刘育杰；屈志刚；孙乐天；焦鸿生；刘亚平；丁小珩；曹学成
目的 探讨应用Pax6基因转染诱导脂肪来源间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADMSCs)分化为角膜上皮样细胞的可行性. 方法 取健康5～6周龄C57BL/6小鼠双侧腹股沟脂肪,分离、培养ADMSCs,取第3代细胞进行基因转染.设未转染组(A组)、pcDNA3.1空质粒组(B组)和pcDNA3.1-Pax6重组质粒组(C组),转染48 h后取B、C组进行G418筛选,倒置显微镜下观察细胞形态学改变;Western blot检测各组Pax6蛋白以及角膜上皮细胞特异性标志分子——细胞角蛋白12 (cytokeratin 12,CK-12)表达;实时荧光定量PCR检测各组CK-12mRNA表达. 结果 A、B组细胞形态无改变;C组筛选出两类不同形状的细胞克隆,一类呈“铺路石”状,形态类似角膜上皮细胞,命名为筛选克隆1;另一类呈网状,有3～7个细胞突起,命名为筛选克隆2.Western blot检测示,A、B组Pax6蛋白表达均为阴性,C组两类细胞克隆均有Pax6蛋白表达;仅C组筛选克隆1CK-12蛋白表达为阳性,其余3组均为阴性.实时荧光定量PCR检测示,C组筛选克隆1的CK-12 mRNA相对表达量为8.64±0.73,高于筛选克隆2(0.55±0.42)、B组(1.36±0.40)和A组(1.00±0.00)(P＜0.05);A、B组以及C组筛选克隆2比较差异均无统计学意义(P＞0.05). 结论 Pax6基因转染能够诱导小鼠ADMSCs分化为角膜上皮样细胞,同时促进CK-12表达,为组织工程角膜构建提供了一种有效的上皮细胞来源.
作者：刘卫华；刘漪沦；刘海荣；罗永慧；徐金眉 刊期： 2014年第08期
目的 探讨烧伤对小鼠棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT)的影响. 方法 取3～4月龄雄性BALB/c小鼠40只,体重(20±3)g,随机分为实验组和对照组(n=20).实验组小鼠将背部置于90℃热水9s制备30％总体表面积Ⅲ度烫伤模型,对照组小鼠背部置于37℃热水中9s,作为对照.造模前后检测小鼠空腹体重、体温;造模后7d取BAT及白色脂肪组织(white adipose tissue,WAT)称重并行大体、组织学及透射电镜观察,实时定量PCR及免疫组织化学染色检测脂肪组织解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP-1)基因及蛋白表达水平. 结果 造模前两组小鼠空腹体重、体温比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);造模后1、2、3、4周实验组小鼠空腹体重显著低于对照组(P＜0.05),1、2、3、7d实验组体温显著高于对照组(P＜0.05).造模后7d,与对照组相比,实验组WAT重量明显降低、BAT重量增加(P＜0.05),WAT及BAT细胞均变小,细胞数增多,细胞质及线粒体较紧密;实验组BAT及WAT中UCP-1基因相对表达量及蛋白表达均显著高于对照组(P＜0.05). 结论 小鼠烧伤后BAT参与了机体的高代谢反应.
作者：庄淑波；柴家科；郁永辉；尹回男；刘玲英；樊军；王一贺；侯玉森 刊期： 2014年第08期
目的 探讨在手术清除椎管内肿瘤的同时行椎管后H形同种异体骨块植骨结合棘突回植重建椎管后部结构的临床疗效. 方法 2006年2月-2012年5月,收治48例椎管内肿瘤患者,采用在手术清除椎管内肿瘤的同时行椎管后H形同种异体骨块植骨结合棘突回植重建椎管后部结构治疗.男35例,女13例;年龄17～48岁,平均29.5岁.病程3～16个月,平均10.5个月.肿瘤位于T5、6 3例,T107例,T12、L113例,L3 10例,L4～S1 15例.其中硬膜外脊膜瘤18例,硬膜外脂肪瘤2例,髓外硬膜下神经类肿瘤3例,髓外硬膜下脊膜瘤10例,髓外硬膜下神经鞘瘤6例,髓内室管膜瘤6例,髓内星形细胞瘤3例.术后采用Oswestry功能障碍指数(ODI)评定症状改善情况,脊髓损伤Frankel分级评估神经损伤及恢复程度. 结果 术后8例出现脑脊液漏,4例切口出现淡黄色渗液,经相应处理后均治愈;其余切口均Ⅰ期愈合,无其他术后早期并发症发生.48例均获随访,随访时间18～72个月,平均38个月.CT示椎管后部植骨均生长融合,椎管结构重建良好,无瘢痕组织长入椎管内形成医源性狭窄.脊柱动力位X线片复查示无椎体失稳或滑脱,重建椎板无断裂及移位.MRI示除1例患者复发外,余均无复发.患者术后症状明显改善,末次随访时ODI评分为(16.69±2.53)分,较术前(47.83±7.25)分显著降低(t=0.89,P=0.00);ODI改善率获优36例,良10例,可1例,差1例,优良率达95.83％.末次随访时Frankel分级除1例肿瘤复发(术前Frankel分级为B级)患者无改变外,余均有1～2级改善,与术前比较差异有统计学意义(Z=13.32,P=0.00). 结论 椎管后H形同种异体骨块植骨结合棘突回植能良好重建椎管后部结构,并有效避免医源性椎管狭窄,是治疗椎管内肿瘤的有效术式.
作者：叶青；黄武；贺云松；农明善；梁天森；谭素贞；杨幸 刊期： 2014年第08期
目的 将软骨细胞复合于人脐带Whanon胶取向支架,体外评估该支架对软骨细胞的影响和作用.方法 取成年新西兰大白兔肩关节软骨组织分离培养软骨细胞.取正常新生儿脐带组织,通过湿润粉碎结合化学脱细胞技术脱细胞,利用冷冻干燥及交联等技术制备人脐带Wharton胶取向支架.取第2代软骨细胞与人脐带Wharton胶取向支架复合培养,倒置显微镜、扫描电镜观察细胞在支架上分布及黏附情况;甲苯胺蓝、番红O染色观察细胞细胞外基质分泌情况;二乙酰荧光素-碘化丙啶双色荧光检测法染色及Hoechst33258染色评估细胞在支架上的活力及增殖情况;将体外PKH26荧光标记的软骨细胞与支架复合培养,荧光显微镜观察. 结果 倒置显微镜观察示,培养3d细胞在支架孔隙内分布较均匀,呈圆形或椭圆形;扫描电镜观察示,培养7d大量细胞黏附于支架孔隙间,呈圆形或椭圆形,且细胞沿取向孔道伸展排列,相互聚集,增殖旺盛;组织学观察示,培养7d,细胞在支架中分布均匀且增殖旺盛,细胞分泌大量细胞外基质,取向支架能引导细胞迁徙和增殖,并能有效保留和促进细胞外基质分泌;细胞活力评估结果示,培养3d见支架上黏附的大部分细胞为活细胞,细胞成活率高达90％以上.荧光显微镜观察示,荧光标记细胞与支架复合培养1d,细胞在支架内部均匀分布,增殖旺盛. 结论 人脐带Wharton胶取向支架具有良好的亲和性和细胞相容性,有利于软骨细胞黏附和增殖,细胞存活率高,是一种比较理想的软骨组织工程支架材料.
作者：吕涵宁；徐国娇；盖昱辛；陈礼；刘舒云；赵鹏；卢世璧；张莉；郭全义 刊期： 2014年第08期
目的 探讨一期病灶清除、人工全髋关节置换术(total hip arthroplasty,THA)治疗活动性髋关节结核的近期疗效. 方法 2006年1月-2011年6月,行一期病灶清除THA治疗活动性髋关节结核12例(12髋).其中男7例,女5例;年龄18～60岁,平均46.3岁.病程6～24个月,平均10.5个月.根据Babhulkar和Pande髋关节结核分期:Ⅲ期5例,Ⅳ期7例.1例并发窦道,2例有肺结核病史.术前髋关节屈伸活动度为(35.83±9.25)o,Harris评分为(36.83±6.44)分.红细胞沉降率为45～90mm/1h,平均62.4 mm/1h;C反应蛋白为19～50mg/L,平均33.6 mg/L.手术前后均接受正规抗结核治疗. 结果 病理学检查及结核杆菌PCR检测均为阳性.术后切口均Ⅰ期愈合,无手术相关并发症发生.患者均获随访,随访时间25～60个月,平均40.8个月.患者红细胞沉降率及C反应蛋白均恢复至正常水平,无肝损害表现.随访期间11例无结核复发;1例于术后4个月复发,行二次翻修术后痊愈.X线片检查示,术后无假体移位及松动和窦道形成;18～24个月双侧骨质密度基本相同,至末次随访时双侧骨质密度无明显变化.末次随访时,髋关节屈伸活动度为(107.08±13.56)°,与术前比较差异有统计学意义(t=14.571,P=0.000); Harris评分为(88.00±10.78)分,与术前比较差异有统计学意义(t=16.750,P=0.000). 结论 一期病灶清除THA治疗活动性髋关节结核,可有效缓解关节疼痛、改善关节功能,结核复发率低,近期疗效满意.
作者：毕红宾；王永清；赵志辉；熊庆广；孙晋保；战颖；綦凤桐；郝晓辉 刊期： 2014年第08期
目的 探讨髋关节重度骨关节炎行人工全髋关节置换术(total hip arthroplasty,THA)中偏心距重建方法以及疗效. 方法 2009年7月-2011年6月,收治18例(18髋)髋关节重度骨关节炎患者.男14例,女4例;年龄47～72岁,平均55.4岁.病程11～74个月,平均33.6个月.左髋11例,右髋7例.髋关节Harris评分为(34.6±5.3)分.托马斯征、“4”字试验以及Trendelenburg征均为阳性.术前肢体不等长15例.患者均行THA,术中采用股骨距标准截骨、选择正确的旋转中心及合适长度股骨距重建偏心距. 结果 术后切口均Ⅰ期愈合.1例出现腓总神经牵拉损伤,经对症治疗3个月后恢复;其余患者均无手术相关并发症发生.18例均获随访,随访时间30～53个月,平均43.5个月.术后髋关节疼痛明显缓解,步态恢复正常.X线片复查示:关节无脱位,假体在位良好、无松动;6例双下肢不等长.患者健、患侧偏心距差值为0.1～0.7mm,平均0.4 mm.末次随访时,髋关节Harris评分为(83.0±7.1)分,与术前比较差异有统计学意义(t=-22.96,P=0.01);关节活动度均较术前显著提高,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 髋关节重度骨关节炎行THA,通过术前模板测量选择合适假体,术中保留适当股骨距长度、调节股骨颈长度和颈干角,适度软组织松解,可准确重建偏心距,术后关节功能恢复满意.
作者：班照楠；黄富国；顾琪珊；许冰；李永奎；李正疆 刊期： 2014年第08期
目的 探讨脊柱楔形截骨并人工全髋关节置换术(total hip arthroplasty,THA)治疗强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)脊柱后凸畸形并髋关节重度屈曲挛缩畸形疗效. 方法 2008年12月-2011年11月,收治25例37髋AS后凸畸形并髋关节重度屈曲挛缩畸形患者.其中男22例,女3例;年龄29～38岁,平均35.6岁.病程8～16年,平均13.2年.其中术前髋关节屈伸、外展活动度丧失18例;脊柱严重后凸畸形16例(后凸Cobb角≥60°).先行脊柱楔形截骨术,术后8周行单侧或双侧THA.测量后凸Cobb角评价脊柱后凸畸形矫形效果,并观察截骨处骨融合情况.采用Harris评分评价髋关节功能恢复情况;并测量手术前后髋关节屈伸及外展活动度;采用疼痛视觉模拟评分(VAS)评价THA术后疼痛改善情况;根据国际资料创建与评估系统(IDES)提出的THA术后假体松动影像学标准评判假体是否发生无菌性松动. 结果 25例均获随访,随访时间12～14个月,平均13个月.脊柱楔形截骨术后1例出现脊柱Ⅱ度滑脱,经二次手术后滑脱矫正;患者均无血管及脊髓损伤.术后6个月脊柱截骨均已达骨性融合.术后12个月后凸Cobb角为(25.4±5.5)°,较术前(83.5±10.4)°显著改善(t=24.63,P=0.00).THA术后1例出现股神经牵拉伤症状,于术后9个月肌肉功能自行恢复正常,其余患者均无相关并发症及死亡.根据IDES影像学标准,1例臼杯向外上方移位,但移位距离＜5mm,且无明显临床症状;1例髋臼周围骨溶解,但臼杯无移位.25例37髋股骨柄假体侧均未见明显透亮带等松动表现.术后髋关节屈曲强直畸形明显改善,仅10例残余屈曲畸形15～20°,平均17.6°.术后3个月,VAS评分为(2.31±0.82)分,较术前(6.71±1.14)分显著改善(t=42.26,P=0.00); Harris评分为(85.92±6.04)分,较术前(26.87±4.23)分显著改善(t=28.72,P=0.00).术后髋关节屈伸活动度较术前明显提高,达60～100°,平均72.0°;髋关节外展活动度达20～40°,平均28.7°. 结论 脊柱楔形截骨术并THA是治疗AS后凸畸形并髋关节重度屈曲挛缩畸形的较佳手术方案.
作者：曾勇；何睿；李庆；石化洋；马红兵 刊期： 2014年第08期
目的 总结灌注法保存断肢的研究进展,分析不同灌注方法保存断肢的效果. 方法 广泛查阅国内外有关灌注法保存断肢的文献,并进行总结分析. 结果 目前灌注保存法主要包括器官灌注液灌注、自由基清除剂灌注液灌注、能量合剂灌注液灌注、血液代用品灌注及血液灌注,均能不同程度减轻骨骼肌缺血-再灌注损伤. 结论 不同灌注液能不同程度减轻骨骼肌缺血-再灌注损伤,但哪种灌注液保存效果好以及个性化保存方案,仍需进一步研究探讨.
作者：秦新愿；张绍春；高磊；尹叶锋；刘宁；王江宁 刊期： 2014年第08期
目的 总结窦道型压疮的临床特点及治疗方法和疗效. 方法 回顾分析2009年1月-2013年4月收治的17例外伤性截瘫后发生窦道型压疮患者临床资料.男11例,女6例;年龄17～49岁,平均27.4岁.压疮形成时间6个月～7年,中位时间1.5年.14例为首发压疮,3例为复发.单纯窦道型压疮8例10处;复杂窦道型压疮9例9处,假性滑液囊合并l～4个二级窦道.窦道型压疮主要发生于坐骨结节处.压疮创面范围1.5 cm×1.0 cm～3.0 cm×2.0 cm;二级窦道长8～32 cm,平均17 cm.单纯窦道型压疮完整切除假性滑液囊后,一期或二期分别采用局部潜行或菱形皮瓣修复;复杂窦道型压疮于假性滑液囊切除修复基础上,联合彻底切除二级窦道治疗. 结果 1处单纯窦道型压疮术后4d发生切口裂开,经再次缝合并制动后愈合;3处复杂窦道型压疮分别于术后9、17、23 d发生切口局部感染,皮瓣下积脓,经二次彻底清除残余坏死组织后愈合;其余切口均Ⅰ期愈合,皮瓣均成活.患者均获随访,随访时间6～12个月,平均9.3个月.压疮均无复发. 结论 根据窦道型压疮的临床特点,可分为单纯窦道型压疮和复杂窦道型压疮两种类型,治愈的关键在于彻底切除假性滑液囊和二级窦道.
作者：刘毅；张鲜英；肖斌；宋玫；刘萍；姜疆；张诚；张绪生；陈黎明 刊期： 2014年第08期
目的 探讨Flow-through静脉皮瓣在伴环形皮肤软组织及血管缺损的复杂性断指再植中的应用. 方法 2010年1月-2012年12月,采用前臂Flow-through静脉皮瓣再植治疗伴环形皮肤软组织缺损及血管缺损的复杂性断指11例.其中男8例,女3例;年龄18～42岁,平均24.6岁.致伤原因:冲压伤6例,压砸伤3例,绞勒伤2例.3例伴指神经缺损,缺损长度分别为1.0、2.0、3.5 cm;2例伴肌腱缺损,缺损长度2.0、6.5 cm.环形皮肤软组织缺损宽度3.0～4.5 cm,长度为1/2～1周指体周径,缺损范围2.0 cm×1.0 cm～7.0 cm × 4.5 cm;其中完全环形缺损6例(为指动、静脉均缺损),不完全环形缺损5例(为指动脉缺损),血管缺损长度1.0～4.5 cm.受伤至手术时间1.5～4.5 h. 结果 1例术后2d出现静脉危象,探查行静脉移植后解除;2例皮瓣边缘表皮坏死,其中1例经换药后自愈,1例植皮后愈合;2例出现皮瓣肿胀、水疱,均自行缓解.余6例皮瓣、断指均顺利成活,创面Ⅰ期愈合.术后10例获随访,随访时间12～18个月,平均15.5个月.皮瓣供区仅遗留线形瘢痕,腕关节功能无受限.患指移植皮瓣不臃肿,颜色、质地与周围皮肤相似,皮瓣及手指浅痛觉及触觉恢复,末次随访时两点辨别觉为6.5～13.0 mm,平均8.6 mm.末次随访时按照中华医学会手外科学会断指再植功能评定试用标准评定,获优6例,良3例,差1例,优良率90％. 结论 将Flow-through静脉皮瓣应用于伴环形皮肤软组织缺损及指动、静脉缺损的复杂性断指再植,可同时修复血管及环形皮肤软组织缺损,断指再植成活率高,临床疗效满意.
作者：郑大伟；黎章灿；许立；张旭阳；石荣剑；孙峰；寿奎水 刊期： 2014年第08期
目的 综述各种生物来源水凝胶的特性及其在组织工程领域的应用与研究进展. 方法 查阅近年有关生物来源水凝胶的文献,并对其进行分析总结. 结果 生物来源水凝胶大体可分为单一成分(胶原蛋白、透明质酸、壳聚糖、藻酸盐及丝素蛋白等)水凝胶及多成分(基质胶、细胞外基质提取物、脱细胞基质)水凝胶两大类.它们大多来自生物组织的细胞外基质,因此具有良好的生物相容性及生物活性.其中,脱细胞基质水凝胶无论成分还是结构,均更加符合仿生学要求,是目前接近细胞生长天然环境的支架材料. 结论 生物来源水凝胶已广泛应用于组织工程研究,尽管现有水凝胶材料仍存在力学性能欠佳、降解速度过快以及血管化、灭菌方法、免疫原性等方面的问题,但随着优化机制的不断深入研究,有望获得理想的生物来源水凝胶材料,并真正应用于临床.
作者：傅月荷；吕青 刊期： 2014年第08期
目的 通过观察氯化镧对氧化铝陶瓷颗粒诱导小鼠RAW264.7细胞分泌炎性因子IL-1β、TNF-a的影响,探讨氧化铝陶瓷颗粒与无菌性炎症的关系以及氯化镧对其影响. 方法 体外培养小鼠RAW264.7细胞,根据培养液不同将实验分成4组:A组为细胞培养液,B组加入1 mg/mL氧化铝陶瓷颗粒悬液,C组加入1 mg/mL氧化铝陶瓷颗粒悬液和10 μmol/L氯化镧溶液,D组加入10 μmol/L氯化镧溶液.采用MTT法检测细胞生长情况,RT-PCR、ELISA及Western blot检测炎性因子IL-1β、TNF-α、NF-κB基因及蛋白表达. 结果 MTT检测示,各组细胞活性差异无统计学意义(F=2.180,P=0.142).RT-PCR检测示,B组IL-1β、TNF-α、NF-κB mRNA相对表达量显著高于其余3组(P＜0.05);D组各基因表达量低于A组(P＜0.05).ELISA检测示,B组IL-1β和TNF-α含量显著高于其余3组(P＜0.05);D组显著低于A组(P＜0.05).Western blot检测示,B组NF-κB蛋白表达量显著高于其余3组(P＜ 0.05). 结论 氧化铝陶瓷颗粒可刺激巨噬细胞分泌IL-1β和TNF-α,而氯化镧可一定程度抑制巨噬细胞分泌IL-1β和TNF-a.
作者：聂涛；戴闽；江川；刘翔 刊期： 2014年第08期
目的 探讨人工全膝关节置换术(total knee arthroplasty,TKA)术后切口缘皮肤坏死的原因及修复方法. 方法 2007年6月-2013年6月,收治7例TKA术后切口缘皮肤坏死患者.其中男5例,女2例;年龄59～78岁,平均69岁.关节置换原因:骨性关节炎4例,创伤性关节炎2例,类风湿性关节炎1例.合并糖尿病2例,高血压2例,长期服用激素1例,吸烟史2例;2例膝关节周围有瘢痕.皮肤坏死范围10 cm×2 cm～13 cm×8 cm; TKA术后至切口缘皮肤坏死清创时间为7～15d,平均12d.彻底清创后,采用隐动脉皮瓣4例、腓肠肌内侧头肌皮瓣2例、腓肠肌外侧头肌皮瓣1例修复创面;其中2例同时行髌韧带重建.供区断层皮片游离移植修复. 结果 术后皮瓣、肌皮瓣均成活,创面Ⅰ期愈合;供区植皮均成活,切口均Ⅰ期愈合.无术后早期相关并发症发生.7例均获随访,随访时间6～12个月,平均7.8个月.皮瓣与肌皮瓣外形与质地良好;假体无松动、移位;无感染复发.术后6个月膝关节活动度为45～110°,平均85°;根据膝关节学会评分系统(KSS)评分,获优3例,良2例,一般1例,差1例. 结论 早期发现、彻底清创、及时行轴型皮瓣或肌皮瓣修复是治疗TKA术后切口缘皮肤坏死并挽救膝关节假体的关键.
作者：沈余明；韩冬；覃凤均 刊期： 2014年第08期
目的 探讨经聚羟基脂肪酸酯表面颗粒结合蛋白(polyhydroxyalkanoates granule binding protein,PhaP)-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp,RGD)融合蛋白修饰后的聚羟基丁酸戊酸酯[poly (3-hydroxybutyrateco-3-hydroxyvalerate),PHBV]和聚羟基丁酸己酸酯[poly (3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyhexanoate),PHBHHx]的亲水性及其与软骨细胞的生物相容性. 方法 利用溶剂挥发法制备PHBV和PHBHHx生物膜材料,扫描电镜观察材料结构;通过蛋白工程技术表达纯化PhaP-RGD融合蛋白,按照3.5 mg/mL浓度对两种生物膜材料进行蛋白修饰,通过测量接触角检测蛋白修饰前后材料表面亲疏水性的改变.采用三步消化法体外分离培养人鼻中隔软骨细胞并传代.取第2代细胞分别接种于PHBV(A1组)、PHBV/PhaP-RGD(A2组)、PHBHHx(B1组)、PHBHHx/PhaP-RGD(B2组)、细胞培养板(C组).培养3d后行DAPI染色观察细胞增殖情况;3、7d通过MTT法检测细胞增殖能力.7d扫描电镜下观察细胞在生物膜材料表面的贴附及形态结构,并通过甲苯胺蓝染色初步检测细胞外基质分泌情况. 结果 扫描电镜观察示PHBV和PHBHHx生物膜材料表面为多孔结构;经融合蛋白修饰后PHBV、PHBHHx生物膜材料表面接触角均显著减小,差异有统计学意义(P＜0.05).细胞接种于生物膜材料表面后均能生长,培养3d后B2组细胞增殖能力强(P＜0.05);7d时各组软骨细胞增殖能力均较3d增强(P＜0.05),组间比较B1、B2组高于A1、A2、C组,B2组高于B1组、A1组高于A2组(P＜0.05).培养7d,甲苯胺蓝染色示A1、A2、B1、B2组材料表面均可见蓝色异染,其中A1、A2组染色程度相似,B2组染色较B1组深;扫描电镜观察示各组细胞贴附良好,细胞之间形成连接,并伸入材料孔隙内. 结论 经PhaP-RGD融合蛋白修饰的PHBHHx生物膜材料与软骨细胞有良好的生物相容性.
作者：高天喜；常会敏；范敏杰；卢晓云；王正辉；张向红；井晓红；史艳霞；李智慧 刊期： 2014年第08期
目的 综述MSCs老化研究进展,总结在MSCs老化研究中取得的成就和当前面临的困境. 方法 广泛查阅国内外有关MSCs老化研究的文献,并进行综述. 结果 人工转导使MSCs表达端粒酶延缓老化,甚至使细胞永生,但也存在潜在安全隐患;年龄相关的细胞老化研究由于研究对象选择不规范,导致结果不一;从多方面改善细胞体外培养条件有助于延缓老化;氧化应激学说似乎并不能很好说明细胞老化现象. 结论 MSCs老化机制研究仍是组织工程种子细胞研究难点,针对MSCs老化机制的研究有助于加速组织工程向临床应用转化.
作者：杨海堂；赵珩 刊期： 2014年第08期
目的 综述椎间盘退变模型及降钙素治疗的研究现状. 方法 广泛查阅近年国内外与椎间盘退变动物模型及降钙素治疗相关的文献,并进行总结分析. 结果 不同造模方法可引发椎间盘组织或细胞退变,各有优缺点;降钙素在体内外研究中均可不同程度缓解椎间盘退变. 结论 各种椎间盘退变模型为研究椎间盘退变机制提供了多种思路,降钙素干预不同椎间盘退变模型结果可为今后实验研究提供依据.
作者：刘彬彬；张柳；田发明；王文雅 刊期： 2014年第08期
目的 通过与持续硬膜外麻醉比较,探讨局部麻醉全关节镜下胭窝囊肿摘除联合膝关节清理术治疗胭窝囊肿的疗效. 方法 2002年6月-2013年1月,对145例胭窝囊肿患者采用局部麻醉全关节镜下胭窝囊肿摘除联合膝关节清理术治疗(局麻组);以2000年2月-2005年8月,采用持续硬膜外麻醉全关节镜下手术治疗的51例胭窝囊肿患者作为对照组.两组患者性别、年龄、侧别、病程以及囊肿大小比较,差异均无统计学意义(P＞ 0.05),具有可比性.比较两组麻醉时间、镇痛效果、麻醉满意度、手术时间、术中出血量、术后麻醉并发症发生情况,根据Rauschning和Lindgren胭窝囊肿分级标准评定疗效,记录随访期间囊肿复发情况. 结果 两组术后切口均Ⅰ期愈合,无血管、神经损伤等并发症发生.两组患者均获随访,局麻组随访时间1年1个月～8年,平均3.7年;对照组随访8年～13年7个月,平均10.8年.与对照组相比,局麻组麻醉时间缩短、疼痛视觉模拟评分(VAS)增高、手术时间缩短、术中出血量减少(P＜0.05);麻醉满意度降低,但两组差异无统计学意义(x2=0.071,P=1.000).术后对照组8例(15.7％)发生麻醉并发症,发生率显著高于局麻组(0)(P=0.000).随访期间局麻组12例囊肿复发,治愈率91.7％;对照组5例复发,治愈率90.2％;两组治愈率比较差异无统计学意义(x2=0.111,P=0.774).末次随访时,根据Rauschning和Lindgren分级标准:局麻组0级131例、Ⅰ级13例、Ⅱ级1例,与术前比较差异有统计学意义(Z=10.683,P=0.000);对照组0级37例、Ⅰ级12例、Ⅱ级2例,与术前比较差异有统计学意义(Z=-6.385,P=0.000);两组术后分级比较差异有统计学意义(Z=3.145,P=0.002).结论 与持续硬膜外麻醉相比,局部麻醉全关节镜下胭窝囊肿摘除联合膝关节清理术治疗胭窝囊肿效果更好,可实时动态观察患肢血管、神经情况,且创伤小、复发率低,临床疗效满意.
作者：王江涛；刘玉杰；王俊良；齐伟；曲峰；申学振；肇刚；袁邦拓；刘洋 刊期： 2014年第08期
目的 研究雪旺细胞(Schwann cells,SCs)对BMSCs来源内皮细胞分泌一氧化氮(nitric oxide,NO)功能的影响,为进一步探究组织工程骨成骨过程中神经因素对血管因素的作用奠定实验基础. 方法 取1日龄SD乳鼠坐骨神经及臂丛神经,体外分离获取SCs,采用S-100免疫组织化学染色鉴定;取2周龄SD大鼠胫骨及股骨骨髓,体外分离获取BMSCs,诱导分化成为内皮细胞,采用血管性血友病因子与CD31免疫荧光染色鉴定.采用Transwell共培养板对SCs与BMSCs来源内皮细胞进行非接触共培养作为实验组,单纯培养BMSCs来源内皮细胞作为对照组,分别于1、3、5、7d检测培养液中NO浓度,1、3、7、10d采用实时荧光定量PCR (real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)检测一氧化氮合酶2(nitric oxide synthetase 2,NOS2)、NOS3 mRNA表达. 结果 分离及诱导分化的细胞通过形态学及免疫组织化学和免疫荧光染色鉴定为SCs和内皮细胞.实验组及对照组内各时间点间释放NO浓度比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);除3d外,其余各时间点实验组释放NO浓度均显著高于对照组(P＜0.05).RT-qPCR检测结果示,培养各时间点实验组NOS2 mRNA相对表达量均显著高于对照组(P＜0.05);两组内各时间点间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).除10d外,其余各时间点实验组NOS3 mRNA相对表达量均显著高于对照组(P＜0.05);实验组内各时间点间NOS3 mRNA相对表达量比较差异均无统计学意义(F=6.673,P=0.062),对照组内各时间点间比较差异均有统计学意义(F=36.581,P=0.000). 结论 SCs可促进BMSCs来源内皮细胞释放NO,可能与SCs促进NOS活性有关.
作者：蔡喜雨；张鑫鑫；姜晓锐；江汕；裴国献 刊期： 2014年第08期
目的 通过对C3H10T1/2细胞进行成骨及成软骨分化,利用微小RNA (microRNA,miRNA)芯片技术筛选成骨分化和成软骨分化中差异miRNA,以期寻找调节C3H10T1/2细胞成骨及成软骨分化的特异性miRNA. 方法 取C3H10T1/2细胞系,分别行成骨和成软骨诱导分化,对诱导组和对照组进行鉴定.然后通过miRNA芯片技术筛选分化前后2倍变化幅度且平均标准化信号值＞2的差异miRNA,并行实时荧光定量PCR (real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)验证. 结果 诱导7d成骨诱导组较对照组有明显ALP表达(P＜0.05);诱导7、14、21d,RT-qPCR检测成骨诱导组成骨标志物Runx2、丝氨酸蛋白酶7(serine protease 7,Sp7)、Ⅰ型胶原、骨桥蛋白(osteopontin,OPN) mRNA相对表达量均显著高于诱导0d时(P＜ 0.05);诱导21d,Western blot检测成骨诱导组Runx2、Sp7、Ⅰ型胶原、OPN蛋白表达量明显高于对照组(P＜0.05).成软骨诱导5、10、15d,RT-qPCR检测成软骨诱导组软骨标志物SOX9、Ⅱ型胶原、蛋白多糖(Aggrecan)、透明质酸合成酶(Has2) mRNA相对表达量均显著高于诱导0d时(P＜0.05);诱导15d,Western blot检测成软骨诱导组SOX9、Ⅱ型胶原、Aggrecan、Has2蛋白表达量明显高于对照组(P＜0.05).通过miRNA芯片技术分别筛选出10个成骨和3个成软骨2倍变化幅度且平均标准化信号值＞2的差异miRNA.除miR-455-3p之外,其余差异miRNA验证结果与芯片结果比较有较好一致性. 结论 通过miRNA芯片技术对C3H10T1/2细胞系以及其诱导成骨和成软骨分化细胞进行检测对比,发现部分miRNA表达量在诱导后细胞中发生变化,为进一步挑选成骨和成软骨特异性miRNA进行功能验证和靶基因预测奠定了基础.
作者：幸嵘；孔清泉；项舟；杨婧；罗静聪；邓力；解慧琪 刊期： 2014年第08期
目的 探讨1,25-二羟基维生素D3对伴骨质疏松腰椎退变性疾病患者椎间融合率的影响. 方法 回顾分析2011年11月-2012年10月采用经后路椎间孔行腰椎椎间融合术治疗的44例伴骨质疏松腰椎退变性疾病患者临床资料,根据术后是否使用1,25-二羟基维生素D3将患者分为试验组(21例)和对照组(23例).两组患者性别、年龄、病变类型、病变节段、病程比较,差异均无统计学意义(P＞0.05),具有可比性.采用Oswestry功能障碍指数(ODI)评价术后功能恢复情况;行腰椎正侧位X线片及薄层二维重建CT检查,根据改良Brantigan评分标准评价椎间融合情况. 结果 两组患者均获随访,随访时间12～27个月,平均14.5个月.随访期间两组患者均无断钉、断棒、Cage移位及其他并发症发生.术后6个月及末次随访时两组ODI评分均较术前显著改善(P＜0.05);术前两组ODI评分比较差异无统计学意义(P＞0.05),术后6个月和末次随访时试验组ODI评分均显著低于对照组(P＜0.05).根据改良Brantigan评分标准,术后6个月试验组椎间融合率为76.19％ (16/21),对照组为43.48％ (10/23),两组融合率比较差异有统计学意义(x2=3.60,P=0.03);末次随访时,试验组椎间融合率为95.24％ (20/21),对照组为65.22％(15/23),两组融合率比较差异亦有统计学意义(x2=4.38,P=0.02). 结论 1,25-二羟基维生素D3可能提高伴骨质疏松腰椎退变性疾病患者椎间融合率以及改善患者术后生活质量.
作者：徐勇；周敏；刘欢；张群虎；胡志毅；张宁；任永信 刊期： 2014年第08期
中国修复重建外科杂志
主管:中华人民共和国卫生部 计划生育委员会
主办：中国康复医学会,四川大学
