曾庆香；张碧；孙吉成；刘平；王涛
目的 通过骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)与膀胱平滑肌细胞(bladder smooth muscle cells,BSMCs)接触共培养探讨组蛋白乙酰化对BMSCs分化能力的影响.方法 分别采用密度梯度离心法和胶原酶消化法培养大鼠BMSCs及BSMCs至第3代,并对BMSCs进行了鉴定；以单独培养的BMSCs作为对照组,接触共培养的BMSCs为实验组；运用免疫荧光化学染色法分别对2组BMSCs中的平滑肌标志性蛋白平滑肌α肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、平滑肌肌球蛋白重链(smooth muscle-myosin heavy chain,SM-MHC)、Calponin进行检测,Western blot检测α-SMA蛋白、Calponin蛋白在BMSCs中的表达,并用微球菌核酸酶(micrococcal nuclease,MNase)对平滑肌3个标志性基因的启动子区进行了染色质开放性的检测,同时运用了ChIP技术分析了α-SMA、SM-MHC启动子区组蛋白乙酰化水平对BMSCs向平滑肌分化的影响.结果 大鼠原代BMSCs流式检测显示CD29表达阳性,阳性率为99.8％,CD31、CD45表达阴性,阳性率为6.30％、1.04％；免疫荧光显示平滑肌3种标志性蛋白的表达均随时间的延长而增加；Western blot结果显示随着共培养天数的增加α-SMA蛋白、Calponin蛋白在实验组中的表达相比对照组有明显的增加；MNase显示实验组的BMSCs启动子区染色质对核酸酶的敏感性明显高于对照组,ChIP显示实验组中BMSCs平滑肌标志性基因α-SMA、SM-MHC、Calponin启动子区H4乙酰化水平较未分化前明显增加(P＜0.05).结论 组蛋白乙酰化程度的增加促进了BMSCs向BSMCs分化.
作者：徐梦遥；王延洲；徐惠成 刊期： 2013年第21期
目的 探讨经腰磁刺激运动诱发电位对功能性排便障碍(functional defecation disorders,FDD)的诊断价值.方法 收集2010年3月至2011年9月本院住院或门诊的FDD患者80例(男性37例,女性43例),年龄23 ～69(53.12±17.60)岁,病程(8.28±6.14)年；同期招募健康志愿者30例作为正常对照组(男性13例,女性17例),年龄19～35(25.67±7.32)岁.通过磁刺激腰骶部,记录肛门外括约肌动作电位潜伏期和波幅变化,观察腰脊神经根到肛门外括约肌的运动神经传导功能.结果 正常对照组检测波幅为400～1100(725.63±178.23) μV,潜伏期为2.6 ～3.7(3.35±0.41)ms.FDD组和正常对照组左右侧MEP各参数比较差异均无统计学意义(P＞0.05)；与正常对照组比较,FDD组波潜伏期延长,波幅下降,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 经腰磁刺激运动诱发电位对功能性排便障碍的诊断具有重要价值.
作者：倪敏；丁曙晴；皇甫少华；周惠芬；王岚 刊期： 2013年第21期
目的 寻找能够特异性与前列腺特异性膜抗原(prostate-specific membrane antigen,PSMA)胞外区结合的纳米抗体.方法 通过RT-PCR技术在真核细胞HEK-293中重组表达PSMA胞外区.以该重组蛋白为包被抗原,采用固相淘选的方法在天然纳米抗体噬菌体展示库中淘选能够与之特异性结合的噬菌体,以Phage-ELISA方法筛选出具有结合活性的噬菌体克隆.通过细胞ELISA和细胞免疫荧光技术再次验证分子水平淘选到的阳性噬菌体克隆.结果 测序证明编码PSMA的重组DNA片段序列正确,Western blot验证该重组蛋白成功表达.4轮固相淘选天然库使具有结合活性的噬菌体克隆得到了有效富集,阳性率从8.3％提高到64.6％.细胞ELISA测值表明PSMA表达阳性细胞明显高于阴性细胞[PSMA+:(0.621±0.043);PSMA-:(0.148±0.014),P＜0.01]；细胞免疫荧光亦证实分子水平淘选的阳性噬菌体与表达PSMA阳性细胞能发生特异性结合.结论 从天然纳米抗体噬菌体库中淘选得到了在分子和细胞水平均能与PSMA胞外区特异性结合的阳性噬菌体克隆.
作者：范校周；郭燕丽；涂追；童海鹏；李浪；王洛夫；黄海韵；许杨 刊期： 2013年第21期
目的 观察全结肠切除回直肠吻合术(ileorectal anastomosis,IRA)和次全结肠切除盲直肠吻合术(caeco-rectal anastomosis,CRA)治疗慢传输型便秘患者的效果,以及对患者营养状况和健康状况的影响.方法 收集5家医院提供的行全结肠切除回直肠吻合术的40例患者,以及行次全结肠切除盲直肠吻合术的32例患者临床资料,对手术资料和术后随访资料进行统计分析,观察患者术前和术后的血红蛋白、总蛋白和白蛋白含量；采用术后全身情况调查表、MNA营养状况调查表、健康调查评分量表(SF-36)、社会生活情况调查表,分析两种手术治疗效果,以及对患者营养状况和健康状况的影响.结果 IRA组和CRA组术后3个月患者对手术满意度为87.5％,术后6个月都在90.0％以上.两组大便次数增多的例数随术后时间延长而减少,与各自术后3个月的例数相比,IRA组术后1年的例数显著减少(P＜0.01),CRA组术后6个月的例数也显著减少(P＜0.05).IRA组和CRA组术后1年应用止泻剂例数显著少于各自术后3个月的例数(P＜0.05,P＜0.01).IRA组术后的血红蛋白和白蛋白含量较CRA组显著增高(P＜0.05).两组MNA营养状况调查指标数值之间无统计学差异(P＞0.05),两组各指标得分均接近高分.两组健康调查评分量表数值之间无统计学差异(P＞0.05).两组的健康状况、情绪问题和对周围生活的感受的得分只有高分的68.8％ ～ 82.4％.结论 IRA和CRA手术能缓解患者便秘症状,术后营养状况良好,健康状况和社会生活受到一定程度的影响.IRA和CRA手术都适用于治疗慢传输型便秘,可根据患者的个体情况选择手术方式.
作者：刘宝华；魏东；杨向东；高峰；钱群；李凡；付涛；屈景辉；任彦武 刊期： 2013年第21期
急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)的发病率逐年增加,早期诊治能有效挽救濒死心肌、降低AMI的病死率及病残率.目前诊断AMI的主要依据是临床胸痛症状、心电图改变以及心肌损伤标志物的增高.因部分患者心电图早期无特异性改变,检测心肌标志物在AMI诊断中起着重要作用,国内外的研究认为肌钙蛋白(cTn)是目前用于诊断心肌损伤较好的确定标志物,但肌钙蛋白Ⅰ (cTn Ⅰ)在AMI 6 h后才出现增高.寻找早期诊断AMI的标志物是当前研究的热点问题.本研究的目的在于观察急性心肌梗死患者血清和肽素、肌钙蛋白浓度的变化及与其严重程度的关系,旨在为急性心肌梗死早期病情判断提供借鉴.
作者：余俊；朱武军；李红霞；杜燕；杨秀林 刊期： 2013年第21期
目的 探讨直肠内脱垂(internal rectal prolapse,IRP)患者直肠顺应性改变与TRPV1、5-HT在直肠黏膜层表达的关系.方法 选择临床诊断IRP的患者20例及对照组20例先进行肛管直肠测压,然后行结肠镜检查,在齿状线上方4cm处下段直肠取黏膜活检,行TRPV1和5-HT免疫组化染色,采用图像分析法分析免疫反应阳性情况.结果 与对照组比较,IRP组初始感觉容积明显增高(Z=-3.710,P＜0.01),大感觉耐受容积明显降低(Z=-5.181,P＜0.01),直肠顺应性明显降低；对照组黏膜层仅有少量TRPV1表达,IRP组直肠黏膜腺体可见大量TRPV1阳性染色,与对照组相比,IRP组直肠黏膜层TRPV1的表达显著增强(Z=-5.085,P＜0.01)；对照组黏膜层5-HT免疫阳性染色很少,而IRP组黏膜层腺体细胞内5-HT表达量显著升高(Z=-4.734,P＜0.01).结论 IRP患者直肠顺应性明显低于对照组,与直肠黏膜层TRPV1和5-HT免疫反应阳性显著增强导致直肠高敏感有关,可能是IRP患者肛门坠胀、便意频繁等排便功能障碍的机制之一.
作者：张鑫；田跃；童卫东；李凡；王李；赵松；叶景旺；刘宝华 刊期： 2013年第21期
目的 探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(apurinic/apyrimidinic endonuclease,APE1)和p53蛋白内源性和外源性相互结合作用.方法 将重组质粒pET42a-hAPE1转染E.coli BI21(DE3),应用IPTG诱导GST-APE1蛋白表达,鉴定后经金属螯合层析技术纯化,通过Western blot鉴定纯化蛋白,得到GST-APE1融合蛋白.免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)和GST蛋白沉降实验分别检测内源性和外源性APE1和p53蛋白结合作用,免疫荧光标记结合激光共聚焦显微镜技术确定APE1和p53蛋白亚细胞定位.结果 转染质粒经IPTG诱导表达,应用SDS-PAGE发现GST-APE1在预期位置64×103处存在阳性条带,“Ni”柱纯化后得到GST-APE1融合蛋白,通过Western blot鉴定.免疫共沉淀和GST蛋白沉降实验证实APE1和p53存在内源性和外源性结合作用.激光共聚焦显微镜观察免疫荧光标记的APE1和p53蛋白均为核浆共表达蛋白,氧化应激处理后,蛋白逐渐由胞浆向胞核移位,二者共定位于核膜处较明显.结论 APE1和p53蛋白在A549和HeLa细胞中存在内源性和外源性结合作用,可能与其转录调控及肿瘤放化疗疗效有关.
作者：张翀；李梦侠；程燚；李增鹏；王阁；王东；杨镇洲 刊期： 2013年第21期
目的 初步探讨EphrinB2/EphB4信号在牙槽骨吸收及骨重建过程中的表达及其意义.方法 采用RT-PCR及Western blot方法分别检测小鼠RAW264.7细胞体外诱导前后、小鼠MC3T3-E1细胞骨吸收上清处理前后EphrinB2及EphB4的表达情况.以免疫组化(S-P)法、免疫荧光等方法检测大鼠实验性牙槽骨吸收模型牙体牙周联合标本中EphrinB2、EphB4的表达情况.结果 EphrinB2和EphB4在小鼠RAW264.7细胞、MC3T3-E1细胞中均有明显的表达,骨吸收上清作用于MC3T3-E1细胞后,分化的成骨细胞EphrinB2表达量(17.53±0.43)较阴性对照组(15.67±0.45)有显著升高(P＜0.01)；采用E-LPS注射法成功制备了稳定、可靠的实验性大鼠牙槽骨吸收模型,模型中免疫荧光结果可见EphB4和EphrinB2分别在牙槽骨缘成骨细胞及破骨细胞存在区的高信号.结论 EphrinB2/EphB4信号参与了骨吸收-重建过程,成骨细胞和破骨细胞均可共表达EphrinB2/EphB4并可能存在成骨细胞间的EphrinB2/EphB4传导完成促进成骨活动.
作者：雷利红；黄玫；吴燕岷；陈莉丽 刊期： 2013年第21期
目的 探讨结肠传输试验在慢传输型便秘(slow transit constipation,STC)诊治中的价值和意义.方法 收集2007年9月至2013年5月于我院行结肠传输试验的414例受检者的资料,包括男性87例,女性327例,年龄13～82岁,平均45.9岁,临床表现大便次数减少、便意减弱,可伴随有大便于结、排便费力,部分患者需要手助排便,病程3～37年,平均10.7年,病情符合罗马Ⅲ诊断标准.受检者口服含有20粒不透光标记物的胶囊,观察其在服药后24、48、72 h腹部立位片中标记物的分布情况,比较各组标记物数量的差异.结果 414例按72 h残留于大肠的标记物的数量进行分组,＞20％为阳性组,≤20％为阴性组,阳性组197例,阴性组217例.两组在各时间点差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 结肠传输试验可以如实地反映在人群结肠传输功能方面确实存在的不同程度的异常,结肠传输试验宜反复、多次检查,使结果更为准确.
作者：赵松；刘宝华；付涛；李光焰；龚水根；王郜 刊期： 2013年第21期
目的 利用虚拟现实技术模拟人体枕下乙状窦后入路显露颈静脉孔区的局部解剖特征.方法 5例成人尸体头颅行头颅CT和MRI扫描,动脉系统和静脉系统依次灌注混合造影剂乳胶.分别于2次灌注后再次行头颅CT扫描.按照枕下乙状窦后入路解剖两侧尸体头颅,切除部分小脑半球显露脑干和颅神经,再次行头颅MRI扫描,影像数据输入Vitrea虚拟现实系统构建颈静脉孔区三维解剖模型并且模拟枕下乙状窦后入路.分别于尸体头颅和计算机模型中选择内听道入口上缘,颈静脉孔前缘,颈静脉孔后缘为骨性标志点测量距离,采用Bland-Altman方法进行测量结果一致性检验.结果 虚拟现实颈静脉孔区三维解剖模型中神经、血管和骨性结构的空间关系清晰显示,尸体头颅标本和计算机模型中测量内听道入口上缘-颈静脉孔前缘、内听道入口上缘-颈静脉孔后缘以及颈静脉孔前后缘之间连线距离,经Bland-Altman检验,偏倚分别为0.060、0.062和0.017,95％可信区间分别为-0.255 ～0.375、-0.357～0.481和-0.265～0.299,绘制散点图显示一致性良好.结论 颈静脉孔区的三维解剖模型数据测量经尸体头颅解剖验证其准确性良好.
作者：汤可；周敬安；周青；赵亚群；刘策 刊期： 2013年第21期
目的 探讨脉冲多普勒(PW)、M型(MME)、实时三维容积(RT-3 DE)超声心动图在右室双出口及法洛四联症胎儿右心功能检测中的应用价值.方法 采用PW、MME、RT-3DE三种方法,分别测量30例右室双出口及法洛四联症胎儿和30例正常胎儿的Tei指数、右室舒张末期容积(right ventricular end-diastolic volume,RVEDV)、收缩末期容积(right ventricular end-systolic volume,RVESV)、每搏量(stroke volume,sv)和射血分数(ejection fraction,EF)等指标,并进行对比分析.结果 PW测量异常组胎儿右室Tei指数为(0.48±0.09),正常组为(0.36±0.05),异常组测值明显高于正常组；MME与RT-3DE测量的异常组胎儿右室EF分别为(60.04 ±7.69)、(52.04 ±7.26),差异有统计学意义(P＜0.05)；PW测量的Tei指数与RT-3DE的ROC诊断曲线较一致,与MME差异较大.结论 RT-3DE可不依赖于任何解剖假设准确地评价胎儿心功能,且具有较好的重复性；由于右心室形态的不规则,MME在心室内径的测量上存在较大的误差,其相关测值的准确性和可重复性均较RT-3DE差.
作者：李晓瑜；郑俊平；蒋演；李佩倞；高云华；夏红梅 刊期： 2013年第21期
目的 研制温度敏感型眼用和厚朴酚羟丙基-β-环糊精包合物原位凝胶(HK-HPCD-Gel).方法 以溶液搅拌法制备和厚朴酚羟丙基-β-环糊精包合物(HK-HPCD),泊洛沙姆407(P407)和泊洛沙姆188 (P188)为凝胶基质,冷溶法制备HK-HPCD-Gel；用不同方法分别考察凝胶的溶蚀与体外释药行为并进行数据拟合.结果 制备得到的HK-HPCD-Gel在室温下黏度为(0.1894±0.0999)Pa·s,流动性较好的液体,在眼部生理条件(34.2±0.1)℃时能够发生相转变形成黏度为(2.0822±0.6172)Pa·s的半固体状态,延长制剂在眼部的滞留时间.凝胶溶蚀与体外释放数据拟合结果表明无膜溶出法更适用于凝胶的体外性质考察,并且包合物的加入能提高药物的溶解度.结论 制得的温敏眼用和厚朴酚包合物原位凝胶能提高药物的溶解度,延长制剂在眼部的滞留时间,有良好的应用前景.
作者：娄杰；徐才兵；田睿；刘玉祺；郭锋；张良珂 刊期： 2013年第21期
作者：刘诗；巴莹 刊期： 2013年第21期
1 临床资料患者,男性,43岁,主诉:左下后牙疼痛3d.现病史:患者自述1年前左下后牙曾于外院行充填治疗,2周前充填物脱落,3d前感左下后牙冷热刺激痛,偶有自发痛,来我院就诊.既往史:平时体质较好,自述有支气管炎症史,否认传染病病史,否认药物过敏史.检查:全口卫生差,牙石Ⅱ度,软垢Ⅰ度,色素Ⅰ度,牙龈充血,无退缩.34牙颊侧楔形缺损,已累及髓腔,冷(+),探(+),叩(+),松动度(-),牙龈未见明显异常(图1A).
作者：刘建党；王慧霞；陈永进；张旻 刊期： 2013年第21期
作者：方秀才 刊期： 2013年第21期
目的 了解医务人员血源性职业暴露的心理健康状况、创伤后应激障碍发生率及与应对方式的相关性,探讨其有效的预防模式及心理干预对策.方法 采用回顾性问卷调查方式,运用症状自评量表,PTSD自评量表及简易应对方式问卷,调查2011年6月至2012年11月213人血源性职业暴露的医务人员.结果 医护人员血源性职业暴露后SCL-90总分、躯体化、人际关系敏感、抑郁、焦虑、恐怖因子分显著高于常模(P＜0.05)；PCL-C总分为14 ～ 58(32.69±10.73)分,3类症状再体验、回避、警觉的得分为(10.67 ±3.78)、(11.56 ±4.98)、(10.01 ±5.76),PTSD阳性率为16.90％.积极应对方式显著高于常模(P＜0.05).积极应对方式与SCL-90总分、焦虑、抑郁、敌对、偏执呈显著负相关(r分别为-0.138、-0.365、-0.201、-0.188、-0.235,P＜0.05).消极应对方式与SCL-90总分、人际关系敏感、抑郁、焦虑、敌对、恐怖、偏执、精神病性、PTSD总分、再体验、回避、警觉呈显著正相关(r分别为0.194、0.141、0.401、0.354、0.201、0.436、0.308、0.323、0.269、0.286、0.315、0.287,P＜0.05).消极应对方式可以预测心理健康水平及PTSD的发生(Beta分别为0.186、0.152).结论 医护人员血源性职业暴露后心理健康状况不容乐观,PTSD的发生率较高,应给予正确指导和心理干预,采取更有效的应对方式.
作者：谷珊珊；宫海燕；何梅 刊期： 2013年第21期
目的 研究小鼠Osterix基因敲除及过表达后对其脊椎骨量的影响及作用机制.方法 将12周龄的野生型小鼠(WT)、Osterix基因敲除小鼠(Osterix-KO)和Osterix过表达转基因小鼠(Osterix-CA)分为3组(每组8只,均为雄性),分别采用X线摄像和HE染色观察小鼠腰椎骨量的变化,TRAP染色检测破骨细胞水平,免疫组织化学检测NF-KB受体活化因子配体(RANKL)、骨涎蛋白(BSP)和骨桥蛋白(OPN)表达水平,并将所得数据进行统计学分析.结果 OsterixKO小鼠在X线和HE染色表现为腰椎骨密度和骨量增加,破骨细胞数量显著减少(P＜0.05),椎体中RANKL、BSP和OPN的表达水平显著降低(P＜0.05),而Osterix-CA小鼠的脊椎X线、HE染色表现及破骨细胞数量与WT小鼠无明显差异.结论 Osterix基因敲除小鼠脊柱骨吸收活性减弱伴成骨细胞分化能力降低,进而发生骨量明显增加.
作者：陈思旭；宗兆文；贾敏；华祥；沈岳；赵玉峰；郭庆山；刘道城 刊期： 2013年第21期
目的 研究蒿甲醚自微乳化释药系统处方组成和体外特性.方法 通过溶解度实验、伪三元相图绘制和正交实验设计筛选优化蒿甲醚自微乳化处方.以自乳化速率、粒径、稳定性和体外溶出度为指标评价自乳化微乳系统体外特性.结果 蒿甲醚自微乳化释药系统的佳处方选择Lauroglycol 90为油相,Cremophor RH 40为乳化剂,Gelucire 44/14为助乳化剂,佳配比为4∶4∶2,其中蒿甲醚的载药量为80 mg/g.自制的ARM-SMEDDS均在2 min以内完成自微乳化,粒径为(61.50±8.66) nm,常温下3个月基本保持稳定,体外溶出度结果显示120 min即能达到＞99.5％的溶出率,累积溶出百分率为原料药的7倍.结论 所制备的ARM-SMEDDS外观和稳定性良好,能显著提高体外溶出度.
作者：张亚红；林凤云；邱妍川；朱照静 刊期： 2013年第21期
目的 观察NF-кB信号通路阻断剂吡咯烷二硫氨基甲酸在骨髓间充质干细胞移植治疗糖尿病小鼠创面愈合中的作用.方法 分离培养GFP+小鼠骨髓间充质干细胞.链脲佐菌素诱导C57小鼠糖尿病.小鼠背部制作直径6 mm的皮肤缺损创面.实验动物分为4组:①NC组:正常小鼠对照；②DC组:糖尿病小鼠对照；③MSC1组:糖尿病小鼠移植MSCs(每个创面2.5×105个细胞注射于创缘皮下)；④MSC2组:糖尿病小鼠移植MSCs,同时腹腔注射PDTC(50 mg/kg).细胞移植后观察创面愈合情况,同时切取创面组织制备切片行HE染色、免疫组织化学染色.结果 MSC2组小鼠创面的愈合率明显高于MSC1组和DC组(P＜0.05).HE染色发现MSC2组创面愈合过程及血管形成优于MSC1组和DC组.免疫组织化学VEGF检测显示创面形成第11天,MSC2组(33.51±2.40)的表达明显增强,与DC组(26.07±4.50)和MSC1组(18.71 ±7.14)相比较,差异显著(P＜0.05).MSC2组NF-кB p65荧光强度(35.20±18.77)明显减弱,与DC组(130.64±16.35)和MSC1组(56.80±16.35)相比,差异显著(P＜0.05).第14天创面中GFP荧光信号显示MSC2组创面中GFP+阳性细胞IOD值(135.20±11.84)明显大于MSC1组(46.81±22.37),差异显著(P＜0.05).结论PDTC阻断NF-кB通路,能够促进骨髓间充质干细胞在糖尿病创面愈合中的作用,加速创面愈合.
作者：张玉龙；毋巨龙；高晓康；戴霞；杨忠；刘彦龙；李世荣 刊期： 2013年第21期
作者：刘宝华；付涛 刊期： 2013年第21期
第三军医大学学报杂志
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