学术投稿

ABCE1基因pEGFP重组表达载体构建及转染小细胞肺癌细胞

黄波;田大力;杨春鹿

关键词:小细胞肺癌, ABCE1基因, 绿色荧光蛋白
摘要:目的:构建ABCE1基因的pEGFP重组表达载体pEGFP-C1-ABCE1,并将其转染至小细胞肺癌细胞(NCI-H446),观察其表达,并检测转染前后细胞增殖情况.方法:RT-PCR扩增ABCE1基因cDNA,酶切后和携带绿色荧光蛋白报告基因的真核表达载体pEGFP-C1重组获得重组表达载体pEGFP-C1-ABCE1.经酶切,电泳,DNA测序鉴定后应用Fugene-HD将重组表达载体pEGFP-C1-ABCE1及空载体pEGFP-C1分别转染NCI-H446细胞,观察pEGFP-C1-ABCE1和pEGFP-C1在小细胞肺癌细胞的表达,MTT法检测转染ABCE1基因对小细胞肺癌细胞增殖的影响.结果:ABCE1基因cDNA片段成功重组到pEGFP-C1载体中.经酶切和DNA测序验证,插入载体的cDNA片段为ABCE1基因.荧光显微镜观察转染pEGFP-C1- ABCE1的NCI-H446细胞绿色荧光蛋白主要在胞浆表达而转染pEGFP-C1的NCI-H446细胞绿色荧光蛋白在胞浆及胞核均有表达.MTT实验提示转染pEGFP- C1-ABCE1的细胞与转染pEGFP-C1和未转染的同类细胞相比增殖能力明显增加.结论:成功构建了pEGFP-C1-ABCE1真核细胞重组表达载体,并将该载体转染入小细胞肺癌细胞,该载体的绿色荧光主要在NCI-H446细胞胞质表达,提示ABCE1基因可能主要在胞质表达.该基因与小细胞肺癌的增殖活性有关.
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    目的:探讨基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)、膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)及基质金属蛋白酶2(MMP2)在人脑胶质瘤中的表达及基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)的表达与肿瘤生物学行为和预后的关系.方法:用免疫组织化学S-P法检测48例人脑胶质瘤组织和10例正常人脑组织中EMMPRIN、MT1-MMP和MMP2的表达.结果:高度恶性胶质瘤组织(Ⅲ-Ⅳ级)中EMMPRIN、MT1-MMP和MMP2的阳性表达率显著高于低度恶性胶质瘤组织(Ⅰ-Ⅱ级)和正常脑组织;EMMPRIN、MT1-MMP及MMP2在人脑胶质瘤中共同表达,EMMPRIN的表达与MT1-MMP及MMP2的表达呈显著正相关;在单因素生存分析中,EMMPRIN的表达可能与患者预后不良有关.结论: EMMPRIN在恶性胶质瘤组织中高表达,与胶质瘤的进展和侵袭密切相关,可作为胶质瘤恶性表型的有用指标;EMMPRIN在胶质瘤中的阳性表达可能与患者的预后不良有关;EMMPRIN、MT1-MMP及MMP2三者协同作用,可能共同促进脑胶质瘤的侵袭性发展.

    作者:张海泉;周毅;敖祥生;黄星;刘汉东 刊期: 2009年第03期

  • 腹部、盆腔部位的肿瘤患者放疗体位固定技术探讨

    目的:探讨真空负压袋固定技术和低温热塑体膜固定技术对提高腹部、盆腔部位肿瘤患者治疗摆位精度的作用.方法:共 60 例患者治疗中使用两种固定装置,一组 30 例使用真空负压袋固定,另一组 30 例采用腹盆腔低温热塑体膜固定技术,比较两组中心点移位情况.结果:两组对比X轴、Z轴方向移位范围有明显差异(P<0.01).结论:腹部、盆腔部位肿瘤患者由于体重、呼吸、膀胱充盈、皮肤(松弛)牵拉等因素,造成摆位误差,使用腹盆腔低温热塑体膜固定技术有助于体位的固定,提高了治疗摆位精度.

    作者:张龙;刘孜;钱建升;梁文会;王诚;邢明 刊期: 2009年第03期

  • Iressa对ER表达状态不同的乳腺癌细胞增殖的影响

    目的:观察Iressa对雌激素受体表达状态不同的人乳腺癌细胞:ER(+)的MCF-7和ER(-)的MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用.方法:设置Iressa不同浓度组、时间组,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测Iressa对细胞生长的影响,并分析量效关系、时效关系.结果:Iressa以0.01-1μmol/L浓度作用24h之后对2种细胞均有抑制增殖的作用,其中MDA-MB-231的抑制率于48h达到高峰;浓度为10 μmol/L时抑制率高峰,MCF-7出现在48h,而MDA-MB-231在72h;且同浓度的Iressa作用相同时间后,对MDA- MB-231的抑制率更高.结论:一定浓度的Iressa作用一定时间后对雌激素受体表达状态不同的人乳腺癌细胞有抑制细胞增殖的作用,且对ER(-)的MDA-MB-231细胞作用更显著.

    作者:周苏娜;张明鑫;莫非;王峥;王昌燕;王丽;黄辰;王健生 刊期: 2009年第03期

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    作者:胡睿;裴红蕾;沐金明;王国林 刊期: 2009年第03期

  • 长春瑞滨联合吉西他滨治疗晚期乳腺癌的临床观察

    目的:观察长春瑞滨(NVB)联合吉西他滨(GEM)治疗对蒽环类和/或紫杉类耐药的晚期乳腺癌的疗效及安全性.方法:28例晚期乳腺癌患者均给予长春瑞滨(NVB)25mg/m2静滴,第1、8天;吉西他滨(GEM)1000mg/m2静滴第1、8天,每21天为1周期, 2周期后评定疗效,平均完成3.1个周期.结果:28例患者中,CR 2例,PR 11例,总有效率46.42%,中位TTP 7.9月.主要不良反应为恶心、呕吐及骨髓抑制.结论:长春瑞滨联合吉西他滨治疗晚期乳腺癌疗效确切,不良反应可以耐受,是蒽环类和/或紫杉类耐药性晚期乳腺癌理想的挽救性化疗方案.

    作者:冉凤鸣;臧爱华 刊期: 2009年第03期

  • 肺部炎性假瘤的临床诊治

    目的:探讨肺部炎性假瘤的临床特点、诊断和治疗.方法:对59例肺部炎性假瘤患者的临床资料进行回顾性分析.结果:52例行手术治疗,1例术后因呼吸衰竭死亡,术前仅17 例(28.8%)诊断正确.结论:肺部炎性假瘤在临床症状和影像学上与肺癌较难鉴别,虽属良性,宜积极手术治疗;肺部炎性假瘤可能存在恶性潜能和复发可能,须加强术后随访.

    作者:丁凯;潘佳;柴大森;梁冰;李晓辉;韦华 刊期: 2009年第03期

  • Survivin在人胃癌及癌前病变中表达的研究

    肿瘤的发生是多基因,多阶段渐进的结果,其中肿瘤细胞增殖过度,凋亡通路失活是其发病的一个重要机制.Survivin是近年来发现的凋亡抑制蛋白(IAP)家族成员之一,现就Survivin在胃癌及癌前病变中的表达研究作一综述.

    作者:李梅;姚乐;惠起源 刊期: 2009年第03期

  • 罕见部位转移性乳腺癌的临床病理分析

    目的:分析转移性乳腺癌的临床病理特点.方法:对8例罕见转移部位的性乳腺癌的临床资料及病理特点进行研究,分析误诊原因及解决方法.结果:罕见部位的单发性转移性乳腺癌容易造成临床病理诊断困难.结论:乳腺癌患者出现其它脏器的肿瘤,尤其是不常见的转移部位,要想到乳腺癌转移的可能;当病理图象出现巢状、条索状结构时,要警惕乳腺癌转移的可能;免疫组化对确定肿瘤来源乳腺具有重要意义.

    作者:舒红;邱芳;董芳 刊期: 2009年第03期

  • P-32持续低剂量率辐射对外周血淋巴细胞染色体的损伤研究

    目的:探讨P-32持续低剂量率辐射对外周血淋巴细胞的染色体损伤.方法:应用不同活度(0、0.01、0.1、0.5、2.7MBq)的放射性P-32胶体溶液,加入6ml的外周血淋巴细胞培养液中,培养3天后进行染色体分析.结果:0.01、0.1、0.5 MBq的P-32持续低剂量率辐射均造成染色体不稳定畸变(双着丝粒、着丝环、无着丝粒断片),随放射性活度增加而增加;2.7MBq的P-32辐射剂量较大,染色体形成率很低.结论:0.01、0.1、0.5 MBq的P-32持续低剂量率辐射可以造成染色体不稳定畸变,随辐射剂量增加畸变率增加;2.7MBq P-32的辐射剂量过大,染色体形成率很低不利于染色体畸变分析.

    作者:苏军龙;郑慧媛;原荣;袁彬;李楠;施常备;汪静 刊期: 2009年第03期

  • 胸腔镜辅助小切口胸部手术的应用

    目的:探讨胸腔镜辅助小切口胸部手术的实用性及临床意义.方法:对24例胸腔内疾病患者,采用胸腔镜辅助小切口术式进行手术.结果:全组患者均痊愈,无严重并发症,与无辅助切口胸腔镜手术相比,手术难度下降,手术时间缩短,医疗费降低.结论:胸腔镜辅助小切口胸部手术具有创伤小、费用低、安全、实用的优点,更适用经济不发达地区.

    作者:李新举;付军科;梁景仁 刊期: 2009年第03期

  • 周剂量多西紫杉醇联合奥沙利铂、亚叶酸钙和5-氟尿嘧啶治疗晚期胃癌

    目的:评价周剂量多西紫杉醇(TAX)联合奥沙利铂(OXA)、亚叶酸钙(CF)和5-氟尿嘧啶(5-FU)治疗晚期胃癌的疗效和不良反应.方法:34例晚期胃癌患者应用联合化疗方案, TAX 40 mg/m2静滴1h,第1,8天; OXA 65mg/m2,静滴,第1,8天,CF100 mg静滴, 第1-5天; 5-FU 375mg/m2,静滴,第1-5天.结果:34例晚期胃癌患者中,CR 2例,PR 20例,有效率为64.7%.主要不良反应为恶心呕吐,骨髓抑制,脱发,外周神经感觉异常.结论:周剂量多西紫杉醇联合奥沙利铂、亚叶酸钙和5-氟尿嘧啶方案治疗晚期胃癌安全有效,不良反应可以耐受.

    作者:钟锡明;范钰;经小珍;黄卫兵 刊期: 2009年第03期

  • 流式细胞仪免疫分型在B细胞淋巴瘤诊断中的应用

    评估B淋巴细胞是流式细胞仪免疫分型有临床意义的指征之一,通过检测免疫球蛋白轻链限制性或异常表型可区分肿瘤性B细胞和反应性B细胞,而肿瘤细胞的表型可用于诊断WHO分类中具有不同特点的淋巴瘤亚型.本文综述流式细胞免疫分型在诊断B淋巴细胞肿瘤中的应用.

    作者:于亚平 刊期: 2009年第03期

  • 骨髓活检在多发性骨髓瘤诊断中的价值

    目的:探讨骨髓活检在多发性骨髓瘤(MM)诊断中的价值.方法:同步观察多发性骨髓瘤26例患者骨髓涂片和活检塑料包埋切片.观察骨髓增生程度、浆细胞增殖模式及浸润程度.结果:MM患者骨髓造血组织在切片中的增生度明显高于涂片,两者差异有统计学意义(P<0.05).MM切片中浆细胞以簇片-间质型、结节-间质型、结节型及塞实型浸润为主,以结节出现为阳性诊断标准,其敏感性25例(96.1%) 明显高于涂片中浆细胞>15%的指标(76.9%).结论:骨髓活检能准确反映骨髓组织的增生程度、浆细胞浸润情况及增殖模式,对MM的诊断有重要价值.

    作者:关键虹;王星烨;刘亚琳;郭桂丽;蔡瑞波 刊期: 2009年第03期

  • 放射性肺损伤发生机制的研究进展

    放射治疗是肺癌、食管癌等胸部肿瘤的主要治疗手段,在治疗过程中,正常肺组织不可避免地受到一定剂量的射线照射而造成不同程度的放射损伤.根据放射治疗肿瘤协作组的评价标准,将放射性肺损伤分为放射性肺炎和放射性肺纤维化.放射性肺炎经系统治疗可以逆转,一旦发生肺纤维化,则对患者的生活、治疗及预后产生严重的影响,甚至危及生命.因此,对放射性肺损伤的发生机制、预防显得尤为重要.本文就其发生机制的研究现状做一综述.

    作者:李凤玉;刘秀芳;张建宇 刊期: 2009年第03期

  • 胃癌术后胃瘫的诊治分析

    目的:探讨胃癌根治术后发生胃瘫的原因、诊断和治疗方法.方法:回顾分析本院2002年-2006年间行226例胃癌根治术后发生胃瘫的13例患者的诊治经过,分析发生胃瘫的原因.结果:胃癌根治术后发生胃瘫的原因与年龄、手术创伤、手术操作不当、支配胃的迷走神经被切断、术后镇痛、精神心理因素、电解质紊乱等相关.结论:胃癌术后胃瘫治疗应中西医结合,预防应加强围手术期管理.

    作者:吕铁升;朱小林;赵中华;党诚学 刊期: 2009年第03期

  • 外周血干细胞冻存夹的改良及临床应用

    外周血干细胞移植(peripheral blood stem cell transplantation,PBSCT)在血液病和实体瘤的治疗中得到了广泛的应用,干细胞移植过程中,干细胞的冻存是保证移植成功的重要环节.直接-80℃冰箱冻存外周血干细胞是一种简便、实用、安全、可靠、成本低的外周血干细胞保存方法,在外周血干细胞移植中已得到广泛应用[1].干细胞放入-80℃冰箱前,需用冻存夹固定干细胞冻存袋,以往选择有机玻璃板作冻存夹,使用中有诸多不便,我们对冻存夹进行了改良,形成了具有经济实惠,方便实用,取材容易,制作简单等优点的改良新型冻存夹,使用后效果满意,现介绍如下.

    作者:斯晓明;刘文超;黄颖 刊期: 2009年第03期

  • 18F-FDG PET/CT显像与CT增强在肾癌诊断中的对比研究

    目的:评价18F-脱氧葡萄糖(18F-fluorodeoxyglucose,18F-FDG)PET/CT显像对肾癌诊断和治疗方案选择的临床应用.方法:回顾性分析50例临床诊断为肾癌患者的全身18F-FDG PET/CT及CT平扫加增强的影像学资料,比较两者对肾癌的诊断价值.结果:50例中,经手术病理证实为肾癌的有41例,其余9例因18F-FDG PET/CT显像发现远处转移放弃手术.18F- FDG PET/CT检查敏感度80%;CT平扫加增强敏感度92%.9例转移病例中4例为腹膜后淋巴结转移,2例两肺多发转移,2例伴有下腔静脉和肾静脉癌栓形成,1例骨转移合并肝转移,而CT平扫加增强仅发现1例肾静脉和下腔静脉癌栓形成.结论:18F-FDG PET/CT对诊断原发性肾癌的敏感性不如CT,但对淋巴结转移及远处转移的诊断优于CT,对肾癌的分期及治疗方案的选择有重要意义.

    作者:谢爱民;叶慧;莫逸;彭翔 刊期: 2009年第03期

  • 乙型肝炎病毒转录体的检测及与隐源性肝病的研究

    目的:探讨不同肝病患者血清中乙型肝炎病毒转录体的表达及与隐匿性感染的关系.方法: 用血清核酸提取试剂盒从不同肝病患者血清中提取核酸,PCR及RT-PCR扩增HBVxDNA、fRNA和trRNA,琼脂糖电泳及Southern 杂交验证显示结果.结果: HBVxDNA和fRNA在HBsAg(+) 血清中检出率显著高于HBsAg(-)者,(P<0.05).trRNA在HBsAg(+)血清中检出率和HBsAg(-)者无显著差异,(P>0.05).trRNA在HBsAg(-)的肝癌、肝硬化血清中有高检出率,分别为66.7%、70.0%.此外,在丙肝和其他肝病中trRNA的检出率比HBVxDNA和fRNA的检出率高.结论: HBV病毒转录体与隐匿性感染密切相关.trRNA是某些HBsAg(-)肝病HBV感染的唯一指标,这将为把trRNA作为诊断特殊HBV感染的诊断标志物打下基础.

    作者:贾林梓;冯英明;张伟;朱少君;巩丽;张贺龙;王军;韩敏辉;常丽花 刊期: 2009年第03期

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    上肢淋巴水肿是乳腺癌术后常见的并发症,罹患者因长期肢体肿胀导致疼痛,畸型,活动受限,甚至穿衣困难,频发脉管炎症可以引发溃疡坏死.甚至竟有患者要求以截肢来解脱痛苦.另外,乳腺癌的发病率逐年提高,上肢淋巴水肿的患者数量在增加.然而,对其治疗一直是世界性的难题,至今尚未找到良好的方法.针对乳腺癌继发淋巴水肿的现有理论研究和临床实践做一简要回顾.

    作者:常兴华;李仕国;王志军 刊期: 2009年第03期

现代肿瘤医学杂志

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