NDV-ATV与树突状细胞联合诱导抗胃癌作用研究

吴淼；余佩武；曾冬竹；雷晓；赵永亮；朱自满；王自强

关键词：新城鸡瘟病毒修饰的自体肿瘤细胞瘤苗, 树突状细胞, 胃癌, 免疫治疗

摘要：目的研究负载新城鸡瘟病毒修饰的自体肿瘤细胞瘤苗(NDV-ATV)抗原的树突状细胞(DCs)诱导的抗胃癌效应.方法新城鸡瘟病毒感染MNK45细胞并灭活,粒巨细胞集落刺激因子(GM-CSF)、IL-4和TNF-a体外诱导扩增DCs并负载NDV修饰后的胃癌抗原,制备胃癌抗原特异性细胞毒性淋巴细胞(CTL);用Cyto Tox 96TM检测其对MNK45细胞体外杀伤效应,并以冻融胃癌细胞抗原为对照.结果负载新城鸡瘟病毒胃癌抗原DCs诱导的特异性CTL对MNK45细胞的杀伤率达(90.15±9.82)%,显著高于冻融抗原的杀伤率[(60.57±5.74)%],P＜0.05,且其对同种不同分化类型的胃癌细胞株MGC803及SGC901也有较高的杀伤效应[(52.23±6.45)%,(61.75±8.84)%],而对LOVO及HepG2肿瘤细胞无显著杀伤作用[(9.11±3.42)%,(8.30±3.12)%],P＜0.05.结论新城鸡瘟病毒修饰的胃癌细胞,联合树突状细胞可诱导产生高效和特异的抗胃癌效应.提示NDV-ATV联合DCs可作为胃癌免疫治疗的一种有效的新方法.

中国普外基础与临床杂志相关文献

SUMO-1对p53基因诱导HepG2细胞凋亡的增强作用

目的研究小分子泛素样修饰体-1(small ubiquitin-like modifier-1,SUMO-1在野生型p53基因诱导HepG2细胞凋亡中的作用.方法用含人野生型p53基因质粒pcDNA3-wtp53(pwtp53)、含人双微粒体基因2[(human double minute gene 2(HDM2);鼠同源基因为MDM2]质粒pCMV-HDM1B(pMDM2)、含人SUMO-1基因质粒pcDNA3-His6-SUMO-1(pSUMO-1)和空质粒pcDNA3分别或同时转染HepG2细胞,获得各转染细胞系,应用Western blot检测转染后细胞中质粒蛋白的表达及流式细胞技术检测细胞凋亡比例.结果转染pwtp53和pMDM2质粒的HepG2细胞均可见p53及MDM2蛋白条带,同时转染pSUMO-1质粒的细胞分别可见被SUMO-1修饰的相对分子量较大的p53和MDM2蛋白条带,在未转染任何质粒、仅转染空质粒和pSUMO-1质粒的细胞中只检测到少量p53蛋白表达.转染pwtp53及pwtp53+pSUMO-1质粒的HepG2细胞凋亡比例分别为(16.79士1.62)%和(18.15±1.36)%,转染pwtp53+pMDM2+pSUMO-1质粒的细胞凋亡比例为(14.06±1.84)%,转染pwtp53+pMDM2质粒的细胞凋亡比例则下降至(5.17士1.23)%,与前三者比较差异有显著性意义(P＜0.01);其他转染系细胞中的细胞凋亡比例均≤2%,差异无显著性意义.结论 SUMO-1通过与p53蛋白的结合或翻译后修饰,抑制MDM2等癌基因蛋白对p53蛋白的降解,可增强p53抑癌基因诱导的细胞凋亡.

作者：卢星榕；易继林刊期： 2005年第04期
急性重症胆管炎治疗体会

目的探讨急性重症胆管炎(ASC)患者的手术时机、治疗方式的选择以及患者围手术期的治疗.方法回顾性分析156例ASC患者的临床资料.结果治愈131例,死亡25例,总死亡率为16.0%.入院后行急诊手术者32例,术后死亡9例,死亡率28.1%;入院后经支持治疗、纠正休克和酸碱失衡及抗感染治疗后再行手术者53例,死亡9例,死亡率为17.0%.行ERCP+乳头括约肌切开术治疗17例,行PTCD治疗12例,行保守治疗42例.结论对ASC患者掌握好手术时机,根据病情选择治疗方式,重视围手术期支持治疗以及适时手术治疗,是降低死亡率,提高疗效的重要措施.

作者：陈颢；王兆刚；田建伟；梁文辉；崔明哲刊期： 2005年第04期
多排螺旋CT在诊断胃癌侵犯胃裸区中的价值

目的研究胃癌侵犯胃裸区(gastric bare area,GBA)的CT表现和解剖基础,探讨多排螺旋CT在诊断中的价值.方法回顾性分析196例连续性胃癌病例的CT资料,其中GBA受累56例(28.6%),按解剖部位分为近侧胃癌(proximal gastric cancer,PGC)组和远侧胃癌(distal gastric cancer,DGC)组.观察胃癌侵犯GBA的CT表现特征,比较PGC组和DGC组胃癌侵犯GBA的出现率差异.结果 56例中,有46例表现为GBA内软组织肿块,10例表现为结节状淋巴结.胃癌侵犯GBA病例的CT征象有:GBA增宽,胃壁与膈肌之间的薄层脂肪间隙中断或消失;GBA内可见不均匀强化的软组织密度肿块或类圆形淋巴结;左膈脚及胃膈韧带不规则增厚并与肿瘤分界不清;膈下腹膜后间隙淋巴结肿大.PGC组中,胃癌侵犯GBA的出现率为70.0%(42/60),而在DGC组仅为10.3%(14/136),两者间差异有显著性意义(P=0.025).结论 PGC侵犯GBA的出现率高于DGC.胃癌侵犯GBA有一定的CT表现特征.多排螺旋CT在术前评价GBA受侵和淋巴结转移方面具有重要价值.

作者：伍兵；闵鹏秋；宋彬；刘荣波；卢春燕；朱捷刊期： 2005年第04期
肝门部胆管癌手术难点和对策

手术切除仍是肝门部胆管癌的首选治疗手段.但由于肝门区紧邻重要血管,操作空间狭小,加之癌细胞特殊生物学行为,常侵犯肝门区血管、神经和淋巴组织,并沿胆管黏膜下向近侧胆管扩展,侵犯高位胆管和肝实质,发生肝十二指肠韧带或更远处的淋巴结转移.为了获得组织学阴性的切缘,需要实施大范围侵袭性手术,除了胰腺以上的肝外胆管骨骼化切除外,需联合半肝、超半肝和尾状叶切除,肝门区血管切除再建甚至胰头十二指肠切除术,手术切除难度很大,操作复杂,有诸多技术难点[1～3].现就肝门部胆管癌主要手术步骤中的关键技术问题进行讨论.

作者：郑树国；董家鸿刊期： 2005年第04期
成人间双供体活体肝脏移植成功2例报告

目的供肝短缺是影响肝脏移植发展的主要因素之一,活体供肝是解决这一矛盾的重要措施,供者提供足够的肝脏是影响活体肝脏移植的重要因素.方法施行成人间双供体活体肝移植2例,1例由受者的两位姐姐分别提供左半肝作为供肝,另1例由受者母亲提供右半肝,由无心跳供者提供左半肝(采用劈裂方式,其另一部分肝脏同时为另一成人受者实施肝脏移植)作为供肝.结果术后供、受者肝功能均恢复良好.结论成人间双供肝活体肝脏移植可以为受者提供更大重量的肝脏,又可减少供者提供较多肝脏所带来的风险;双供肝一受者肝脏移植手术操作复杂.

作者：严律南；曾勇；王文涛；李波；文天夫；赵纪春；徐明清；杨家印；马玉奎；陈哲宇；刘江文刊期： 2005年第04期
纤维蛋白原与糖尿病下肢动脉缺血性病变的关系

糖尿病下肢动脉缺血性病变是导致下肢截肢,特别是高位截肢和再次截肢的主要原因,其发病率较非糖尿病者高19倍,在50岁以上的糖尿病患者可高达40倍[1].对于有20年病史的糖尿病患者,其发病率可达45%[2].本研究通过测定糖尿病下肢动脉缺血性病变患者血浆纤维蛋白原(FIB)含量,拟从病原学角度探讨其发病机理.

作者：张宪生；邹英华；王维亮刊期： 2005年第04期
抑癌基因 DPC4与胰腺癌的研究进展

目的介绍抑癌基因胰腺癌缺失基因(DPC4)的改变与胰腺癌的发展及预后的关系.方法复习近几年的相关文献,进行综述.结果抑癌基因DPC4位于18号染色体上,其编码产物为Smad 4蛋白.Smad 4蛋白是转移生长因子-β信号传导通路的中心分子,所有生物学效应都是Smad 4蛋白与不同的Smads蛋白相互作用的结果.约有50%的胰腺癌发生DPC4基因的缺失或失活,DPC4基因的表达缺失与胰腺癌的发展及预后有密切关系.结论抑癌基因DPC4的改变与胰腺癌的发展及预后有密切关系,但仍需进行深入研究.

作者：熊开琴；张秀辉刊期： 2005年第04期
自制KYL液和UW液保存大鼠肝脏效果的比较

目的比较自制的KYL液和UW液对大鼠肝脏的保存效果.方法采用大鼠肝脏非循环离体灌注模型(noncirculated isolated perfusion of rat liver),随机以KYL液和UW液对大鼠肝脏保存0、4、8、16、24和48 h,记录胆汁流出量,测定灌注流出液天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)和氧自由基代谢产物丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量,检测肝细胞内钙离子浓度,观察肝脏组织形态学变化.同时设生理盐水保存阴性对照组,了解器官保存液对大鼠肝脏有无保护作用.结果 KYL液保存的大鼠肝脏在保存16 h以内各时相胆汁流出量均较UW液保存者高(P＜0.01),灌注流出液AST、ALT和LDH含量与UW液保存者相近,肝细胞内钙离子浓度较UW液保存者低(P＜0.01);KYL组保存24及48 h时,MDA含量低于UW组,SOD含量高于UW组(P＜0.01);光、电镜观察两者形态学变化基本一致.两组所有指标均较生理盐水保存组好,提示KYL保存与UW液一样对大鼠肝脏具有保护作用.结论自制的KYL液对大鼠肝脏的保存效果总体上与UW液相当,在再灌注后肝细胞胆汁分泌方面和钙拮抗方面略优于UW液,而在防止细胞水肿方面较UW液稍差.

作者：李立；李春满；李晓延；胡明道；冉江华；黄明；张炳彦刊期： 2005年第04期
PPARγ配体调控人胆囊上皮细胞炎性因子表达的实验研究

目的初步探讨过氧化物酶体增殖体活化受体γ(PPARγ)之配体能否抑制人胆囊上皮细胞的炎症反应.方法行胆囊上皮细胞原代培养并鉴定,根据细胞生长曲线,在其生长高峰期(第5天),用0、10、20、30、50及100μmol/L的噻格列酮(PPARγ配体之一)处理胆囊上皮细胞24 h,再用人白细胞介素-1β(hIL-1β)5 ng/ml刺激,2h后用放射免疫法测量细胞上清液中IL-6、IL-8及TNF-α浓度.结果与对照组相比,各浓度的噻格列酮作用后,胆囊上皮细胞IL-6及IL-8的表达均被抑制,差异有统计学意义(P＜0.001),且随噻格列酮的浓度增加,IL-6及IL-8水平呈逐渐下降趋势(P＜0.001),存在量效关系;TNF-α浓度低于放免药盒测得值下限,故无法测到.结论 PPARγ配体可抑制炎性细胞因子IL-6和IL-8在胆囊上皮细胞中的表达,有可能在控制胆囊炎症方面发挥一定作用.

作者：刘江文；程南生；潘光栋；熊先泽；严律南刊期： 2005年第04期
甲基强的松龙对人肝癌HepG2细胞系增殖影响的研究

目的探讨甲基强的松龙(MP)对人肝癌HepG2细胞系增殖的影响.方法采用细胞培养、AnnexⅤ免疫荧光染色和流式细胞术定量分析,检测了细胞周期分布及细胞凋亡情况.结果与对照组比较,MP作用于人肝癌HepG2细胞系后其G0/G1期细胞比率增加,S期细胞比率减少(P＜0.01),且与作用时间呈正相关(r=0.85,P＜0.01);细胞凋亡率及坏死率随MP浓度增加而增高;早期凋亡细胞呈细胞膜绿色荧光.结论 MP诱使人肝癌HepG2细胞发生G0/G1期阻滞,具有抑制细胞增殖的作用.

作者：张俊峰；陈规划；陆敏强；李华；蔡常洁；杨扬；陈伟刊期： 2005年第04期
急性肠系膜静脉血栓形成4例报道

自1986年3月至2004年11月,我院共诊治急性肠系膜静脉血栓形成(AMVT)患者4例,均为男性,年龄34～56岁,全部病例均有腹痛、腹胀.早期为阵发性隐痛或绞痛,呈进行性加重,后为持续性痛并有腹膜刺激征.既往有门脉高压、脾大1例,慢性阑尾炎1例,不明原因2例.

作者：李振华刊期： 2005年第04期
胆胰管汇合异常与胆囊癌的关系

目的探讨胆胰管汇合异常(anomalous pancreaticobiliary ductaljunction,APBDJ)与胆囊癌的关系.方法复习相关文献.结果 APBDJ与胆囊癌的发生密切相关,胰液的自由返流及胆囊上皮细胞分子生物学的改变可能是重要的癌变机理.结论 APBDJ是胆囊癌的高危因素,建议APBDJ患者应作预防性胆囊切除.

作者：周彦明；杨甲梅刊期： 2005年第04期
肝门胆管癌的诊治进展

目的报道肝门胆管癌的诊断和治疗进展.方法对肝门胆管癌的病理特征、转移方式、临床表现、实验室检查、影像学检查、免疫组织化学检查和治疗的进展结合文献加以综述.结果肝门胆管癌的临床表现、实验室检查、影像学特征与肿瘤导致的胆管梗阻和继发胆管感染有关;结合临床表现、实验室检查和多种影像学检查可以进行诊断,免疫组织化学检查指标的诊断价值尚不能肯定;手术是惟一可能治愈肝门胆管癌的方法,不能根治的患者可以采用外科旁路解决胆管梗阻和消化道梗阻;单纯化疗疗效差,一般不提倡对肝门胆管癌患者进行原位肝移植.结论肝门胆管癌的早期诊断和根治性手术是获得较好预后的关键.

作者：李波；严律南刊期： 2005年第04期
胆管癌新鲜组织标本库建立与鉴定

目的利用解放军总医院肝胆外科的医疗优势,摸索一套合理的操作方法,有计划地建立胆管癌新鲜组织标本库,为系统开展胆道肿瘤研究做好准备.方法选取2000年1月～2001年6月解放军总医院肝胆外科以胆道肿瘤为主要诊断而行手术切除的患者的手术标本21例,包括肿瘤组织、正常组织和(或)癌旁组织,将切取的组织块分割后装入编号的灭菌贮藏管,迅速放入液氮转移罐,深低温冰柜保存.全部组织标本均经常规病理组织学检查予以鉴定,并取其中部分组织使用Trizol试剂提取总RNA鉴定以判断组织成分的完整性.结果 21例标本中肝内胆管癌4例,肝门胆管癌6例,肝外胆管癌7例,壶腹癌4例.由于肿瘤标本大小不同,所切取的组织块数目各异;因手术难度及人为因素的影响使得组织留取平均时间为(47.60±43.87)min.所取组织经Trizol试剂提取后,可见离心管底部沉淀的呈黄白薄片状的RNA,经紫外分光光度计分析得出其A260/A280=1.6～1.8,总RNA经1%琼脂糖凝胶电泳后可见明显的28s和18s条带,而且28s条带的亮度大约是18s的2倍;2例超过2 h的标本的A260/A280＜1.6,且电泳显示28s和18s条带不清、消失及拖尾.结论人类遗传资源库的建设是开展疾病相关基因研究的重要的基础性工作,本实验建立的胆管癌组织标本留取操作流程可保证标本库质量.标本的留取必须在知情同意和保证留有足够的用于病理诊断的组织前提下,由有经验的相对固定的医护人员完成;标本离体时间应掌握在1 h之内,应常规将标本分割多管保存.

作者：万涛；周宁新；黄志强刊期： 2005年第04期
原发性乳腺恶性淋巴瘤3例并文献复习

目的分析原发性乳腺恶性淋巴瘤(primary breast lymphoma,PBL)的临床特点、诊断和治疗.方法回顾我院2001～2004年收治的3例PBL并复习有关文献,分析其临床特征、诊断情况和治疗方法.结果 3例均为非何杰金淋巴瘤(NHL),属B细胞源性.PBL分期均为Ⅱ期.结论 PBL早期正确诊断,行手术、放疗和化疗联合治疗,效果满意.

作者：陈莉；姜军；杨新华；郭美琴；钟玲刊期： 2005年第04期
肝门部胆管癌扩大根治术及疗效评价

肝门部胆管癌在胆管恶性肿瘤中常见(约占50%～70%)且起病隐蔽,在患者不表现黄疸时很难早期被发现.胆管癌呈多极化浸润性生长,肝门部解剖及毗邻关系复杂而重要,加之高位胆管梗阻迅速导致的严重肝功能损害与衰竭,使联合扩大的肝叶切除围手术期的风险更加增大,术后并发症增多,手术死亡率可高达10%以上.即使以常规肝移植术与之相比,肝门部胆管癌扩大根治术无论在手术难度、手术时间以及风险方面均可谓高难度手术.尤其是肝门部胆管癌扩大根治术的范围及术式极难成规范,即使是有了术前影像学的充分评估与计划,术中也会遇见许多意外的情况.因此,对外科技术的要求与手术者的耐心往往是手术成败的关键[1～3].

作者：周宁新刊期： 2005年第04期
胰十二指肠切除术后发生胰瘘的危险因素

目的探讨胰十二指肠切除术后胰瘘发生的危险因素.方法回顾性分析我院1994年12月至2003年12月期间接受胰十二指肠切除术的连续123例患者的临床资料.结果本组胰瘘的发生率为11.4%(14/123).单变量分析结果表明:上腹部手术史、胰腺质地、术后血红蛋白、胰肠吻合方式及胰管直径为有意义的相关因素;经Logistic回归多变量分析确定了4个独立与胰瘘相关的变量,即上腹部手术史、胰腺质地、术后血红蛋白及胰肠吻合方式.结论上腹部手术史、胰腺质地软、术后血红蛋白＜90 g/L及常规套入式胰肠吻合为胰十二指肠切除术后胰瘘发生的主要危险因素.

作者：王志军；吴阳；彭启平；谢志徵；王陆林刊期： 2005年第04期
保存温度对移植胰腺功能影响的实验研究

目的探讨保存温度对移植胰腺功能的影响,确定大鼠胰腺的适保存温度.方法采用原位灌注、单纯低温保存及建立同系大鼠异位全胰十二指肠移植模型,按不同保存温度(0℃、4℃、8℃、12℃)进行分组,保存6 h后进行移植,通过光镜观察胰腺组织结构变化,高压液相色谱法检测保存6 h后移植物ATP和总腺苷核苷酸(TAN)含量.移植24 h后,检测血糖、血清中脂肪酶及淀粉酶含量,测定移植胰腺组织中髓过氧化酶(MPO)活性,并进行组织学观察.结果 4℃组保存6 h后和移植24 h后的胰腺组织结构损伤明显轻于其它组.保存6 h后胰腺组织中ATP和TAN水平在4℃组、0℃组、8℃组和12℃组依次降低,差异有显著性意义(P＜0.05).移植24 h后血糖、血清脂肪酶及胰腺组织中MPO水平在4℃组、0℃组、8℃组和12℃组依次增高,差异均有显著性意义(P＜0.05).结论 4℃对大鼠胰腺是适保存温度,它能够明显减轻大鼠胰腺的冷损伤程度.

作者：原春辉；刘永锋；程颖；赵宁；梁健；何三光刊期： 2005年第04期
胆总管探查后一期缝合胆汁漏的临床分析

目的探讨胆总管探查一期缝合后胆汁漏的发生及其相关因素.方法对我院1999年1月至2003年6月期间,因肝外胆管结石施行胆总管探查后行T管引流的148例和一期缝合的154例患者的临床资料进行分析.结果术后发生胆汁漏T管引流组有11例(7.4%),一期缝合组有16例(10.4%),两组间差异无统计学意义(P＞0.05);一期缝合组胆汁漏的发生与高血糖(P＜0.05)、低血浆白蛋白(P＜0.01)、胆总管多次缝合(P＜0.01)及胆汁细菌培养阳性(P＜0.05)有关,与高龄无关(P＞0.05).结论严格掌握适应证,认真做好术中特检,轻柔细致的操作以及有针对性的药物治疗,是减少一期缝合胆汁漏发生的关键.

作者：王毅本；曾小兵；吴弛；朱瑜；刘利民刊期： 2005年第04期
腹股沟斜疝嵌顿致肠外瘘1例报道

患儿,男,4+月,因左侧腹股沟区包块4个月,左侧阴囊排便3个月入院.4个月前患儿因左侧腹股沟区不可回纳性包块2 d入本院,诊断为左侧腹股沟斜疝嵌顿,拟急诊行嵌顿松解、疝囊高位结扎术,但家属认为患儿年龄太小不愿手术治疗,自动离院.

作者：魏艇；周昉；刘文英；罗启成；刘敏刊期： 2005年第04期