学术投稿

肿瘤研究常用动物小鼠病原菌16s rDNA检测方法的建立

时伟红;魏政立;郭晓冲;刘佳;吴腾飞;郑志红

关键词:小鼠, 病原菌, 16S rDNA, 多聚酶链反应
摘要:目的:建立肿瘤研究常用动物小鼠病原菌快速检测方法.方法:提取经常规方法已被鉴定的小鼠病原菌绿脓杆菌、溶血性链球菌和大肠埃希氏菌DNA,利用PCR技术扩增病原菌16s rDNA全长,经纯化后直接测序.利用BLAST软件从GenBank数据库中搜索相关菌株的序列进行序列比对和同源性分析,确定病原菌的种属.结果:测序结果与数据库中搜索到的相关菌株的序列进行序列比对显示,3种病原菌测序序列分别与绿脓杆菌、溶血性链球菌和大肠埃希氏菌序列一致.结论:16s rDNA PCR方法可准确地检测肿瘤研究常用动物小鼠病原菌绿脓杆菌、溶血性链球菌和大肠埃希氏菌感染,并且缩短了检测时间.
现代肿瘤医学杂志相关文献
  • TACE联合PSE在原发性肝癌并脾亢治疗中的应用

    目的:探讨原发性肝癌行TACE联合不同程度PSE对术后血常规及肝功能部分化验指标的影响.方法:2014年4月至2014年6月对本院原发性肝癌伴脾功能亢进行TACE联合PSE治疗的患者45例,按照脾栓塞比例分为:脾栓塞程度<50%(A组)、50%-60%(B组),术前及术后每周复查外周血WBC、PLT、AST、ALT、TBI至术后第8周,并进行Child分级.结果:A、B两组患者术后外周血中WBC、PLT计数均较术前有所升高,B组升高更明显,在随访末期A组明显呈下降趋势;A、B两组术前术后肝功能无明显变化.结论:在TACE联合PSE治疗中,脾栓塞比例是影响外周血WBC、PLT的重要因素;不同脾栓塞比例对肝功能无明显影响,高比例脾栓塞可加重栓塞后反应.

    作者:刘杰;刘鸿章;周荣林;段文都;李根 刊期: 2015年第08期

  • 烟酰胺磷酸核糖转移酶在子宫内膜癌中的表达及临床意义

    目的:探讨烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)蛋白的表达与子宫内膜癌生物学行为之间的关系.方法:选取中国医科大学附属盛京医院2013年5月-2014年5月手术切除的40例子宫内膜癌组织(均为腺癌)及30例正常子宫内膜组织.采用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测其Nampt mRNA的表达、免疫组织化学SP法及蛋白免疫印迹检测Nampt蛋白的表达水平,并分析其表达量与子宫内膜癌临床病理学参数的关系.结果:Nampt mRNA在子宫内膜癌组织和正常子宫内膜组织中的相对表达量分别为3.774±2.399和1.286±0.762,差异有统计学意义(P<0.05).Nampt蛋白在子宫内膜癌组织和正常子宫内膜组织中的相对表达量分别为0.426±0.16和0.203±0.129,差异有统计学意义(P<0.05).在不同临床分期、不同肌层浸润的子宫内膜癌组织中Nampt蛋白的表达量有统计学差异(P<0.05).结论:Nampt蛋白的过度表达在子宫内膜癌的发生、发展过程中可能起到一定的作用.

    作者:蔡乐;杨清;毕芳芳 刊期: 2015年第08期

  • TLR4 Thr399Ile基因多态性与胃癌易感性的研究

    目的:探讨Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4) Thr399Ile基因多态性与胃癌易感性的关系.方法:通过计算机检索及手工检索,收集有关TLR4 Thr399Ile基因多态性与胃癌易感性的文献,筛选出符合纳入和排除标准的文献,应用Meta分析软件对各项研究进行异质性检验,计算合并OR值及其95% CI,并行敏感性分析和发表偏倚的评估.结果:8篇文献纳入本研究,共计有1297例胃癌患者和2702例对照人群.TLR4Thr399Ile基因多态性与胃癌易感性的研究结果为:T versus C:OR=1.307,95% CI=1.047-1.631:TT versus CC:OR=1.527,95% CI=0.398-5.860; TC versus CC:OR=1.324,95% CI=1.049-1.670; TT/TC versus CC:OR=1.326,95% CI=1.053-1.671;TT versus TC/CC:OR=1.481,95%CI=0.386-5.685.根据种族来源进行分层分析,在高加索人群中的研究结果为:T versus C:OR=1.298,95% CI=1.027-1.640;TC versus CC:OR =1.313,95% CI=1.027-1.679; TT/TC versus CC:OR=1.316,95% CI=1.031-1.679.结论:TLR4Thr399Ile TC、TT/TC基因型及T等位基因能增加胃癌的患病风险.

    作者:卜迟文;王绪山;杨全德;刘景宏;谭扬;张冬 刊期: 2015年第08期

  • FoxM1在胶质瘤对卡氮芥化疗抵抗中的作用

    目的:研究FoxM1在胶质瘤细胞对卡氮芥化疗耐药中的作用,为胶质瘤化疗提供新的靶点和依据.方法:建立对BCNU耐药的胶质瘤细胞株,采取Western blot法检测FoxM1蛋白表达水平的变化;通过RNA干扰技术下调FoxM1表达水平,CCK-8法检测胶质瘤细胞对卡氮芥的敏感性;检测DNA损伤修复基因XRCC1蛋白表达水平.结果:卡氮芥耐药的U251胶质瘤细胞中FoxM1与XRCC1的蛋白表达水平明显升高;下调FoxM1表达水平后,恢复了耐药细胞株对卡氮芥的敏感性;下调FoxM1蛋白表达水平后,XRCC1蛋白表达水平随之下降,与胶质瘤细胞对卡氮芥的敏感程度相关.结论:FoxM1在胶质瘤细胞对卡氮芥耐药过程中发挥重要作用;在这一过程中,DNA损伤修复机制参与了FoxM1介导的胶质瘤细胞对卡氮芥的耐药过程.

    作者:张明杰;范承哲;李少一;刘云会 刊期: 2015年第08期

  • 特异性下调CXCR4表达对食管鳞癌细胞迁移侵袭能力的影响

    目的:探讨特异性下调CXCR4分子的表达对食管鳞癌细胞系TE-1迁移侵袭能力的影响.方法:根据CXCR4基因序列,设计合成CXCR4特异性小干扰RNA,采用siRNA技术下调CXCR4的表达,转染48h后RT-PCR和Western blot检测各组细胞CXCR4在mRNA水平和蛋白质水平表达,通过Traswell小室实验检测细胞系迁移侵袭能力的差异.结果:小干扰RNA下调CXCR4表达后,Western blot和RT-PCR证实TE-1细胞中CXCR4表达明显下调,Traswell小室实验证实,下调CXCR4表达后,TE-1细胞的体外迁移侵袭潜能显著降低.结论:小干扰RNA下调CXCR4基因后,降低了食管鳞癌细胞TE-1的迁移侵袭能力,CXCR4表达水平与食管鳞癌的迁移侵袭能力呈正相关,抑制CXCR4表达能够使食管鳞癌细胞迁移侵袭能力明显降低.

    作者:薛锋;张璞;周斌 刊期: 2015年第08期

  • CD146与泌尿系肿瘤关系的研究进展

    CD146属于免疫球蛋白超家族(IGSF)成员,CD146的高表达与黑素瘤、前列腺癌等多种肿瘤发生及转移密切相关.然而,令人难以相信的是CD146在乳腺癌的表达与其他肿瘤的情况有所不同,其在乳腺癌中的表达明显降低,似乎提示CD146抑制乳腺的发生及进展.本文就CD146基因的结构、特征、功能及其泌尿系肿瘤的关系作一系统综述.

    作者:袁红纲;龙兵;董自强;张路生 刊期: 2015年第08期

  • 原发乳腺淋巴瘤的研究进展

    原发性乳腺恶性淋巴瘤是一种少见的、异质性结外非霍奇金淋巴瘤类型,具有特殊的临床表现.常见的病理类型是弥漫大B细胞淋巴瘤,但也存在其他不常见的亚型.我们将描述原发性乳腺恶性淋巴瘤的特点,重点在发病机理、分期、风险分层、预后及新治疗进展.

    作者:吕鑫鑫;余长艳;赵曙;张清媛;张悦 刊期: 2015年第08期

  • 涎腺硬化性多囊性腺病的临床病理及影像学分析

    目的:探讨涎腺硬化性多囊性腺病(SPA)的影像学、临床病理特征及预后.方法:对1例SPA进行影像学、组织学形态及免疫组化染色观察,随访26个月并结合文献复习,探讨该病的临床病理特征及预后.结果:SPA临床上主要表现为涎腺缓慢生长的无痛性肿块.组织学特征与乳腺纤维囊肿性病变相似,表现为不规则的导管及腺泡分布于丰富的硬化性胶原间质中,形成模糊的小叶状结构.腺上皮细胞形态多样,有的呈大汗腺样化生,有的胞质内含丰富的嗜伊红酶原颗粒,导管上皮可以增生并伴有非典型性.免疫组化染色显示腺上皮EMA弥漫强阳性,导管及腺泡周围肌上皮SMA及Calponin阳性.Ki-67指数<1%.影像学表现:彩超结果表现为边界相对清楚或不清楚的低回声团,可以探及稀疏的血流信号.CT:表现为软组织密度肿块影,边缘较光滑,与正常腮腺分界清楚,也可边界不清.结论:硬化性多囊性腺病是一种罕见的涎腺疾病.主要发生于腮腺,预后较好.影像学缺乏特征表现,界限不清时易误诊为恶性肿瘤.需与黏液表皮样癌、多形性低度恶性腺癌、慢性涎腺炎等鉴别.

    作者:张全武;和莹莹;娄欣;刘俊玲;赵红梅;肖艳景;邢辰威 刊期: 2015年第08期

  • 伊马替尼治疗中miRNA在慢性粒细胞白血病患者中的表达

    目的:探讨miRNA在服用伊马替尼治疗慢性粒细胞性白血病(CML)患者中的表达水平以及与CML患者服用伊马替尼后病情进展的关系.方法:收集慢性粒细胞白血病初诊敏感患者和病情进展患者的骨髓标本共35例.制备骨髓单个核细胞并提取总RNA,利用紫外分光光度仪检测RNA提取液的浓度和纯度,后利用real-time PCR技术检测microRNA-21、microRNA-10a、microRNA-31、microRNA-34a、microRNA-155在敏感组和进展组中的相对表达水平.结果:慢性粒细胞白血病患者服用伊马替尼后进展组白血病细胞中microRNA-21(miR-21)的表达明显高于敏感组,miR-10a、miR-31、miR-34a、miR-155在两组患者骨髓单个核细胞中的表达水平无显著统计学意义(P>0.05).结论:miR-21的高表达可能与慢性粒细胞性白血病患者服用伊马替尼后病情进展有关.

    作者:陈彭;秦炜炜;张阳萍;杨健;刘利 刊期: 2015年第08期

  • 肿瘤研究常用动物小鼠病原菌16s rDNA检测方法的建立

    目的:建立肿瘤研究常用动物小鼠病原菌快速检测方法.方法:提取经常规方法已被鉴定的小鼠病原菌绿脓杆菌、溶血性链球菌和大肠埃希氏菌DNA,利用PCR技术扩增病原菌16s rDNA全长,经纯化后直接测序.利用BLAST软件从GenBank数据库中搜索相关菌株的序列进行序列比对和同源性分析,确定病原菌的种属.结果:测序结果与数据库中搜索到的相关菌株的序列进行序列比对显示,3种病原菌测序序列分别与绿脓杆菌、溶血性链球菌和大肠埃希氏菌序列一致.结论:16s rDNA PCR方法可准确地检测肿瘤研究常用动物小鼠病原菌绿脓杆菌、溶血性链球菌和大肠埃希氏菌感染,并且缩短了检测时间.

    作者:时伟红;魏政立;郭晓冲;刘佳;吴腾飞;郑志红 刊期: 2015年第08期

  • 基质金属蛋白酶-9及其相关因子与卵巢癌的研究进展

    卵巢癌是一种恶性程度高、发病隐匿的妇科恶性肿瘤,死亡率居妇科恶性肿瘤之首.多数卵巢癌诊断时已是晚期.MMP-9即基质金属蛋白酶-9,是重要的蛋白水解酶,参与肿瘤侵袭与转移的多步骤过程.大量研究证明:MMP-9能降解细胞外基质的多种成分,包括明胶和基底膜的Ⅳ型胶原,Ⅳ型胶原是构成阻止肿瘤侵袭屏障的重要成分,同时MMP-9还可以促进肿瘤细胞的生长,减少肿瘤细胞凋亡,促进肿瘤血管的生成,在卵巢癌的侵袭与转移中发挥重要作用.多种因子被发现与卵巢癌有关,研究其机制时发现与MMP-9的表达水平相关,下调MMP-9的表达水平成为卵巢癌新的治疗方法.本文对MMP-9及其相关因子在卵巢癌中的研究进展进行综述,并对其在卵巢癌的研究与应用前景作出展望.

    作者:刘天怡;李佩玲 刊期: 2015年第08期

  • 单通道双支架置入治疗梗阻性黄疸的临床研究

    目的:观察单侧入路双支架植入术治疗左、右肝管同时受累梗阻性黄疸患者的疗效.方法:左、右肝内胆管同时受累的梗阻性黄疸患者7例,经皮经右肝或左肝单侧入路,通过在左、右肝管间和肝管、胆总管间植入金属双支架行胆管内引流.结果:7例14枚支架全部放置成功,总胆红素由术前的(324.4±221.7)μmol/L,降至术后1、2、4周的(263.9±147.2) μmol/L、(104.8±96.5) μmol/L、(43.6±34.3) μmol/L.直接胆红素由术前的(241.8±121.6) μmol/L,降至术后1、2、4周的(198.6±155.3)μmol/L、(92.4 ±81.7) μmol/L、(34.7±34.6) μmol/L.患者无严重并发症及死亡.结论:左、右肝管同时受累的胆管梗阻患者行单侧入路双支架植入技术治疗是一种安全、有效、可靠的治疗方法.

    作者:李洪义;何东风;张启暝 刊期: 2015年第08期

  • 非小细胞肺癌ERCC1基因和β-tubulinⅢ基因的研究进展

    非小细胞肺癌(normal cell lung cancer,NSCLC)的发病率和死亡率近年明显增高,在新诊断的患者中,有65%已不能行手术治疗,因此化学治疗(化疗)是治疗非小细胞肺癌的主要手段.但是由于耐药的存在,化疗疗效有效率有限,治疗的有效率仅为20%-40%.近年来随着肿瘤分子生物学的发展,已发现ERCC1、β-tubulinⅢ等基因的表达水平和化疗药物疗效及预后密切相关,并有可能成为预测疗效进行个体化治疗的重要指标.根据基因表达水平及药物敏感情况选择个体化的化疗方案是肿瘤学研究和临床肿瘤化疗的趋势.

    作者:张杰;赵勇;麻成方;洪琼川 刊期: 2015年第08期

  • 64层螺旋CT血管造影及三维重建在青年女性肺癌诊断中的价值

    目的:探讨64层螺旋CT血管造影(CT angiography,CTA)及三维重建技术在青年女性肺癌诊断中的价值,旨在提高其诊断准确率.方法:对经病理证实的青年女性肺癌组52例及正常对照组28例行胸部CT增强扫描的病例,采用容积显示(volume rendering,VR)、多平面重建(multi-planar reformat,MPR)及大密度投影(maximum intensity projection,MIP)后处理技术进行三维重建,分析其影像学表现.结果:青年女性肺癌组52例中49例可以重建出支气管动脉(BA),显示率为94.2%,平均2.5支/人;正常对照组28例中22例可以重建出BA,显示率为78.6%,平均1.3支/人.青年女性肺癌组BA显示率明显高于对照组(P<0.05),青年女性肺癌组重建BA数明显多于正常对照组,青年女性肺癌组同侧BA管径较正常对照组BA明显增粗(P<0.01).结论:64层螺旋CT血管造影及三维重建是青年女性肺癌的重要检查方法,可以提高其诊断准确率.

    作者:钱智;李淼;周荣林 刊期: 2015年第08期

  • 胰高糖素样肽-1受体激动剂对甲状腺乳头状癌细胞生长和增殖的影响

    目的:探讨甲状腺癌细胞中胰高糖素样肽-1(Glucagon like peptide-1,GLP-1)受体的表达情况,及其对癌细胞生长和增殖的影响.方法:Western blot法检测甲状腺乳头状癌(Papillary thyroid cancer,PTC)细胞系GLP-1受体表达情况.采用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)评价两种GLP-1受体激动剂艾塞那肽和利拉鲁肽处理后细胞增殖情况.Western blot法测定细胞中蛋白激酶B(Protein kinase B,Akt)及细胞外信号调节蛋白激酶1/2(Extracellular signal-regulated kinase 1/2,Erk1/2)等细胞信号通路相关蛋白的表达.结果:PTC细胞系BCPAP、TPC-1中均可检测到GLP-1受体的表达.艾塞那肽和利拉鲁肽分别以1 nmol/L、10noml/L和100nmol/L作用于细胞24h、48h和72h后,实验组细胞增殖率与对照组相比无统计学差异.不同浓度艾塞那肽和利拉鲁肽作用细胞24h后,实验组Akt和Erk蛋白表达水平及其磷酸化程度与对照组相比无统计学差异.结论:人甲状腺乳头状癌细胞中有GLP-1受体的表达.但是,GLP-1受体激动剂对甲状腺癌细胞的增殖无明显促进作用.同时,GLP-1受体激动剂对与细胞增殖密切相关的Akt和Erk通路无明显作用.

    作者:刘睿;王红;郭慧玲;关海霞;单忠艳;滕卫平 刊期: 2015年第08期

  • 中草药猫眼草提取物诱导人胃癌细胞凋亡可能分子机制的探讨

    胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一.药物学治疗是目前抗肿瘤防治研究为活跃的领域.猫眼草作为中国传统中草药之一,其提取物对肿瘤细胞作用的研究已有部分报道,本文就猫眼草或其有效成分诱导人胃癌细胞凋亡的研究进展,及其可能发生的机制作一综述.

    作者:王亚萍;陈锴;惠起源 刊期: 2015年第08期

  • 晚期肺鳞癌一线吉西他滨/紫杉醇与铂类二联方案疗效比较

    目的:比较晚期肺鳞癌患者一线吉西他滨/紫杉醇与铂类二联方案的临床疗效,为晚期肺鳞癌患者个体化化疗方案筛选提供临床依据.方法:回顾性分析2008年6月至2012年5月经病理确诊的、一线应用吉西他滨或紫杉醇铂二联方案化疗的转移性肺鳞癌患者62例,分为2个治疗组,每组患者均为31例.结果:吉西他滨铂二联方案客观有效率为32.3%,紫杉醇铂二联方案客观有效率为35.5%,二者比较差异不具有统计学意义(P=0.737);两组患者中位无进展生存期分别为5个月(95%CI 3.2-6.8个月)和5个月(95%CI 3.7-6.3个月),二者比较差异不具统计学意义(P=O.058);两组患者中位生存期分别为10个月(95% CI8.9-11.1个月)和12个月(95%CI 9.7-14.3个月),二者比较差异不具有统计学意义(P=0.087).结论:在晚期肺鳞癌中,吉西他滨/紫杉醇铂二联方案的疗效相似,其中紫杉醇铂二联具有生存优势.

    作者:赵玲娣;李威;张勇;王子兵;高全立 刊期: 2015年第08期

  • MAP3K1及LSP1基因单核苷酸多态与中国北方汉族绝经前妇女乳腺癌风险相关性

    目的:探讨MAP3K1及LSP1基因单核苷酸多态与中国北方汉族绝经前妇女乳腺癌风险的关系.方法:采用多重单碱基延伸单核苷酸多态性分型技术(Snapshot)分析方法,检测280例绝经前乳腺癌患者和287例绝经前正常对照者MAP3K1基因rs889312和LSP1基因rs3817198多态性位点基因型,并比较不同基因型与乳腺癌风险的关系.结果:MAP3 K1基因rs889312和LSP1基因rs3817198多态性位点基因型频率在乳腺癌和对照样本之间未存在显著差异(P =0.937、P=0.323).Logistic回归分析结果显示,对于MAP3K1的rs889312位点,与AA携带者相比,AC携带者、CC携带者和AC+ CC基因型携带者与乳腺癌的患病危险无关(OR=0.814,95% CI=0.537-1.236,P=0.335; OR=0.999,95%CI=0.627-1.594,P=0.998; OR=0.876,95%CI =0.591-1.298,P=0.509);对于LSP1的rs3817198位点,与TT携带者相比,CT携带者、CC携带者和CT+ CC基因型携带者与乳腺癌的患病危险无关(OR=0.832,95%CI =0.565-1.223,P=0.349;OR=0.651,95%CI =0.108-3.936.P=0.640;OR=0.839,95%CI=0.573-1.229,P=0.369).结论:上述两个基因MAP3K1和LSP1位点多态性与中国北方汉族绝经前妇女乳腺癌易感性之间无明显相关性.

    作者:吴昊;姜永冬;庞达 刊期: 2015年第08期

  • 不同止血方法对腹腔镜下卵巢肿瘤剥除术后卵巢功能影响的临床对比研究

    目的:探讨不同止血方法对腹腔镜下卵巢肿瘤剥除术后卵巢功能的影响.方法:本研究选择2011年5月-2013年3月我院收治的92例卵巢良性肿瘤患者,根据在腹腔镜下卵巢肿瘤剥除术中所采取的止血方法的不同将其分为观察组与对照组,观察组患者采用双极电凝止血法,对照组患者采用缝合的止血方法.观察两组患者手术时间、出血量、住院天数、体内性激素[卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)]水平及手术后月经情况的变化.结果:观察组患者的手术时间明显低于对照组,出血量及住院天数也显著性低于对照组,组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05);两组患者手术前性激素(FSH、E2、LH)水平进行比较无显著性差异(P>0.05),手术后两组性激素水平比较有显著性差异(P<0.05);观察组的月经正常率为93.5%,对照组为71.7%,观察组正常率明显高于对照组,两组比较有统计学意义(P<0.05).结论:采用电凝的止血方法与传统的手术缝合方法相比,前者可以有效保持卵巢的正常生理功能,降低手术对患者的副作用,值得进一步研究.

    作者:陈冰;刘佳;李春东 刊期: 2015年第08期

  • miR-30c表达调控对大肠癌细胞生物学行为的影响及其机制探讨

    目的:探讨上调miR-30c的表达对大肠癌(CRC)细胞生物学行为的影响及可能的机制.方法:将miR-30c模拟物转染CRC细胞株SW620,qRT-PCR方法检测转染后miR-30c的表达,CCK-8法检测细胞增殖情况,Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡情况,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力的改变,qRT-PCR和Western blot检测转染后SNAI2 mRNA和蛋白的表达.结果:转染miR-30c模拟物后,SW620细胞的miR-30c表达明显增高,细胞增殖减少(P<0.05),凋亡增加(P<0.05),侵袭能力显著降低(P<0.05).SNAI2 mRNA及蛋白表达水平明显下调,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:SW620细胞miR-30c表达上调,可抑制细胞增殖和侵袭、诱导细胞凋亡,其机制可能与抑制SNAI2表达相关.

    作者:吴巍芸;周宇 刊期: 2015年第08期

现代肿瘤医学杂志

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主办:中国抗癌协会 陕西省抗癌协会 陕西省肿瘤防治研究所 陕西省医学会