任玉香;袁吉钊;吴凤英;廖湘如
目的 对大鼠视网膜墨汁灌注方法进行改良以充分显示微血管.方法 78只SD大鼠分两部分进行实验.第一部分中, 72只大鼠根据灌注液中明胶的浓度分为纯墨汁组(n=18)、1%明胶墨汁组(n=18)、3%明胶墨汁组(n=18)、5%明胶墨汁组(n=18).每组动物根据灌注压强分为90、115、140、165、190、215 mmHg 6个亚组.墨汁从升主动脉进行灌注.用视网膜铺片和切片检测微血管的灌注情况.根据第一部分结果,在第二部分中,6只大鼠先后灌注3%明胶墨汁和5%明胶墨汁各20 ml.用上面相同的方法检测微血管的灌注情况.结果 在165 mmHg压强下灌注37 ℃的 3%明胶墨汁时,视网膜周边部的血管充填充分,但中央部的血管充填不充分.在215 mmHg压强下灌注37 ℃的5%明胶墨汁时,视网膜周边部的血管充填不充分,但中央部的血管充填充分.在165 mmHg压强下灌注3%明胶墨汁20 ml,再在215 mmHg压强下灌注5%明胶墨汁20 ml能使视网膜中央部和周边部的大小血管都充填充分,且墨汁无外渗、在水溶液中不褪色、灌注血管与周边组织对比明显.结论 在165 mmHg恒压下灌注37 ℃的3%明胶墨汁20 ml,再在215 mmHg恒压下灌注37 ℃的5%明胶墨汁20 ml是一种较好的显示大鼠视网膜微血管的形态学方法.
作者:童建斌;曾乐平;陈旦;周瑾;黄菊芳;罗学港 刊期: 2007年第21期
由全军医学科学技术委员会骨科专业委员会主办、第三军医大学西南医院承办的第十届全军骨科学术大会于2007年9月21日到23日在重庆召开.大会共收到来自101个单位的稿件1 438篇,参会代表千余名.
作者:许建中 刊期: 2007年第21期
异位妊娠是常见的妇科急症,以输卵管妊娠发病率高,治疗以手术为主.输卵管妊娠的手术方式包括输卵管切除和输卵管保守手术.由于保守手术在保留患者生育功能方面较根治术更为有利,因此成为很多有生育要求的患者首选治疗方式,然而保守手术,不论采用开腹或是腹腔镜方式,都可能发生一种并发症,即持续性异位妊娠(persistent ectopic pregnancy,PEP).
作者:雷玲 刊期: 2007年第21期
目的 采用大鼠肾上腹主动脉部分结扎的模型,观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对心房缝隙连接蛋白(connexin,Cx)40重构的影响及贝那普利的干预效果.方法 将30只雄性Wistar大鼠随机数字表法分为对照组(C组)、腹主动脉结扎组(A组)、结扎+贝那普利组(B组).喂养8周后处死,用放射免疫法测血浆及心肌组织AngⅡ含量,用免疫组化方法检测大鼠心房Cx40的分布特征,半定量分析Cx40的含量.结果 与C组相比,A组血浆、心肌AngⅡ含量均明显升高(P《0.01),而B组则无明显变化(P》0.05).A组大鼠心房Cx40含量减少(P《0.01),并向侧边分布增加;而B组Cx40含量较A组增加(P《0.01),且分布不均一程度减轻.结论 AngⅡ升高可导致心房Cx40重新分布和表达减少;贝那普利通过降低AngⅡ水平,可有效减轻心房Cx40的重构.
作者:邵鹏;张卫泽;陈永清;马凌;张明旭 刊期: 2007年第21期
目的 建立体外培养神经细胞的化学缺氧预处理实验模型.方法 分化的SH-SY5Y细胞分为对照组、化学缺氧组、化学缺氧预处理组.用MTT法筛选合适的化学缺氧预处理和化学缺氧浓度.然后,分化的SH-SY5Y细胞随机分为对照组、化学缺氧组(250 μmol/L CoCl2,24 h)、化学缺氧预处理组(75 μmol/L CoCl2,1.5 h,常氧3 h后,250 μmol/L CoCl2,24 h).实验终点测乳酸脱氢酶释放率,并用MTT法检测细胞活力,以此来评价化学预缺氧对神经细胞化学缺氧的保护作用.结果 化学缺氧预处理组细胞较化学缺氧组细胞存活率高、乳酸脱氢酶释放率减少,说明用CoCl2化学预缺氧可保护神经细胞对化学缺氧产生耐受.结论 建立了简单易行、重复性好,可进一步应用于阐明缺氧预处理保护机制的神经细胞化学缺氧预处理实验模型.
作者:孙胜;高文祥;廖卫公;高钰琪 刊期: 2007年第21期
目的 探讨主要组织相容性复合物(major histocompatibility complex,MHC)Ⅱ类反式激活因子(class Ⅱ transactivator , CⅡTA)在调控HepG2细胞HLAⅡ类分子表达中的作用.方法 将含CⅡTA cDNA的真核表达载体EBS-NPL-CⅡTA和不含CⅡTA cDNA的空载体EBS-NPL分别转染至HepG2细胞.用RT-PCR技术检测未经转染的HepG2细胞、转染EBS-NPL-CⅡTA及空载体EBS-NPL的HepG2细胞CⅡTA mRNA的表达,并用间接细胞免疫荧光技术及流式细胞技术检测其3种HLAⅡ类分子(HLA-DR、DP、DQ)的表达.结果 未经转染的HepG2细胞和转染空载体EBS-NPL的HepG2细胞均无CⅡTA mRNA和HLAⅡ类分子的表达.转染EBS-NPL-CⅡTA后的HepG2细胞出现CⅡTA mRNA表达,并表达3种HLAⅡ类分子.结论 CⅡTA是调控HepG2细胞是否表达HLAⅡ类分子的关键因子,HepG2细胞不表达HLA-Ⅱ类分子与其缺乏CⅡTA表达有关,为进一步研究CⅡTA在肝癌治疗中的作用奠定基础.
作者:柏秀娟;张绪清 刊期: 2007年第21期
癌症患者合并糖尿病(diabetes mellitus,DM)在临床上十分常见,并有逐年增多的趋势.癌症伴糖尿病患者的饮食指导是临床护理工作感到棘手的问题[1].癌症患者放、化疗期间、围手术期间的DM处理已成为临床各科和内分泌科医生共同面对的难题.现总结近10 年来癌症合并DM营养治疗经验,报告如下.1 资料与方法
作者:李明秀;王建;樊荣;姜学英;刘俊;卿鑫 刊期: 2007年第21期
目的 观察Wnt5a在髓细胞白血病中的表达以及外源性Wnt5a对K562细胞生长的影响.方法 RT-PCR检测5例急性髓细胞白血病、6例慢性髓细胞白血病外周血或骨髓标本及白血病细胞系中Wnt5a的表达.用AdWnt5a和AdGFP腺病毒转染CHO细胞制备的条件培养液分别处理K562细胞1~5 d,采用细胞计数、台盼蓝染色、细胞形态等方法观察Wnt5a对K562细胞生长影响.结果 6例慢性髓细胞白血病均未表达Wnt5a,5例急性髓细胞白血病中4例不表达或弱表达,仅1例完全缓解的病人高表达Wnt5a.K562、HL-60细胞中Wnt5a也不表达,Jurkat细胞高表达.以GFP条件培养液处理细胞为对照,Wnt5a条件培养液处理K562细胞生长明显受到抑制,但未影响细胞的存活率.与对照相比细胞形态上出现了分化的表型.结论 Wnt5a在急慢性髓细胞白血病外周血或骨髓中以及髓系白血病细胞株中均表达缺失或降低,并且外源性的Wnt5a可抑制K562细胞生长并有诱导其分化的现象,提示Wnt5a的表达下调可能与髓细胞白血病的发生有关.
作者:袁媛;李招权;司维柯;潘静;赵宸 刊期: 2007年第21期
目的 探讨转录因子激动蛋白-2α(activator protein 2α, AP-2α)对脑外伤后蓝斑去甲肾上腺素能神经元中酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase, TH)表达的影响.方法 将90只Wistar大鼠分为对照组和脑外伤组,脑外伤组又分为外伤后1、3、6、24、72 h共5个组(n=15).用Feeney氏法制作机械性脑外伤大鼠模型,分别于脑外伤后各相应时间点取出脑干,对蓝斑(locus ceruleus, LC)所在部位作冷冻切片,用免疫荧光双标检测TH和AP-2的表达,观察二者在外伤后各相应时间点LC神经元中的表达变化.结果 在脑外伤后各时段,LC神经元的TH和AP-2α 阳性细胞数量和荧光强度值均比对照组明显增加(P《0.05),3 h达到高峰,随后逐渐降低,但72 h仍然高于对照组;而且TH和AP-2α的表达变化趋势基本一致,在同一神经元可以共表达.结论 机械性脑外伤使LC去甲肾上腺素能神经元中TH表达增加,使去甲肾上腺素(norepinephrine, NE)合成增多,NE在外伤应激过程中起着重要作用;AP-2α参与了TH的表达调控,AP-2α上调可能是导致了TH表达增加的重要原因.
作者:余维华;孙善全;汪克建;杨美;刘辉;贺桂琼 刊期: 2007年第21期
目的 探讨射频消融(radiofrequency ablation, RFA)联合醋酸加氯化钠治疗肝肿瘤对消融体积的影响.方法 12例直径>5 cm的肝肿瘤患者分为治疗组(6例)和对照组(6例),治疗组在术中先行单次RFA联合醋酸加氯化钠治疗,对照组行单纯RFA治疗,两组均在治疗后切除肿瘤,观察毁损体积.结果 治疗组单次治疗后肿瘤毁损长径6.11 cm,短径5.26 cm;对照组肿瘤毁损长径3.66 cm,短径3.25 cm.结论 RFA联合醋酸加氯化钠治疗肝肿瘤可使一次性毁损体积增加,治疗时间相对延长.
作者:陈敏;高峻;马宽生;刘念洲;王曙光 刊期: 2007年第21期
正确了解病原菌的分布和构成,掌握其对抗菌药物的耐药情况,对临床合理使用抗菌药物具有重要的指导意义.本研究总结了我院1998-2005年从住院患者标本中分离出的病原菌分布以及对常用抗菌药物的药敏分析,现将结果报告如下.1 材料与方法
作者:何晓锋;曹晋桂;焦力群;张虎;张爱云;马文杰;吴镝;王敏 刊期: 2007年第21期
目的 Muc3的羧基端在翻译后经历了蛋白酶切反应,探讨Muc3的羧基端蛋白酶切反应发生是否与其羧基端内的N型糖链有关.方法 截断了的Muc3的羧基端(含完整的SEA组件)(p20SEA)采用定点突变方法在所要求的位点插入终止密码子,所表达蛋白质的检测采用pulse/chase和免疫共沉淀方法或SDS/PAGE和Western印迹方法,所表达蛋白质的N型糖链合成抑制采用Tunicamycin处理转染的COS-1细胞.结果 p20表达产物(完整的Muc3羧基端产物)经历了翻译后蛋白酶切,产生30×103的氨基端酶切片段和49×103的羧基端酶切片段;Tunicamycin处理后主要的表达蛋白是60×103的全长的非糖基化产物,22×103的少量氨基端酶切片段和41×103的羧基端酶切片段;p20SEA表达产物(含完整的SEA组件但不含SEA组件后续氨基酸的截断Muc3羧基端)抑制N型糖链出现未酶切的36×103全长产物和22×103酶切的非N糖基化产物.结论 大鼠Muc3羧基端在抑制其N型糖链合成后出现Muc3的羧基端蛋白酶切的抑制.
作者:李宜成;何勇虹;彭志红;汪荣泉 刊期: 2007年第21期
CT能同时显示胸廓骨折及胸腹脏器损伤征象,且比平片更敏感,但关于胸部外伤中胸腹脏器损伤与胸廓骨折部位和类型间的关系尚缺乏深入研究.本研究对312例胸部外伤的CT检查资料进行回顾性分析,着重从CT角度探讨胸外伤中胸腹脏器损伤与胸廓骨折部位和类型间的关系及临床意义.
作者:钱新初;唐肇普;刘三军 刊期: 2007年第21期
目的 设计特异性stealth siRNA并检测其对TGF-β1的抑制作用.方法 针对BALB/c小鼠TGF-β1基因组,选择不同位点设计3套siRNA基因序列,并经化学修饰合成3种stealth siRNA,转染体外培养的小鼠肺成纤维细胞,免疫组化法检测其对TGF-β1表达的影响. 结果 3种stealth siRNA对TGF-β1表达在不同时间有不同程度的抑制作用,以stealth_166效果更为明显;抑制效果与转染时间长短相关,48 h后就可检测出明显抑制,72 h达到高峰,96 h后开始减弱.结论 合成的特异性stealth siRNA可以抑制TGF-β1在小鼠肺成纤维细胞的表达,有望成为防治肺间质纤维化的一种手段.
作者:余维涛;崔社怀;杨雪梅 刊期: 2007年第21期
目的 通过检测辛伐他汀体外对K562细胞和裸鼠慢性粒细胞白血病组织(CML)K562细胞的影响,同时分别检测辛伐他汀处理后K562细胞PI3K-AKT信号通路中 mRNA水平的变化,比较辛伐他汀在体内外所引起PI3K-AKT信号通路的分子变化,以分析辛伐他汀诱导K562细胞凋亡的机制.方法 体外培养CML 细胞株K562细胞,MTT噻唑蓝法检测细胞增殖抑制率.流式细胞术检测辛伐他汀作用后的细胞周期和凋亡率的变化.另外,12只BALB/c-nu/nu裸小鼠皮下接种K562细胞,构建Balb/c-nu/nu裸小鼠的慢性粒细胞白血病动物模型,采用缺口末端标记技术TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)法检测辛伐他汀诱导K562细胞早期凋亡的变化,用RT-PCR检测辛伐他汀在体内外K562细胞后N-ras分子和N-ras分子下游的PI3K-AKT信号通路的N-ras、PI3K、AKT1、IKK-β、NF-κB1 mRNA水平的变化.结果 辛伐他汀在体外能抑制K562细胞的增殖,使K562细胞停滞在G0/G1期,明显诱导K562细胞凋亡,PI3K-AKT信号通路大多数基因出现差异表达.不同剂量的辛伐他汀能够诱导裸鼠体内K562细胞凋亡,并随剂量的增加凋亡率逐渐增高(P=0.000 );不同剂量的辛伐他汀能够引起PI3K、AKT1、NF-κB、IKK-β mRNA的明显差异表达(P=0.000,P=0.003).但体外实验中的PI3K-AKT信号PI3K、AKT1 mRNA水平的变化与体外实验PI3K、AKT1 mRNA水平的变化呈现相反的差异表达.结论 辛伐他汀体外能够引起参与K562细胞凋亡的N-ras分子和N-ras分子下游的PI3K-AKT信号通路的基因 mRNA水平的变化,从一定角度说明辛伐他汀能依赖PI3K-AKT信号通路诱导K562细胞及其移植瘤细胞凋亡.但体内外实验存在不同的凋亡诱导机制.
作者:周定安;黄文芳;张明川;赵慎;许毅 刊期: 2007年第21期
目的 构建人β3肾上腺素受体 (β3-AR)的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-β3-AR,并通过脂质体介导转染HEK293细胞使之表达该受体蛋白.方法 以pENTR_ADRB3-Stop质粒为模板,采用PCR法扩增出人β3-AR cDNA,将其插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建成真核表达质粒pcDNA3.1(+)-β3-AR.将该质粒转染HEK293真核细胞,通过RT-PCR检测β3-AR mRNA在HEK293细胞内的表达,通过免疫荧光法检测β3-AR蛋白在HEK293细胞中的表达.结果 酶切和DNA测序鉴定均证实重组质粒含有人β3-AR编码区全长.在转染重组质粒pcDNA3.1(+)-β3-AR的HEK293细胞中检测到了β3-AR基因的转录和翻译产物.结论 通过基因工程方法成功构建了β3-AR的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-β3-AR,为进一步建立β3-AR的稳定表达细胞株,用于筛选高效、高选择性β3-AR激动剂奠定了基础.
作者:曾凡新;董志;傅洁民;刘晓海 刊期: 2007年第21期
目的 了解深圳地区人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)亚型的分布情况,并评价不同亚型的HPV在宫颈病变中的临床意义.方法 用导流反斑点杂交法对深圳市人民医院2003-2004年352例尖锐湿疣标本进行9~20种HPV亚型基因分型,结合临床病理检查结果分析HPV亚型分布情况及与不同宫颈病变的关系.结果 深圳地区尖锐湿疣患者中HPV亚型分布较广泛,主要亚型以低危型11和6型为主,多重HPV感染率接近总感染率的37%;在宫颈尖锐湿疣中主要的HPV亚型是高危型,尤其在子宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)Ⅱ+ 以上的宫颈病变中,感染率高的依次为以16、18、58、52和33型.结论 深圳地区尖锐湿疣以HPV11和6感染为主.HPV16、18等高危型HPV亚型可能是深圳地区导致宫颈恶性病变主要原因.
作者:唐敏;戴勇;吕晓萍;李体远 刊期: 2007年第21期
乳腺癌是一种严重威胁妇女健康的全身性疾病,目前乳腺癌的治疗仍采取以手术为主的综合治疗,而化疗在乳腺癌综合治疗中发挥重要作用.术前化疗的目的是降低肿瘤细胞增殖活力,使瘤体缩小;减少术中肿瘤转移扩散机会;估计化疗敏感性,以便选择后续化疗药物[1],术后化疗目的是防止复发和转移.由于乳腺癌患者化疗周期长,药物刺激性大以及自身特点容易引起化疗性静脉炎,现将其原因分析及对策介绍如下.1 临床资料
作者:陈显春;杨英;宋爽;颜贤惠;王泽惠;王寅欢 刊期: 2007年第21期
目的 探讨PTEN基因小鼠胚胎着床过程中的作用.方法 实时荧光定量聚合酶链反应( real-time fluorescence quantitative PCR ,FQ -PCR)分别检测未孕及孕1、3、4、5、7 d(分别记为d0、d1、d3、d4、d5、d7)小鼠子宫内膜PTEN基因mRNA的表达和子宫角注射反义寡核苷酸观察胚泡着床数.结果 FQ-PCR测得妊娠的子宫内膜组织PTEN的表达高于未妊娠的子宫内膜组织,且随着妊娠天数的增加呈现逐渐增加的趋势,到妊娠第5天达到高.子宫角注射PTEN反义寡核苷酸后胚泡着床数明显减少.结论 PTEN在妊娠早期子宫内膜持续表达,可能参与了胚泡着床.
作者:陈晓玲;杨戎;贾咏存;刘孝云;魏莎莉 刊期: 2007年第21期
肉毒杆菌分泌的肉毒素中毒是属于神经型食物中毒,常因进食被肉毒杆菌污染的腌肉、制作不良的罐头食品以及食用豆瓣酱、臭豆腐及不新鲜的鱼、猪肉、猪肝等而发病.在已报道的各类食物中毒中,肉毒中毒的报道相对不多见.
作者:蓝弘 刊期: 2007年第21期