赵世光；李德才；薛正莲；吴安宁；周扬；华骏
目的 在东方拟无枝酸菌中建立由Ⅰ-SceⅠ介导的无标记高效重组系统.方法 首先构建可用于东方拟无枝酸菌的Ⅰ-SceⅠ操作盒,通过敲除多烯类化合物ECO-0501合成相关基因hemA2,比较操作盒使用前后获得hemA2基因双交换突变株的效率.结果 在没有引入Ⅰ-SceⅠ的情况下,随机重组的发生几率仅约2％,而导入后,由于Ⅰ-SceⅠ酶对引入DNA位点的双链切割,导致双交换重组的发生率提高至90％以上.结论 Ⅰ-SceⅠ系统是一种可用于东方拟无枝酸菌无标记遗传操作的有效工具.
作者：朱丽；饶敏；罗敏玉 刊期： 2015年第05期
目的 分离、纯化及鉴定放线菌株12发酵液中抗菌活性代谢产物并对菌株12进行菌种鉴定.方法 采用硅胶柱层析、高效液相色谱等方法对菌株12的活性代谢产物进行分离纯化及纯度分析,并以质谱、核磁等方法对获得的组分进行结构鉴定;采用16s rRNA基因序列检测并构建进化树对菌株进行鉴定.结果 从菌株12的发酵液中分离到1个活性化合物12-A,经波谱分析证实其结构和硫肽类化合物siomycin A相同,活性测定表明其对革兰阳性菌、真菌有较明显的抑制活性;经菌种鉴定,菌株12归为Planomonospora属放线菌.结论 从菌株12的发酵液中分离得到的化合物12-A为已知化合物siomycinA.
作者：刘丽；刘爱华；任浩；何宁；陈汝贤；袁丽杰；解云英 刊期： 2015年第05期
目的 了解碳青霉烯类抗生素耐药鲍曼不动杆菌中碳青霉烯酶和整合子的携带情况.方法 从我院临床标本分离的65株鲍曼不动杆菌中筛选出碳青霉烯类抗生素耐药株,测定其对15种抗生素的敏感性;用EDTA协同试验筛选金属β-内酰胺酶,改良Hodge试验初筛碳青霉烯酶;PCR扩增碳青霉烯酶基因和整合酶基因,并测序分析.结果 65株鲍曼不动杆菌中筛选34株碳青霉烯类抗生素耐药株,对米诺环素、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星和复方磺胺甲噁唑的耐药率分别为8.8％、47.1％、73.5％和82.4％,对其余11种抗生素耐药率均为100.0％.EDTA协同试验结果均为阴性,改良Hodge试验28株(82.4％)结果阳性.基因扩增和测序结果表明34株细菌中25株(73.5％)产OXA-23型碳青霉烯酶,13株(38.2％)产KPC-2型碳青霉烯酶.21株(61.8％)Ⅰ类整合酶基因阳性,其中17株检测出2300bp的可变区基因盒,序列对比显示为aacA4、aadA1和catB8基因盒.未检出OXA-24、OXA-58、IMP、VIM型酶和Ⅱ类整合酶基因.结论 产OXA-23型和KPC-2型碳青霉烯酶是我院2013年临床分离鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因之一;Ⅰ类整合子广泛存在于碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌,但可变区不携带OXA-23型和KPC-2型碳青霉烯酶编码基因.
作者：张琪；程训民；沈继龙 刊期： 2015年第05期
目的 研究A21978C产生菌中一个TetR家族转录调控基因tfpA对A21978C产量的影响.方法 利用同源重组方法敲除该tfpA基因,HPLC检测突变株A21978C产量的变化,通过过表达与回补实验验证其调控特性.结果 敲除tfpA基因的突变株A21978C产量与亲株相比增加了50％;基因回补后A21978C产量恢复到亲株的水平.过表达突变株则几乎不产A21978C.结论 TetR家族转录调控基因tfpA对A21978C的合成至关重要,是一个负调控基因.
作者：逄丽；魏维；靳旭；戈梅；陈代杰 刊期： 2015年第05期
目的 研究Triton X-1 00、CaCl2、DMSO、山梨醇、SDS、Tween-80、CTAB等表面活性剂对活跃链霉菌发酵产那西肽的影响.方法 采用单因素实验研究活跃链霉菌的基础代谢以及表面活性剂加入时间对那西肽效价的影响:采用响应面法对表面活性剂添加浓度进行优化.结果 基础代谢研究表明,活跃链霉菌产那西肽合成相对滞后于菌体生长.多种表面活性剂均显著影响那西肽的生物合成,整体表现为低浓度促进、高浓度抑制.表面活性剂依其类型及加入时机的不同,对那茜肽产量的影响表现出组间类型差异性及组内时间依赖性.结论 DMSO、CaCl2、Triton X-100在低浓度范围内对那西肽产量的促进效果为显著;分别在24、24和48h以DMSO 0.808mg/mL、CaCl20.799mg/mL和Triton X-100 0.574mg/mL的浓度为佳添加浓度,该条件下那西肽效价达到931.493μg/mL,比优化前提高了7.73％.
作者：赵世光；李德才；薛正莲；吴安宁；周扬；华骏 刊期： 2015年第05期
目的 研究头孢硫脒在小鼠中的药动学.方法 取24只小鼠,随机分为4组,每组6只,分别静脉给予7.3、29.2、116.8和467.6mg/kg的头孢硫脒,采集不同时间点的血样,分离血浆,使用经过确证的LC-MS/MS方法测定血浆中头孢硫脒的浓度,用WinNonlin软件中的非房室模型计算药动学参数.结果 静脉给药后,获得的主要药动学参数如下:T1/2分别为(0.20±0.03)、(0.33±0.05)、(0.27±0.08)和(0.38±0.10)h;AUC0～∞分别为(2.85±0.63)、(11.31±1.71)、(53.38±17.57)和(374.9±134.7)h·mg/L;Cax值分别为(9.53±2.10)、(46.67±9.50)、(170.18±71.02)和(1004.0±166.2)mg/L.结论 本文建立了快速、灵敏测定小鼠血浆中头孢硫脒的LC-MS/MS方法,并用于头孢硫脒在小鼠中的药动学研究.药动学结果显示,该药体内消除很快,不同剂量间的药动学参数呈现比较明显的相关关系.
作者：汪闻平；魏敏吉 刊期： 2015年第05期
世界范围内细菌耐药性问题日益严重状况下,包括铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)在内的病原微生物的致病性与耐药性的共选择、共进化现象引起了人们越来越多的关注和不断深入的研究,这将有助于优化临床治疗方案,为药物治疗和筛选提供新靶点.本文综述了PA致病性与耐药性共选择机制的遗传物质基础,并简单讨论二者变化关系及相关应用.
作者：宁唤唤；李晶；王严；李博；王波波；张悦；陈林；沈立新 刊期： 2015年第05期
目的 采用反相加压毛细管电色谱法定量测定依维莫司含量.方法 使用反相色谱柱,以pH5.5的2mmol/L磷酸缓冲液(Na2HPO4-NaH2PO4)-乙腈(30∶70,V/V)为流动相,检测波长为278nm、分离电压为-16kV、流速为0.08mL/min,柱温49℃,等度洗脱.结果 经方法学考察确定佳条件,在该条件下,依维莫司浓度在0.3～5.0mg/mL范围内线性良好(R2=0.9992,n=6);检出限(S/N=3)和定量限(S/N=10)分别为3.9和7.8 μg/mL;日间和日内精密度均小于5％;加样回收率均高于98％.结论 该方法简单方便、准确、灵敏、可靠,适用于依维莫司的定量分析.
作者：赵琪；刘英；周斌；胡海峰 刊期： 2015年第05期
目的 了解2010年到2013年我院肺炎克雷伯菌感染的流行病学及临床特征,耐药性及产超广谱β-内酰胺酶情况,为抗生素的临床应用提供依据.方法 采用回顾性分析方法,分析2010年1月-2013年12月间送检到我院感染科实验室的各类标本中分离出的肺炎克雷伯菌的病例及药敏资料,用WHONET5.6及SPSS17.00软件进行数据分析.结果 4年间我院感染科实验室共分离出肺炎克雷伯菌707株,在肠杆菌科细菌的平均比例为19.1％,主要来源以痰液高,占58.8％.科室分布以内科病房高,占45.4％.产ESBLs菌株阳性检出率为39.0％.近4年来肺炎克雷伯菌对常见抗菌药的耐药率变化如下:对氨苄西林耐药高达97.3％,对哌拉西林的耐药率为40.9％,对哌拉西林/三唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦的耐药率分别为10.2％和12.3％.对第一至四代头孢菌素的耐药率波动在30.9％～51.1％.对亚胺培南、美罗培南、头孢西丁的耐药率分别为5.9％、4.1％和13.6％.对阿米卡星、庆大霉素的耐药率分别为7.4％和32.1％.对环丙沙星的耐药率,波动在25％左右.结论 肺炎克雷伯菌的临床分离率逐年在增加,其占肠杆菌科细菌的比例及产超广谱β-内酰胺酶逐年增加,这应引起重视,加强其耐药性监测,合理选择抗生素,意义重大.
作者：崔畅；朱卫民；唐小红 刊期： 2015年第05期
分离自北极沉积物的海洋链霉菌Streptomyces sp.YB-24菌株产生强抗肿瘤活性的吲哚咔唑生物碱.为了提高其产量,先经过紫外线与氯化锂复合诱变,再通过抗真菌抗肿瘤稻瘟酶模型初筛与高效液相色谱HPLC检测跟踪相结合,获得的高产菌株,其代谢星形孢菌素的能力为3.833mg/L,比原始菌株提高342.28％.通过改变碳氮源及培养配方,在特定时期加入前体物色氨酸的方法,证明淀粉与磷酸氢二铵是菌株合适的碳氮源,在起始期添加色氨酸时,产量为对照的216.40％,提高较明显.
作者：盖翠娟；董姣姣；杨爱岗；林文瀚；钟惠民；田黎 刊期： 2015年第05期
目的 采用HPLC-电喷雾检测器(CAD)新技术测定硫酸阿米卡星中卡那霉素和硫酸盐的含量.方法 采用华谱ClickXIon(4.6mm×250mm,5μm)柱,流动相为含0.7％甲酸的250mmol/L甲酸铵溶液-乙腈-水(26∶35∶39),流速为1.0mL/min.采用Conona ultra RS CAD检测器检测,喷雾器温度为25℃.结果 卡那霉素、硫酸盐与阿米卡星、中间体、副产物、辅料完全分离.卡那霉素、硫酸盐在一定的浓度范围内呈较好的线性关系,卡那霉素测定的回收率为100.7％(RSD=2.00％,n=9);硫酸盐测定的回收率为100.2％(RSD=1.04％,n=9).结论 方法简便、灵敏、重复性好,可用于本品的质量控制.
作者：张凤妹；王建 刊期： 2015年第05期
目的 建立盐酸博来霉素有关物质和组分的分析方法.方法 采用C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,己烷磺酸钠溶液(取己烷磺酸钠7.53g与乙二胺四醋酸二钠3.72g,加0.08mol/L醋酸溶液使溶解并稀释至1000mL,用氨溶液调节pH值至4.3)为流动相A,甲醇—乙腈(7∶3)为流动相B,梯度洗脱,检测波长为254nm.结果 博来霉素A2和B2分别与相邻杂质峰分离符合规定,盐酸博来霉素的检出限为20ng.结论 本法专属、灵敏,可作为盐酸博来霉素有关物质和组分的测定方法.
作者：鲁瑞娟；杨倩；曹晓云 刊期： 2015年第05期
目的 用高效液相色谱法测定羟基地美硝唑的有关物质.方法 采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,甲醇-水(20:80)为流动相;流速为1.0mL/mim测定波长为315nm.结果 该方法具有很好的专属性,在0.02～21.21μg/mL浓度范围内峰面积与浓度成良好的线性关系,定量限和检测限分别为0.4和0.2ng/mL.结论 该方法专属性强,操作简便,测定准确,适用于羟基地美硝唑对照品的有关物质测定.
作者：张秀英；李强；温芳；赵文杰；陆连寿；徐肖君；王在时 刊期： 2015年第05期
抗菌药物在我国水产养殖动物细菌病防治中发挥着重要作用,近几年国内水产用抗菌药物耐药性问题日益突出.本文从耐药现状、研究方法、耐药基因等方面对我国水产常用抗菌药物的耐药性进行了综述,以期针对耐药近况为采取科学合理的用药提供参考和借鉴.
作者：乔毅；万夕和；沈辉 刊期： 2015年第05期
目的 探讨小檗碱(berberine,BBR)与克霉唑(clotrimazole,CLZ)联合用药时,对白念珠菌(Candida albicans,CA)标准菌株ATCC 10231的体外抑菌效果.方法 采用琼脂扩散法(Kirby-Bauer disk diffusion method,KB法)测定BBR、CLZ单用时对CA-10231的低抑菌浓度(minimum inhibitory concentrations,MIC);把不同浓度BBR与CLZ按棋盘法设计配制加药溶液,采用KB法测定不同浓度BBR与CLZ联用时对CA-10231的MIC;计算部份抑菌浓度指数(fractional inhibitory concentration index,FICI),判断联合抑菌效果,FICI≤0.5为协同作用,0.5＜FICI≤4为加成作用,FICI＞4为拮抗作用.结果 BBR和CLZ单用时对CA-10231的平均MIC分别为32000和32 μg/mL;不同浓度BBR与CLZ联用时对CA-10231的平均MIC分别为2000μg/mL(P＜0.01)、8μg/mL(P＜0.01),平均FICI为0.3125.结论 BBR、CLZ单用时都能抑制CA-10231生长;BBR与CLZ联用时能够以低剂量药物协同抑制CA-10231生长.
作者：孔德道；徐可晴；萧锦豪；蔡跃强；孟丽荣 刊期： 2015年第05期
目的 优化24孔板培养活跃链霉菌XW产那西肽的发酵条件.方法 采用单因素实验和响应面法对24孔板的发酵条件进行优化.结果 得到活跃链霉菌XW 24孔板发酵产那西肽的优发酵条件为:种子培养基装液量2.55 mL,发酵培养基装液量0.93mL,发酵时间121h.结论 通过对发酵条件的优化,可以明显提高24孔板发酵产那西肽的效价达到882.25μgg/mL,实验值与模型预测值较接近,吻合度较高,较初始效价675.63μg/mL提高了30.58％.研究结果表明24孔板发酵与摇瓶发酵之间有良好的相关性,相关系数R为0.883.
作者：周扬；薛正莲；秦艳飞；赵世光；刘艳 刊期： 2015年第05期
中国抗生素杂志
主管:中国医药集团总公司
主办：中国医药集团总公司四川抗菌素工业研究所,中国医学科学院医药生物技术研究所
