李丹;卡索;刘成;田勇
目的 探讨转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)、胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)在诱导骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)向软骨细胞分化过程中的相互作用,并研究细胞密度对MSCs向软骨细胞分化的影响.方法 取健康昆明种小白鼠骨髓,用全骨髓贴壁法筛选获得MSCs,体外培养传代.采用特定的诱导培养使MSCs向软骨细胞分化,按培养基内添加生长因子的不同分成3个实验组和对照组.实验组分别为:TGF-β1+IGF-1联合应用组(TGF-β1 10 ng/ml、IGF-1 50 ng/ml);TGF-β1单独应用组(TGF-β110 ng/m1);IGF-1单独应用组(IGF-1 50 ng/ml);对照组不添加任何生长因子.TGF-β1+IGF-1联合应用组于诱导14 d和21 d,分别进行甲苯胺蓝染色及免疫荧光双染法鉴定;于诱导7、14和21 d各组分别提取诱导细胞总RNA,进行RT PCR扩增,检测TGF-β1、IGF-1对诱导细胞Ⅱ型胶原表达量的影响;比较MSCs在平板培养及细胞团培养时,Ⅱ型胶原表达量的差异.结果 TGF-β1+IGF-1联合应用组诱导培养14 d,诱导软骨细胞甲苯胺蓝染色呈阳性,免疫荧光染色可见诱导软骨细胞的细胞外基质含有Ⅱ型胶原.各组基因扩增产物的凝胶电泳可见,TGF-β1+IGF-1联合应用组和TGF-β1单独应用组Ⅱ型胶原扩增片段呈阳性;IGF-1单独应用组和对照组,未见Ⅱ型胶原扩增条带;凝胶成像系统灰度扫描示Ⅱ型胶原表达量TGF-β1+IGF-1联合应用组各时间点均比TGF-β1单独应用组明显增加(P<0.05).细胞团培养模式下,诱导细胞表达Ⅱ型胶原比平板培养模式更加显著.结论 MSCs向软骨细胞诱导分化时,IGF-1对TGF-β1有明显的促进作用;细胞培养密度提高有利于MSCs成软骨细胞表型.
作者:晏杰;刘玲蓉;张其清 刊期: 2006年第11期
肱骨干骨折术后不愈合的治疗方法有多种,但理想的方法仍存在争议.单侧外固定器以单侧进针为特点,操作简便,并发症少,尤其适用于治疗肱骨干骨折,避免了固定针穿过骨干内侧对神经血管造成损伤的危险;同时单侧外固定器对肱骨干骨折能够达到牢固固定.1995年5月~2003年7月,我院采用单侧外固定器结合植骨治疗肱骨干骨折内固定术后骨不连37例,疗效满意.报告如下.
作者:冯云波;侯小华;赵海勇;殷胜春;张伟佳 刊期: 2006年第11期
2000年5月~2003年4月,应用锁骨钩钢板治疗锁骨外侧端骨折伴肩锁关节脱位38例,疗效满意.报告如下.
作者:李丹;卡索;刘成;田勇 刊期: 2006年第11期
目的 观察医用硫酸钙(Osteoset颗粒)作为骨移植材料的临床应用效果.方法 2004年12月~2005年5月,采用Osteoset颗粒作为骨移植材料治疗9例四肢良性肿瘤性骨缺损(四肢组),其中肱骨黄色纤维瘤1例,髋臼黄色纤维瘤2例,肱骨骨囊肿1例,桡骨骨囊肿1例,股骨非骨化性纤维瘤1例,股骨骨化性纤维瘤1例,股骨骨纤维结构不良2例.同期将材料作为自体骨增量物用于5例腰椎后外侧融合术患者(脊柱组),其中腰椎管狭窄症2例,腰椎滑脱症2例,腰椎峡部裂1例.通过影像学方法评估Osteoset颗粒的成骨作用.结果 14例患者平均获随访6.2个月(3~9个月),Osteoset颗粒植入后1~3个月开始吸收,4~6个月完全吸收并被骨组织替代.四肢组患者术后骨肿瘤无局部复发,肢体功能恢复良好;脊柱组患者术后6个月均获骨性融合.结论 医用硫酸钙是一种成骨性能优良的骨移植材料.
作者:刘鹏;赵建华;范伟力;刘明永;李远安 刊期: 2006年第11期
2000年2月~2004年4月,我院对69例不同类型髌骨骨折采用改良AO克氏针张力带钢丝、西脉镍钛形状记忆合金聚髌器(NT-PC)两种不同内固定方式进行治疗,疗效满意.报告如下.
作者:李松哲;李成福;李林 刊期: 2006年第11期
目的 综述现代骨库(组织库)的发展趋势及质量管理.方法 广泛查阅国内外骨库相关法律、法规及管理文献,综合分析现代骨库发展趋势及质量管理.结果 骨库近年来取得了巨大的发展,并逐步向集中化、产业化和标准化方向发展,质量管理在现代骨库管理上日益受到重视.结论 现代骨库具有广阔的发展前景,有必要对其加强管理.
作者:张育敏;李宝兴 刊期: 2006年第11期
目的 探讨缝匠肌骨瓣移植术与加压螺纹钉在中青年股骨颈骨折中的应用及疗效.方法 1996年2月~2004年12月,对86例中青年股骨颈骨折患者采用开放复位、加压螺纹钉固定与缝匠肌骨瓣植骨进行治疗.年龄21~49岁,平均30.6岁.车祸伤35例,坠落伤27例,跌伤24例.骨折部位:头颈型33例,颈中型38例,基底型15例.骨折按Garden分型,Ⅱ型23例,Ⅲ型48例,Ⅳ型15例.术后观察X线片,分析骨折愈合情况并行功能评估.结果 62例获随访6个月~7年,平均2年5个月.骨折不愈合及股骨头坏死判断参照危杰等采用的标准,获随访的62例患者,4例发生骨折不愈合,骨折愈合率为93.5%;骨折愈合的患者中7例3年后发生股骨头坏死,发生率为11.3%.髋关节功能评定:优44例,良8例,可6例,差4例,优良率83.9%.骨瓣供区无功能障碍及不适.结论 缝匠肌骨瓣移植术与加压螺纹钉联合应用治疗中青年股骨颈骨折简便有效.
作者:杨火发;郭应林;聂文波 刊期: 2006年第11期
目的 建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G1(soluble human leucocyte antigen G1,sHLA-G1)的真核细胞系.方法 采用核转染技术将质粒pcDNA3-sHLA-G1转入不表达HLA-Ⅰ类分子的LCL721.221细胞,经G418筛选获得稳定转染细胞,通过RT-PCR及Dot-ELISA在基因和蛋白水平鉴定目的基因的表达.结果 采用核转染法LCL721.221细胞转染效率可以达到约14%.RT-PCR检测发现了sHLA-G1基因特异性条带;采用Dot-ELISA方法利用sHLA-G1特异性抗体MEM-G/9检测,存在sHLA-G1蛋白. 结论 通过核转染方法成功建立了稳定表达sHLA-G1的真核细胞系.
作者:曾梦华;房崇芸;王树森;朱珉;谢林;王璐;李荣;吴雄文;陈实 刊期: 2006年第11期
目的 在体观察重组人血小板源性生长因子(recombmant human platelet-derived growth factor,rhPDGF)促进糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面修复可能涉及的细胞和分子机制,研究其可能涉及的信号通路.方法 26只糖尿病大鼠,每只动物背部制备4个全层皮肤缺损创面,选取其中52个创面,随机分成3组,即对照组,创面自然愈合;rhPDGF治疗组,创面rhPDGF用量为7.0μg/cm2;赋形剂组,创面用等量赋形剂凝胶.观察治疗后3、7和14 d创面肉芽形成、胶原沉积、再上皮化速率以及炎性细胞浸润情况,并采用免疫荧光和免疫组织化学技术观察创面周围和创面修复细胞内细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase 1/2,ERK1/2)磷酸化和增殖细胞核抗原(proliferative cell nuclear antigen,PCNA)的表达.结果 组织学观察,rhPDGF治疗组创面可见大量炎性细胞浸润,毛细血管胚芽及成纤维细胞明显多于另两组(P<0.05);胶原沉积明显,肉芽组织生长活跃,创面收缩显著,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).免疫学研究显示,应用rhPDGF 7~14 d后,rhPDGF治疗组ERK1/2明显强于对照组和赋形剂组(P<0.05);且损伤后3~7 d rhPDGF治疗组修复细胞PCNA的表达明显高于对照组和赋形剂组(P<0.05).结论 rhPDGF促糖尿病大鼠创面愈合的作用部分是通过ERK1/2信号通路的磷酸化来完成的.
作者:程飚;刘宏伟;付小兵;盛志勇;孙同柱 刊期: 2006年第11期
近年来,由于意外伤害、机械事故及交通事故的增多,周围血管损伤逐年增多.此类损伤病势急、病情重,死亡率及致残率高,在急诊处理及术中、术后存在一些特殊问题.现将2000年1月~2004年11月我们收治的36例周围血管损伤患者的救治体会总结如下.
作者:王科学;阿效诚;邓长英 刊期: 2006年第11期
目的 观察小肠粘膜下层(small intestinal submucosa,SIS)和双相磷酸钙(hydroxyapatite-tricalcium phosphate,HA-TCP)以不同比例制备的复合材料修复兔股骨髁缺损的效果,探讨复合仿生骨组分的合适比例.方法 分别以SIS和HA/TCP质量比1,0.5,0.25制备复合材料.取36只新西兰大白兔,制备双侧股骨髁直径6 mm、深10 mm的骨缺损模型,分别采用按三种比例制备的复合材料修复缺损[SIS/HA-TCP(1)、SIS/HA-TCP(0.5)及SIS/HA-TCP(0.25)组].术后2、4、8和12周观察三种材料修复骨缺损的大体情况,并采用组织学和图像分析技术评价材料的修复效果.结果 组织学观察SIS/HA-TCP(1)组在12周有少量新生骨形成,骨缺损未修复.SIS/HA-TCP(0.5)组在2周即出现新生骨,4周新生编织骨增多并形成骨小梁融合,8周出现大量小髓腔,12周骨缺损基本修复,并出现大量板层骨.SIS/HA-TCP(0.25)组成骨过程基本与SIS/HA-TCP(0.5)组相似.组织学评分,术后各时间点SIS/HA-TCP(1)组均低于另两组(P<0.05),4、8周SIS/HA-TCP(0.5)组和SIS/HA-TCP(0.25)组差异无统计学意义(P>0.05),2、12周SIS/HA-TCP(0.5)组优于另两组(P<0.05).在新生骨形成及HA-TCP颗粒降解方面,术后8、12周各组之间差异均有统计学意义(P<0.05),且SIS/HA-TCP(1)组明显差于另两组,但SIS/HA-TCP(0.5)组优于SIS/HA-TCP(0.25)组.结论 SIS与HA-TCP以质量比为0.5制备的复合材料对骨缺损具有良好的修复作用;0.5的成分比可作为构建复合仿生骨支架材料的参考指标.
作者:马鑫;张长青;张开刚;苏琰 刊期: 2006年第11期
目的 探讨中药成分汉防己甲素(tetrandrine,TET)对大鼠先天性膈疝(congenital diaphragmatic hernia,CDH)模型胎仔肺内表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)及其受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的影响和意义.方法 实验组20只雌性SD大鼠于孕9.5 d灌胃给予除草醚115 mg/只;对照组4只灌胃给等量食用油.孕18.5 d,实验组根据给药不同随机分为生理盐水组(normal solution group,NS组)、地塞米松组(dexamethasone group,Dex组)、汉防己甲素组(tetrandringe group,TET组)、地塞米松+汉防己甲素组(D+T组),每组5只.孕21.5 d对所有孕鼠行剖宫产,取出胎鼠两侧肺组织行大体观察、HE染色、EGF、EGFR免疫组织化学染色和图像分析.结果 正常对照组共产胎仔36只,无隔疝形成.实验组共产胎仔137只,CDH形成64只,致畸率46.7%.在Dex组、TET组和T+D组,肺组织处于原始肺泡期或进一步成熟.EGF在NS组、Dex组、TET组、D+T组及对照组的表达量依次递减(P<0.05),而EGFR在NS组、Dex组、TET组、D+T组和对照组的表达量依次递增(P<0.05).结论 TET可使CDH胎鼠肺内EGF表达高峰提前,使EGFR表达上调,TET和Dex联合作用对促进EGF表达高峰提前及EGFR表达上调具有明显的协同效应.TET可以通过调节EGF及EGFR在肺内的表达而实现其促进肺组织细胞发育分化和改善肺血管构型的效应.
作者:王永刚;刘文英;林涵;熊中讯;彭强;王勇 刊期: 2006年第11期
目的 探讨自固化磷酸钙骨水泥(calcium phosphate cement,CPC)注射椎体成形术后对胸腰椎骨质疏松性骨折椎体的力学影响.方法 自愿捐赠的4具甲醛固定的老年尸体,取胸腰椎骨质疏松标本,平均年龄69岁,男、女各2具.每具标本随机取6个椎体,制备24个单椎体标本,建立前屈方向加载单椎体骨折模型.将CPC粉末与固化液以2.5 g:1 ml调和制备CPC骨水泥,对骨折标本行CPC成形强化,每个椎体注射CPC约4 ml.分别进行骨折前、成形后屈曲压缩力学检测.结果 骨质疏松椎体标本骨折前大载荷为1 954±46 N,位移长度为5.60±0.70 mm,刚度为349±18 N/mm;骨折间隙CPC填塞成形后大载荷为2 285±34 N,位移为5.35±0.60 mm,刚度为427±10 N/mm,各指标骨折前和成形后比较差异均有统计学意义(P<0.05).CPC加强成形后单椎体的承载能力强度较骨折前提高16.92%,刚度较骨折前提高22.31%.结论 椎体内注射CPC能明显恢复骨质疏松骨折椎体的力学性能.
作者:施俊武;胡艇;池永龙;郭晓山 刊期: 2006年第11期
目的 综述利用肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)基因治疗周围动脉闭塞症(peripheral arterial disease,PAD)的实验研究和临床试验.方法 查阅近年来对大鼠、家兔、犬及糖尿病大鼠缺血肢体模型或临床患者缺血部位转染HGF质粒DNA后,评价缺血肢体血流量、血管密度、血压及缺血性溃疡等相关文献.结果 缺血肢体模型转染HGF质粒DNA后,缺血肢体血流量、血管密度及血压均有显著增加.肌肉注射携带HGF质粒DNA对荷瘤小鼠的肿瘤生长和转移无促进作用.Ⅰ/Ⅱa期临床试验表明,6例患者均未观察到与基因治疗相关的不良反应,踝部绝对血压、血压指数增高,可视模拟疼痛尺度减低,缺血性溃疡长径减小、愈合或明显改善.结论 携带HGF质粒DNA可能成为治疗PAD的一种新手段.
作者:张庆林;李元敏;吴祖泽 刊期: 2006年第11期
深度烧伤和烧伤晚期瘢痕整形时常采用不同厚度的自体皮片移植.若皮片太薄,受皮区易产生瘢痕挛缩,甚至继发畸形,影响功能;中厚皮片移植,供皮区易产生瘢痕;全厚皮移植供皮区有限.2004年7月~2005年10月,我们采用脱细胞异体真皮支架加自体刃厚皮移植术治疗各种原因引起的烧烫伤创面和瘢痕整形继发创面81例,术后获随访6~20个月,效果满意.报告如下.
作者:牛文化;陈大夫;钟宇;王晓 刊期: 2006年第11期
2004年秋,我受北京积水潭医院派遣,参加在芝加哥举行的美国第28届组织库年会.来自全球的医生、科技工作者和企业人员大约1 000余人参加了这次会议.现将参会的几点印象归纳如下,希望能给我国的相关工作一些启示.
作者:孙磊 刊期: 2006年第11期
踝关节作为负重关节,在行走、站立、跑跳等活动中,均承受很大的负荷,因此踝关节损伤后,其功能恢复具有重要意义.2001年5月~2002年4月,我们采用带旋髂深血管的髂骨复合皮瓣游离后修复内踝缺损和游离腓骨头修复外踝缺损,并重建踝关节结构和功能,效果满意.报告如下.
作者:苏瑞鉴;曾麟杰;陈善豪 刊期: 2006年第11期
目的 鉴定携带大鼠胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)的重组逆转录病毒载体(pLXSN-GDNF),并建立包装细胞系. 方法 采用脂质体包裹法进行pLXSN-GDNF质粒PA317细胞的包装、G418抗性筛选及病毒液提取,PCR及RT PCR进行重组逆转录病毒的鉴定,NIH3T3细胞进行逆转录病毒颗粒滴度测定.结果 pLXSN-GDNF质粒测序结果与GeneBank中序列一致,所测DNA序列位于pLXSN多克隆位点Xho Ⅰ.采用pLXSN-GDNF质粒转染包装细胞PA317,获得G418抗性细胞,RT-PCR证实其培养上清含有重组逆转录病毒,采用NIH3T3细胞测定病毒滴度为104~105 CFU/ml.结论 pLXSN-GDNF结构正确,GDNF基因序列完整;并成功建立了pLXSN-GDNF的包装细胞系.
作者:张文捷;李兵仓;任先军;王建忠;陈建梅 刊期: 2006年第11期
1 病例介绍患者男,69岁.3年前发现下颌部出现一黄豆大小肿物,黑色、质软,近年来肿物逐渐变大、变硬,肿物约2 cm×3 cm.因其影响外观就诊,在未明确病变性质情况下行病灶切除、局部皮瓣移位修复,术后愈合良好.送检组织病理诊断:颏部基底细胞癌,镜下见癌组织呈巢状,癌巢仅少许与表皮粘连,深部侵入横纹肌明显,切取组织深部及周边仍有癌组织残留.术后9 d,为彻底清除病灶,收治入院.局麻下行病灶扩大加深切除,创面达4 cm×5 cm,于下颌隐蔽处设计以面部浅表肌肉腱膜系统-颈阔肌为蒂、范围为4 cm×5 cm的肌皮瓣,皮瓣蒂长5 cm,宽2 cm,行移位术.手术顺利,术毕皮瓣血运良好.术后次日拔除引流片,见肌皮瓣肿胀,表面颜色变为暗紫,考虑为皮瓣静脉回流不畅,故采用活体菲牛蛭(由南宁科康生物有限公司提供)吸血疗法.皮瓣周围用无菌纱布保护,将4条水蛭依次置于皮瓣上吸血,每只吸血2~3 h,待其吸饱后取下处死.水蛭吸血后创面渗血较多,及时更换敷料.术后48 h皮瓣肿胀明显消退,由暗紫色转为红紫色,逐渐恢复至正常.术后8 d切口拆线,肌皮瓣生长良好,无不良反应发生.1个月后随访,手术效果满意.
作者:杨晓楠;殷国前 刊期: 2006年第11期
目的 总结以桡动脉茎突返支为蒂的桡骨茎突骨瓣移位治疗舟骨骨折不愈合的临床效果.方法 2000年3月~2005年6月,对18例舟骨骨折不愈合的患者,以桡动脉茎突返支为蒂在桡骨茎突掀起1.5 cm×3.5 cm×0.5 cm的骨瓣,植入沿舟骨纵轴跨越骨折线所凿同等大小的骨槽内进行治疗.其中男15例,女3例.年龄18~39岁.舟骨腰部骨折11例,近侧1/3骨折7例,其中5例舟骨近端骨折块伴缺血坏死.腕关节活动疼痛,尤以背伸及桡偏时明显,鼻烟窝处有压痛,腕关节活动受限,X线片示10例患者有骨折端硬化及囊性变,骨折线明显加宽.结果 术后18例舟骨骨折均愈合,其中5例合并缺血坏死的舟骨骨折块重新成活,骨折平均愈合时间为4个月.术后获随访1~5年,患者腕关节活动良好,腕背伸时无疼痛,日常生活和工作无影响.结论 采用桡动脉茎突返支为蒂的桡骨茎突骨瓣移位治疗舟骨骨折不愈合及近端骨折块缺血坏死,操作简便,治疗有效,具有一定临床应用价值.
作者:朱延明 刊期: 2006年第11期