学术投稿

人骨形态发生蛋白-2基因克隆及真核表达载体的构建

周诺;黄旋平;廖妮;韦山良;梁飞新;麦华明

关键词:骨形态发生蛋白-2, 基因克隆, 真核表达载体
摘要:目的 克隆人骨形态发生蛋白-2(hBMP2)基因片段,构建pcDNA3.1-hBMP2真核表达质粒.方法 采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从人骨肉瘤中扩增出人骨形态发生蛋白-2基因片段,通过DNA重组技术将该基因片段重组于pcDNA3.1真核表达载体上,构建pcDNA3.1-hBMP2重组质粒,通过用PCR扩增、酶切电泳分析及DNA测序的方法对重组DNA进行鉴定.结果 经PCR扩增、酶切电泳分析和DNA测序证实,本实验构建的重组质粒目的 基因片段为人BMP2-cDNA.结论 本实验成功克隆了hBMP2基因并构建成其真核表达质粒.
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  • 多曲方丝弓配合前牙区垂直牵引下颌牙齿移动趋势的光弹性研究

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    作者:胡敏;刘磊;张丽雯;吴宏;颜炜群;寺田员人 刊期: 2007年第05期

  • 不良修复体导致双侧舌下腺肿大1例

    患者因舌下区肿痛3 d就诊,检查见双侧舌下腺肿大,1(T)1为不良修复体,舌侧边缘下方有约2 mm×2mm不规则溃疡面,水肿及触痛明显.去除1(T)1不良修复体,碘甘油涂抹溃疡面,维生素B1、维生素B2、强的松、阿莫西林口服,2 d后舌下腺肿胀消退.

    作者:陈卓;李国华;吴永生 刊期: 2007年第05期

  • 桂皮醛用作鼠牙牙髓切断术盖髓剂的组织病理学研究

    目的 探讨桂皮醛对大鼠根髓及根尖周组织的刺激性,为开发桂皮醛用作乳牙活髓切断术的盖髓剂提供实验依据.方法 应用桂皮醛作为鼠牙牙髓切断术的盖髓剂.实验分为桂皮醛组、甲醛甲酚组和空白对照组.每组大鼠分别于4周和12周处死,实验牙牙周矩形颌骨骨块固定脱钙后HE染色切片,观察根髓及根尖周组织的病理学变化.结果 术后4周时,3组在牙根内、外吸收和牙根钙化方面差异均无统计学意义;在炎症反应方面,桂皮醛组和甲醛甲酚组差异无统计学意义,但是和空白对照组比较,其差异均有统计学意义(P<0.05).术后12周时,桂皮醛组和甲醛甲酚组在牙根内、外吸收和炎症反应方面差异无统计学意义,但是与空白对照组相比,其差异有统计学意义(P<0.005);在牙根钙化方面,3组差异均无统计学意义.结论 桂皮醛作为大鼠牙髓切断术的盖髓剂,对根髓及根尖周组织刺激小,为桂皮醛用作乳牙活髓切断术的盖髓剂提供了组织病理学理论基础.

    作者:高洪岩;李文颜;郝太国;刘红英 刊期: 2007年第05期

  • 鼓室置管对婴儿期腭裂患者中耳功能障碍的治疗效果

    目的 比较鼓室置管和鼓膜穿刺术治疗婴儿期腭裂患儿分泌性中耳炎(SOM)的效果,探讨腭裂中耳功能障碍的佳治疗方法和早期干预时机.方法 19例患SOM伴听力损失的婴儿期腭裂患儿的38耳在唇裂修复术同期行鼓室置管术,平均置管年龄为6.9月龄;15例患SOM的婴儿期腭裂患儿30耳行鼓膜穿刺术,平均穿刺年龄为6.6月龄.术后1周至12个月内于每个月行听性脑干反应(ABR)和声导抗检查作为判断指标,比较两种手术的疗效.结果 38耳鼓室置管术前ABR Ⅴ波平均阈值为55.41 dBnHL,术后1周~12个月的平均值为28.48 dBnHL,术后听力提高26.93 dBnHL.置管术后峰压点平均升高90.72 daPa,坡度;比值法升高0.01,压力范围法降低84.00 daPa,静态声顺值平均升高0.04 mL;B型鼓室图(24耳)转化为A型者19耳,转化率为79.17%.30耳鼓膜穿刺术前ABR Ⅴ波平均阈值为40.63 dBnHL,术后1周为26.50 dBnHL,听力提高14.13 dBnHL.穿刺后1周B型鼓室图(22耳)转化为A型者9耳,转化率为40.91%;穿刺后1月和3月ABR Ⅴ波阈值和鼓室图与穿刺术前比较无统计学差异(P>0.05).结论 鼓室置管术治疗婴儿期SOM,听力恢复快且疗效稳定,虽有发生并发症的可能,但仍是较好的治疗手段;鼓膜穿刺术在1周内的疗效较好,但复发率高,好不作为婴儿期腭裂SOM的常规治疗手段.

    作者:李薇;尚伟;于爱华;张哓恒;刘玉欣;万秀明;贾暮云;李宁毅 刊期: 2007年第05期

  • 磁性附着体模拟静磁场对成骨细胞增殖活性和周期分布及凋亡率的影响

    目的 研究不同强度磁性附着体模拟静磁场对成骨细胞增殖活性、细胞周期及细胞凋亡的影响.方法 通过模拟Magnedisc 800磁性附着体静磁场,对体外培养的SD大鼠成骨细胞进行3种强度(12.5、125、250mT)、持续不同时间的静磁场加载,检测成骨细胞的增殖活性,流式细胞术分析细胞周期分布和细胞凋亡率.结果 成骨细胞加载3种强度的静磁场1、3、5、7、9 d后,细胞增殖活性未发生明显改变,各组细胞生长趋势基本一致,静磁场作用无明显的剂量-效应关系.成骨细胞加载1、3、5、7 d后,未发现静磁场对G0/G1期、S期、G2/M期细胞百分比、增殖指数及细胞凋亡率产生明显影响.结论 磁性附着体静磁场在闭合磁路、磁体和衔铁的闭合过程中以及开放磁路下,对成骨细胞的增殖均无明显的促进和抑制作用,未改变细胞的周期分布和促进细胞凋亡的发生.

    作者:赵煜;李冰雁;巢永烈;杜莉 刊期: 2007年第05期

  • 正畸力作用下牙周炎大鼠牙周膜骨保护素及配体的mRNA表达

    目的 探讨骨保护素(OPG)及其配体(OPGL)在炎性牙周条件下参与牙移动及牙周改建的机制.方法 采用原位杂交法检测牙周炎大鼠磨牙移动过程中OPG及OPGL在牙周组织内表达情况.结果 牙周受压后,牙周炎大鼠加力组OPG及OPGL mRNA的阳性信号强度与牙周炎大鼠对照组比较,差异有统计学意义,其平均光密度值在2 d组中两者均达到峰值.结论 OPG及OPGL在炎症及正畸力联合效应下的牙周改建中起着重要作用.

    作者:肖立伟;陈扬熙;白丁 刊期: 2007年第05期

  • 环境光和邻牙对前牙接触式测色仪测色结果的影响

    目的 探讨外源性环境光和邻牙对接触式测色仪测量牙齿颜色结果的影响.方法 将10颗离体上颌中切牙固定,MI-150光源从牙齿的唇面(切缘朝下)3点钟和12点钟上方45°入射,入射强度分别为0、50、75、100、125、150 W,在有邻牙和无邻牙时分别测量10颗离体中切牙中1/3正中点的CIE L* a* b*值,测量结果采用SPSS 11.5软件进行统计分析.结果 不同强度和方向的入射光及邻牙存在与否对颜色测量结果均没有明显影响(P>0.05).结论 环境光源和邻牙对接触式测色仪的测色结果没有影响,临床上在牙椅外源辅助灯光下可以采用接触式测色仪直接测色.

    作者:王思钱;Sean S. Lee;Wu Zhang;Yiming Li;麻健丰 刊期: 2007年第05期

  • 瓷贴面基底烧结饰面瓷的临床应用研究

    目的 探讨瓷贴面基底烧结饰面瓷的临床应用效果.方法 对12例患者的54颗着色牙进行全瓷贴面修复,根据着色原因不同将其分为四环素牙组、氟斑牙组和死髓牙组.应用MarkⅡ瓷块制作贴面基底,在其上烧结饰面瓷,制作全瓷贴面.分别在牙体预备前、贴面基底在白背景和基牙上试戴时、全瓷贴面在白背景和基牙上黏固后采用Shade Eye电脑比色仪进行颜色测量,测量结果采用CIE1976L*a*b*标准色度系统表示,计算色差.全瓷贴面黏固后每3个月检查1次修复体的边缘密合度、颜色以及折裂、脱落情况.结果 瓷贴面可在很大程度上改变基牙的颜色,其中四环素牙组和死髓牙组的贴面基底和瓷贴面在白背景和基牙背景下有明显的颜色差异,而氟斑牙组贴面在白背景和基牙背景下的颜色差异较小,肉眼几乎无法察觉.全瓷贴面黏固后3~12个月复诊,贴面边缘密合良好,无食物嵌塞、继发龋、牙龈炎等,也无1例发生修复体脱落或折裂.结论 全瓷贴面修复着色牙具有较好的效果,氟斑牙是较理想的适应证,而中度以上的四环素牙和变色较重的死髓牙在设计全瓷贴面时应选择色度较深的基底瓷以增加贴面的遮色能力或应用不透明材料制作基底.

    作者:刘天爽;陈小冬 刊期: 2007年第05期

  • 两种方法制取固定义齿印模的临床评价

    目的 对藻酸盐印模法和琼脂/藻酸盐联合印模法制取固定义齿印模的效果进行临床评价.方法 将237例固定义齿患者分为A、B组,A组81例患者207颗基牙,采用藻酸盐印模法制取印模;B组156例患者392颗基牙,采用琼脂/藻酸盐联合印模法制取印模.用放大镜观察两组印模,记录基牙数目、印模缺陷类型与数目.结果 藻酸盐印模中有118颗(57.0%)基牙存在缺陷,琼脂/藻酸盐联合印模法中有141颗(36.0%)基牙存在缺陷,二者存在显著性差异(P<0.05).在颈缘气泡、龈沟及肩台不清晰两个方面,两种印模法存在显著性差异(P<0.05).在颈缘处的撕裂或缺损方面,两种印模法无显著性差异.结论 琼脂/藻酸盐联合印模法较藻酸盐印模法制取的印模缺陷少.

    作者:石连水;王立凯;张小军 刊期: 2007年第05期

  • 饮料与染色瓷粉比色板色度的匹配性研究

    目的 通过孟塞尔表色系研究饮料与染色瓷粉比色板色度的匹配性,为技工制作陶瓷修复体时选择染色瓷粉模拟天然牙的着色提供参考依据.方法 采用分光光谱仪测量Vita Akzent、Vita Interno、Shofu Vintage & Unibond和Noritake Super Porcelain EX-3染色瓷粉比色板各比色片和15种饮料的孟塞尔色参数,比较其邻近色相、邻近明度和邻近彩度的差异,用双向无序行列表的Fisher确切概率法进行统计.结果 15种饮料与4种染色瓷粉比色板邻近色相的频次差异有统计学意义(P<0.05),而邻近明度和邻近彩度的频次差异没有统计学意义(P>0.05).结论 4种染色瓷粉模拟15种饮料的着色除色相外没有区别,通过适当的色相、明度和彩度调配,4种染色瓷粉能够与15种饮料的色度大致相匹配.

    作者:姚江武;李水根;林金莹 刊期: 2007年第05期

  • 1例勒雪病的临床特征和病理表现

    勒雪病是组织细胞增生症的一种类型,临床罕见,本文对收治的1例勒雪病进行报道.患儿男性,2003年7月5日因口腔溃烂、牙齿松动、脱落1月,双耳道溢脓2周就诊于四川大学华西口腔医院.检查见全身皮肤散在红色皮疹、瘀点,头皮与躯干尤为明显;双侧中耳炎;腭部及下颌牙龈出现增生性溃疡并伴有病损区牙齿的松动、脱落,X线片显示左下颌骨破坏;肝功能异常;细胞免疫功能低下伴顽固性念珠菌病.病理检查显示组织样细胞浸润,免疫组化检查:CD1a蛋白阳性,S-100蛋白染色阳性.诊断:勒雪病.本文根据本病例的特点及相关文献对勒雪病的临床特征、诊断和治疗进行了讨论.

    作者:高峰;林梅;周红梅;曾昕;陈谦明 刊期: 2007年第05期

  • 真空镀膜技术对新型牙用烤瓷支架钴铬合金金瓷结合强度影响的研究

    目的 研究一种新的工程学真空镀膜技术--等离子磁控反应溅射技术对新型牙用烤瓷支架钴铬合金金瓷结合强度的影响.方法 用DA9-4烤瓷支架钴铬合金制成标准金属基片,并在金属基片上瓷前利用等离子磁控反应溅射技术在其表面溅射生成一层Al2O3陶瓷薄膜,对其表面形貌、结构、厚度进行分析;金属基片与VMK95瓷粉烧结形成标准三点弯曲试件,测定其结合强度,观察金瓷界面的形貌及元素分布情况.同时,以未进行溅射镀膜基片作为对照.结果 溅射镀膜组金瓷结合强度为(180.55±16.45)MPa,对照组(143.80±24.49)MPa.经统计学分析,溅射镀膜后的金瓷结合强度明显高于对照组(P<0.01).结论 等离子磁控反应溅射技术有改善新型牙用烤瓷支架钴铬合金金瓷结合强度的作用.

    作者:吴峻岭;巢永烈;汲平;高旭 刊期: 2007年第05期

  • 根管内折断器械的超声取出方法

    根管内器械折断是根管治疗的常见并发症,随着显微根管治疗技术的发展,大部分根管折断器械可以通过超声技术取出.本文对根管内器械折断的原因、超声技术取根管内折断器械的方法及应用中可能出现的问题进行介绍,强调超声法取根管内折断器械时建立直线通路的重要性,对超声振动过程中有水或无水下操作、工作尖是否需要旋转以及是否需要根管显微镜辅助等问题进行讨论,对临床医师预防和处理根管器械折断具有指导意义.

    作者:侯本祥 刊期: 2007年第05期

  • 黄芪多糖对犬骨髓基质干细胞增殖及超微结构的影响

    目的 探讨黄芪多糖(APS)对诱导培养的犬骨髓基质干细胞(BMSCs)增殖、分化成骨作用及超微结构的影响.方法 用瑞氏-姬姆萨染色、改良Gomori钙-钴法、茜素红染色法检测BMSCs分化成骨的能力.用四唑盐(MTT)比色和酶动力学方法测定不同浓度和时间的APS对诱导培养的BMSCs增殖影响以及超微结构的改变.结果 诱导条件下BMSCs具有成骨细胞活性,瑞氏-姬姆萨染色呈深蓝色,改良Gomori钙-钴法将细胞及矿化结节染成黑色,茜素红染色法见细胞及矿化结节成红色.第1、3天时,低浓度(0.005 mg/mL)APS可促进诱导培养的BMSCs增殖;而第5天时,高浓度(50 mg/mL)APS则明显抑制诱导培养的BMSCs增殖.第5天,透射电镜下,0.005 mg/mL APS组细胞线粒体、粗面内质网增多,细胞外基质分泌增加;50 mg/mL APS组细胞发生退变,粗面内质网和线粒体明显减少,且二者明显肿胀、变性、膜结构破坏.结论 短期低浓度APS能促进诱导培养的BMSCs的代谢和蛋白质的合成,有利于细胞的增殖和向成骨分化.

    作者:许春姣;翦新春;郭峰;高清平;彭解英;徐锡平 刊期: 2007年第05期

  • 腺病毒介导的骨形态发生蛋白2基因转染肌卫星细胞诱导成骨的动物实验研究

    目的 观察腺病毒介导的BMP-2基因转染肌卫星细胞后体内骨诱导能力.方法 采用动物实验方法,将转染BMP-2基因的绿色荧光蛋白(GFP)转基因鼠肌卫星细胞吸收到胶原支架上,然后将细胞胶原支架复合物移植入野生型129sv小鼠的后小腿肌肉中,应用X线片观察、组织学检查及荧光显微镜观察转染细胞的诱导成骨能力.结果 用BMP-2基因转染的肌卫星细胞复合胶原支架移植入野生型小鼠后小腿筋膜下肌肉后会产生异位骨形成,移植2周后其中有GFP阳性的成骨细胞和骨细胞,3周后形成良好的骨组织,4周时已形成成熟的骨组织,而且骨组织具有GFP荧光.对照组用胶原支架和未转染的肌卫星细胞移植,未出现诱导性异位骨形成.结论 Ad-BMP2转染的肌卫星细胞以胶原为支架可以在肌肉内诱导骨组织形成.

    作者:张风河;黄萍;魏奉才;孙树洋 刊期: 2007年第05期

  • 热化疗对口腔颌面癌患者细胞毒性T淋巴细胞活性的影响

    目的 探讨热化疗对口腔颌面癌患者细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性的影响.方法 选取21例口腔颌面癌患者接受热化疗,于第一次治疗前和后一次治疗后取其外周血行CTL活性检测.结果 热化疗后口腔颌面癌患者CTL活性较治疗前大大提高,其差异有统计学意义(P<0.01).结论 热化疗可以提高口腔颌面癌患者CTL的活性,从而增强机体的免疫功能,提高机体抗肿瘤效应.

    作者:郭军;门昌杰;王升志;高向东;成洲;毛祖彝;王大章 刊期: 2007年第05期

  • 成人低角骨性Ⅲ类错(牙合)非手术矫治对颞下颌关节的影响

    目的 探讨非手术矫治对成人低角骨性Ⅲ类错(牙合)患者颞下颌关节的影响.方法 选取13例严重成人低角骨性Ⅲ类错(牙合)病例,男5例,女8例,年龄18~23岁,平均年龄21.3岁.所有患者均采用OPA-K滑动直丝固定矫治技术矫治,矫治前后均做Helkimo指数分析,并拍摄双侧闭口矫正薛氏位片和X线头颅侧位片,行颞下颌关节间隙测量和头影测量分析.采用SPSS 12.0统计软件进行统计分析.结果 非手术矫治后,Helkimo主诉症状指数重新分布,Ai0级比例明显升高,AiⅡ级比例减少为零.间隙分析表明;矫治前,髁突处于关节窝过前位;矫治后,关节前间隙线距和面积增大(P<0.01),后间隙线距和面积减小(P<0.05),线性百分比由20.81%减小为8.04%,面积比P'/A'由1.62减小为1.01,关节前后间隙基本相等.髁突及下颌骨发生后移.结论 成人低角骨性Ⅲ类错(牙合)非手术矫治后,髁突由下前位向后移至中位范围,关节结构趋于协调和稳定,颞下颌关节紊乱症状得到了有效缓解.

    作者:赵艳红;王春玲;郭杰;朱鲲;魏福兰 刊期: 2007年第05期

  • 人骨形态发生蛋白-2基因克隆及真核表达载体的构建

    目的 克隆人骨形态发生蛋白-2(hBMP2)基因片段,构建pcDNA3.1-hBMP2真核表达质粒.方法 采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从人骨肉瘤中扩增出人骨形态发生蛋白-2基因片段,通过DNA重组技术将该基因片段重组于pcDNA3.1真核表达载体上,构建pcDNA3.1-hBMP2重组质粒,通过用PCR扩增、酶切电泳分析及DNA测序的方法对重组DNA进行鉴定.结果 经PCR扩增、酶切电泳分析和DNA测序证实,本实验构建的重组质粒目的 基因片段为人BMP2-cDNA.结论 本实验成功克隆了hBMP2基因并构建成其真核表达质粒.

    作者:周诺;黄旋平;廖妮;韦山良;梁飞新;麦华明 刊期: 2007年第05期

  • 氯离子通道ClC-5在大鼠牙胚发育过程中的表达

    目的 研究氯离子通道ClC-5在大鼠牙胚发育过程中的表达情况,探讨其在牙齿发育过程中的作用.方法 从不同发育阶段的大鼠牙胚中提取总RNA和蛋白,应用RT-PCR和Western blot检测ClC-5在大鼠牙胚发育过程中mRNA和蛋白的表达情况.结果 ClC-5在牙胚发育的过程中存在时空特异性表达,其mRNA和蛋白都主要在牙胚发育的钟状晚期表达.结论 ClC-5在大鼠牙胚发育过程中的这种时空特异性表达,提示其可能在牙齿发育的过程中发挥一定的作用.

    作者:侯晋;段小红;司徒镇强 刊期: 2007年第05期

  • 天然牙与全瓷饰面瓷的磨损特性研究

    目的 通过体外模拟实验观察全瓷饰面瓷材料(Vintage AL、Vita-alpha)与天然牙釉质的摩擦学行为特点,探讨其摩擦磨损机制.方法 实验前对材料进行力学性能检测.采用摩擦磨损机观察3种材料的摩擦磨损行为,记录摩擦力矩数,计算摩擦系数;测量磨斑宽度;磨损试件表面采用动态原子力显维镜(DFM)观察;采用能谱仪分析摩擦实验前后样品元素的变化.结果 3种材料显微硬度值存在统计学差异(P<0.05);两种饰面瓷的三点弯曲强度比较有统计学差异(P<0.05),断裂韧性差别无统计学意义.3种材料摩擦系数呈现一定时间规律性,耐磨性能由高到低排列为Vintage AL、Vita-alpha、天然牙釉质.磨斑宽度比较有统计学意义(P<0.05).DFM结果显示釉质主要表现为磨粒磨损和组织结构的变形,偶可见组织断裂片;饰面瓷摩擦表面可见大量犁沟和磨粒,偶见微裂.结论 本实验中3种材料呈现良好的耐磨性.天然牙的磨损机理主要是磨粒磨损和组织结构变形;全瓷饰面瓷的磨损机理主要为磨粒磨损、黏着磨损和疲劳磨损,不同磨损类型在两种饰面瓷发挥的作用不完全相同.

    作者:高清平;巢永烈;翦新春;郭峰;孟玉坤 刊期: 2007年第05期

华西口腔医学杂志

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