学术投稿

-40℃条件下储存不同时间的全血对提取DNA浓度的影响

段莹;于卫建

关键词:-40℃条件, DNA提取, 分光光度法
摘要:目前为止中华造血干细胞志愿捐献者资料库已经建库多年,标本保存是采用低温冰箱全血保存法.对于分子生物学实验有时需要长时间的标本积攒,而长时间的低温保存会对这些全血提取后的DNA的浓度产生何种影响,目前国内还未见详细的报道.本实验室就-40℃冰箱保存的人全血进行基因组DNA的提取,将保存时间为年,0~4年的全血提取的DNA浓度进行了比较.
中国输血杂志相关文献
  • 冷沉淀凝血因子制备方法的比较

    输血是现代医学的重要支持手段,不断提高输血疗效是近代医学关注的焦点之一.冷沉淀凝血因子作为一种血液制品,在临床应用越来越广泛,尤其在治疗甲型血友病、纤维蛋白原缺乏症、产妇大出血、弥漫性血管内凝血等方面获得明显疗效[1].本站于2010年采用Pool方法和虹吸法2种方法制备冷沉淀凝血因子,发现虹吸法较Pool方法,制备时间短,纤维蛋白原和FⅧ因子回收率高,现报道如下.

    作者:柏则蓉;梁启忠;贾红志 刊期: 2011年第11期

  • 从血液保护到血液管理——解读2011版STS和SCA《心脏手术血液保护指南》

    2007年美国胸外科医师学会(STS)和心血管麻醉医师学会(SCA)联合制订了《心脏手术血液保护指南》[1](以下简称《指南》).2个学科共同制订1个专科指南,凸显心脏手术血液保护的重要性.2011年对《指南》做了新的修订[2],吸收了3年来血液保护研究进展和循证医学成果,旨在进一步强化心脏手术的血液保护,减少心脏手术围术期失血和输血.我们现对《指南(2011年版)》新增或对前一版《指南》(2007年版)修订的内容——强调血液管理对血液保护的重要性——做一解读,并将其与阜外心血管病医院近2年来开展血液保护所取得的收获共同以飨读者,希望能为推动国内心脏手术血液保护工作尽一份薄力.

    作者:邓硕曾;纪宏文 刊期: 2011年第11期

  • 转化医学与输血医学

    输血医学(transfusion medicine)的发展至今已超过1个世纪,虽然早在17世纪就有将动物血液输给人类的记载,19世纪开始尝试人与人之间输血,但现代意义的输血肇始于1900年Landsteiner发现ABO血型,发展到今天,输血已由1种治疗手段成为医学科学中的1门独立学科,是多学科交叉发展的结果,涉及免疫学、遗传学、血液学、传染病学、移植生物学、病毒学以及生物工程学等学科.

    作者:王同显 刊期: 2011年第11期

  • 罕见的同种抗-Lea+Leb1例

    1临床资料患者,女性,56岁,汉族,临床诊断为骨髓异常增生综合症(MDS),2009年12月入院化疗,治疗期间Hb进行性下降需输血治疗,输血前检查时抗体筛选阳性,遂送本室进行抗体鉴定和交叉配血.本室血型血清学检查结果为:患者血型为A型RhD阳性、抗体鉴定为抗-Lea、Lewis血型为Le(a-b-).选择交叉配血相合且无Lea抗原的A型RhD阳性悬浮红细胞输注,患者血色素升高,无不良输血反应.此后患者多次(1次/月)到本室配血,与无Lea抗原的悬浮红细胞配血均相合,至2011年2月患者来本室配血,其血清与无Lea抗原的红细胞卡式配血相合、盐水配血不相合,提示该患者体内有新的抗体产生,经抗体鉴定为抗-Lea+ Leb.

    作者:刘亚庆;闫芳;范道旺;许志远;刘凯;刘素芳;王颖;苗天红 刊期: 2011年第11期

  • 血站成分制备人员职业暴露的防护

    血站职业暴露一般是指血站工作人员在血液采集、运输、制备、检验等工作中因操作意外接触到感染性病原体.成分制备人员在工作中与血液密切接触,这些血液大部分是未经检验的待检血,少部分为检验合格的成品血,其职业暴露有着自身的特点,针对这些特点做好重点防护可以有效降低职业暴露的危险性,现结合本站实际工作情况谈谈成分制备人员防护职业暴露的一点体会.

    作者:宋毅;张永征;丛培芳 刊期: 2011年第11期

  • 山东地区汉族人群杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因型P、AE、AG和单体型1、6、17与梅毒的关系

    目的 分析山东地区汉族梅毒患者杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因型和单体型的多态性,探讨其与梅毒发生之间的关联性.方法 采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)法,对山东汉族梅毒患者190名和健康对照者192名的KIR基因进行检测和分析.结果 共检出KIR基因型25种,其中包括新的基因型11种.25种KIR基因型共由12种单体型和6种未知单体型组成.在健康对照组中,KIR基因型P的频率显著高于梅毒患者组(P<0.05),其OR值为0.304;在梅毒患者组中,基因型AE和AG的频率显著高于健康对照组(P<0.05).在健康对照组中,单体型17的表型频率显著高于梅毒患者组(P<0.05),其OR值为0.321;在梅毒患者组中,单体型1和6的表型频率显著高于健康对照组(P<0.05).单体型A和B在这2组人群的分布频率差异相比无统计学意义(P>0.05).结论 KIR基因型AE和AG可能是梅毒的易感基因型,基因型P可能是梅毒的抗性基因型;KIR单体型1和6可能是梅毒的易感单体型,单体型17可能是梅毒的抗性单体型.

    作者:庄云龙;张毅;朱传福;宋永红;王大见;聂向民;刘艳 刊期: 2011年第11期

  • Uranus AE200全自动酶免分析仪分析性能的确认

    根据《血站质量管理规范》、《血站试验室质量管理规范》的要求,血站试验室必须对新的或者有变化的检测方法、设备在投入使用前进行确认.完整的设备确认包括设备的设计确认、环境确认、开箱验收、运行确认、性能确认、计量检定[1],而对设备分析性能的确认是其中一个非常重要的环节.我们参考《中国输血技术操作规程》(讨论稿)(下称规程讨论稿)中关于血液检测方法的确认内容,对新购置的Uranus AE200全自动酶免分析仪ELISA检测的分析性能进行了确认,现报道如下.

    作者:李鹏;聂心教 刊期: 2011年第11期

  • 31766名患者红细胞血型不规则抗体分析

    目的 检测患者血清中不规则抗体,评估不规则抗体在患者的性别、输血史/妊娠史上的发生频率,并探讨不规则抗体筛查在临床输血及孕妇产前检查中的意义.方法 采用盐水法及微柱凝胶免疫检测法对解放军总医院2009年10月~2010年10月31 766名患者进行不规则抗体筛查,并对不规则抗体筛查阳性的病例进行抗体特异性鉴定.结果 在被检标本中共发现217例不规则抗体筛查阳性,阳性率为0.68%,其中男84例,占被调查男性的0.51%,女133例,占被调查女性的0.86%,女性高于男性(x2=14.34,P<0.01).其中有204例曾经有输血史或妊娠史,显著高于无输血史或妊娠史的患者(x2=230.29,P<0.01).在不规则抗体筛查阳性的患者中自身抗体17例,有抗体特异性未能确认者66例,确认抗体特异性134例,其中Rh系统抗体79例(36.40%),MNS系统29例(13.36%),Lewis系统17例(7.83%),其他系统:抗-K 2例、抗-Kpa1例、抗-Fya1例、抗-Jka 2例、抗-P1 2例、抗-e联合抗-P1 1例.免疫球蛋白类别IgG抗体152例(70.04%);IgM抗体26例(11.98%);IgM+ IgG抗体39例(17.97%).结论 患者在输血前及孕妇在产前进行抗体筛查,并对出现的不规则抗体特异性进行鉴定是非常重要的,特别是对有输血史/妊娠史的患者意义重大.

    作者:王谦;燕备战;于洋 刊期: 2011年第11期

  • IgM与IgG型抗-D引起新生儿溶血病1例

    1病例简介患儿,男,2d,在某医院出生后当日皮肤出现黄染.患儿母亲无输血史,第1、2胎分别孕4月、2月自愿流产,第3胎产后发生不明原因黄疸而死亡,该患儿为第4胎.医院怀疑该患儿系母子血型不合引起的新生儿溶血病,遂将母子标本送本血站血型室相关检测,经检测产妇血清中含有效价较高的IgG与IgM抗-D.临床经对症治疗,输注ABO同型的Rh(D)阴性红细胞后,症状明显好转,14 d后出院.

    作者:夏伟;耿微 刊期: 2011年第11期

  • 干化学法在无偿献血者ALT初筛中的应用分析

    目前,国内采供血系统检测ALT的方法有酮体粉法、赖氏法、速率法[1],但均不适用于街头流动采血点的初筛ALT[2].2010年我们引进德国Reflotron快速全血生化仪和试纸条[3],进行无偿献血者ALT的初筛,具体情况报道如下.

    作者:高均翠 刊期: 2011年第11期

  • 辽宁汉族人群MICA、TNF基因微卫星多态性研究

    目的 探讨中国北方辽宁汉族人群HLA区域的MICA和TNF基因微卫星多态性分布.方法 采用PCR-毛细管电泳方法检测197名正常无关个体的MICA基因第5外显子和TNF基因复合体TNFa微卫星的基因型.应用Arlequin和SPSS软件进行统计分析.结果 辽宁汉族人群MICA基因第5外显子存在5种等位基因,其中以A5.1为常见(34.01%);TNFa位点存在13种等位基因,其中以a6为常见(33.76%).辽宁地区和南方部分地区汉族人群MICA基因第5外显子和TNFa位点的等位基因频率分布均具有统计学差异(P<0.01).MICA基因第5外显子和TNFa位点间存在一定的连锁不平衡,如单体型A5-a6和A5.1-a7(P <0.05).结论 MICA基因第5外显子和TNFa位点微卫星多态性分布在中国汉族人群中均存在地区差异.

    作者:范亚欣;于卫建;段莹;梁晓华 刊期: 2011年第11期

  • 滤除白细胞灭活病毒冰冻血浆Ⅷ因子和血浆蛋白检测分析

    目前国内对冰冻血浆的研究报道多见于新鲜冰冻血浆,但对滤除白细胞灭活病毒下称(滤白灭活)后冰冻血浆质量的变化报道尚不多见.本中心于2009年开始推广使用滤白并MBR(亚甲蓝光照法)法进行血浆去除白细胞和病毒灭活,目前已有2 200万ml的滤白灭活冰冻血浆用于临床,收到良好的临床效果.现对血液采集后9、30 h滤白灭活前后制备血浆各12人份进行了质量检测并对其Ⅷ因子和血浆蛋白含量变化进行了统计分析,报道如下.

    作者:聂海祺;吕延中;王淑梅;李剑平;刘显智 刊期: 2011年第11期

  • 国内血浆置换治疗慢性重型肝炎疗效的Meta分析

    目的 系统评价国内文献报道的血浆置换治疗慢性重型肝炎的疗效.方法 1)检索策略:检索中国生物医学文献数据库、中国期刊全文数据库、万方医药期刊数据库及维普中文科技期刊全文数据库2000 ~ 2010年公开发表的血浆置换治疗慢性重型肝炎的中文文献,同时通过与同事、专家和厂家联系获得同期未发表的同类中文文献资料(即灰色文献,包括学术报告、会议论文、毕业论文等);2)文献评价:按照严格的纳入/排除标准筛选符合标准的文献10篇,采用Cochrane协作网推荐的方法评价文献质量;3)统计学处理:采用Cochrane协作网提供的RevMan4.2软件做Meta分析.结果 10篇文献评价均为B或C级,为低质量研究;Meta分析显示:10项研究具有同质性[早期:chi2=3.01,df =9(P =0.96),I2=0%;中期:chi2=3.23,df =9(P =0.95),I2=0%;晚期:chi2=2.54,df =9(P =0.98),I2=0%];早、中、晚期慢性重型肝炎治疗组与对照组比较,其固定效应模型的合并比值比分别为:早期OR =4.06,95% CI为(2.60,6.35),Z=6.16(P <0.000 01);中期OR =3.04,95%CI为(2.18,4.24),Z=6.56(P <0.000 01);晚期OR =1.71,95% CI为(0.96,3.03),Z=1.83(P =0.07).血浆置换治疗早中期慢性重型肝炎患者的疗效明显高于常规治疗组(P <0.000 01),晚期不明显(P =0.07 >0.05).结论 与常规内科治疗相比,血浆置换能够有效提高早、中期慢性重型肝炎患者的疗效,而对晚期不明显.

    作者:张洪为;李代渝 刊期: 2011年第11期

  • -40℃条件下储存不同时间的全血对提取DNA浓度的影响

    目前为止中华造血干细胞志愿捐献者资料库已经建库多年,标本保存是采用低温冰箱全血保存法.对于分子生物学实验有时需要长时间的标本积攒,而长时间的低温保存会对这些全血提取后的DNA的浓度产生何种影响,目前国内还未见详细的报道.本实验室就-40℃冰箱保存的人全血进行基因组DNA的提取,将保存时间为年,0~4年的全血提取的DNA浓度进行了比较.

    作者:段莹;于卫建 刊期: 2011年第11期

  • 四川地区供血浆人群隐匿性乙型肝炎病毒感染的研究

    目的 了解四川地区供血浆人群隐匿性乙型肝炎病毒感染(OBI)情况,分析现行标准下原料血浆的HBV残余风险.方法 采用实时荧光PCR和ELISA法,对四川地区10个单采血浆站2007年7月~2009年7月筛查合格的56 620名次供浆者的135 542份原料血浆标本作HBV NAT和HBsAg同步筛查,对筛查阳性的标本以进口试剂复核、作中和试验及HBV DNA定量测定,并对阳性血浆的供血浆者追踪分析,确认OBI标本.结果 共检出HBV DNA阳性12份(9人),四川地区原料血浆HBV DNA检出率为0.008 9%(12/135 542);HBV DNA载量均<1 000 IU/ml;采用国产ELISA试剂检测该12份标本HBsAg均为阴性,而用进口试剂检测并经中和试验确认了其中5份(3人)为HBsAg阳性,其余7份(6人)为OBI血浆,血清学模式均为HBsAg-/HBeAg-/HBcAb+;对供血浆者2~9个月的追踪分析显示ELISA和NAT检测结果无变化,与筛查结果一致.结论 HBsAg阴性供血浆人群中存在OBI感染者,四川供浆人群中OBI感染率为0.010 6%(6/56 620),低于现有报道的我国无偿献血者的OBI感染率;按照现行要求采用ELISA法检测原料血浆,灵敏度较低的国产试剂检测HBsAg的残余风险(0.0089%)高于进口试剂(0.005 2%).增加HBV NAT能有效降低原料血浆OBI的漏检风险.

    作者:张燕;曾飞翔;何学新;何培德;刘丽;程皓;马异云;杨汇川 刊期: 2011年第11期

  • 单采血小板献血者发生不良反应个体影响因素分析

    目的 探讨影响单采血小板献血者发生不良反应个体相关因素,以便采取相应措施减少不良反应发生,保证献血者的健康.方法 对2008年4~12月本站采集的516名单采血小板献血者的资料进行回顾性调查,用Logistic回归分析的方法分析单采献血者发生不良献血反应个体相关影响因素及影响效果.结果 516名单采血小板献血者中,发生献血反应44例,总反应率8.5%,其中轻度10(1.9%),中度3例(0.6%),重度未见;枸盐酸盐中毒占31例(6.0%),不同个体因素的献血者出现不良反应的情况不同.用Logistic回归分析影响献血反应的主要因素有:性别、体重、血液体外循环量.结论 性别、体重、血液体外循环量可能是献血不良反应发生的主要影响因素,各因素造成的低血容量是献血者发生不良反应的主要原因,低体重、初次献血、年龄偏小的女性更容易发生献血反应.

    作者:杜红梅 刊期: 2011年第11期

  • DNA序列分析鉴定HLA新等位基因B*58∶01∶04

    目的 确认中国人群中的1个新HLA等位基因.方法 使用PCR-SSO、PCR-SSP和测序为基础的分型技术,分析确认HLA-B位点新等位基因与B*58∶01∶01的差异.结果 先证者HLA-B位点的2个等位基因为纯合子(均为HLA-B*58∶ 01∶04),不同于(已)知的HLA-B等位基因序列,与其同源性高的B*58∶01∶01相比,在第4外显子处有1个碱基发生了改变,为785位G>A,但编码的氨基酸并未发生变化,仍然为Gln.结论 该等位基因于2009年10月由WHO HLA因子命名委员会正式命名为HLA-B*58∶ 01∶04.

    作者:刘嬿;季云;杨剑豪;孙瑛;谢军华;郑皆炜;杜可明 刊期: 2011年第11期

  • 上海地区高危人群献血屏蔽机制初步研究

    随着经济发展,上海的开放程度不断提升,流动人口不断增加.随之而来的输血传染病传播风险也不断提高.现有的血液管理信息系统通过黑名单的方式对高危人群献血进行筛选[1,2].随着信息化的发展,上海公共卫生体系不断完善,如何融入基于公共卫生信息系统的平台成为未来发展方向的1个选择.在具体实施和建设中会面临筛选数据来源,统一交换标准,选择交换平台,建立信息安全策略,包括机制建立后维护等一系列问题.

    作者:张喆;高瑜 刊期: 2011年第11期

  • 血细胞分离机在机采血小板采集中常见报警故障

    Amicus血细胞分离机是新一代血细胞分离机,可为临床提供去白细胞机采血小板,以满足日益提高的临床治疗需求.2005年3月~2010年4月,我们对本中心使用的Ami-cus机器采集血小板46 733例进行研究,对采集过程中常见报警故障[1]进行分析,并提出处理方法及技巧,现报道如下.

    作者:李爱萍;赵晓芳;白洁 刊期: 2011年第11期

  • 孕妇血浆中胎儿游离DNA在胎儿ABO血型鉴定中的应用

    目的 探索1种新的胎儿ABO血型的检测方法,为预防ABO血型系统新生儿溶血病提供可靠依据.方法 收集医院2009年1~12月送检的O型孕妇34名,提取孕妇外周血血浆中胎儿游离DNA,利用聚合酶链反应——限制性片段长度多态性分型(PCR-RFLP)检测胎儿ABO血型.结果 在34例标本中,32例实验成功,且与胎儿出生后的ABO血型一致,其中A型11例、B型15例、O型6例,2份标本扩增失败.结论 利用孕妇外周血中胎儿游离DNA来检测胎儿ABO血型的方法,准确性高,安全性好,值得临床推广.

    作者:杨波;贠中桥;吕运来;马红丽;刘广超;兰炯采 刊期: 2011年第11期

中国输血杂志

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主管:中华人民共和国卫生部

主办:中国输血协会 中国医学科学院输血研究所