学术投稿

不同保存条件对丙型肝炎病毒核酸稳定性的影响

熊玉娟;周华友

关键词:丙型肝炎病毒, RNA, 保存条件, 温度, 时间, 荧光定量PCR
摘要:目的 探讨不同温度和时间条件下保存对血液中丙型肝炎病毒核酸( HCV RNA)稳定性的影响.方法 采集12名丙型肝炎患者4ml的外周血,分装、保存在不同温度及相同温度下的不同时间,利用实时荧光定量PCR检测其不同时间点血浆HCV RNA的水平(log IU/ml),并与该血液标本的起始HCV RNA水平做比较分析.结果 当血液标本中的HCV RNA起始水平≥105 IU/ml时,在25℃放置6h后转至4℃保存18 h(a)、25℃放置12 h后转至4℃保存12 h(b)及4℃放置24 h(c)等3种保存条件,24 h时内检测到血液标本的HCVRNA水平105IU/ml组分别为(5.15±0.16)、(5.15±0.15)及(5.16±0.16) IU/ml (P> 0.05),107 IU/ml组分别为(7.45±0.21)、(7.44±0.23)及(7.45±0.24) IU/ml (P>0.05);当血液标本中HCVRNA起始水平在临界范围[(3.38±0.14) IU/ml]时,在条件a、b保存24h血液标本的HCV RNA含量分别为(2.28±1.52) IU/ml、0(均为P<0.01),而条件c保存24h血液标本的HCV RNA含量为(3.28±0.20) IU/ml (P >0.05);当血液标本中HCV RNA起始水平为103 IU/ml时,在4℃保存48h时HCVRNA含量为(2.31±1.54) IU/ml (P<0.01).结论 当血液中HCVRNA起始浓度较低时,HCV RNA的稳定性较差,短时常温保存都会造成病毒核酸的降解.
中国输血杂志相关文献
  • 血液标本凝块对核酸检测混合加样的影响

    自开展血液核酸检测工作以来,检测过程中遇到血液标本凝块造成标本混样失败,从而进行重复操作,核酸检测中血液标本凝块不仅严重影响到混样的效率,并且反复离心也对标本造成一定的影响,不仅增加了核酸检测的检测成本,浪费耗材和试剂.也增加了工作人员的工作量,为此我们对标本的前处理进行分析,现报道如下.

    作者:钱榕;熊丽红;刘强 刊期: 2012年第06期

  • 1例ABw表型的血清学和基因型检测

    目的 鉴定对1例ABO疑难血型标本的表型和基因型.方法 1例ABO疑难血型标本用血清学方法做ABO表型检测,用PCR-SSP法做ABO基因鉴定,用直接测序法和克隆测序法对ABO基因的第6、7外显子做序列分析.结果 血清学定型:ABw表型;PCR-SSP法鉴定:AB型;直接测序:A101/B101等位基因杂合,但伴有nt1055的G/A突变;克隆测序:G1055A突变发生在B101等位基因上,该突变产生Bw07等位基因.结论 在中国人群中发现A101/Bw07基因型.

    作者:孟庆丽;高勇;段莹;潘凌子;肖南;于卫建 刊期: 2012年第06期

  • 柳州地区无偿献血者汉族人群Kidd血型分布与输血风险的评估

    目的 无偿献血者汉族人群Kidd血型不配合的输血风险进行评估,构建柳州地区无偿献血者红细胞稀有血型库.方法 根据JK(a-b-)血型人的红细胞对2 mol/L尿素的溶解有抵抗性,我们使用2 mol/L尿素试验筛查JK表型阴性标本.用微量板法检测Kidd血型,将已知微量抗-JKa、抗-JKb分别加入相对应孔,分别检测献血者红细胞上有无JKa或JKb.结果 1 611名汉族无偿献血者Kidd血型基因频率JKa=0.4675、JKb =0.5325.由于调查对象数量较少,未能筛选出JK(a-b-)标本.JKa不配合输血风险为0.1708,JKb不配合输血风险为0.2032,JKa、JKb不配合输血风险合计为0.374.抗-JKa随机输血不配合可能性为70.2%,抗-JKb随机输血不配合可能性为76.7%.结论 使用盐水介质法、快速聚凝胺法或者卡式配血法的同时,结合酶法以及经典的抗球蛋白法,多种配血方法的联合使用,可以避免某些血型系统弱抗体的漏检.

    作者:谭庆芬 刊期: 2012年第06期

  • 输血相关HBV风险评估的研究进展

    自1943年美国的Beeson[1]首次报道输血后肝炎病例起,针对于输血传播疾病的风险研究就从未停止过.众所周知,HBV是目前世界范围内为普遍的慢性感染的病原体.全世界近三分之一的人口曾经暴露于HBV,大约有3.5 ~4亿人发生过感染[2].研究表明输血相关HBV风险的大小与所在地区HBV的流行率的高低[3]以及当地采取的血液HBV筛检策略[4]密切相关.尽管各地区HBV流行率不同,血液检测策略也不尽相同,但各国的血液HBV残留风险评估研究得出了相同的结论:与产生严重社会影响的输血传播HIV相比,发生输血相关HBV的风险要高出数倍至数十倍[5].

    作者:邓雪莲;张丽 刊期: 2012年第06期

  • Ael02B亚型1例

    1 病例资料献血者,男,汉族,25岁,无特殊疾病.2008年10月来本站第1次无偿献血,其血型正反定型相符,鉴定为B型;2010年12月第2次无偿献血,其血型正反定型相符,鉴定为B型,2次采集血液均发往临床,未见退血记录.2011年10月第3次无偿献血,街头采血车初筛纸板法正定型为B型,在对血液进行试管法复检时发现正定型为AB型,反定型为B型,正反定型不符,怀疑为表达弱A抗原的AB型.进一步的鉴定证明该献血者ABO血型为Ael02B.

    作者:王成辉;陈远贵;杨清平;刘佳;孙国伟;卜坤 刊期: 2012年第06期

  • 过期血液中血小板生长因子促细胞增殖作用的初步研究

    目的 探讨过期血液中血小板生长因子含量及促细胞增殖作用.方法 选取全血和浓缩血小板样品为研究对象,分别采用冻融法和CaCl2法处理保存d1、5、10的血小板,应用ELISA试剂盒测定样品中PDGF-AB、TGF-β1的含量,应用CCK-8试剂盒测定样品的促细胞增殖作用;在全血保存d1、10、21、35、40时取样,离心收集血浆,测定其血小板生长因子含量和促细胞增殖作用.结果 CaCl2法处理的d1、5、10血小板样品中PDGF-AB含量分别为86.56±19.66、76.15±18.55、70.65±24.13 ng/ml,TGF-β1的含量分别为86.40±19.92、79.80±16.54、92.45±17.59 ng/ml;冻融法处理的d1、5、10血小板样品中PDGF-AB含量分别为48.24±3.73、60.91±18.39、69.35±22.29 ng/ml,TGF-β1的含量分别为107.57 +46.48 149.33±24.78 154.26±38.99 ng/ml,同一处理方法d1、5、10血小板样品中生长因子含量无明显差别(P>0.05);同一处理方法不同时间点血小板样品对细胞增殖作用无明显差别(P>0.05);冻融法处理后样品在浓度20%时促细胞增殖率明显下降;不同时间点全血血浆促细胞增殖作用趋势线相近,在样品浓度达到20%时促细胞增殖率均明显下降.结论 过期血小板中血小板生长因子含量及促细胞增殖作用与新鲜血小板无显著差异,过期全血血浆中的血小板生长因子与新鲜全血相比也得到了相似的初步结果.

    作者:于晶晶;王红;刘曦;袁理;刘嘉馨 刊期: 2012年第06期

  • 沈阳地区口腔颌面外科手术临床用血回顾

    目的 评估沈阳地区不同口腔颌面外科手术围术期用血状况,以了解血液保护取得的临床疗效和存在的问题.方法 2005年1月1日~2010年12月31日在本院行口腔颌面部外科手术,且在围术期接受输血患者共421名,采用回顾性研究方法比较不同手术种类不同年份临床输血趋势.结果 6年来红细胞悬液输入量随输血手术例数逐年增多而增多.红细胞悬液的平均输入量呈上升趋势,2010年比2005年红细胞悬液平均输入量增加0.66 U.红细胞悬液输入量的变化趋势与输血手术例数呈明显相关性P<0.05;新鲜冰冻血浆输入量的变化趋势与输血手术例数呈无明显相关性P>0.05.结论 血液保护工作在口腔颌面部外科手术围术期红细胞悬液输入中有一定成效,但对于新鲜冰冻血浆和血小板的合理使用还需要进一步改进.

    作者:张霞;何晓帆;白晓峰;张倩 刊期: 2012年第06期

  • 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路与白血病干细胞耐药的研究进展

    磷脂酰肌醇3-激酶( phosphatidylinositol-3 -kinases,PI3Ks)信号参与细胞增殖、分化、凋亡和葡萄糖转运等多种细胞功能的调节.近年发现PI3Ks和其下游分子蛋白激酶B(protein kinase B,PKB或Akt)所组成的信号通路与肿瘤的发生、发展密切相关,调节肿瘤细胞的增殖、存活和凋亡.Yilmaz等[1]发现正常造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)敲除人第10号染色体缺失的磷酸化酶及张力蛋白同源的基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10,pten)后导致PI3 K/Akt信号通路异常激活而转化为白血病干细胞(leukemic stem cell,LSCs),显示PI3 K/Akt通路异常激活在白血病的发生发展中起重要作用.

    作者:彭琪;佘妙容;夏平方 刊期: 2012年第06期

  • 互助献血小板与自愿无偿献血小板初筛不合格原因分析

    目的 了解亲友互助献血小板者与自愿无偿献血小板者的初筛不合格差异原因.方法 将2种献血者采前征询、填表、查询、体检、初筛检验结果进行统计分析.结果 亲友互助献血小板组初筛不合格率(76.19%)明显高于自愿无偿献机采血小板组(6.5%).结论 自愿无偿献机采血小板者应为献血的主要群体,而亲友互助献血小板者可作为血源不足时的一种补充.

    作者:吴次宁;汪彦;田浩;万浬科;罗勋;冯伟 刊期: 2012年第06期

  • 血站核酸检测实验室清洁消毒效果的监控与分析

    目的 对血站NAT检测实验室的清洁消毒过程实施控制,采取监控措施对消毒效果进行评估,以满足核酸检测环境的需求.方法 采用空气下落法和物体表面擦拭法,每月采集NAT实验室工作前消毒后1h的环境和物体表面18个监控点的无菌生理盐水标本47份,以HBV DNA为参照物进行核酸检测并分析检测结果;结合实验室质控结果及NAT单阳性结果,分析检测实验列表有效率、假阳性率与监控结果的相关性.结果 2010年11月至2011年10月,11次清洁消毒监控结果中有2次监控合格率分别为95.5%、97.9%,均发生于NAT检测工作站出风口的监控点,其余均为100%,t=223.83,P<0.05,有统计学意义;跟进消毒措施后,对阳性监控点跟踪监控结果均为阴性.分析检测实验列表有效率和假阳性率与监控结果合格率的相关性x2=0.234,P>0.05,无统计学意义.结论 NAT检测工作站出风口监控点的反应性结果不会造成实验结果假阳性率的增高,设备维护保养中的清洁消毒工作可有效清除污染.NAT实验室现行清洁消毒方法有效,且符合生物安全实验室要求.

    作者:王中梅;冷婵;姚凤兰;汪德海;郑静;杨海平;查祎;王瑞;葛红卫 刊期: 2012年第06期

  • 3例获得性血友病A报告及文献复习

    获得性血友病A(acquited hemophilia A,AH-A)是由于非血友病患者体内自发性产生针对凝血因子Ⅷ(FⅧ)的特异性自身抗体(FⅧantibody,亦称FⅧ抑制物)而引起的1种出血性疾病[1,2].这种自身抗体能引起FⅧ活性降低,产生类似遗传性血友病A表现的1种免疫相关性凝血缺陷疾病.其发病率远低于先天性血友病A,常易被漏诊或误诊.现将本科近2年来收治的3例AH-A报道如下.

    作者:彭捷;阳红斌;傅敢;陈曙平;赵谢兰;李晓林;陈方平 刊期: 2012年第06期

  • 类孟买血型鉴定1例

    我们对上海国妇婴保健院ABO定型困难而送检的孕妇血样进行了ABO血型鉴定,发现其为类孟买血型(Bhm),并对其做了进一步的血清学、基因测序及家系调查,现报道如下.1 材料与方法1.1 患者资料 患者,女,32岁,汉族,籍贯上海,无输血史,无药物史.系上海国妇婴保健院妇产科患者,P1G0,怀孕18周到医院检查,检测血型时发现ABO血型正反定型结果不符,遂于2011年6月送至上海市血液中心做进一步鉴定.

    作者:林杰;蔡晓红;范亮峰 刊期: 2012年第06期

  • 无偿献血纠纷的原因和解决途径

    无偿献血者绝大部分都是为了奉献爱心,是为社会做出自己应有的贡献,同时也存在一些矛盾和纠纷,这些消极的现象和绝大部分正面的积极的结果比起来只是风毛麟角.尽管有些还达到了很严重的程度,但对整个血站的采血工作和良好的工作秩序造成不同程度的影响.下面,我们就针对近年来发生较严重纠纷一些行为表现中存在的实例问题进行探讨和分析.

    作者:薛斌利;叶世辉;宋王洁;洪丙炎;李晓玲;杨华;潘志伟;张建耕 刊期: 2012年第06期

  • 孕妇体内存在高效价IgG抗-A伴抗-D、抗-E的血清学结果分析

    我们在新生儿溶血病产前检查中发现1名孕妇体内存在高效价IgG抗-A伴抗-D、抗-E的病例,现将检查结果分析报道如下.1 资料与方法1.1 标本来源 孕妇,26岁,“O”型,Rh(D)阴性,孕4流3,3年前曾经因流产大出血输注4URh阴性红细胞(未经测定RhC、c、E、e).产前检查血标本为怀孕3个月进行新生儿溶血病产前检查时抽取的静脉血标本.新生儿血标本为该孕妇进行保胎治疗至足月生产时所留取的脐带血标本.

    作者:段福才;辛喜勤;李大元;张秦永 刊期: 2012年第06期

  • 2种预判新生儿溶血病方法的比对分析

    目的 比较IgG抗体效价测定与单核细胞单层试验对预判新生儿溶血病的效果,找到适合新生儿溶血病预判的方法组合.方法 分别在孕妇妊娠的不同时间采集血标本,做产前血清学试验和单核细胞单层试验,并按妊娠次数不同进行分类.新生儿出生时收集脐血,进行新生儿溶血病检查.结果 ABO血型不合夫妇,IgG抗体效价和单核细胞单层试验的灵敏度、特异性、准确率依次为76.2%、61.5%、70.9%和90.1%、64.6%、81.0%.Rh(D)不合夫妇,IgG抗体效价和单核细胞单层试验的灵敏度、特异性、准确率,均依次为100%、94.1%、95.7%.11名早产新生儿,IgG抗体效价和单核细胞单层试验的灵敏度、特异性、准确率均为100%.结论 预判ABO新生儿溶血病单核细胞单层试验总体优于IgG抗体效价测定,可根据患者的实际情况,在进行IgG抗体效价测定的同时,有选择地开展单核细胞单层试验.

    作者:杜振军 刊期: 2012年第06期

  • 锡林浩特地区血浆报废原因分析

    目的 了解血浆报废原因,减小血浆浪费.方法 2008~2010年锡林郭勒盟中心血站采集、制备的病毒灭活滤白血浆13 549份进行报废原因统计分析.结果 血浆总报废率为20.44%,报废率占前3位的依次为:脂浆> ALT>过期.结论 脂浆报废率高与锡林浩特地区居民饮食习惯及采血前未对血浆进行肉眼筛查有关;ALT报废与非病理性因素相关;过期报废与本地区基层医疗条件偏低、没有合理使用血浆有关.

    作者:张广礼 刊期: 2012年第06期

  • 大学生和农民工无偿献血知识和献血动机的调查

    目的 综合评价大学生和农民工无偿献血知识和动机.方法 通过调查石家庄市大学生和农民工无偿献血知识和动机认知现状,对大学生和农民工无偿献血知识和动机作出综合评价.结果 献血反应发生率很小、精神因素是献血反应发生的主要因素、献血是为了尝试体验一下献血过程、献血是迫于无奈或压力等回答正确率不高;免费用血、累计无偿献血达到一定数量者给予奖励、无偿献血不会影响健康和感染疾病以及奉献爱心,帮助需要用血的患者、献血可以体现社会价值、今后享受用血优惠、献血可以减肥等价值取向上,2类人群认知差异有统计学意义(P<0.05).结论 大学生的整体认知水平高于农民工,但2类人群的认知状况有待于进一步提高.

    作者:宋任浩;赵莉华;何路军 刊期: 2012年第06期

  • 无偿献血者检出获得性B抗原1例

    无偿献血者丁某,女,51岁,在本站采血点经健康征询、体检合格后于2012年1月1日献全血400ml,初筛检测血型为AB型,检验科进行血标本检测时发现正定型为AB型,反定型为A型,正反定型不一致,随将标本送至我室,经检测该献血者为A型,红细胞上有获得性B抗原,现将实验情况报道如下.

    作者:张军;李鹏;侯振娇 刊期: 2012年第06期

  • 血站核酸检测实验室质量监控指标应用

    近年来,对血液检测实验室实施质量监控已经成为实验室的一项重要质量活动.实验室质量监控的要求也更多体现在行业法规中.《血站实验室质量管理规范》[1]规定,血站实验室“必须建立和持续改进实验室质量体系,并负责组织实施和严格监控”.美国临床实验室标准委员会CLSI-GP35的发布,更明确了实验室可采用质量监控指标,对检测过程和检测要素进行量化管理和监控,并将其作为改进和完善实验室质量管理体系的重要依据之一.目前,血站行业正在逐步实施血液核酸检测(NAT),建立核酸检测实验室(NAT实验室).相对于已经建立成熟质量监控指标体系的血清学检测过程,如何应用质量监控指标监控NAT检测过程,尚无报道.我们依据本中心NAT实验室基本状况,从过程分析入手,建立了总体类、过程类、资源类监控指标.用这些指标监控NAT过程和NAT实验室质量体系运行状况,以达到控制检测过程、持续改进质量体系的目的.

    作者:汪德海;王瑞;葛红卫 刊期: 2012年第06期

  • 偏远县市设置献血房车固定献血点对于提高无偿献血采集量的效果评价

    目的 探讨在距中心血站偏远的县市普遍设立献血房车对无偿献血招募的作用.方法 对恩施土家族苗族自治州(恩施州)各县市设立献血房车与否或设立献血房车前后的采血量等数据作分析比较,评估献血房车作为固定献血点的招募效果.结果 2011年7~12月,设立献血房车的6个县市采血量增长4660 U,同比平均增长36.63%(14.98% ~59.62%);未设立献血房车的2个县采量增长225.5 U,同比增长6.15%(5.59% ~6.74%);咸丰县设献血房车后较献血屋采血量增长586.5 U,同比增长35.42%.结论 献血房车停放在人口密集的步行街或广场,能“365天”方便边远县市居民的献血,招募献血者的效果稳定、可靠、高效,有助于老少边穷及交通不便的地区建立无偿献血长效机制.

    作者:陈家学;石思蓉;杨仕坤;杨芸 刊期: 2012年第06期

中国输血杂志

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主管:中华人民共和国卫生部

主办:中国输血协会 中国医学科学院输血研究所