学术投稿

RNA干扰降低唾液酸酶3表达对骨肉瘤MG-63细胞增殖和凋亡影响的实验研究

杨晓;李思;向尚;吴衣论;王琳;彭锦;冯颖

关键词:唾液酸酶, MG-63细胞, 骨肉瘤, 细胞增殖, 细胞凋亡
摘要:目的 探讨下调唾液酸酶3 (neuraminidase 3,NEU3)表达对人成骨肉瘤MG-63细胞体外增殖及凋亡的调控作用.方法 取MG-63细胞行免疫荧光染色,观察MG-63细胞中NEU3的表达情况.然后根据处理方法不同将细胞分为5组:正常对照组(A组),不作任何处理;30、50、100 nmol/L NEU3 RNA干扰组(分别为B、C、D组),分别以浓度为30、50、100 nmol/L的NEU3小干扰RNA (small interfering RNA,siRNA)转染细胞;阴性对照组(E组),使用不同种属阴性对照siRNA(小鼠actin siRNA,50 nmol/L)转染细胞.转染后采用实时荧光定量PCR检测NEU3 mRNA水平,细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测Ras蛋白和Bcl-2蛋白表达情况.结果 荧光显微镜观察示NEU3表达集中在MG-63细胞的细胞质中.实时荧光定量PCR检测示,培养24 h后B、C、D组NEU3 mRNA相对表达量明显低于A、E组(P<0.05);随着siRNA浓度升高,B、C、D组NEU3 mRNA相对表达量呈下降趋势(P<0.05).CCK-8法检测示,培养48 h后随NEU3 siRNA浓度升高,B、C、D组MG-63细胞抑制率显著升高,成活率显著降低,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05).流式细胞术检测示,培养24 h后B、C、D组MG-63活细胞逐渐减少、坏死细胞逐渐增加(P<0.05).B、C、D组细胞凋亡率与A组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);与E组比较,C、D组细胞凋亡率显著降低(P<0.05),B、E组间差异无统计学意义(P>0.05).Western blot检测示,培养24 h后,与A、E组比较,B、C、D组Ras和Bcl-2蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05),而D组以上蛋白表达均显著降低(P<0.05).结论 NEU3表达下降能够抑制骨肉瘤MG-63细胞的成活,促进细胞凋亡,提示NEU3可能是治疗骨肉瘤的潜在药物靶点.
中国修复重建外科杂志相关文献
  • 中国颅颌面外科近三十年的发展和现况

    该文对近三十年来中国颅颌面外科的发展和现况作了全面述评,重点总结了先天性颅面畸形的手术改进和微创化、先天性颅面畸形的分子遗传学研究、3D打印和手术模板导航等三维数字化技术的应用、牵引成骨技术以及种植赝复体修复重建技术对学科发展的促进等.后对颅颌面外科未来的发展趋势作了展望.

    作者:杨斌;祁佐良;韦敏;穆雄铮;滕利;张智勇;靳小雷;陶凯;沈卫民;吴国平;韩正学;舒茂国;陈小平;鲍南 刊期: 2018年第07期

  • 中国再植再造发展与现状

    我国断指(肢)再植及拇、手指再造事业起步自上世纪60年代,随着我国显微外科技术的不断发展,再植及再造均取得了举世瞩目的成就.断指(肢)再植的成活率已不是问题,再植肢体的功能得到更多的重视;同时特殊类型的断指再植领域的重大突破,拓宽了断指再植的适应证.再造方面,不仅我国拇指再造积累了应对不同类型拇指缺损的大量经验,再造也逐渐向微创化、减少供区损伤的方向发展.

    作者:柴益民 刊期: 2018年第07期

  • 骨肿瘤外科修复重建进展

    骨肿瘤外科主要任务涉及两个方面:切除与重建.近十年来新材料、新技术不断出现,骨肿瘤切除后骨关节缺损的重建取得长足进步.依照重建方法不同分为生物性重建和机械性重建.此外,新兴的3D打印技术在肿瘤性缺损重建的临床应用正在展开,短期效果可靠,然而远期功能结果和并发症少有报道.

    作者:李靖;王臻 刊期: 2018年第07期

  • 足踝外科新进展

    对足踝外科新进展进行综述,包括疾病的诊断、治疗方法以及术后结果和评价标准等方面的革新进展.诊断、评价方法更趋向准确、简便易行和经济.手术的精准性和疗效的确切性以及微创术式成为更流行和重要的主题.新的治疗方法和基础学研究也有突破性进展.

    作者:朱敏;冯凡哲 刊期: 2018年第07期

  • 先天性多拇畸形的研究进展

    手术仍然是先天性多拇畸形治疗的主要手段,治疗目的是尽可能重建功能和外观均良好的拇指.需要在术前对多拇畸形进行系统评估,包括骨骼力线、关节偏斜、关节活动度及关节不稳定性、指体和指甲大小以及发育程度.术中需充分矫正软组织异常以及骨骼畸形,以达到良好功能,避免再次手术.Bilhault-Cloquet术可以重建良好的指体和指甲大小,精细操作可以改善术后指甲畸形,使重建的指甲达到满意的美学评分.

    作者:高伟阳;丁健;周宗伟 刊期: 2018年第07期

  • 骨延长治疗近期关注热点

    骨延长技术是目前骨骼延长和骨骼重建手术的核心技术之一,被广泛用于骨不连、骨缺损、骨感染、先天性或创伤后肢体长度差异及手足部畸形矫正的治疗.骨延长技术从开始到发展再到今天,手术技术及器械在不断地完善、改进,其目的是提高治疗质量和减少并发症.但是,骨延长技术有别于骨科其他疾病的治疗,具有以下特点:治疗分为多个环节、治疗周期较长、外固定架固定.该文将总结近年来骨延长治疗领域中的研究热点,为今后临床治疗提供借鉴.

    作者:艾合买提江·玉素甫 刊期: 2018年第07期

  • 壳聚糖/胡须/磷酸钙骨水泥复合生物材料的力学性能及对诱导多能干细胞成骨潜能的影响

    目的 观察新型强化型磷酸钙骨水泥(calcium phosphate cement,CPC)生物支架材料的力学性能以及对诱导多能干细胞(induced potential stem cells,iPS)生物活性及成骨潜能的影响.方法 根据制备的支架材料不同,将实验分为4组,A组为单纯CPC支架组,B组为CPC∶10%wt壳聚糖为2:1比例混合支架组,C组为CPC∶10%wt壳聚糖∶胡须为2∶1∶1比例混合支架组,D组为CPC∶10%wt壳聚糖∶胡须为2∶1∶2比例混合支架组.检测各组支架材料力学性能(抗弯强度、断裂功、硬度及弹性模量).与第5代iPS-MSCs复合培养1、3、7、14d采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)法检测各组吸光度(A)值;1、7、14d行ALP活性检测、Live/Dead荧光染色及定量检测、RT-PCR检测成骨基因ALP、Runx2、Ⅰ型胶原、骨钙蛋白(osteocalcin,OC)及BMP-2表达;1、7、14、21d行茜素红染色观察.取3月龄雄性SD大鼠24只,建立8 mm颅骨骨缺损模型,随机分为4组(n=6),分别植入对应的4组支架材料,术后8周取材行HE染色观察骨缺损修复情况,并检测新生骨体积百分比和新生血管密度.结果 B、C、D组抗弯强度、断裂功、弹性模量及硬度均显著高于A组,C、D组高于B组,D组高于C组,差异均有统计学意义(P<0.05).CCK-8法检测示随培养时间增加,细胞活性逐渐增加,3、7、14d时B、C、D组A值均显著高于A组,C、D组高于B组(P<0.05),C、D组间比较差异无统计学意义(P>0.05).Live/Dead荧光染色示,7、14d时B、C、D组活细胞比例均显著高于A组(P<0.05),7d时C、D组显著高于B组(P<0.05);RT-PCR检测示,7、14d时B、C、D组各基因相对表达量均显著高于A组,C、D组显著高于B组(P<0.05),C、D组间比较差异无统计学意义(P>0.05);茜素红染色示随培养时间延长,各组支架材料表面的红色钙盐沉积均逐渐加深变厚,14、21d时B、C、D组A值均显著高于A组,C、D组高于B组(P<0.05),C、D组间差异无统计学意义(P>0.05).动物体内修复实验显示,各组新生骨主要填充于支架材料间隙中,成骨细胞和新生血管被基质中的新生骨组织包围,成骨细胞排列在新生骨边界上,B、C、D组新生骨显著多于A组,C、D组显著多于B组.B、C、D组新生骨体积百分比和新生血管密度均显著高于A组,C、D组高于B组,差异有统计学意义(P<0.05);C、D组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 复合壳聚糖、胡须和CPC制备的新型强化型复合生物支架材料的机械性能明显优于单纯CPC支架材料,可满足皮质骨及松质骨的机械性能要求.iPS-MSCs在新型强化型复合生物支架材料上黏附、增殖,骨组织修复效果良好,可满足骨植入材料的生物活性及成骨活性要求.

    作者:康明;黄杰华;张理选;王新光;郭汉明;何瑞轩 刊期: 2018年第07期

  • 经Watson-Jones入路股骨近端防旋髓内钉联合病灶刮除植骨治疗股骨近端良性病变

    目的 探讨经Watson-Jones入路股骨近端防旋髓内钉(proximal femoral nail anti-rotation,PFNA)联合病灶刮除植骨治疗股骨近端良性肿瘤和瘤样病变的可行性,评估治疗效果.方法 回顾分析2008年1月-2015年1月采用经Watson-Jones入路PFNA联合病灶刮除植骨治疗的38例股骨近端良性病变患者临床资料.其中男24例,女14例;年龄15~57岁,平均28岁.病理类型:纤维结构不良20例,骨囊肿7例,动脉瘤样骨囊肿5例,骨巨细胞瘤3例,内生软骨瘤2例,非骨化性纤维瘤1例.临床表现:髋关节疼痛19例,病理性骨折12例,肢体短缩、髋关节内翻畸形4例,出现原有病灶复发3例.记录手术时间、术中出血量以及术后完全负重时间.随访摄X线片及三维CT,了解植骨融合情况及内固定物位置,采用疼痛视觉模拟评分(VAS)评价疼痛程度,国际骨与软组织肿瘤协会(MSTS93)评分标准评估下肢功能,Harris评分评估髋关节功能.结果 手术时间为130~ 280 min,平均182 min;术中出血量为300~1 500mL,平均764mL.术后3例出现切口脂肪液化,均经正规换药顺利愈合,未造成深部感染;其余患者切口均Ⅰ期愈合.所有患者均于术后2~4周开始部分负重,完全负重时间为3~6个月,平均4.2个月.38例均获随访,随访时间24 ~ 108个月,中位随访时间60个月.影像学检查提示植骨均融合,融合时间为8~18个月,平均11.4个月.随访期间无病理性骨折、股骨头缺血性坏死、关节脱位、内固定物松动断裂等并发症发生,无肿瘤复发和远处转移.末次随访时,VAS评分、MSTS93评分和Harris评分均较术前显著改善,差异有统计学意义(P<0.05).结论 经Watson-Jones入路刮除植骨后联合PFNA内固定治疗股骨近端良性病变,能够在彻底清除病灶的同时获良好力学稳定性,且术后并发症少,是一种安全有效的治疗方法.

    作者:刘宏远;熊燕;方向;段宏 刊期: 2018年第07期

  • 游离桡动脉掌浅支皮瓣修复手指软组织缺损

    目的 探讨游离桡动脉掌浅支皮瓣修复手指软组织缺损的疗效.方法 2014年6月-2017年6月,采用游离桡动脉掌浅支皮瓣修复10例(10指)手指软组织缺损.男8例,女2例;年龄23~42岁,平均29.8岁.致伤原因:电锯切割伤6例,机器挤压伤2例,玻璃划伤2例.受伤至入院时间为1 ~8h,平均3h.损伤部位:示指中节掌侧3例,示指末节掌侧1例,中指末节掌侧3例,环指远指间关节尺侧1例,小指末节掌侧2例.皮肤软组织缺损范围为1.8 cm×0.9 cm~ 2.8 cm×2.1 cm.皮瓣切取面积为2.0 cm×1.0 cm~ 3.0 cm×2.3 cm.供区均直接缝合.结果 术后皮瓣顺利成活,创面均Ⅰ期愈合;供区切口均Ⅰ期愈合.患者均获随访,随访时间6~ 12个月,平均9个月.皮瓣质地优良,外形满意,痛觉、温觉、触觉均恢复较好;末次随访时皮瓣两点辨别觉为6~13 mm,平均7.5 mm.末次随访时,按中华医学会手外科学会手功能评定试用标准评定:优8例,良2例.腕部供区仅遗留线性瘢痕.结论 游离桡动脉掌浅支皮瓣供区隐蔽、创伤小,皮瓣切取简便、吻合容易,是修复手指软组织缺损的一种良好方法.

    作者:黄良库;许玉本;李鹏;夏雷;田钊;陆梦;徐涛 刊期: 2018年第07期

  • 自体腘绳肌腱移植重建前交叉韧带后植物的组织学研究

    目的 观察自体腘绳肌腱移植重建前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)术后移植物组织学表现特点,总结ACL移植物组织学转归规律.方法 以2017年3月-12月应用自体腘绳肌腱移植单束重建ACL术后4年以上、因移除胫骨端内固定物行二次关节镜探查,并符合选择标准的患者为研究对象.根据关节镜下对移植物滑膜及血管覆盖、移植物张力、移植物容量及纤维再撕裂情况评分,将患者分为塑形良好组(good remodeling group,GRG),总分为4~6分;塑形不良组(poor remodeling group,PRG),总分为1~3分.镜下取移植物体部中央标本,分别行光镜观察(细胞形态、血管分布)及透射电镜观察(细胞合成代谢、胶原纤维分布)并评分.以同期行人工全膝关节置换术且年龄<60岁患者的正常ACL标本作为对照组.结果 共18例二次关节镜探查患者纳入研究,关节镜下移植物评分为2~6分,平均4.7分;其中GRG组11例、PRG组7例.对照组9例.光镜下观察示,PRG组血管分布及细胞形态评分均明显低于对照组及GRG组(P<0.05);GRG组与对照组相关评分比较,差异无统计学意义(P>0.05).透射电镜观察示,PRG组胶原纤维分布评分较对照组及GRG组明显降低,但细胞合成代谢评分明显增高,比较差异均有统计学意义(P<0.05);GRG组细胞合成代谢评分与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),但胶原纤维分布评分明显低于对照组(P<0.05).结论 ACL重建术后自体腘绳肌腱移植物塑形稳定期,关节镜下评估为塑形良好的移植物在光镜下其组织学结构更接近于正常ACL,但其超微结构特点与正常ACL仍存在明显差异.

    作者:吴冰;丘志河;李盛;梁达强;许鉴;钟名金;陆伟;王大平;柳海峰;朱伟民;欧阳侃;李皓 刊期: 2018年第07期

  • 乳房脂肪瓣矫治重度乳头凹陷的疗效

    目的 总结乳房脂肪瓣矫治重度乳头凹陷的方法及疗效.方法 2013年2月-2017年1月,收治8例重度乳头凹陷女性患者.患者年龄25 ~ 36岁,平均30.7岁.双侧乳头凹陷2例,单侧乳头凹陷6例.其中l例曾于外院行乳头凹陷矫治术,效果欠佳且术后发生感染.术中乳腺脂肪层制备面积为3.5 cm×2.5 cm的带蒂脂肪瓣,翻转平铺至切断的挛缩乳腺导管处.结果 术后无乳头坏死发生.患者均获随访,随访时间6~15个月,平均12.3个月.乳头均明显突出,感觉无丧失,随访期间凹陷无复发,未遗留明显切口瘢痕.结论 乳房脂肪瓣法矫治重度乳头凹陷方法简单、成功率高,可获得较好乳头形态.

    作者:万睿 刊期: 2018年第07期

  • 后路病灶清除植骨内固定联合不同入路腰大肌脓肿清除局部化疗治疗胸腰椎结核

    目的 比较前、后路腰大肌脓肿清除及脓腔内局部化疗联合后路病灶清除植骨内固定治疗胸腰椎结核的临床疗效,探讨后路腰大肌脓肿清除的可行性.方法 回顾分析2012年6月-2015年12月治疗的37例胸腰椎结核伴腰大肌脓肿患者临床资料.所有患者行后路病灶清除、植骨内固定术,根据腰大肌脓肿清除的手术入路不同分为A组(21例,行后路脓肿清除及脓腔内局部化疗)和B组(16例,行前路脓肿清除及脓腔内局部化疗).两组患者性别、年龄、病程、病变节段、术前红细胞沉降率、术前C反应蛋白、腰大肌脓肿侧别、腰大肌脓肿大横径及纵径、伴随脓肿、脓腔分隔情况、术前病变节段Cobb角、术前美国脊髓损伤协会(ASIA)分级等一般资料比较差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性.记录并比较两组患者手术时间、术中出血量、术后住院时间、脓肿吸收时间及骨融合时间;观察患者术前及末次随访时的病变节段Cobb角变化情况;采用ASIA分级评价脊髓神经功能.结果 除B组手术时间显著长于A组(t=-2.985,P=0.005)外,两组间术中出血量、术后住院时间、脓肿吸收时间及骨融合时间比较,差异均无统计学意义(P>0.05).两组患者均获随访,随访时间18 ~ 47个月,平均31.1个月.术中及术后均无脑脊液漏发生.A组4例二次行前方脓肿清除置管化疗.末次随访时所有患者脓肿均吸收,红细胞沉降率及C反应蛋白均正常.两组患者末次随访时病变节段Cobb角均较术前显著改善(P<0.05),末次随访时两组间病变节段Cobb角以及矫正度比较,差异无统计学意义(P>0.05).术前9例伴脊髓神经功能损害者中,末次随访时神经功能均改善,与术前比较差异有统计学意义(Z=-2.716,P=0.007).结论 治疗胸腰椎结核伴腰大肌脓肿,单纯后路病灶清除、植骨内固定联合脓肿清除及脓腔内局部化疗可取得良好疗效,但特殊情况下仍需行前路脓肿清除.

    作者:彭琪琪;欧云生;朱勇;赵增辉;罗伟;杜兴;李剑箫 刊期: 2018年第07期

  • 激素性与酒精性股骨头坏死患者骨标本坏死区域病理与显微结构特点分析

    目的 观察激素性和酒精性股骨头坏死(osteonecrosis of the femoral head,ONFH)患者骨标本坏死区域的病理和显微结构特点.方法 收集2015年8月-2016年4月因ONFH行人工全髋关节置换术的股骨头标本30个,其中男22例,女8例;酒精性15例,激素性15例;两组国际骨循环协会(ARCO)分期构成比较差异无统计学意义(Z=2.143,P=0.143).取激素性与酒精性ONFH患者骨标本不同区域(坏死区、硬化区、正常区)骨组织,行大体观察、HE染色并计算空骨陷窝率.将完整股骨头标本行Micro-CT扫描,并进行骨微结构定量分析以下参数:骨小梁相对体积(bone volume to total volume,BV/TV)、骨表面积与骨骼体积比(bone surface area to bone volume ratio,BS/BV)、骨矿密度(bone mineral density,BMD)、骨矿容量(bone mineral content,BMC)、结构模型指数(structure model index,SMI)、骨小梁数目(trabecular plate number,Tb.N)、骨小梁厚度(trabecular plate thickness,Tb.Th)、骨小梁间隙(trabecular spacing,Tb.Sp).结果 大体观察示激素性和酒精性ONFH均有骨小梁连续性中断,骨小梁吸收区域有囊变被肉芽组织取代,激素性ONFH肉芽组织内有血管新生的痕迹,酒精性ONFH肉芽组织内血管新生痕迹不明显.HE染色示激素性和酒精性ONFH坏死区均有骨质结构紊乱、骨髓坏死、骨陷窝空虚,其中激素性ONFH骨小梁结构和连续性破坏更严重,酒精性ONFH骨小梁更粗,连续性较激素性ONFH好.激素性ONFH坏死区的空骨陷窝率明显高于酒精性ONFH (P<0.05),但两种ONFH硬化区和正常区空骨陷窝率比较差异无统计学意义(P>0.05).激素性与酒精性ONFH坏死区与硬化区之间区域在Micro-CT图像中均是低密度区,但前者形态不规则,对应部位大体标本可见富含血运的肉芽组织形成,后者对应部位大体标本见无血运的纤维肉芽组织形成.骨微结构定量分析显示,激素性ONFH坏死区和硬化区BV/TV、BMD、BMC、Tb.N、Tb.Th明显低于酒精性ONFH,BS/BV、SMI、Tb.Sp显著高于酒精性ONFH,差异均有统计学意义(P<0.01);两种ONFH正常区上述各指标比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 激素性和酒精性ONFH标本坏死区的骨小梁连续性均破坏.但两种ONFH有不同的坏死表现形式,激素性ONFH以多发灶性溶骨性骨质破坏为特点,酒精性ONFH是以凝固性骨质坏死为特点.

    作者:魏秋实;杨帆;陈哓俊;何敏聪;陈镇秋;张庆文;何伟 刊期: 2018年第07期

  • 损伤单元矢状位非稳定区对称椎弓根系统内固定结合植骨融合术治疗胸腰椎骨折

    目的 探讨损伤单元矢状位非稳定区对称椎弓根系统内固定结合植骨融合术治疗胸腰椎骨折的安全性与有效性.方法 选取2011年11月-2015年11月收治的单节段胸腰椎骨折患者65例,其中男41例,女24例;年龄23~60岁,平均36.7岁.骨折部位:T71例,T92例,T104例,T118例,T1214例,L119例,L213例,L33例,L41例.AO分型:A型34例,B型27例,C型4例.美国脊柱损伤协会(ASIA)分级为A级1例,B级2例,C级6例,D级15例,E级41例.胸腰椎损伤分类及损伤程度评分(TLICS):4分9例,5分29例,6~8分23例,9~ 10分4例.受伤至手术时间2~12d,平均5.3 d.定义伤椎连同上、下间隙及其所对应的后方结构作为1个损伤单元,将此损伤单元在矢状位上分为3区:Ⅰ区,椎体上1/3、上位关节突关节、上位椎间隙及其对应的后方韧带复合体;Ⅱ区,椎体中1/3,椎弓根、椎板、棘突及棘上韧带;Ⅲ区,椎体下1/3、下位关节突关节、下位椎间隙及其对应的后方韧带复合体.非稳定区为损伤单元中主要受累区域.以非稳定区为中心上下对称植入椎弓根螺钉固定,结合植骨融合进行治疗.观察患者术前、术后即刻及末次随访时神经功能恢复情况、伤椎前缘高度比、矢状面Cobb角恢复情况.结果 65例患者均顺利完成手术,术中发现脑脊液漏3例,予以相应处理后痊愈.所有患者均获随访,随访时间12~24个月,平均17.3个月.无内固定物松动、移位及断钉、断棒等并发症发生.植骨均达到骨性愈合,愈合时间10 ~ 13个月,平均11.4个月.末次随访时神经功能ASIA分级为A级1例、B级1例、C级3例、D级9例、E级51例,较术前显著改善(Z=-2.963,P=0.014).术前、术后即刻及末次随访时伤椎前缘高度比分别为53.2%±6.8%、91.3%±8.3%、89.5%土6.6%,矢状面Cobb角分别为(16.3土8.1)、(2.6±7.5)、(3.2±6.8)°.术后即刻及末次随访时伤椎前缘高度比及矢状面Cobb角均较术前显著改善,差异有统计学意义(P<0.05);术后即刻及末次随访间比较差异无统计学意义(p>0.05).结论 依据损伤单元分区理论设计椎弓根植钉原则,实施非稳定区对称椎弓根系统内固定植骨融合术治疗胸腰椎骨折安全、可靠,临床效果满意.

    作者:梁成民;张伟;刘彬;于海洋;曹杰;尹稳 刊期: 2018年第07期

  • 同种异体骨Cage在经椎间孔腰椎椎间融合手术中的应用

    目的 评估同种异体骨Cage在经椎间孔腰椎椎间融合术(transforaminal lumbar interbody fusion,TLIF)术后的融合效果.方法 回顾分析2015年1月-2017年1月使用同种异体骨Cage行TLIF的30例患者(38个节段)临床资料.男25例,女5例;年龄44 ~ 72岁,平均56.9岁.腰椎间盘突出症20例,腰椎滑脱7例,腰椎管狭窄3例.手术节段:单节段22例,L3、44例,L4、513例,L5、S15例;双节段8例,L4、5~L5、S16例,L3、4~L4、52例.病程6~36个月,平均12个月.术前,术后3、6个月及末次随访时采用疼痛视觉模拟评分(VAS)、Oswestry功能障碍指数(ODI)和日本骨科协会(JOA)评分评估临床疗效;术后3、6个月摄正侧位X线片及行CT三维重建评估融合率;术前及术后3d、3个月、6个月分别摄腰椎正侧位X线片测量椎间隙高度.结果 手术时间2.1~4.3 h,平均3.1h;术中出血量150~820mL,平均407.5 mL.30例均获随访,随访时间8~25个月,平均16.4个月.1例术后6个月出现Cage下缘碎裂,不伴Cage移动,无神经症状;其余患者均无Cage脱出、位移、碎裂等情况发生.所有患者均无局部或全身变态反应或感染征象,随访期间无神经压迫、受损症状.30例患者术后各时间点VAS评分、ODI评分及JOA评分均较术前显著改善(P<0.05);术后6个月及末次随访时显著优于术后3个月(P<0.05);术后6个月和末次随访间比较差异无统计学意义(P>0.05).X线片及CT三维重建示,术后3、6个月及末次随访时的融合率分别为55.3%(21/38)、92.1% (35/38)、100% (38/38).术后3d、3个月、6个月及末次随访时椎间隙高度均较术前显著改善(P<0.05);末次随访时与术后3d比较椎间隙高度有所丢失,差异有统计学意义(P<0.05).结论 同种异体骨Cage在腰椎TLIF术后可提供早期稳定性和较高融合率.

    作者:郜德龙;方忠;孙允龙;李锋 刊期: 2018年第07期

  • 虚拟手术计划及术中导航辅助的下颌骨重建——从精确走向微创

    下颌骨重建应同时恢复功能和外形,并根据缺损的原因、部位、范围和类型选择重建方法.血管化骨移植是目前临床上应用广泛的下颌骨重建方法,腓骨是常用的供区,腓骨肌皮瓣平行折叠能够克服单层腓骨重建下颌骨后高度不足的问题.应用虚拟手术计划和术中导航辅助下颌骨重建,简化了手术操作、缩短了手术时间和创伤、降低了供区并发症,也提高了下颌骨重建的精确性;而口内入路手术和口内显微血管吻合则将推动下颌骨重建向微创的方向发展.

    作者:孙坚 刊期: 2018年第07期

  • 慢病毒介导小干扰RNA干扰促分裂原和应激激活的蛋白激酶1对大鼠脊髓损伤的修复作用

    目的 探讨促分裂原和应激激活的蛋白激酶1 (mitogen-and stress-activated protein kinase 1,MSK1)在大鼠脊髓损伤后的表达变化及对脊髓损伤的修复作用.方法 雄性SD大鼠120只(体质量220~250 g),取其中70只随机分为假手术组和脊髓损伤组(n=35),脊髓损伤组按照Allen法制作大鼠脊髓损伤模型,假手术组仅打开椎板不损伤脊髓;造模后8、12h及1、2、3、5、7d取材(n=5)行Western blot检测MSK1及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)蛋白表达变化.另取20只SD大鼠同上法分组(n=10),于脊髓T10水平背侧深约0.8 mm处注射阴性对照慢病毒LV3NC稀释液,倒置荧光显微镜下观察1、3、5、7、14 d的转染效果,确定病毒佳转染时间.将剩余30只SD大鼠随机分为单纯脊髓损伤组(A组)、脊髓损伤后转染阴性对照慢病毒LV3NC组(B组)和脊髓损伤后转染MSK1小干扰RNA (small interfering RNA,siRNA)组(C组),每组10只.于术后1、3、5、7、14d行大鼠后肢功能BBB评分;于病毒佳转染时间点取材行Western blot检测脊髓组织中MSK1及PCNA蛋白表达变化,并采用免疫荧光染色检测MSK1及PCNA在脊髓中的定位表达.结果 Western blot检测示假手术组各时间点脊髓组织中的MSK1及PCNA蛋白表达无明显变化.脊髓损伤组MSK1蛋白表达于伤后8h开始逐渐下降,至伤后3d降至低,而后逐渐上升;PCNA蛋白表达与MSK1表达趋势相反.脊髓损伤组伤后1、2、3、5 d MSK1蛋白表达量显著低于假手术组,伤后8h及1、2、3、5、7 d PCNA蛋白表达量显著高于假手术组,差异均有统计学意义(P<0.05).脊髓损伤组及假手术组大鼠脊髓组织在慢病毒转染后各时间点均有较强的荧光表达,转染7d内荧光强度与时间成正相关,7d时达高峰.随术后时间延长,A、B、C组BBB评分均呈逐渐上升趋势,术后5、7、14dC组BBB评分显著低于A、B组(P<0.05).慢病毒转染7d后,Western blot检测示C组MSK1蛋白表达量显著低于A、B组,PCNA蛋白表达量显著高于A、B组,差异均有统计学意义(P<0.05).免疫荧光染色显示MSK1在脊髓表达并存在于细胞核中,并与绿色荧光蛋白、神经元核抗原及神经胶质酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)共定位.免疫荧光染色示,C组MSK1阳性细胞相对表达面积显著高于B组,PCNA、GFAP阳性细胞相对表达面积显著低于B组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 慢病毒介导MSK1siRNA转染大鼠脊髓组织,能够有效沉默MSK1的表达,MSK1可能通过调控神经胶质细胞的增殖,在大鼠脊髓损伤修复中发挥一定作用.

    作者:钟泽祥;周亦楠;冯思思;黄宇;陈宣维 刊期: 2018年第07期

  • 耻骨上区瘢痕疙瘩的治疗体会

    目的 总结耻骨上区瘢痕疙瘩治疗经验及体会.方法 2014年1月-2015年12月,收治21例耻骨上区瘢痕疙瘩患者.男6例,女15例;年龄11 ~ 69岁,中位年龄39岁.病因:会阴部毛囊炎迁延刺激形成瘢痕疙瘩16例,外伤或者腹部手术后增生5例.病程8个月~21年,中位时间3.5年.7例为复发患者.15例瘢痕疙瘩伴感染病灶.瘢痕疙瘩范围为6.0 cm×3.5 cm ~ 14.0 cm×7.0 cm.手术切除瘢痕疙瘩后,切取大小为8 cm×5 cm~ 16 cm×8 cm的髂腹股沟皮瓣修复创面;术后联合电子射线治疗(连续3d,总剂量15 Gy).结果 术后皮瓣均成活.1例供区愈合不佳,经换药2周后愈合.患者均获随访,随访时间12 ~ 24个月,平均16个月.随访期间4例复发,治愈率为81%.复发患者中,2例为初次治疗患者,2例为再次复发;复发患者经长期瘢痕内注射曲安奈德后不同程度萎缩,并得到控制.结论 对于耻骨上区瘢痕疙瘩,手术切除后采用髂腹股沟皮瓣修复,具有手术操作简便且供区切口隐蔽的优点;结合术后早期电子射线照射可以有效降低瘢痕疙瘩的复发率.

    作者:刘勇;刘晓雪;肖海涛;伍俊良;岑瑛 刊期: 2018年第07期

  • 3D打印截骨导板辅助人工全膝关节置换术早期疗效分析

    目的 探讨3D打印截骨导板辅助人工全膝关节置换术(total knee arthroplasty,TKA)的早期疗效.方法 2016年1月-2017年6月,收治60例膝骨关节炎患者,其中30例采用传统TKA术式(传统组),30例采用3D打印截骨导板辅助手术(3D打印组).两组患者性别、年龄、体质量指数、手术侧别、病程等一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05).记录两组手术时间,术前及术后1、3d患者血红蛋白值,术后切口引流量;术前及术后3个月膝关节美国特种外科医院(HSS)评分、膝关节学会评分系统(KSS)临床及功能评分;采用Opti-Knee膝关节三维运动分析系统,记录术前及术后3个月膝关节内外翻角、内外旋角、屈伸角、前后位移、上下位移、内外位移活动范围,同时与30例正常成人(<60岁)测量数据进行对比分析.结果 与传统组比较,3D打印组手术时间明显缩短,术后1、3d血红蛋白值较高,术后切口引流量较少,差异均有统计学意义(P<0.05).两组患者均获随访,随访时间6~9个月,平均7.3个月.两组手术前后HSS评分以及KSS临床评分比较,差异均无统计学意义(P>0.05);两组术前KSS功能评分比较差异无统计学意义(P>0.05),但术后3个月3D打印组KSS功能评分明显优于传统组(P<0.05).膝关节运动学分析示,术前两组膝关节内外翻角、内外旋角、前后位移、上下位移活动范围均大于正常成人(P<0.05),屈伸角及内外位移活动范围与正常成人相似(P>0.05).术后3个月,与正常成人相比,传统组内外翻角活动范围增加、屈伸角活动范围减小(P<0.05);两组上下位移、内外位移活动范围明显减小(P<0.05);其余自由度活动范围比较差异无统计学意义(P>0.05).X线片复查示假体无松动.结论 与传统TKA相比,3D打印截骨导板辅助TKA具有手术时间短、术后出血少、膝关节功能恢复良好的优点.

    作者:刘德健;李彦林;蔡国锋;贾笛;毛健宇;蒙旭晗;王国梁;何川 刊期: 2018年第07期

  • RNA干扰降低唾液酸酶3表达对骨肉瘤MG-63细胞增殖和凋亡影响的实验研究

    目的 探讨下调唾液酸酶3 (neuraminidase 3,NEU3)表达对人成骨肉瘤MG-63细胞体外增殖及凋亡的调控作用.方法 取MG-63细胞行免疫荧光染色,观察MG-63细胞中NEU3的表达情况.然后根据处理方法不同将细胞分为5组:正常对照组(A组),不作任何处理;30、50、100 nmol/L NEU3 RNA干扰组(分别为B、C、D组),分别以浓度为30、50、100 nmol/L的NEU3小干扰RNA (small interfering RNA,siRNA)转染细胞;阴性对照组(E组),使用不同种属阴性对照siRNA(小鼠actin siRNA,50 nmol/L)转染细胞.转染后采用实时荧光定量PCR检测NEU3 mRNA水平,细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测Ras蛋白和Bcl-2蛋白表达情况.结果 荧光显微镜观察示NEU3表达集中在MG-63细胞的细胞质中.实时荧光定量PCR检测示,培养24 h后B、C、D组NEU3 mRNA相对表达量明显低于A、E组(P<0.05);随着siRNA浓度升高,B、C、D组NEU3 mRNA相对表达量呈下降趋势(P<0.05).CCK-8法检测示,培养48 h后随NEU3 siRNA浓度升高,B、C、D组MG-63细胞抑制率显著升高,成活率显著降低,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05).流式细胞术检测示,培养24 h后B、C、D组MG-63活细胞逐渐减少、坏死细胞逐渐增加(P<0.05).B、C、D组细胞凋亡率与A组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);与E组比较,C、D组细胞凋亡率显著降低(P<0.05),B、E组间差异无统计学意义(P>0.05).Western blot检测示,培养24 h后,与A、E组比较,B、C、D组Ras和Bcl-2蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05),而D组以上蛋白表达均显著降低(P<0.05).结论 NEU3表达下降能够抑制骨肉瘤MG-63细胞的成活,促进细胞凋亡,提示NEU3可能是治疗骨肉瘤的潜在药物靶点.

    作者:杨晓;李思;向尚;吴衣论;王琳;彭锦;冯颖 刊期: 2018年第07期

中国修复重建外科杂志

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主管:中华人民共和国卫生部 计划生育委员会

主办:中国康复医学会,四川大学