极情绪体验与表达抑制策略使用频率存在正相关(r=0.19,P<0.05),与积极情绪和认知重评使用策略不存在相关(P>0.05);③积极情绪体验与认知重评策略使用频率之间存在正相关(r =0.20,P<0.05);④军人的消极情绪体验在表达抑制策略的使用频率与心理应激水平之间起完全中介的作用.结论 情绪调节策略的使用频率通过影响个体的情绪体验来影响军人心理应激水平.

    作者:赵鑫;马秀娟;周仁来;岳建忠 刊期: 2013年第21期

  • 眼用和厚朴酚包合物温敏原位凝胶的制备及性质研究

    目的 研制温度敏感型眼用和厚朴酚羟丙基-β-环糊精包合物原位凝胶(HK-HPCD-Gel).方法 以溶液搅拌法制备和厚朴酚羟丙基-β-环糊精包合物(HK-HPCD),泊洛沙姆407(P407)和泊洛沙姆188 (P188)为凝胶基质,冷溶法制备HK-HPCD-Gel;用不同方法分别考察凝胶的溶蚀与体外释药行为并进行数据拟合.结果 制备得到的HK-HPCD-Gel在室温下黏度为(0.1894±0.0999)Pa·s,流动性较好的液体,在眼部生理条件(34.2±0.1)℃时能够发生相转变形成黏度为(2.0822±0.6172)Pa·s的半固体状态,延长制剂在眼部的滞留时间.凝胶溶蚀与体外释放数据拟合结果表明无膜溶出法更适用于凝胶的体外性质考察,并且包合物的加入能提高药物的溶解度.结论 制得的温敏眼用和厚朴酚包合物原位凝胶能提高药物的溶解度,延长制剂在眼部的滞留时间,有良好的应用前景.

    作者:娄杰;徐才兵;田睿;刘玉祺;郭锋;张良珂 刊期: 2013年第21期

  • 功能性排便障碍患者经腰刺激运动诱发电位的研究

    目的 探讨经腰磁刺激运动诱发电位对功能性排便障碍(functional defecation disorders,FDD)的诊断价值.方法 收集2010年3月至2011年9月本院住院或门诊的FDD患者80例(男性37例,女性43例),年龄23 ~69(53.12±17.60)岁,病程(8.28±6.14)年;同期招募健康志愿者30例作为正常对照组(男性13例,女性17例),年龄19~35(25.67±7.32)岁.通过磁刺激腰骶部,记录肛门外括约肌动作电位潜伏期和波幅变化,观察腰脊神经根到肛门外括约肌的运动神经传导功能.结果 正常对照组检测波幅为400~1100(725.63±178.23) μV,潜伏期为2.6 ~3.7(3.35±0.41)ms.FDD组和正常对照组左右侧MEP各参数比较差异均无统计学意义(P>0.05);与正常对照组比较,FDD组波潜伏期延长,波幅下降,差异有统计学意义(P<0.05).结论 经腰磁刺激运动诱发电位对功能性排便障碍的诊断具有重要价值.

    作者:倪敏;丁曙晴;皇甫少华;周惠芬;王岚 刊期: 2013年第21期

  • 乳牙滞留伴多发性多生牙及恒牙阻生2例

    多生牙是一种牙齿数目的发育异常,可发生于牙弓内任何部位,常见于上颌前牙区,也称为额外牙.恒牙列多生牙发生率国内报道为1%~3%[1],国外报道为1.04%~2.00%[2].多生牙可能由牙胚发育期间形成过多牙蕾或牙胚分裂导致,其牙数常为1~2颗,3颗以上者较为少见[3].多生牙可单独发生,也常合并其他畸形,如腭裂、锁骨颅骨发育不全综合征等[4].我院治疗非综合征性乳牙滞留伴多发性多生牙及恒牙阻生2例,报告如下.

    作者:曾庆香;张碧;孙吉成;刘平;王涛 刊期: 2013年第21期

  • 大鼠骨髓间充质干细胞向膀胱平滑肌细胞分化的标志基因表达受组蛋白乙酰化调控

    目的 通过骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)与膀胱平滑肌细胞(bladder smooth muscle cells,BSMCs)接触共培养探讨组蛋白乙酰化对BMSCs分化能力的影响.方法 分别采用密度梯度离心法和胶原酶消化法培养大鼠BMSCs及BSMCs至第3代,并对BMSCs进行了鉴定;以单独培养的BMSCs作为对照组,接触共培养的BMSCs为实验组;运用免疫荧光化学染色法分别对2组BMSCs中的平滑肌标志性蛋白平滑肌α肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、平滑肌肌球蛋白重链(smooth muscle-myosin heavy chain,SM-MHC)、Calponin进行检测,Western blot检测α-SMA蛋白、Calponin蛋白在BMSCs中的表达,并用微球菌核酸酶(micrococcal nuclease,MNase)对平滑肌3个标志性基因的启动子区进行了染色质开放性的检测,同时运用了ChIP技术分析了α-SMA、SM-MHC启动子区组蛋白乙酰化水平对BMSCs向平滑肌分化的影响.结果 大鼠原代BMSCs流式检测显示CD29表达阳性,阳性率为99.8%,CD31、CD45表达阴性,阳性率为6.30%、1.04%;免疫荧光显示平滑肌3种标志性蛋白的表达均随时间的延长而增加;Western blot结果显示随着共培养天数的增加α-SMA蛋白、Calponin蛋白在实验组中的表达相比对照组有明显的增加;MNase显示实验组的BMSCs启动子区染色质对核酸酶的敏感性明显高于对照组,ChIP显示实验组中BMSCs平滑肌标志性基因α-SMA、SM-MHC、Calponin启动子区H4乙酰化水平较未分化前明显增加(P<0.05).结论 组蛋白乙酰化程度的增加促进了BMSCs向BSMCs分化.

    作者:徐梦遥;王延洲;徐惠成 刊期: 2013年第21期

  • 前列腺特异性膜抗原胞外区的真核表达及其纳米抗体的淘选

    目的 寻找能够特异性与前列腺特异性膜抗原(prostate-specific membrane antigen,PSMA)胞外区结合的纳米抗体.方法 通过RT-PCR技术在真核细胞HEK-293中重组表达PSMA胞外区.以该重组蛋白为包被抗原,采用固相淘选的方法在天然纳米抗体噬菌体展示库中淘选能够与之特异性结合的噬菌体,以Phage-ELISA方法筛选出具有结合活性的噬菌体克隆.通过细胞ELISA和细胞免疫荧光技术再次验证分子水平淘选到的阳性噬菌体克隆.结果 测序证明编码PSMA的重组DNA片段序列正确,Western blot验证该重组蛋白成功表达.4轮固相淘选天然库使具有结合活性的噬菌体克隆得到了有效富集,阳性率从8.3%提高到64.6%.细胞ELISA测值表明PSMA表达阳性细胞明显高于阴性细胞[PSMA+:(0.621±0.043);PSMA-:(0.148±0.014),P<0.01];细胞免疫荧光亦证实分子水平淘选的阳性噬菌体与表达PSMA阳性细胞能发生特异性结合.结论 从天然纳米抗体噬菌体库中淘选得到了在分子和细胞水平均能与PSMA胞外区特异性结合的阳性噬菌体克隆.

    作者:范校周;郭燕丽;涂追;童海鹏;李浪;王洛夫;黄海韵;许杨 刊期: 2013年第21期

  • Osterix基因敲除及过表达对小鼠脊椎骨量的影响

    目的 研究小鼠Osterix基因敲除及过表达后对其脊椎骨量的影响及作用机制.方法 将12周龄的野生型小鼠(WT)、Osterix基因敲除小鼠(Osterix-KO)和Osterix过表达转基因小鼠(Osterix-CA)分为3组(每组8只,均为雄性),分别采用X线摄像和HE染色观察小鼠腰椎骨量的变化,TRAP染色检测破骨细胞水平,免疫组织化学检测NF-KB受体活化因子配体(RANKL)、骨涎蛋白(BSP)和骨桥蛋白(OPN)表达水平,并将所得数据进行统计学分析.结果 OsterixKO小鼠在X线和HE染色表现为腰椎骨密度和骨量增加,破骨细胞数量显著减少(P<0.05),椎体中RANKL、BSP和OPN的表达水平显著降低(P<0.05),而Osterix-CA小鼠的脊椎X线、HE染色表现及破骨细胞数量与WT小鼠无明显差异.结论 Osterix基因敲除小鼠脊柱骨吸收活性减弱伴成骨细胞分化能力降低,进而发生骨量明显增加.

    作者:陈思旭;宗兆文;贾敏;华祥;沈岳;赵玉峰;郭庆山;刘道城 刊期: 2013年第21期

第三军医大学学报杂志

第三军医大学学报杂志

主管:第三军医大学

主办:第三军医大学