彭捷；阳红斌；傅敢；陈曙平；赵谢兰；李晓林；陈方平
无偿献血者丁某,女,51岁,在本站采血点经健康征询、体检合格后于2012年1月1日献全血400ml,初筛检测血型为AB型,检验科进行血标本检测时发现正定型为AB型,反定型为A型,正反定型不一致,随将标本送至我室,经检测该献血者为A型,红细胞上有获得性B抗原,现将实验情况报道如下.
作者：张军；李鹏；侯振娇 刊期： 2012年第06期
目的 验证开盖机能否适用于血站核酸检测(NAT)实验室,而不引起标本之间的交叉污染.方法 使用自动开盖机,对制备的NAT阴性标本和NAT阳性标本进行开盖处理.设计3组试验确认开盖过程对标本的影响:1)阴性对照组试验:先将NAT阴性标本上机开盖后进行NAT检测.2)测试A组试验:将NAT阳性标本和NAT阴性间隔放入开盖机启动开盖,随后立即进行NAT检测.3)测试B组试验:在A组试验标本开盖完成后,立即使用开盖机再对NAT阴性标本进行开盖处理,并进行NAT检测.结果 所有NAT阴性标本被开盖后,NAT检测结果100％为非反应性.所有NAT阳性标本被开盖后,NAT检测结果100％为反应性.结论 开盖机适用于血站NAT实验室标本预处理过程,不会引起标本之间的交叉污染.
作者：汪德海；葛红卫 刊期： 2012年第06期
目的 探讨不同温度和时间条件下保存对血液中丙型肝炎病毒核酸( HCV RNA)稳定性的影响.方法 采集12名丙型肝炎患者4ml的外周血,分装、保存在不同温度及相同温度下的不同时间,利用实时荧光定量PCR检测其不同时间点血浆HCV RNA的水平(log IU/ml),并与该血液标本的起始HCV RNA水平做比较分析.结果 当血液标本中的HCV RNA起始水平≥105 IU/ml时,在25℃放置6h后转至4℃保存18 h(a)、25℃放置12 h后转至4℃保存12 h(b)及4℃放置24 h(c)等3种保存条件,24 h时内检测到血液标本的HCVRNA水平105IU/ml组分别为(5.15±0.16)、(5.15±0.15)及(5.16±0.16) IU/ml (P＞ 0.05),107 IU/ml组分别为(7.45±0.21)、(7.44±0.23)及(7.45±0.24) IU/ml (P＞0.05);当血液标本中HCVRNA起始水平在临界范围[(3.38±0.14) IU/ml]时,在条件a、b保存24h血液标本的HCV RNA含量分别为(2.28±1.52) IU/ml、0(均为P＜0.01),而条件c保存24h血液标本的HCV RNA含量为(3.28±0.20) IU/ml (P ＞0.05);当血液标本中HCV RNA起始水平为103 IU/ml时,在4℃保存48h时HCVRNA含量为(2.31±1.54) IU/ml (P＜0.01).结论 当血液中HCVRNA起始浓度较低时,HCV RNA的稳定性较差,短时常温保存都会造成病毒核酸的降解.
作者：熊玉娟；周华友 刊期： 2012年第06期
目的 探索通过免疫亲和层析从Cohn法组份Ⅳ分离纯化人α1-抗胰蛋白酶浓缩物的方法.方法 24℃下,将Cohn氏法组份Ⅳ用Tris缓冲液抽提0.5h后,离心4 750 g×15 min,上清液加入亲水型气相二氧化硅脱脂后,离心6 000 g×15 min,再用1.2 μm的滤膜过滤;通过GE公司新型的Alpha-1 Antitrypsin Select免疫亲和凝胶层析柱,对α1-抗胰蛋白酶进行纯化.用考马斯亮蓝法通过紫外分光光度计测定总蛋白含量;用SDS-PAGE鉴定α1-抗胰蛋白酶的纯度,并用Western Blot和串联质谱分析鉴定纯化的蛋白;通过发色底物法测定α1-抗胰蛋白酶活性.结果 纯化的α1-抗胰蛋白酶在非还原性SDS-PAGE图谱上呈现1条54 kD左右的蛋白带和1条约140 kD的多聚体蛋白带,经过还原性SDS-PAGE多聚体条带解聚,Western Blot也可以反应相关变化;在经过前处理和亲和层析后,α1-抗胰蛋白酶活性回收率为(60.35±1.39)％,α1-抗胰蛋白酶总活性回收率为(41.88±6.98)％,纯化倍数为(71.68±1.32)倍,比活性大约(1.00～1.05)PU/mg.结论 GE公司Alpha-1 Antitrypsin Select免疫亲和层析亲和层析可以从Cohn氏法组份Ⅳ中特异性捕获α1-抗胰蛋白酶浓缩物.
作者：张学俊；叶生亮；曹海军；王宗奎；杜晞；谢亦武；李长清 刊期： 2012年第06期
目的 探讨在距中心血站偏远的县市普遍设立献血房车对无偿献血招募的作用.方法 对恩施土家族苗族自治州(恩施州)各县市设立献血房车与否或设立献血房车前后的采血量等数据作分析比较,评估献血房车作为固定献血点的招募效果.结果 2011年7～12月,设立献血房车的6个县市采血量增长4660 U,同比平均增长36.63％(14.98％ ～59.62％);未设立献血房车的2个县采量增长225.5 U,同比增长6.15％(5.59％ ～6.74％);咸丰县设献血房车后较献血屋采血量增长586.5 U,同比增长35.42％.结论 献血房车停放在人口密集的步行街或广场,能“365天”方便边远县市居民的献血,招募献血者的效果稳定、可靠、高效,有助于老少边穷及交通不便的地区建立无偿献血长效机制.
作者：陈家学；石思蓉；杨仕坤；杨芸 刊期： 2012年第06期
随着无偿献血工作的发展,无偿献血志愿工作者服务队在各地悄然兴起,对无偿献血事业的发展起着一定的推动作用.我市于2007年6月成立无偿献血志愿工作者服务队,现有在册志愿者330余人.在这几年运行的过程中,我们不断地探索如何提升无偿献血志愿工作者的服务水平、服务激情以及队伍本身的发展,从而在无偿献血宣传中起到切实的作用,现将一些体会报道如下.
作者：赖建秀；何燕琴；张学昇；史影 刊期： 2012年第06期
血液安全关乎人民身体健康、社会安定和谐.为确保输血的安全和有效,预防和控制输血不良反应及输血传染病,国家及其卫生行政主管部门近10多年来制定并完善了一系列法律法规,其中2006年出台的《血站管理办法》(2006年3月1日实施)、《血站质量管理规范》(2006年4月25日实施)、《血站实验室质量管理规范》(2006年7月24日实施)3个法规性文件(简称“一法两规”),不仅是我国各级采供血机构建设的“法理”依据,而且标志着我国的血站管理由经验管理迈向全面质量管理的科学轨道.5年来随着“一法两规”的贯彻落实,血站管理实践证明了科学的全面质量管理模式和手段是临床输血安全、充足和有效的根本保障[1].
作者：马丽霞 刊期： 2012年第06期
目的 制备具有功能活性的重组人血小板表面CD36抗原的纯化表达蛋白胞外区30 ～439氨基酸残基段.方法 提取人肝细胞组织总RNA,经RT-PCR扩增编码人血小板CD36抗原胞外区(Gly30～Asn439)氨基酸残基cDNA,构建于原核表达载体pMD18并转化大肠杆菌DH5α,筛选获得阳性重组子pMD18-CD36,提取质粒.经序列测定后,将该基因插入到真核细胞瞬时表达载体pTE2上,构建成为pTE2-s-CD36-10 his真核瞬时表达载体.采用lipofectamine 2000 (invitrogen)转染法,将重组质粒转染HEK-293细胞,表达产物经Ni2+ 2NTA柱层析纯化.结果 RT-PCR扩增获得了1.4kb的片段.invitrogen测序,该序列分析结果与Genebank中的NM_001001547.2完全一致.SDS-PAGE证实转染的HEK-293细胞表达了人CD36抗原胞外区蛋白片段.结论 利用构建的真核载体pTE2-s-CD36转染人胚肾细胞(HEK293)可高效表达CD36 Gly30～Asn439,得到纯化蛋白,为人血小板CD36表面抗原对血小板输注无效影响的深入研究奠定基础.
作者：付丽辉；张杰；孙春昀；陈麟凤；冯倩；罗圆圆；张晓娟；王可；于洋；汪德清 刊期： 2012年第06期
目的 探讨过期血液中血小板生长因子含量及促细胞增殖作用.方法 选取全血和浓缩血小板样品为研究对象,分别采用冻融法和CaCl2法处理保存d1、5、10的血小板,应用ELISA试剂盒测定样品中PDGF-AB、TGF-β1的含量,应用CCK-8试剂盒测定样品的促细胞增殖作用;在全血保存d1、10、21、35、40时取样,离心收集血浆,测定其血小板生长因子含量和促细胞增殖作用.结果 CaCl2法处理的d1、5、10血小板样品中PDGF-AB含量分别为86.56±19.66、76.15±18.55、70.65±24.13 ng/ml,TGF-β1的含量分别为86.40±19.92、79.80±16.54、92.45±17.59 ng/ml;冻融法处理的d1、5、10血小板样品中PDGF-AB含量分别为48.24±3.73、60.91±18.39、69.35±22.29 ng/ml,TGF-β1的含量分别为107.57 +46.48 149.33±24.78 154.26±38.99 ng/ml,同一处理方法d1、5、10血小板样品中生长因子含量无明显差别(P＞0.05);同一处理方法不同时间点血小板样品对细胞增殖作用无明显差别(P＞0.05);冻融法处理后样品在浓度20％时促细胞增殖率明显下降;不同时间点全血血浆促细胞增殖作用趋势线相近,在样品浓度达到20％时促细胞增殖率均明显下降.结论 过期血小板中血小板生长因子含量及促细胞增殖作用与新鲜血小板无显著差异,过期全血血浆中的血小板生长因子与新鲜全血相比也得到了相似的初步结果.
作者：于晶晶；王红；刘曦；袁理；刘嘉馨 刊期： 2012年第06期
1 病例简介患者,女,89岁,汉族,无输血史,孕2产2,无新生儿溶血史.2009年因“糖尿病合并左下肢溃疡”在当地社区卫生服务中心治疗,连续服用SMZ 2年余.近期因头晕、恶心、四肢乏力3d来我院就诊,临床诊断为重度贫血(原因待查).入院时外周血常规检查结果:RBC 1.23×1012/L,WBC 7.1×109/L,Plt 145×109/L,Hb 45g/L,Hct 0.117.入院后给予对症治疗(包括输注悬浮红细胞),备血时,血型血清学检测红细胞血型:A型、RhD阳性,抗体筛查阳性;血液交叉配血试验:盐水介质法主侧、次侧均无凝集溶血,凝聚胺介质法主侧、次侧均凝集,进一步检测确认患者血清及放散液中检出类抗-DC类同种特异性自身抗体.
作者：鲍聿炜；黄崴；吴春芳；胡雷光；向东 刊期： 2012年第06期
目的 综合评价大学生和农民工无偿献血知识和动机.方法 通过调查石家庄市大学生和农民工无偿献血知识和动机认知现状,对大学生和农民工无偿献血知识和动机作出综合评价.结果 献血反应发生率很小、精神因素是献血反应发生的主要因素、献血是为了尝试体验一下献血过程、献血是迫于无奈或压力等回答正确率不高;免费用血、累计无偿献血达到一定数量者给予奖励、无偿献血不会影响健康和感染疾病以及奉献爱心,帮助需要用血的患者、献血可以体现社会价值、今后享受用血优惠、献血可以减肥等价值取向上,2类人群认知差异有统计学意义(P＜0.05).结论 大学生的整体认知水平高于农民工,但2类人群的认知状况有待于进一步提高.
作者：宋任浩；赵莉华；何路军 刊期： 2012年第06期
自开展血液核酸检测工作以来,检测过程中遇到血液标本凝块造成标本混样失败,从而进行重复操作,核酸检测中血液标本凝块不仅严重影响到混样的效率,并且反复离心也对标本造成一定的影响,不仅增加了核酸检测的检测成本,浪费耗材和试剂.也增加了工作人员的工作量,为此我们对标本的前处理进行分析,现报道如下.
作者：钱榕；熊丽红；刘强 刊期： 2012年第06期
自1943年美国的Beeson[1]首次报道输血后肝炎病例起,针对于输血传播疾病的风险研究就从未停止过.众所周知,HBV是目前世界范围内为普遍的慢性感染的病原体.全世界近三分之一的人口曾经暴露于HBV,大约有3.5 ～4亿人发生过感染[2].研究表明输血相关HBV风险的大小与所在地区HBV的流行率的高低[3]以及当地采取的血液HBV筛检策略[4]密切相关.尽管各地区HBV流行率不同,血液检测策略也不尽相同,但各国的血液HBV残留风险评估研究得出了相同的结论:与产生严重社会影响的输血传播HIV相比,发生输血相关HBV的风险要高出数倍至数十倍[5].
作者：邓雪莲；张丽 刊期： 2012年第06期
当前我国平均人口献血率仅为0.84％,远远低于世界高收入国家的4.54％和中等收入国家的1.01％,而人口献血率未达到1％的,即说明献血量低于通常被视为必要的水平[1].我市为典型移民新兴工业城市,主要以钢铁企业带动城市发展,全市总人口近30万,全市人口献血率为1.7％,高于全国平均水平,在临床用血量以15％的比率逐年增涨的情况下,未出现明显的结构性、季节性缺血现象.在无偿献血人群分布上,相对于其它城市无偿献血人群主要以高校学生、部队官兵及流动人群为主不同,我市献血人群分布主要以企业职工为主,约占总献血人数的60％以上,不受如寒暑假、小长假、以及部队战备任务、务工人员流动性大等因素影响,并且在血液紧张,偏型及应急突发事件中发挥着积极作用.现将日常工作中针对以企业职工为主要献血人群的分布特点所采取的宣传和招募策略做以下粗浅的探讨.
作者：王英 刊期： 2012年第06期
目的 比较IgG抗体效价测定与单核细胞单层试验对预判新生儿溶血病的效果,找到适合新生儿溶血病预判的方法组合.方法 分别在孕妇妊娠的不同时间采集血标本,做产前血清学试验和单核细胞单层试验,并按妊娠次数不同进行分类.新生儿出生时收集脐血,进行新生儿溶血病检查.结果 ABO血型不合夫妇,IgG抗体效价和单核细胞单层试验的灵敏度、特异性、准确率依次为76.2％、61.5％、70.9％和90.1％、64.6％、81.0％.Rh(D)不合夫妇,IgG抗体效价和单核细胞单层试验的灵敏度、特异性、准确率,均依次为100％、94.1％、95.7％.11名早产新生儿,IgG抗体效价和单核细胞单层试验的灵敏度、特异性、准确率均为100％.结论 预判ABO新生儿溶血病单核细胞单层试验总体优于IgG抗体效价测定,可根据患者的实际情况,在进行IgG抗体效价测定的同时,有选择地开展单核细胞单层试验.
作者：杜振军 刊期： 2012年第06期
目的 验证不同真空采血管、保存温度、时间等对核酸检测(NAT)结果的影响,为NAT检测的采血管选取、过程控制、检测策略等提供数据支持.方法 进行3个试验:1)标本保存温度、离心前保存时间及采血管对NAT联检试验结果的影响:将含HIV-1( 150 IU/ml)或HCV(60 IU/ml)或HBV(50 IU/ml)的弱阳性标本按照保存温度分为30℃组、4℃组,之后依据标本离心前的保存时间不同分为4h,6h,8h,10 h,12 h,24h组,再依据采血管生产厂家不同分为A、B、C组,对所有标本进行NAT联检试验,利用卡方统计分析各因素对NAT联检试验结果的影响;2)标本保存时间、采血管对NAT鉴别试验结果的影响:将含HIV-1( 150 IU/ml)或HCV( 60 IU/ml)或HBV(50 IU/ml)的弱阳性标本按照保存时间不同分为0d、1d、2d、3d、4d、5d、6d、7d组,再依据采血管不同分为采血管A、B、C组,对所有标本进行NAT鉴别试验,利用卡方统计分析标本保存时间、采血管对NAT鉴别试验结果的影响;3)保存时间对HCV阳性标本NAT定量结果的影响:选取9份浓度范围在1.04×102 IU/ml ～ 4.86×103 IU/ml之间的弱阳性标本,依据标本在4℃保存时间的长短不同,分为0d、ld、2d、3d、4d、5d、6d、7d组,进行定量HCVRNA检测,分析4℃保存条件下保存时间对血浆中HCV RNA浓度的影响.结果 试验1:对于全血标本,4℃或30℃的保存温度,4～24 h的离心前保存时间以及采用不同的采血管对弱阳性标本NAT检出率的影响差异均无统计学意义(P＞0.05).试验2:在4℃保存条件下,采用A采血管保存含HIV-1( 150 IU/ml)的弱阳性标本0～7d,保存后d3,d4、d5、d6、d7弱阳性标本的NAT检出率与0d相比,差异具有统计学意义(P＜0.01);采用B采血管保存含HBV(50 IU/ml)的弱阳性标本0～7d,保存后d3和d7此标本的NAT检出率与保存前相比差异有统计学意义(P＜0.01);其余各组标本的NAT检出率与保存前相比差异没有统计学意义;试验3:9份HCV弱阳性标本的浓度7d内没有出现明显变化.变化范围均在0.56log之内,且有相同的变化趋势,即在4℃保存2d后,其浓度开始下降.结论 采用Procleix Ultrio Assay和Procleix Ultrio Discriminatory Assay分析系统,在不超过30℃的采血环境中,NAT标本采集后可以在24h内离心处理;为提高鉴别阳性率,建议4℃保存的献血者标本在NAT联检阳性后2d内完成NAT鉴别检测.
作者：姚凤兰；陈瑜；汪德海；冷婵；查祎；张莉；王中梅；杨海平；郑静；葛红卫 刊期： 2012年第06期
卫生部于2012年6月7日公布了《医疗机构临床用血管理办法》(卫生部令第85号)[1](以下简称《临床用血管理办法》),并将于2012年8月1日起施行,同时废止《医疗机构临床用血管理办法(试行)》(卫医发[ 1999]第6号)(以下简称《临床用血办法1999年版》).深入学习、理解和实施《临床用血管理办法》既是医疗机构,也是血站当前的1项重要工作.现将《临床用血管理办法》的研读体会整理如下,与输血界同仁交流并请批评指正.
作者：郭永建 刊期： 2012年第06期
目的 无偿献血者汉族人群Kidd血型不配合的输血风险进行评估,构建柳州地区无偿献血者红细胞稀有血型库.方法 根据JK(a-b-)血型人的红细胞对2 mol/L尿素的溶解有抵抗性,我们使用2 mol/L尿素试验筛查JK表型阴性标本.用微量板法检测Kidd血型,将已知微量抗-JKa、抗-JKb分别加入相对应孔,分别检测献血者红细胞上有无JKa或JKb.结果 1 611名汉族无偿献血者Kidd血型基因频率JKa=0.4675、JKb =0.5325.由于调查对象数量较少,未能筛选出JK(a-b-)标本.JKa不配合输血风险为0.1708,JKb不配合输血风险为0.2032,JKa、JKb不配合输血风险合计为0.374.抗-JKa随机输血不配合可能性为70.2％,抗-JKb随机输血不配合可能性为76.7％.结论 使用盐水介质法、快速聚凝胺法或者卡式配血法的同时,结合酶法以及经典的抗球蛋白法,多种配血方法的联合使用,可以避免某些血型系统弱抗体的漏检.
作者：谭庆芬 刊期： 2012年第06期
2010年,我国血站开始实施血液的核酸检测(NAT),标志着我国的输血服务又进入了1个跨越式发展期,对于进一步预防输血相关传染病和提升输血安全性都具有深远的历史意义.从质量管理的角度,NAT的实施属于血站行业血液检测过程的重大变更,需要通过一系列的确认活动对其加以有效的控制.确认活动是认识过程的手段,更是控制过程的前提[1].
作者：葛红卫；王鸿捷 刊期： 2012年第06期
目的 了解民营医院临床输血和临床输血质量管理的情况,为规范医院临床输血管理提供决策依据.方法 实地考察民营医院,全面了解与浙江省血液中心签订采供血协议的所有民营医院(15家)的基本情况、管理情况,并查阅临床输血病历了解临床输血规范化管理情况.结果 15家民营医院2011年1～11月总用血量2494.4 U,占同期所有用血医院的0.69％,15家医院均未建立临床输血质量体系.22例输血病例调研发现采用酶联免疫法检测HBsAg/抗-HCV仅2例,抗-HIV为11例,所有病例均未采用酶联免疫法检测梅毒螺旋体,符合输血指证的病例13例,占59.1％.结论 民营医院在临床输血管理中仍存在很多问题,必须制定临床输血准入、考核和退出机制,规范输血前传染性指标检测工作,全面提升临床输血的安全性.
作者：冯晴；孟忠华；虞容；吕杭军 刊期： 2012年第06期
中国输血杂志
主管:中华人民共和国卫生部
主办：中国输血协会 中国医学科学院输血研究所
