学术投稿

美满霉素对脑缺血再灌注大鼠脑组织COX-2、NF-κB表达的影响

蔡志友;余昌胤;晏勇;张骏;黄良国;袁胜山;王凤英

关键词:脑缺血再灌注, 美满霉素, 环氧合酶-2, 核转录因子-κB
摘要:目的 观察美满霉素对脑缺血再灌注大鼠COX-2、NF-κB表达的影响.方法 54只Wistar大鼠,适应性喂养1周,分为:正常组(N组)、假手术组(NS组)、美满霉素对照组(M组)、美满霉素预处理组(MP组),美满霉素治疗组(MT组),缺血再灌注组(IR组).HE染色观察大鼠脑组织的病理改变;采用免疫组织化学法检测大鼠脑组织COX-2、NF-κB的表达,用图像分析仪测定光密度值.结果 NF-κB p65和COX-2光密度值、阳性细胞百分率MP组较NS组明显增高(P《0.01),较IR组明显降低(P《0.01).MT组较NS组明显增高(P《0.01),较IR组明显降低(P《0.05).结论 美满霉素能抑制大鼠脑缺血再灌注后脑组织COX-2、NF-κB的表达,发挥脑保护作用.
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    目的 探讨转录因子激动蛋白-2α(activator protein 2α, AP-2α)对脑外伤后蓝斑去甲肾上腺素能神经元中酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase, TH)表达的影响.方法 将90只Wistar大鼠分为对照组和脑外伤组,脑外伤组又分为外伤后1、3、6、24、72 h共5个组(n=15).用Feeney氏法制作机械性脑外伤大鼠模型,分别于脑外伤后各相应时间点取出脑干,对蓝斑(locus ceruleus, LC)所在部位作冷冻切片,用免疫荧光双标检测TH和AP-2的表达,观察二者在外伤后各相应时间点LC神经元中的表达变化.结果 在脑外伤后各时段,LC神经元的TH和AP-2α 阳性细胞数量和荧光强度值均比对照组明显增加(P《0.05),3 h达到高峰,随后逐渐降低,但72 h仍然高于对照组;而且TH和AP-2α的表达变化趋势基本一致,在同一神经元可以共表达.结论 机械性脑外伤使LC去甲肾上腺素能神经元中TH表达增加,使去甲肾上腺素(norepinephrine, NE)合成增多,NE在外伤应激过程中起着重要作用;AP-2α参与了TH的表达调控,AP-2α上调可能是导致了TH表达增加的重要原因.

    作者:余维华;孙善全;汪克建;杨美;刘辉;贺桂琼 刊期: 2007年第21期

  • bFGF-PLA-Ns对体外培养成骨细胞增殖、分化及矿化的影响

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    作者:张纲;亓连军;谭颖徽;卢来春;裘松波;何飞 刊期: 2007年第21期

  • 美满霉素对脑缺血再灌注大鼠脑组织COX-2、NF-κB表达的影响

    目的 观察美满霉素对脑缺血再灌注大鼠COX-2、NF-κB表达的影响.方法 54只Wistar大鼠,适应性喂养1周,分为:正常组(N组)、假手术组(NS组)、美满霉素对照组(M组)、美满霉素预处理组(MP组),美满霉素治疗组(MT组),缺血再灌注组(IR组).HE染色观察大鼠脑组织的病理改变;采用免疫组织化学法检测大鼠脑组织COX-2、NF-κB的表达,用图像分析仪测定光密度值.结果 NF-κB p65和COX-2光密度值、阳性细胞百分率MP组较NS组明显增高(P《0.01),较IR组明显降低(P《0.01).MT组较NS组明显增高(P《0.01),较IR组明显降低(P《0.05).结论 美满霉素能抑制大鼠脑缺血再灌注后脑组织COX-2、NF-κB的表达,发挥脑保护作用.

    作者:蔡志友;余昌胤;晏勇;张骏;黄良国;袁胜山;王凤英 刊期: 2007年第21期

  • TDL复合物提高人脐静脉内皮细胞基因转染效率的体外实验

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    作者:任建丽;王志刚;李兴升;苏琳;张勇;汪朝霞;杨春江;张群霞;许川山 刊期: 2007年第21期

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    目前临床上充填治疗龋齿的方法不尽相同,充填材料的使用不很规范.为了给临床口腔科医师正确使用Beautifil氟化玻璃聚合体(商品名为卓美)提供规范参考,避免盲目使用,我科采用日本Shofu公司生产的新型充填材料Beautifil氟化玻璃聚合体修复充填磨牙Ⅰ类洞龋损,并与传统的银汞合金作对照,观察二者的临床疗效,取得明显效果,现报告如下.1 材料与方法

    作者:郭玉峰;刘鹏程;张新芳 刊期: 2007年第21期

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    作者:李黎;刘鲁川 刊期: 2007年第21期

  • Muc3羧基端内SEA组件的蛋白酶切与N糖基化关系的研究

    目的 Muc3的羧基端在翻译后经历了蛋白酶切反应,探讨Muc3的羧基端蛋白酶切反应发生是否与其羧基端内的N型糖链有关.方法 截断了的Muc3的羧基端(含完整的SEA组件)(p20SEA)采用定点突变方法在所要求的位点插入终止密码子,所表达蛋白质的检测采用pulse/chase和免疫共沉淀方法或SDS/PAGE和Western印迹方法,所表达蛋白质的N型糖链合成抑制采用Tunicamycin处理转染的COS-1细胞.结果 p20表达产物(完整的Muc3羧基端产物)经历了翻译后蛋白酶切,产生30×103的氨基端酶切片段和49×103的羧基端酶切片段;Tunicamycin处理后主要的表达蛋白是60×103的全长的非糖基化产物,22×103的少量氨基端酶切片段和41×103的羧基端酶切片段;p20SEA表达产物(含完整的SEA组件但不含SEA组件后续氨基酸的截断Muc3羧基端)抑制N型糖链出现未酶切的36×103全长产物和22×103酶切的非N糖基化产物.结论 大鼠Muc3羧基端在抑制其N型糖链合成后出现Muc3的羧基端蛋白酶切的抑制.

    作者:李宜成;何勇虹;彭志红;汪荣泉 刊期: 2007年第21期

  • 深圳市人民医院352例尖锐湿疣患者生殖道人乳头状瘤病毒基因亚型的分布及意义

    目的 了解深圳地区人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)亚型的分布情况,并评价不同亚型的HPV在宫颈病变中的临床意义.方法 用导流反斑点杂交法对深圳市人民医院2003-2004年352例尖锐湿疣标本进行9~20种HPV亚型基因分型,结合临床病理检查结果分析HPV亚型分布情况及与不同宫颈病变的关系.结果 深圳地区尖锐湿疣患者中HPV亚型分布较广泛,主要亚型以低危型11和6型为主,多重HPV感染率接近总感染率的37%;在宫颈尖锐湿疣中主要的HPV亚型是高危型,尤其在子宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)Ⅱ+ 以上的宫颈病变中,感染率高的依次为以16、18、58、52和33型.结论 深圳地区尖锐湿疣以HPV11和6感染为主.HPV16、18等高危型HPV亚型可能是深圳地区导致宫颈恶性病变主要原因.

    作者:唐敏;戴勇;吕晓萍;李体远 刊期: 2007年第21期

  • 特异性stealth siRNA抑制小鼠肺成纤维细胞TGF-β1表达的实验研究

    目的 设计特异性stealth siRNA并检测其对TGF-β1的抑制作用.方法 针对BALB/c小鼠TGF-β1基因组,选择不同位点设计3套siRNA基因序列,并经化学修饰合成3种stealth siRNA,转染体外培养的小鼠肺成纤维细胞,免疫组化法检测其对TGF-β1表达的影响. 结果 3种stealth siRNA对TGF-β1表达在不同时间有不同程度的抑制作用,以stealth_166效果更为明显;抑制效果与转染时间长短相关,48 h后就可检测出明显抑制,72 h达到高峰,96 h后开始减弱.结论 合成的特异性stealth siRNA可以抑制TGF-β1在小鼠肺成纤维细胞的表达,有望成为防治肺间质纤维化的一种手段.

    作者:余维涛;崔社怀;杨雪梅 刊期: 2007年第21期

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    目的 探讨PTEN基因小鼠胚胎着床过程中的作用.方法 实时荧光定量聚合酶链反应( real-time fluorescence quantitative PCR ,FQ -PCR)分别检测未孕及孕1、3、4、5、7 d(分别记为d0、d1、d3、d4、d5、d7)小鼠子宫内膜PTEN基因mRNA的表达和子宫角注射反义寡核苷酸观察胚泡着床数.结果 FQ-PCR测得妊娠的子宫内膜组织PTEN的表达高于未妊娠的子宫内膜组织,且随着妊娠天数的增加呈现逐渐增加的趋势,到妊娠第5天达到高.子宫角注射PTEN反义寡核苷酸后胚泡着床数明显减少.结论 PTEN在妊娠早期子宫内膜持续表达,可能参与了胚泡着床.

    作者:陈晓玲;杨戎;贾咏存;刘孝云;魏莎莉 刊期: 2007年第21期

  • 辛伐他汀对K562细胞PI3K-AKT信号通路分子变化影响的体内外比较

    目的 通过检测辛伐他汀体外对K562细胞和裸鼠慢性粒细胞白血病组织(CML)K562细胞的影响,同时分别检测辛伐他汀处理后K562细胞PI3K-AKT信号通路中 mRNA水平的变化,比较辛伐他汀在体内外所引起PI3K-AKT信号通路的分子变化,以分析辛伐他汀诱导K562细胞凋亡的机制.方法 体外培养CML 细胞株K562细胞,MTT噻唑蓝法检测细胞增殖抑制率.流式细胞术检测辛伐他汀作用后的细胞周期和凋亡率的变化.另外,12只BALB/c-nu/nu裸小鼠皮下接种K562细胞,构建Balb/c-nu/nu裸小鼠的慢性粒细胞白血病动物模型,采用缺口末端标记技术TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)法检测辛伐他汀诱导K562细胞早期凋亡的变化,用RT-PCR检测辛伐他汀在体内外K562细胞后N-ras分子和N-ras分子下游的PI3K-AKT信号通路的N-ras、PI3K、AKT1、IKK-β、NF-κB1 mRNA水平的变化.结果 辛伐他汀在体外能抑制K562细胞的增殖,使K562细胞停滞在G0/G1期,明显诱导K562细胞凋亡,PI3K-AKT信号通路大多数基因出现差异表达.不同剂量的辛伐他汀能够诱导裸鼠体内K562细胞凋亡,并随剂量的增加凋亡率逐渐增高(P=0.000 );不同剂量的辛伐他汀能够引起PI3K、AKT1、NF-κB、IKK-β mRNA的明显差异表达(P=0.000,P=0.003).但体外实验中的PI3K-AKT信号PI3K、AKT1 mRNA水平的变化与体外实验PI3K、AKT1 mRNA水平的变化呈现相反的差异表达.结论 辛伐他汀体外能够引起参与K562细胞凋亡的N-ras分子和N-ras分子下游的PI3K-AKT信号通路的基因 mRNA水平的变化,从一定角度说明辛伐他汀能依赖PI3K-AKT信号通路诱导K562细胞及其移植瘤细胞凋亡.但体内外实验存在不同的凋亡诱导机制.

    作者:周定安;黄文芳;张明川;赵慎;许毅 刊期: 2007年第21期

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    目的 建立体外培养神经细胞的化学缺氧预处理实验模型.方法 分化的SH-SY5Y细胞分为对照组、化学缺氧组、化学缺氧预处理组.用MTT法筛选合适的化学缺氧预处理和化学缺氧浓度.然后,分化的SH-SY5Y细胞随机分为对照组、化学缺氧组(250 μmol/L CoCl2,24 h)、化学缺氧预处理组(75 μmol/L CoCl2,1.5 h,常氧3 h后,250 μmol/L CoCl2,24 h).实验终点测乳酸脱氢酶释放率,并用MTT法检测细胞活力,以此来评价化学预缺氧对神经细胞化学缺氧的保护作用.结果 化学缺氧预处理组细胞较化学缺氧组细胞存活率高、乳酸脱氢酶释放率减少,说明用CoCl2化学预缺氧可保护神经细胞对化学缺氧产生耐受.结论 建立了简单易行、重复性好,可进一步应用于阐明缺氧预处理保护机制的神经细胞化学缺氧预处理实验模型.

    作者:孙胜;高文祥;廖卫公;高钰琪 刊期: 2007年第21期

  • 回肠代膀胱自发性破裂误诊为急性胆囊炎1例

    1 临床资料患者,男性,65岁,1999年在外院行膀胱镜检查提示膀胱癌,因肿瘤小,行膀胱部分切除.2000年因肿瘤复发在我院泌尿科行膀胱癌根治、回肠代膀胱术.2006年2月因右上腹持续性疼痛12 h来我科就诊.查体:急性痛苦面容,腹平,右上腹部明显压痛、反跳痛及肌紧张,Murphy征阳性,肠鸣音弱.腹部B超示急性胆囊炎,胆囊肿大,胆囊周围积液,胆囊穿孔?

    作者:孙刚;蒋小春;王梦炎 刊期: 2007年第21期

  • 松果体先天性囊肿的影像诊断

    目的 探讨松果体先天性囊肿的CT与MRI影像表现及诊断特征.方法 搜集26 例松果体先天性囊肿病例,回顾性对照分析其CT与MRI表现,研究其诊断特征.结果 26 例松果体先天性囊肿均表现为圆形或椭圆形, 有完整光滑的囊壁,囊壁信号强度变化或CT值类似于脑灰质,囊壁可有轻微强化改变,囊液为长T1 长T2 水样信号,CT值与脑脊液近似.结论 CT平扫易遗漏诊断,MRI 诊断松果体先天性囊肿优于CT,特别是矢状位图像, 有助于明确囊肿与第三脑室后部的关系,MRI应作为本病检查的首选方法.

    作者:戴书华;刘卫金;张冬;戚跃勇;张启川;孙清荣;文利 刊期: 2007年第21期

  • 全乳大切片观察新辅助化疗后乳腺癌浸润性生长特征变化

    目的 探讨乳腺癌的浸润特征及新辅助化疗对乳腺癌浸润特点的改变.方法 采用全乳大切片技术对比研究病理分期为Ⅰ~Ⅲ期93例行术前化疗与31例未行术前化疗乳腺癌的浸润特征.结果 对照组皮肤皮下浸润阳性35.5%,发生大导管浸润者25.8%,对肿瘤周围血管浸润者38.7%,肿瘤微血管计数(MVD)17.2±9.5;新辅助化疗后皮肤皮下浸润阳性9.7%,大导管浸润阳性8.6%,肿瘤周围血管浸润阳性11.8%,MVD 8.0±4.4,各项指标均明显低于对照组(P《0.05).结论 新辅助化疗显著减轻乳腺癌对周围组织的浸润,可增加保乳机会.

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  • 血管紧张素Ⅱ对大鼠心房Cx40重构的影响及贝那普利的干预作用

    目的 采用大鼠肾上腹主动脉部分结扎的模型,观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对心房缝隙连接蛋白(connexin,Cx)40重构的影响及贝那普利的干预效果.方法 将30只雄性Wistar大鼠随机数字表法分为对照组(C组)、腹主动脉结扎组(A组)、结扎+贝那普利组(B组).喂养8周后处死,用放射免疫法测血浆及心肌组织AngⅡ含量,用免疫组化方法检测大鼠心房Cx40的分布特征,半定量分析Cx40的含量.结果 与C组相比,A组血浆、心肌AngⅡ含量均明显升高(P《0.01),而B组则无明显变化(P》0.05).A组大鼠心房Cx40含量减少(P《0.01),并向侧边分布增加;而B组Cx40含量较A组增加(P《0.01),且分布不均一程度减轻.结论 AngⅡ升高可导致心房Cx40重新分布和表达减少;贝那普利通过降低AngⅡ水平,可有效减轻心房Cx40的重构.

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  • 两起肉毒杆菌食物中毒事件的分析

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    作者:钱新初;唐肇普;刘三军 刊期: 2007年第21期

  • 明胶墨汁灌注展示大鼠视网膜血管的方法

    目的 对大鼠视网膜墨汁灌注方法进行改良以充分显示微血管.方法 78只SD大鼠分两部分进行实验.第一部分中, 72只大鼠根据灌注液中明胶的浓度分为纯墨汁组(n=18)、1%明胶墨汁组(n=18)、3%明胶墨汁组(n=18)、5%明胶墨汁组(n=18).每组动物根据灌注压强分为90、115、140、165、190、215 mmHg 6个亚组.墨汁从升主动脉进行灌注.用视网膜铺片和切片检测微血管的灌注情况.根据第一部分结果,在第二部分中,6只大鼠先后灌注3%明胶墨汁和5%明胶墨汁各20 ml.用上面相同的方法检测微血管的灌注情况.结果 在165 mmHg压强下灌注37 ℃的 3%明胶墨汁时,视网膜周边部的血管充填充分,但中央部的血管充填不充分.在215 mmHg压强下灌注37 ℃的5%明胶墨汁时,视网膜周边部的血管充填不充分,但中央部的血管充填充分.在165 mmHg压强下灌注3%明胶墨汁20 ml,再在215 mmHg压强下灌注5%明胶墨汁20 ml能使视网膜中央部和周边部的大小血管都充填充分,且墨汁无外渗、在水溶液中不褪色、灌注血管与周边组织对比明显.结论 在165 mmHg恒压下灌注37 ℃的3%明胶墨汁20 ml,再在215 mmHg恒压下灌注37 ℃的5%明胶墨汁20 ml是一种较好的显示大鼠视网膜微血管的形态学方法.

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    由全军医学科学技术委员会骨科专业委员会主办、第三军医大学西南医院承办的第十届全军骨科学术大会于2007年9月21日到23日在重庆召开.大会共收到来自101个单位的稿件1 438篇,参会代表千余名.

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第三军医大学学报杂志

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主管:第三军医大学

主办:第三军医大学