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hVEGF_(165)及hBMP-7共表达重组腺相关病毒载体的体外生物学活性研究

时志斌;樊立宏;强辉;唐一仑;王坤正;党晓谦

关键词:重组腺相关病毒载体, hVEGF_(165), hBMP-7, 共表达, 生物学活性
摘要:目的 通过体外实验探讨hVEGF_(165)和hBMP-7共表达重组腺相关病毒载体(recombinant adeno-associated virus,rAAV)体外生物学活性,为体内应用其进行骨坏死的基因治疗奠定理论基础. 方法 分别采用rAAV-hVEGF_(165)-内部核糖体进入位点序列(internal ribosome entry site,IRES)-hBMP-7(实验组)、绿色荧光蛋白(green fluores-cent protein,GFP)标记的rAAv-IRES-GFP(对照组)转染体外培养的第3代兔BMSCs,于转染后1、2、3、7及14 d应用ELISA法及转染后14 d应用Western blot法鉴定两组hVEGF_(165)和hBMP-7表达;转染后14 d行细胞免疫荧光染色观察hVEGF_(165)和hBMP-7表达一致性.应用第3代人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)管状血管形成实验检测hVEGF_(165)蛋白活性.取第3代BMSCs行诱导成骨实验,Gomori钙钴法ALP染色及茜素红法钙盐染色检测hBMP-7蛋白活性. 结果 ELISA检测示随转染时间延长,两组hVEGF_(165)和hBMP-7表达逐渐升高;实验组各时间点hVEGF_(165)和hBMP-7表达量均明显高于对照组(P<0.05).Western blot检测示实验组可见hVEGF_(165)和hBMP-7表达,对照组未见阳性表达.细胞免疫荧光染色观察示实验组hVEGF_(165)和hBMP-7染色呈阳性,表达部位和强度具有较好一致性;对照组未见阳性表达.HUVEC管状血管形成实验示实验组HUVEC拉长变形、出芽且相互交联成管状样结构;与对照组相比,管状血管数比较差异有统计学意义(P<0.05).ALP染色见实验组细胞出现深染颗粒,对照组细胞内浅着色;与对照组相比,矿化结节数比较差异有统计学意义(P<0.05). 结论 双基因共表达rAAV-hVEGF_(165)-IRES-hBMP-7体外具有良好的生物学活性.
中国修复重建外科杂志相关文献
  • 股前外侧穿支皮瓣修复四肢软组织缺损

    目的 总结游离或带蒂的股前外侧穿支皮瓣修复四肢软组织缺损的临床疗效. 方法 2000年3月-2009年1月,收治外伤致四肢软组织缺损32例.男30例,女2例;年龄4~53岁,中位年龄28岁.其中左手桡侧半3例,左肘外侧1例,膝周5例,小腿14例,足背5例,足底4例.软组织缺损范围9 cm×6 cm~15 cm×13 cm.伴骨缺损9例,桡神经干缺损1例.受伤至入院时间1 h~4个月,平均5 d.采用股前外侧穿支皮瓣游离移植27例,其中组合第2足趾移植1例、小隐静脉动脉化腓肠神经1例、腓骨瓣或髂骨瓣4例;带膝上外侧动脉血管蒂移位5例.吻合股外侧皮神经14例.皮瓣切取范围10 cm×8 cm~16cm×15 cm.供区直接缝合或中厚皮片修复. 结果 29例术后皮瓣均成活,创面I期愈合;3例术后出现皮瓣坏死,对症处理后痊愈.供区植皮全部成活,切口I期愈合.32例均获随访,随访时间8个月~9年,平均1年6个月.皮瓣颜色、质地和厚薄与受区相近,术后6个月14例吻合股外侧皮神经皮瓣感觉恢复至S_(3~4),其余皮瓣恢复保护性感觉.移植骨瓣均于术后4~6个月达骨性愈合.供区无明显功能障碍. 结论 股前外侧穿支皮瓣血管蒂粗长,解剖恒定,便于移位或吻合,切取面积大,可通过吻合神经恢复皮瓣感觉,切取简便,对供区影响小,是修复四肢软组织缺损的一种有效方法.

    作者:钟凤林;兰玉平;赵晨阳;徐兵;刘绍江 刊期: 2010年第04期

  • 产瘫后肩关节外展外旋功能受限的手术治疗

    目的 介绍一种治疗产瘫后肩外展、外旋受限的手术方法并总结其疗效. 方法 2005年2月-2008年8月,采用肩胛下肌起点剥离、背阔肌及大圆肌移位术治疗11例产瘫后肩外展、外旋受限患儿.男6例,女5例:年龄1~15岁,平均6岁.主要临床表现为肩关节呈内收、内旋挛缩畸形,主动、被动外旋受限,主动外展功能严重受限,被动外展均>90°.根据Gilbert肩关节功能分级:1级7例,2级4例.根据Mallet肩关节功能评分:5分3例,6分3例,7分5例.三角肌、冈上肌、冈下肌、大圆肌及背阔肌肌力均达3~4级. 结果 术后1例出现血肿,对症处理后切口愈合;余切口均I期愈合.11例均获随访,随访时间12~37个月,平均17个月.肩关节主动外展及外旋功能恢复满意.根据Gilbert肩关节功能分级:2级1例,3级1例,4级9例;根据Mallet肩关节功能评分:10分1例,11分2例,12分4例,13分3例,14分1例:与术前比较差异均有统计学意义(P<0.01).三角肌、冈上肌、冈下肌、大圆肌及背阔肌肌力较术前增加1级,达4~5级. 结论 采用肩胛下肌起点剥离、背阔肌及大圆肌移位术可在治疗肩关节内收、内旋挛缩的同时,增强外展、外旋肌力,是治疗产瘫后肩关节外展、外旋受限的有效方法之一.

    作者:靳国强;史其林 刊期: 2010年第04期

  • 封闭式负压引流技术联合腓肠神经营养血管逆行岛状皮瓣修复下肢皮肤软组织大面积缺损

    目的 总结封闭式负压引流技术(vacuum sealing drainage,VSD)联合腓肠神经营养血管逆行岛状皮瓣修复下肢皮肤软组织大面积缺损的临床疗效. 方法 2008年1月-7月,收治25例下肢皮肤软组织大面积缺损患者.男13例,女12例;年龄15~54岁,平均34.4岁.机器绞伤15例,交通伤9例,爆炸伤1例.损伤部位:小腿中下段8例,踝部4例,足背部5例,足跟部及跟腱部8例.创面范围为9 cm×4 cm~12 cm×9 cm.受伤至手术时间为1~12 h,平均6.2 h.先行VSD治疗待创面肉芽组织新鲜、感染控制后,采用大小为10 cm × 7 cm~13 cm×11 cm的腓肠神经营养血管逆行岛状皮瓣修复创面.供区直接缝合或游离植皮修复. 结果 皮瓣修复术后2例出现皮瓣切口远端皮缘坏死,1例静脉危象,经对症处理后成活;其余皮瓣均顺利成活,创面I期愈合.供区切口均I期愈合,游离植皮成活.25例均获随访,随访时间11~14个月,平均13个月.皮瓣与周围皮肤色泽相似,无臃肿,质地佳;皮瓣受力处无破溃. 结论 VSD治疗能降低创面感染几率,为皮瓣修复提供良好组织床.腓肠神经营养血管逆行岛状皮瓣是修复下肢及远端足跟部皮肤软组织缺损的有效方法之一.

    作者:杨大威;李卫;孙丕云;吴建滨;王景滨;梁佳军;孟庆刚 刊期: 2010年第04期

  • 穿支血管蒂腓肠神经营养血管皮瓣的实验研究

    目的 建立穿支血管蒂腓肠神经营养血管皮瓣的实验动物模型,为皮瓣生理及血流动力学的研究提供基础. 方法 新西兰大白兔35只,雌雄不限,体重2.5~3.0 kg,根槲观察方法不同随机分为4组.活体解剖观察组5只10侧,解剖观察腓肠神经、伴行血管、胫后动脉及穿支血管走行.乳胶灌注观察组和明胶.氧化铅灌注解剖X线片观察组,分别5只10侧,两组动物处死后分别经腓肠神经伴行动脉或胫后动脉注入乳胶或明胶.氧化铅,观察上述血管走行、直径及吻合情况.皮瓣移位观察组20只40侧,设计以胫后动脉跟骨上穿支血管为蒂,腓肠神经走行为轴线的远端蒂皮瓣,皮瓣面积为7 cm×1 cm,蒂长0.5 cm,观察皮瓣颜色和肿胀情况. 结果 腓肠神经起源于胫后神经,于胭窝部穿腓肠肌外侧头斜行向外下走行,于外踝上(5.42±0.15)cm处穿至深筋膜下,垂直走向外踝,其伴行动脉起源于股深动脉,起始直径为(0.73±0.11)mm,伴行腓肠神经行向外踝.胫后动脉跟骨卜穿支血管起始于内踝与跟骨连线中点,起始直径(0.45±0.01)mm.穿支血管于跟骨上方行至外踝区与腓肠神经伴行血管相吻合,共同构成腓肠神经周围血管网.2侧皮瓣因术后感染排除实验,其余38侧皮瓣术后10 d成活率为78.0%±1.5%. 结论 兔穿支血管腓肠神经营养血管远端蒂皮瓣解剖稳定,切取简便,血管可靠,是良好的研究穿支蒂皮神经营养血管皮瓣的动物模型.

    作者:文根;柴益民;汪春阳;吴旭华;王磊;成亮 刊期: 2010年第04期

  • 髋臼周围肿瘤切除后腓骨移植重建的有限元研究

    目的 建立精细人体全骨盆及髋臼周围肿瘤缺损后重建的三维有限元模型,探讨腓骨移植联合3种不同内固定重建骨盆环后的应力分布规律. 方法 采集1例35岁正常男性L_3至股骨中段、单侧腓骨及内固定系统的CT数据集,建立人体全骨盆及髋臼周围肿瘤切除后腓骨移植联合钢板(Plates)、椎弓根棒(pediele-rods,PR)、骶髂棒(sacral-iliae rods,SIR)3种内固定方式模拟重建的有限元模型.模拟双腿站立位,L_3椎体表面施加500 N的垂直载荷,分析重建后的骨盆、移植腓骨及内固定系统的应力分布情况,并进行评价. 结果 建立了髋臼周围肿瘤切除后腓骨重建的有限元模型.移植腓骨应力集中多发生在与宿主骨接合处附近,不同内固定系统中,Plates与螺钉或钛棒与螺钉接合部分易发生应力集中;Plates重建时,移植腓骨及健侧股骨颈应力较少发生应力集中;SIR重建时,移植腓骨及健侧骨盆应力集中明显. 结论 游离腓骨移植、Plates内固定重建骨盆应力分布与完整状态趋于一致,是修复髋臼周围肿瘤切除术后骨缺损的较好方法;有限元模型可作为骨盆生物力学研究的工具.

    作者:游木荣;俞光荣;荆珏华;荆志振;李兵;陈博;丁祖泉 刊期: 2010年第04期

  • 骶骨切除范围对髂骨钉重建腰-髂固定结构稳定性的生物力学影响

    目的 评价骶骨切除范围对使用骼骨钉技术的腰-骼固定结构稳定性的生物力学影响,以明确髂骨双钉技术的使用时机. 方法 取自愿捐献的9具成年新鲜尸体L_2至骨盆标本用于实验.首先行L_(3~5)椎弓根钉固定,并将此结构定义为腰-髂部的完整状态(完整状态组).完整状态测试后,在同一标本上行阶段性骶骨部分切除并联合L_3~髂骨钉棒系统固定如下,A组:S_1以下切除加双侧髂骨单钉的腰-髂固定(以下称Single);B组:1/2 S_1以下切除加Single:C组:单侧骶髂关节切除加Single:D组:骶骨完全切除加Single:E组:骶骨完全切除加双侧髂骨双钉的腰-髂固定.在MTS材料测试机上,给标本分别施加0~800 N轴向压缩和-7~7 N·m轴向扭转载荷,计算并比较各组的结构压缩和扭转刚度. 结果 完整状态组的压缩刚度值为(392±119)N/mm,A~E组L_3~髂骨重建结构的压缩刚度分别是完整状态组的106.4%±9.5%、102.7%±8.0%、92.2%±10.1%、72.7%±8.0%和107.7%±10.7%.A、B、C组及完整状态组4组间比较差异无统计学意义(P>0.05),4组的压缩刚度显著高于D组(P<0.05);E组与A、B组和完整状态组比较差异无统计学意义(P>0.05),但显著高于C、D组(P<0.05).完整状态组的扭转刚度值为(3.22±1.23)N·m/deg,A~E组重建结构的扭转刚度分别是完整状态组的105.4%±10.1%、89.8%±12.3%、75.9%±10.6%、71.2%±10.2%和109.1%±16.9%.A、B、E组与完整状态组比较差异无统计学意义(P>0.05),C、D组的扭转刚度显著低于A、E组和完整状态组(P<0.05),E组的扭转刚度显著高于B组(P<0.05). 结论 1/2 S_1以下切除后,使用骼骨单钉技术可有效恢复局部稳定性:进一步切除单侧骶髂关节或全部骶骨时,髂骨单钉技术难以恢复局部初始稳定性.在骶骨肿瘤手术治疗中,对于骶骨全切或单侧骶髂关节切除所致的失稳,应采用髂骨双钉固定.

    作者:庄新明;于滨生;李泽民;郑召民;梁春祥;李浩淼;韩国伟 刊期: 2010年第04期

  • 缺氧诱导因子1α参与异氟醚延迟性预处理减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤的研究

    目的 异氟醚预处理能对大鼠肾脏发挥急性期缺血保护作用,但急性期保护作用仅能维持2~3 h.探讨异氟醚延迟性预处理是否能减轻.肾脏缺血再灌注损伤,以及缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)是否参与调节该保护作用. 方法 取雄性C57BL/6小鼠52只,体重20~25 g,随机分为4组(n=13):对照组(A组)、PBS加异氟醚预处理组(B组)、无意义小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)加异氟醚预处理组(C组)和HIF-1α siRNA加异氟醚预处理组(D组).气体暴露前24 h C、D组小鼠经尾静脉分别给予含有50μg无意义siRNA或HIF-1α siRNA的无RNA酶的PBS 1 mL;A、B组给予等体积PBS.B、C、D组给予含1.5%异氟醚和25%O_2的气体持续吸入2 h,A组仅吸入含25%O_2的气体2 h.气体暴露后24 h,采用Western blot技术检测肾脏组织中HIF-1α和促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)蛋白的表达;制备肾缺血再灌注损伤,于再灌注后24 h检测血清肌酐(serum ereatinine,SCr)和血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平,并观察肾组织病理学变化. 结果 与A组比较,B、C组HIF-1α和EPO蛋白表达明显增加(P<0.01),SCr和BUN水平以及肾小管评分明显降低(P<0.01);D组HIF-1α蛋白表达及SCr、BUN水平较A组明显下降(P<0.01).与B、C组比较,D组HIF-1α和EPO蛋白的表达明显下降(P<0.01),SCr和BUN水平以及肾小管评分明显增加(p<0.01),肾组织损伤明显加重. 结论 异氟醚延迟性预处理能明显减轻肾缺血再灌注损伤,HIF-1α参与调控异氟醚的保护作用.

    作者:程剑;张蕾;黄瀚;马大青;刘进 刊期: 2010年第04期

  • LARS人工韧带重建后交叉韧带伴后外侧韧带结构损伤疗效观察

    目的 评价应用LARS人工韧带在关节镜下重建后交叉韧带,并有限切开重建后外侧韧带结构的临床疗效. 方法 2004年11月-2008年9月,采用LARS人工韧带同时重建12例后交叉韧带伴后外侧韧带结构损伤.男10例,女2例;年龄19~43岁,平均26.5岁.交通伤10例,重物砸伤2例.病程4~12周,平均6.4周.后抽屉试验及Laclaman试验均为阳性.按国际膝关节文献委员会(IKDC)评分标准均为D级,Lysholm评分为(53.2±3.1)分. 结果 术后切口均I期愈合.患者均获随访,随访时间13~60个月,平均32.2个月.后抽屉试验及Lachman试验均为阴性.末次随访时IKDC评分均为A级,Lysholm评分为(91.5±2.8)分,与术前比较差异均有统计学意义(P<0.05).KT-1000检查提示患膝前向及后外向松弛度差异均<3 mm. 结论 应用LARS人工韧带在关节镜下重建后交叉韧带,同时有限切开重建后外侧韧带结构,术后膝关节可获即时稳定,利于膝关节早期活动,避免相关并发症的发生.

    作者:林志金;贺伶;沈锋;黄建明;曹烈虎;陈凤梅;康一凡 刊期: 2010年第04期

  • 短节段椎弓根螺钉系统并伤椎固定治疗胸腰椎骨折脱位

    目的 总结后路短节段椎弓根螺钉系统并伤椎固定治疗胸腰椎骨折脱位的疗效. 方法 2006年1月-2008年12月,收治18例胸腰椎骨折脱位患者.其中男12例,女6例;年龄24~50岁,平均41岁.高处坠落伤8例,车祸伤7例,重物砸伤3例.受伤节段:T_(12)骨折合并T_(11)脱位5例,L_1骨折合并T_(12)脱位7例,L_2骨折合并L.脱位4例,L_3骨折合并L_2脱位2例.神经功能Frankel分级:A级7例,B级4例,C级3例,D级2例,E级2例.术前影像学检查示骨折椎体均有楔形变,其下终板及椎体下部保持完整.受伤至手术时间3~7 d,平均5 d.采用后路短节段椎弓根螺钉系统加伤椎固定进行复位、固定并植骨融合. 结果 手术时间160~210 min,平均185 min:术中出血量500~800 mL,平均650 mL.术后患者切口均I期愈合,无严重并发症发生,无脊髓、神经功能加重.18例均获随访,随访时间11~36个月,平均20个月.术后2周摄X线片示骨折椎体高度恢复至正常的85%~95%,相邻上位椎体脱位完全复位.脊髓功能除7例Frankel A级无变化外,其余各级均有不同程度恢复. 结论 同时经伤椎椎弓根螺钉固定治疗胸腰椎骨折脱位可取得良好复位效果,并能增强后路短节段内固定系统的牢固性.

    作者:俞武良;陆建猛;欧阳甲;韦勇力;方明;王兴武 刊期: 2010年第04期

  • hVEGF_(165)及hBMP-7共表达重组腺相关病毒载体的体外生物学活性研究

    目的 通过体外实验探讨hVEGF_(165)和hBMP-7共表达重组腺相关病毒载体(recombinant adeno-associated virus,rAAV)体外生物学活性,为体内应用其进行骨坏死的基因治疗奠定理论基础. 方法 分别采用rAAV-hVEGF_(165)-内部核糖体进入位点序列(internal ribosome entry site,IRES)-hBMP-7(实验组)、绿色荧光蛋白(green fluores-cent protein,GFP)标记的rAAv-IRES-GFP(对照组)转染体外培养的第3代兔BMSCs,于转染后1、2、3、7及14 d应用ELISA法及转染后14 d应用Western blot法鉴定两组hVEGF_(165)和hBMP-7表达;转染后14 d行细胞免疫荧光染色观察hVEGF_(165)和hBMP-7表达一致性.应用第3代人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)管状血管形成实验检测hVEGF_(165)蛋白活性.取第3代BMSCs行诱导成骨实验,Gomori钙钴法ALP染色及茜素红法钙盐染色检测hBMP-7蛋白活性. 结果 ELISA检测示随转染时间延长,两组hVEGF_(165)和hBMP-7表达逐渐升高;实验组各时间点hVEGF_(165)和hBMP-7表达量均明显高于对照组(P<0.05).Western blot检测示实验组可见hVEGF_(165)和hBMP-7表达,对照组未见阳性表达.细胞免疫荧光染色观察示实验组hVEGF_(165)和hBMP-7染色呈阳性,表达部位和强度具有较好一致性;对照组未见阳性表达.HUVEC管状血管形成实验示实验组HUVEC拉长变形、出芽且相互交联成管状样结构;与对照组相比,管状血管数比较差异有统计学意义(P<0.05).ALP染色见实验组细胞出现深染颗粒,对照组细胞内浅着色;与对照组相比,矿化结节数比较差异有统计学意义(P<0.05). 结论 双基因共表达rAAV-hVEGF_(165)-IRES-hBMP-7体外具有良好的生物学活性.

    作者:时志斌;樊立宏;强辉;唐一仑;王坤正;党晓谦 刊期: 2010年第04期

  • 局部植入辛伐他汀修复兔桡骨极限骨缺损的实验研究

    目的 为寻找一种理想的骨缺损修复材料,以聚乳酸为载体复合辛伐他汀,观察其修复兔桡骨极限骨缺损的效果,初步探讨其促进成骨的方式. 方法 取4月龄雄性新西兰大白兔12只,体重2.3~2.8 kg,制备兔双侧桡骨22mm骨缺损模型.随机分为4组(n=3),每组自身左右侧对照.A、B、C组左侧(实验侧)分别植入辛伐他汀含量为50、100、200mg的复合棒(以250mg聚乳酸复合),右侧(对照侧)单纯植入250mg聚乳酸棒;D组左侧(实验侧)自体骨移植,右侧(对照侧)旷置.分别在术后8、16周行x线检查评分及像素值测定;术后16周处死取材,CT扫描并计算新骨形成体积百分比,micro-CT扫描后切片组织学观察. 结果 X线片示术后8周各组实验侧有较多云雾状骨痂,断端模糊;16周骨皮质连续,髓腔再通.对照侧骨皮质均不连续,断端硬化.术后8、16周各组实验侧x线评分和像素值及CT扫描所测新骨形成体积百分比均明显高于对照侧(P<0.05).其中x线评分示术后8周C、D组实验侧明显高于A、B组(P<0.05),16周B、D组实验侧明显高于A、C组(P<0.05).X线像素值示术后8周B组实验侧大于A、C、D组(P<0.05).CT扫描所测新骨形成体积百分比示B、D组实验侧明显大于A、C组(P<0.05),D组大于B组(P<0.05).micro-CT扫描显示术后16周B组实验侧完全愈合,骨髓腔再通,骨皮质连续;对照侧虽有新骨形成,但形状不规则,髓腔未通,骨皮质不连续.组织学观察显示各组实验侧完全愈合,骨皮质连续,髓腔再通,成骨多为软骨内成骨;对照侧重塑效果差,愈合不良. 结论 局部植入辛伐他汀可促进兔桡骨极限骨缺损的修复,100 mg剂量修复骨缺损愈合效果好.

    作者:朱静琳;宋泉生;王晶莹;韩晓光;杨燕琳;廖晶;宋纯理 刊期: 2010年第04期

  • 改良胸锁乳突肌皮瓣修复口腔颌面部肿瘤切除术后软组织缺损

    目的 探讨改良胸锁乳突肌皮瓣修复口腔颌面部肿瘤切除术后软组织缺损的临床效果及预后. 方法 2001年4月-2007年1月,对43例颌面部恶性肿瘤根治术后软组织缺损患者采用同期改良胸锁乳突肌皮瓣修复.其中男31例,女12例;年龄25~76岁,平均58.5岁.病程25 d~14个月,平均4.5个月.其中高分化鳞癌27例,中、低分化鳞癌14例,横纹肌肉瘤1例,腺样囊性癌1例.发病部位:舌25例,口底11例,下牙龈4例,颊黏膜3例.肿瘤临床分期:I期3例,II期13例,III期7例,IV期20例.肿瘤切除后软组织缺损范围及术中切取皮瓣范围均为4锄×3 cm~8cm×6 cm.观察术后皮瓣的生长及伤口愈合情况,并随访术后患者吞咽、张口功能恢复情况. 结果 术后1周3例患者出现远端皮瓣1/4缺血性坏死,经抗炎治疗及局部冲洗换药后II期愈合:其余皮瓣成活良好.供区2例感染伴积液,给予切开引流后II期愈合;其余供区切口I期愈合.术后48 h未见皮瓣出现动、静脉危象.39例获随访,随访时间6个月~6年.3例颊黏膜癌患者的张口度均恢复到2指以上.术后24例舌癌患者吞咽及发音功能良好;3例需进软食,余均可进普食.26例随访超过2年者可见皮瓣上皮化生为口腔黏膜.4例术后6个月、2例术后1年肿瘤复发死亡.2例术后6个月同侧颈部淋巴结转移复发,再次手术治疗后存活至今.术后2年生存率为85%. 结论 改良胸锁乳突肌皮瓣修复口腔颌面部肿瘤切除术后软组织缺损,可及时恢复口腔颌面部功能,提高患者生存质量.

    作者:林轶;朱慧勇;刘建华;王慧明 刊期: 2010年第04期

  • 肩关节周围损伤合并腋神经损伤的诊治

    目的 总结肩关节周围损伤合并腋神经损伤的诊断和治疗方法. 方法 2005年6月-2009年3月,收治6例肩关节周围损伤患者,经体检结合肌电图确诊合并腋神经损伤.其中男4例,女2例;年龄21~56岁,平均39岁.锁骨远端骨折2例,肩胛颈骨折、锁骨中段骨折、肩锁关节脱位及肩部挤压伤各l例.术前三角肌肌力0~1级.受伤至入院时间0.5~96.0 h.行切开复位内固定术或保守治疗,腋神经损伤均采用理疗、药物等非手术治疗. 结果 术后患者切口均I期愈合.术后6例均获随访,随访时间5~18个月,平均8个月.骨折均愈合,愈合时间6~10个月.4例三角肌肌力恢复至5级,2例恢复至4级.患侧肩关节功能按照改良Mallett评分标准评价,优4例,良1例,中1例.无并发症发生.肌电图检查5例恢复正常,1例腋神经运动传导波幅稍低. 结论 肩关节周围损伤时体检结合肌电图检查即可确诊是否合并腋神经损伤,采用保守治疗腋神经损伤可获得较好疗效.

    作者:谭美云;郭杏;王远辉;张忠杰;阳运康;鲁晓波 刊期: 2010年第04期

  • 体外血管内皮细胞和脂肪干细胞联合培养对脂肪干细胞成骨分化的影响

    目的 进一步研究血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)和脂肪干细胞(adipose-derived stromal cells,ADSCs)联合培养对ADSCs成骨分化的影响,为联合培养VECs和ADSCs作为骨组织工程种子细胞的可能性提供实验依据. 方法 分别自足月妊娠SD大鼠和18周龄SD大鼠制备脐血来源的VECs和ADSCs,行形态学观察及免疫荧光染色鉴定.取第3代ADSCs与诱导培养6周的VECs按细胞比例分别为3:1、1:1和1:3设为实验组A、B、C组,.ADSCs、VECs单独培养设为对照组D、E组.培养第7、14天取各组细胞行ALP和饱和茜素红钙染色,进行ALP和骨钙定性检测;第4、7、14天定量测定各组细胞ALP和骨钙素(osteocalcin,OC)含量. 结果 诱导培养6周的脐血来源VECs可见短梭形和多角形细胞混合生长,免疫荧光染色可见血管性血友病因子为阳性.ADSCs培养可见贴壁单个核细胞形态单一,呈梭形生长,无重叠现象;免疫荧光染色可见CD90~+.各组细胞培养第7天,ALP染色示A、D、E组呈阴性反应,B、C组可见部分阳性细胞;第14天时D、E组仍呈阴性反应,A、B、C组可见片状阳性细胞.培养第7天,茜素红染色示各组均未发现红色阳性细胞;第14天时A、B、C组可见极少数阳性细胞,D、E组未发现阳性细胞.各组ALP含量随时间延长均逐渐增高,其中B组各时间点含量均高,与其余各组比较差异均有统计学意义(P<0.01),各时间点A、C组与D、E组比较差异均有统计学意义(P<0.01),A、C组间及D、E组间比较差异无统计学意义(P>0.05).各组OC含量随时间延长逐渐增高,培养第7、14天时B组含量高,各时间点B组与其余各组比较差异均有统计学意义(P<0.01),第4、14天时C、D组间比较差异均有统计学意义(P<0.01),第14天时A、C组和E组比较差异有统计学意义(P<0.05),其余各时间点各组间比较差异均无统计学意义(P>0.05). 结论 大鼠脐血来源的VECs能在体外诱导ADSCs向成骨细胞方向分化,1:1比例分化能力强.

    作者:王福科;刘流;赵德萍;何晓光;代晓明;李逸松;李玉晓 刊期: 2010年第04期

  • 肩胛骨并骨盆骨转移瘤同期手术一例

    目的 总结1例肩胛骨并骨盆骨转移瘤同期手术的方法及效果. 方法 2007年6月收治1例63岁男性滤泡状甲状腺癌右侧肩胛骨并左侧骨盆骨转移瘤.右肩胛部有-8 cm×5 cm肿块,质韧,边界清晰,不活动;右肩功能部分受限,外展70°,外旋45°,外展上举120°;左髋活动轻度受限.同期行右侧全肩胛骨切除和左侧骨盆切除并特殊定制的半骨盆假体重建术. 结果 术后切口I期愈合.患者获随访2年,恢复日常生活.右肩功能部分受限,外展50°,外旋20°,外展上举90°;患髋无明显疼痛不适,行走时步态正常.关节功能根据国际保肢协会标准评分,右肩关节18分,左髋关节24分.随访期间肿瘤无复发. 结论 全肩胛骨切除和半骨盆切除并重建术是治疗肩胛骨及骨盆骨转移瘤的一种有效方法.

    作者:陈庆真;许少健;黄永明;高辉;徐逸生 刊期: 2010年第04期

  • 大鼠椎间盘器官整体培养条件下髓核组织的变化

    目的 对大鼠椎间盘包括上下软骨终板、纤维环及髓核组织进行整体培养,观察髓核组织的变化,探索椎间盘器官整体培养的实用技术. 方法 取健康清洁级5~6周龄SD大鼠60只,体重约150 g,雌雄不限,完整取出腰段椎间盘器官共335个,用含肝素的高渗PBS液充分冲洗后置入含有渗透压为410 mOsmol/kg高渗培养液的12孔培养板内,每天换液1次.于培养第O、3、7、14、21天行髓核细胞成活率检测(n=15)、免疫组织化学染色观察(n=2)、HE染色(n=15)、番红O染色观察(n=15),培养第O、3、7、14天行RT-PCR检测(n=5). 结果 培养14 d内髓核细胞成活率无明显变化(P>0.05),21 d时显著低于其余各时间点(P<0.01).各时间点免疫组织化学染色均显示髓核细胞内含大量Ⅱ型胶原.培养14 d内HE染色和番红O染色示髓核和基质组织结构完整.图像分析显示,培养14 d内各时间点间髓核组织灰度值比较差异均无统计学意义(P>0.05),21 d与其余各时间点比较差异均有统计学意义(P<0.05).RT-PCR检测显示,随着培养时间延长,I型胶原mRNA表达呈上升趋势,而Ⅱ型胶原、核心蛋白聚糖和聚集蛋白聚糖均呈下降趋势;各基质蛋白mRNA表达的相对强度各时间点间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05). 结论 利用高渗培养液可对椎间盘器官进行整体培养,为椎间盘生理与病理研究提供了一种理想模型.

    作者:李钢;范顺武;赵凤东;张聪明;和荣丽 刊期: 2010年第04期

  • 庆大霉素阳离子脂质体同种异体骨治疗兔慢性骨髓炎的实验研究

    目的 细菌牛物膜常于骨感染灶滋生,导致难以根除的慢性感染:庆大霉素阳离子脂质体同种异体骨在体外可有效抑制金黄色葡萄球菌生物膜的生长.探讨庆大霉素阳离子脂质体同种异体骨对兔慢性骨髓炎的治疗作用. 方法 取40只6月龄新西兰大白兔,左下肢构建胫骨金黄色葡萄球菌慢性骨髓炎模犁,右下肢为阴性对照侧.造模后2周行大体及X线片观察.造模后10 d内死亡4只动物,余36只于造模后2周根据不同治疗方法分为6组,每组6只.A组:无抗生素;B组:庆大霉素静脉注射;C组:庆大霉素阳离子脂质体静脉注射;D组:植入2粒庆大霉素同种异体骨(0.5 cm×0.3 cm);E组:植入2粒庆大霉素阳离子脂质体同种异体骨(0.5 cm×0.3 cm);F组:植入2粒同种异体骨(0.5 cm×0.3 cm).治疗后2周行X线检查并行Norden评分,抽取静脉血行细菌学检查;然后处死动物,取标本行HE染色及骨髓细菌学检查. 结果 造模后2周大体及x线片观察均提示兔胫骨金黄色葡萄球菌慢性骨髓炎模型制备成功.治疗后2周行X线检查提示A、B、C、F组均有不同程度骨质破坏以及骨膜反应;D、E组未见明显骨质破坏和骨膜反应.A~F组Norden评分分别为(2.5±0.3)、(2.1±0.2)、(1.5±0.3)、(1.5±0.2)、(0.9±0.3)、(2.7±0.3)分,A组与B~E组比较差异均有统计学意义(P<0.05),与F组比较差异无统计学意义(P>0.05);B~F组中除C、D组间比较差异无统计学意义(P>0.05)外,其余各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05).A、F组血液及骨髓培养均呈金黄色葡萄球菌阳性;其余4组血液培养均为阴性;骨髓培养B、C、D组各有6、4、3只兔为金黄色葡萄球菌阳性,E组为阴性.HE染色示A、F组均有脓肿、死骨形成,未见新骨形成:B、C组均有不同程度中性粒细胞聚集;D组部分出现中性粒细胞聚集,并见植入骨周围骨母细胞及破骨细胞;E组无中性粒细胞聚集,大量肉芽组织长入,植入骨周围有骨母细胞及破骨细胞. 结论 庆大霉素阳离子脂质体同种异体骨对兔胫骨金黄色葡萄球菌慢性骨髓炎的治疗效果显著优于庆大霉素同种异体骨或庆大霉素脂质体.

    作者:唐辉;徐永清;李刚;游永刚;赵玺龙;梅良斌;范新宇;杨军;赵万秋;丁晶;李军;汤迅;林月秋 刊期: 2010年第04期

  • 切开复位与闭合复位治疗老年桡骨远端骨折的对比研究

    目的 通过对比切开复位与闭合复位治疗老年患者桡骨远端骨折后腕部功能恢复情况,探讨腕关节功能恢复与解剖复位程度的关系. 方法 回顾性分析2005年2月-2009年3月收治的78例单侧桡骨远端闭合骨折老年患者临床资料,其中闭合复位小夹板或石膏固定治疗37例(非手术组),切开复位钢板内固定治疗41例(手术组).非手术组男15例,女22例;年龄60~83岁,平均73岁.按AO骨折分型:A2型8例,A3型7例,B1型7例,B2型4例,B3型2例,C1型4例,C2型2例,C3型3例.受伤至入院时间30 min~3 d,平均1 d.手术组男18例,女23例;年龄62~80岁,平均71岁.按AO骨折分型:A2型5例,.A3型7例,B1型7例,B2型6例,B3型3例,C1型4例,C2型5例,C3型4例.受伤至入院时间30 min~7 d,平均1 d.两组患者性别、年龄、病程、骨折分型等一般资料比较,差异均无统计学意义(P>0.05). 结果 手术组术后切口均I期愈合.患者术后均获随访,随访时间9~36个月,平均20个月.X线片示两组骨折均愈合,骨折愈合时间非手术组为(10.8±2.O)周,手术组为(11.7±2.5)周,两组比较差异无统计学意义(P>0.05).末次随访时非手术组掌倾角、尺偏角、桡骨长度分别为(5.6±2.0)°、(19.1±4.9)°、(8-3±1.3)mm,手术组分别为(8.6±3.O)°、(21.8±2.0)°、(10.4±1.4)mm,两组比较差异均有统计学意义(p<0.05).末次随访时非手术组Gartland-Werley腕关节评分获优9例,良21例,可5例,差2例,优良率为81.1%;手术组获优13例,良25例,可2例,差1例,优良率为92.7%;两组比较差异无统计学意义(P>0.05).两组腕关节屈伸活动度、桡尺偏活动度、旋前旋后活动度、手握力及捏力比较,差异均无统计学意义(P>0.05). 结论 闭合复位小夹板或石膏固定治疗老年患者桡骨远端骨折虽解剖复位程度不如切开复位钢板内固定,但仍可获得满意腕关节功能.

    作者:李书振;陈跃平;林宗汉;丰哲;赵劲民;苏伟 刊期: 2010年第04期

  • 后路病椎切除经椎弓根内固定治疗儿童及青少年先天性脊柱侧后凸畸形

    目的 探讨后路病椎切除、经椎弓根内固定治疗儿童及青少年先天性脊柱侧后凸畸形的方法选择,评价其临床效果. 方法 2003年5月-2007年12月,收治28例先天性脊柱侧凸和后凸畸形患者.其中男11例,女17例;年龄1.5~17.0岁,平均9.6岁.病椎位于胸段13例,胸腰段10例,腰段5例.依据病椎类型及畸形范围,采取不同经后路病椎切除方式:半椎体切除(13例)、半椎体切除联合对侧分节不全切除(7例)、全脊椎切除(8例).均依靠椎弓根螺钉器械行矫形内固定术,其中短节段固定7例(A组),长节段固定、单纯半椎体或联合对侧骨桥切除13例(B组),长节段固定、全脊椎切除8例(C组).记录各组患者手术时间及出血量,测量侧凸及后凸角度并计算矫正率. 结果 A、B、C组手术时间分别为(98±17)、(234±42)、(383±67)min,出血量分别为(330±66)、(1 540±120)、(4 760±135)mL,3组间比较差异均有统计学意义(P<0.05).术后患者切口均I期愈合,无深部感染、呼吸衰竭或深静脉血栓等并发症发生.1例C组患者于术后6 h出现脊髓再灌注损伤,经积极治疗后2周恢复正常;余患者无神经系统并发症发生.28例均获随访,随访时间24~72个月,平均32.8个月.影像学资料示术后6个月植骨融合良好,有连续性骨性结构连接病椎切除后间隙,手术所获矫形角度无明显丢失.所有患者无螺钉松动或拔钉等现象发生.术后2周X线片示3组侧凸及后凸角度与术前比较差异均有统计学意义(P<0.01).A、B组侧凸矫正率显著高于C组(P<0.05),A、B组间差异无统计学意义(P>0.05);A、C组后凸矫正率低于B组(P<0.05),A、C组间差异无统计学意义(P>0.05). 结论 后路病椎切除可直接去除致畸因素,在冠状面和矢状面均可获得良好的矫形,手术计划应结合患者年龄,针对不同的致畸因素及畸形情况,选择恰当的手术方式及固定范围.

    作者:王迎松;鲁宁;张颖;刘路平;赵智;杨振东;赵道洪;陈鸿;解京明 刊期: 2010年第04期

  • Neurogenesin 1基因对脊髓损伤大鼠运动功能的影响及机制探讨

    目的 观察Neurogenesin 1(Ng1)基因对大鼠脊髓损伤后功能恢复的影响,并初步探讨其可能机制. 方法 4月龄SPF级SD大鼠36只,体重约230 g,雌雄不限,随机分为实验组和对照组(n=18).采用改良Allen法制备大鼠T_(10)脊髓损伤模型,通过Alzet微渗透压泵分别向实验组和对照组持续转染重组Ng1质粒和空白质粒各5μg.术后1 d及1、2、3、4周采用BBB运动功能评分系统检测大鼠运动功能恢复情况;术后1周分别采用RT-PCR和Western blot方法检测Ng1 mRNA及蛋白的表达:并于术后2、4周采用免疫荧光双标染色和组织学观察Ng1基因对内源性神经干细胞增殖的影响以及脊髓组织病理变化情况. 结果 自术后1周起实验组BBB评分明显高于对照组(P<0.05);术后4周实验组运动功能评分为(16.80±1.79)分,对照组为(9.60±1.67)分,差异有统计学意义(P<0.01).RT-PCR和Western blot方法检测显示实验组大鼠脊髓组织均见Ngi mRNA与蛋白的表达,对照组无表达.组织学观察示实验组脊髓结构以及神经元形态恢复较好且逐渐趋于正常,且免疫荧光双标染色示实验组脊髓组织中新增殖的神经干细胞数较对照组明显增多,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 Ng1基因能够诱导脊髓损伤后内源性神经干细胞大量增殖,保护受损伤神经元,促进脊髓运动功能修复.

    作者:郑张安;尹宗生;高维陆;张辉;胡勇;张胜权 刊期: 2010年第04期

中国修复重建外科杂志

中国修复重建外科杂志

主管:中华人民共和国卫生部 计划生育委员会

主办:中国康复医学会,四川大学