贾爱琼；施存元；王炜；伊正革
目的 从注射用盐酸头孢唑兰样品中分离制备头孢唑兰有关物质,并进行结构鉴定,为质量研究提供杂质对照品.方法 采用制备色谱进行分离纯化,通过NMR、MS进行结构解析.结果 制备分离得到3个化合物,分别为咪唑并[1,2-b]哒嗪、头孢唑兰的△3-异构体和去咪唑并哒嗪头孢唑兰.结论 头孢唑兰的△3-异构体和去咪唑并哒嗪头孢唑兰为新化合物.
作者：陈钢；余欢；盛力 刊期： 2014年第03期
为获得盐霉素产生菌的原生质体制备与再生的佳条件,本文考察了影响盐霉素产生菌原生质体制备与再生的各种因素.结果表明,盐霉素产生菌的原生质体制备与再生的佳条件为:菌丝体培养基选择为R2YE,一级菌丝体佳培养时间为22h,二级菌丝体佳培养时间为18h,佳蔗糖的添加量为100g/L,佳甘氨酸质量浓度为5g/L,菌丝体在酶解前要经玻璃珠打碎,佳溶菌酶质量浓度为4g/L,佳酶解温度为33℃,佳酶解时间为60min.原生质体制备与再生条件经优化后,盐霉素产生菌的原生质体释放率可达95％,原生质体再生率可达17％.较高的原生质本制备率与再生率使得利用原生质体技术进行微生物菌种选育成为可能,同时,这种成熟的原生质体制备与再生工艺,确保了经原生质体诱变育种后发生基因突变的遗传个体绝大部分都是纯合体,从而避免了高产性状经传代后发生性状回复的现象,为盐霉素工业生产菌种的选育工作奠定了基础.
作者：贾永峰；梁剑光；王永红；郝玉有；储炬 刊期： 2014年第03期
目的 建立克林霉素磷酸酯原料药中三乙胺残留量的测定方法.方法 顶空进样毛细管气相色谱法,采用Elite-5Amine(5％二苯基-95％二甲基聚硅氧烷固定液)石英毛细管柱,柱温50℃,溶解介质为1.0mol/L NaOH溶液,载气为氮气,检测器为FID,测定三乙胺的残留量.结果 在上述色谱条件下三乙胺峰形佳,峰面积与浓度呈良好的线性关系(r=0.9999),精密度和回收率良好,定量限为0.0466μg/mL,检测限为0.0155μg/mL.结论 本法简单、灵敏、准确,适用于克林霉素磷酸酯中三乙胺残留量的测定.
作者：刘珊；陈贵斌；洪利娅 刊期： 2014年第03期
目的 了解学龄前儿童中耳炎流感嗜血菌的感染情况,并对其进行分型及耐药性监测,为临床诊断和合理使用抗生素提供依据.方法 取1103份学龄前儿童化脓性中耳炎的脓性标本进行流感嗜血菌培养,并对其进行生物学分型、β-内酰胺酶及药敏试验.结果 1103份标本中检出86株流感嗜血菌,阳性率7.8％;年龄分布中3～4岁组构成比高,占48.8％,5～6岁组低,占21.0％.对流感嗜血菌进行生物学分型,结果以Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型为主,分别为14.0％、24.4％、54.5％,未检出Ⅶ和Ⅷ型;用Nitrocefin纸片进行β-内酰胺酶检测,有13株β-内酰胺酶阳性,阳性率15.1％(13/86),纸片法检测氨苄西林耐药率为17.4％(15/86).流感嗜血菌对复方磺胺甲噁唑、氨苄西林、氯霉素的耐药率分别为67.5％、17.4％、11.6％,对氨苄西林/舒巴坦、左氧氟沙星、阿奇霉素、头孢噻肟、头孢呋辛的耐药率分别为4.7％、4.7％、5.8％和7.0％.结论 学龄前儿童化脓性中耳炎流感嗜血菌感染以2～4岁年龄组为主要人群,生物型以Ⅲ型居多,药敏结果显示阿齐霉素、第二代和第三代头孢菌素及加酶抑制剂的β-内酰胺类抗生素耐药率较低,可作为学龄前儿童中耳炎流感嗜血菌治疗的经验用药.
作者：段达荣；张文喜；喻长法；张虹 刊期： 2014年第03期
目的 对纯度98.0％左右(HPLC)的市场产品奥利司他进行分离纯化,制备纯度99.50％以上、单一杂质在0.10％以下的高纯度奥利司他.方法 采用反相制备高效液相色谱技术,选择C18填料,以甲醇-水(85:15,v/v)为流动相,收集的目标组分经浓缩、结晶得到高纯度的奥利司他.结果 小试和放大制备的奥利司他,纯度达99.50％以上、单一杂质控制在0.10％以下.放大制备了10kg以上的高纯产品,并解决了放大过程中配套设备和产品稳定性等实际问题.结论 常规分离技术难以去除的奥利司他原料药中的杂质,采用反相制备高效液相色谱技术可有效去除,此技术适合生产制备高质量高附加值的药物.
作者：李小兵；李思琦；焦彦凯；赵廷彬；马双新；解晓兰 刊期： 2014年第03期
目的 鉴定两个平阳霉素相关杂质的结构.方法 通过CM-Sephadex-C-25凝胶柱层析色谱方法,富集和纯化平阳霉素的相关杂质,通过UV、MS、1H-NMR、13C-NMR、1H-1H COSY、HSQC和HMBC等方法来鉴定结构.结果 制备分离得到两个杂质成分,A5-z01和A5-z02,并鉴定了结构.两者结构与平阳霉素类似,均在Ⅴ部分发生变化,同时Ⅳ部分的咪唑环质子化.结论 A5-z01和A5-z02为平阳霉素的两个主要杂质成分,A5-z01为首次报道的新化合物.
作者：王起运；曾佳烽；吴光明；潘俊芳；于国庆；冯子群；张朝晖 刊期： 2014年第03期
目的 建立测定痕量大观霉素的共振瑞利散射法.方法 在pH9.68的Tris-盐酸缓冲介质中,溴甲酚绿与大观霉素相互作用后共振瑞利散射显著增强,在340nm处,增强的共振光散射强度△IRRS与一定浓度范围的大观霉素线性相关.结果 在340nm处,大观霉素的浓度在1.0×10-7～1.0×10-6mol/L范围内与△IRRS成正比,方法的检出限(3Sb/S)为0.030mg/L.结论 该法用于市售大观霉素药物及尿样中大观霉素含量的测定,结果满意.
作者：庞向东；徐艳；江虹 刊期： 2014年第03期
目的 了解耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌中插入序列ISAbal的存在对碳青霉烯酶基因表达的影响.方法 筛选32株碳青霉烯类耐药的鲍曼不动杆菌,运用PCR技术检测OXA-23、OXA-24、OXA-51和OXA-58型酶基因及插入序列ISAbal;RT-PCR方法检测ISAba1下游基因的mRNA的相对表达水平.结果 OXA-51型基因的检出率为100％,OXA-23型基因为96.9％.其中23株OXA-23型基因、18株OXA-51型基因上游均存在插入序列.RT-PCR结果显示上游存在ISAba1时,OXA-23和OXA-51型基因相对表达水平分别为1.6471±0.6560和1.3209±0.3678,与不存在插入序列的相应基因表达水平相比,二者差异均有统计学意义(P＜0.001).结论 OXA-23和OXA-51型基因是本组试验菌的主要碳青霉烯酶基因型,ISAba1序列的插入可引起下游碳青霉烯酶基因高表达.
作者：王同慧；刘男男；凌保东 刊期： 2014年第03期
目的 在万古霉素产生菌东方拟无枝酸菌HCCB 10007内构建attB整合位点,将噬菌体ΦC31重组酶介导的位点特异性整合系统引入该菌,从而提高该工业菌株的遗传操作效率.方法 在不破坏结构基因的情况下经同源重组将来源于变铅青链霉菌的attB编码序列插入到东方拟无枝酸菌HCCB 10007基因组中,然后将带有绿色荧光蛋白基因(eGFP)的特异性位点重组质粒pLYGYQ2导入该工程菌中.用于验证整合系统的有效性.结果 获得基因组中整合有attB位点的基因工程菌LYGYQA.eGFP 基因顺利整合入所构建的attB位点,并且获得了表达.同时发现该系统的整合效率较同源重组效率提高了约3倍.结论 本研究不但表明来源于链霉菌的位点特异性整合系统可以成功应用于东方拟无枝酸菌中,也证明绿色荧光蛋白基因可以作为报告基因用于该菌的研究.
作者：盖忆青；朱丽；陈代杰；张怡轩 刊期： 2014年第03期
目的 优化替尼泊苷冻干粉针剂的处方及冻干工艺.方法 采用L9(34)正交试验优选处方,以原料药的浓度(A)、聚氧乙烯氢化蓖麻油的用量(B)、甘露醇的用量(C)、药液pH值(D)为考察因素,以制剂溶解性和含量为质量评价指标,确定优处方组合A1B3C3D3;采用L9(34)正交试验确定冻干工艺,以预冻温度和时间(E)、升华干燥温度变化(F)、升华干燥时间和真空压力(G)、解析干燥温度和真空压力(H)为考察因素,以成品收率和残余水分为质量评价指标,确定优冻干工艺组合E2F3G1H2.结果 通过处方A1B3C3D3及冻干工艺E2F3G1H2制备3批替尼泊苷冻干粉针样品,3批样品的外观均为白色疏松块状,复溶性好,含量均在99.3％左右.结论 该替尼泊苷冻干粉针处方及冻干工艺可行性好、重现性好.
作者：杨柳；姚瑰玮；王秀玲；余邦良 刊期： 2014年第03期
多烯大环内酯类抗生素是有效的抗真菌素之一,在临床和食品工业中都得到广泛的应用.本文综述了多年来多烯大环内酯类抗生素的研究成果及进展.包括:多烯大环内酯类抗生素完整的生物合成流程;该类抗生素杀灭真菌核心机制的新发现;通过生物工程手段对多烯大环内酯类抗生素进行结构改造的研究,目前人们已实现通过有目的性的理性设计,调整生物合成相关基因来获得预期产物;多烯大环内酯类抗生素从属的聚酮类抗生素相关基因的进化方式和特点等.在介绍多烯大环内酯类抗生素各个方面的研究进展的同时,还对多烯大环内酯类抗生素的研究与应用前景进行了展望.
作者：曾繁旭；乔建军 刊期： 2014年第03期
目的 分离鉴定海洋链霉菌Streptomyces sp.7-145产生的抗耐药菌活性成分.方法 通过活性追踪,利用大孔吸附树脂、凝胶、正反相色谱等多种色谱技术分离纯化活性成分;通过紫外光谱、质谱、核磁共振谱等波谱学方法鉴定其结构.利用琼脂稀释法和微量肉汤稀释法分别测定所得化合物的抗耐药菌和抗结核活性,利用MTT法评价其细胞毒性.结果 从中分离鉴定了4个活性化合物,其结构分别确定为洋橄榄叶素(1)、11-O-甲基洋橄榄叶素(2)、11,11'-O-二甲基洋橄榄叶素(3)、14'-去乙基-14'-甲基洋橄榄叶素(4).化合物1～4对甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA)和万古霉素耐药的肠球菌(VRE)等革兰阳性耐药菌具有较强的抗菌活性,低抑菌浓度(MIC)为1～16μg/mL;所有化合物对结核分枝杆菌H37Rv株显示出显著的抑制活性(MIC:0.5～4μg/mL),其中化合物1对结核分枝杆菌多重耐药(MDR)、广泛耐药(XDR)等耐药株也表现出较强的抑制活性(MIC:0.5～1μg/mL);1和2对人肝细胞(L02)、肾上皮细胞(293T)和乳腺癌细胞(MCF-7)具有较强的细胞毒活性,IC50值为0.14～0.28 μmol/L.结论 化合物1～4具有较强的体外抗MRSA、VRE等耐药菌活性.首次发现洋橄榄叶素(1)具有体外抗结核分枝杆菌标准株、多重耐药以及广泛耐药株活性.化合物1和2对人正常肝、肾上皮细胞具有细胞毒性.
作者：吴春彦；谭亿；甘茂罗；蒙建州；关艳；周红霞；戴剑漉；王以光；尚小雅 刊期： 2014年第03期
目的 了解鲍曼不动杆菌耐药性及ArmA甲基化酶携带状况,为临床治疗和防控医院感染提供依据.方法 临床标本中分离97株鲍曼不动杆菌,经VITEK 2 Compact细菌仪鉴定和药敏试验,筛选氨基糖苷类耐药鲍曼不动杆菌,再采用PCR检测ArmA甲基化酶并序列分析.结果 头孢菌素类、氨基糖苷类、喹诺酮类三类以上抗菌药物耐药率50.3％,氨基糖苷类耐药鲍曼不动杆菌ArmA甲基化酶检出率89.6％(43/48),有5株表型耐药未检出ArmA甲基化酶.结论 鲍曼不动杆菌多重耐药严重,临床可选择的药物极为有限,高携带ArmA甲基化酶是鲍曼不动杆菌耐药和传播流行的主要原因.
作者：黄和赞；罗来恒；万鸣春；杨志兰 刊期： 2014年第03期
在酶法合成头孢西丁的研究中设计出一种新的7α-甲氧基头孢菌素中间体:7-β-(4-羟基-3,5-二叔丁基苯亚甲基)-氨基-2-头孢烯-2-(Y-丁内酯)(化合物c)及其合成方法.化合物c经过氧化、加成、脱保护反应得到新化合物f(7-β-(4-羟基-3,5-二叔丁基苯亚甲基氨基)-7α-甲氧基-2-头孢烯-2-(γ-丁内酯)).将此化合物经过结构改造即可得到一系列7α-甲氧基头孢菌素药物.由此法生产头孢西丁、头孢美唑、头孢米诺等甲氧头孢菌素药物可大幅度降低成本.
作者：贾爱琼；施存元；王炜；伊正革 刊期： 2014年第03期
目的 探讨制备方法对博安霉素脂质体包封率的影响,考察其制备的影响因素,优化处方工艺,并对其特性进行表征.方法 分别采用乙醇注入法和逆向蒸发法制备博安霉素脂质体(boanmycin liposomes,BAM-Ls),确定终工艺及处方.并对其包封率、粒径、Zeta电位和形态进行综合评价.结果 逆向蒸发法制备BAM-Ls时药物包封率明显高于乙醇注入法,终处方磷脂浓度为10mg/mL、磷脂胆固醇比为4:1(W/W)、水/乙醚比为1:3(V/V)时,所得脂质体包封率高,约为30％.粒径为150nm,Zeta电位为-22.8mV,7d内脂质体稳定性良好.结论 逆向蒸发法制备的BAM-Ls理化性质及稳定性良好.
作者：王金晶；张芹；肖晗；陈立江；李丽；张文君；李铁福；刘宇 刊期： 2014年第03期
目的 了解佛山地区产青霉素酶淋球菌(PPNG)TEM-1基因和高度耐四环素淋球菌(TRNG)tetM基因分子流行情况.方法 采用纸片酸度法检测PPNG,琼脂稀释法检测TRNG.建立PCR方法分别扩增TEM-1基因和tetM基因,电泳分析其质粒谱型.结果 98株临床分离淋球菌青霉素和四环素耐药率分别为96.9％和94.9％,共检出PPNG 34株(34.7％),TRNG 63株(64.3％).质粒分型结果显示PPNG中亚洲型30株(88.2％),非洲型4株(11.8％),未检出多伦多/里约型,TRNG均携带荷兰型质粒.讨论 佛山地区PPNG大多数携带亚洲型质粒,少见非洲型质粒,TRNG均为携带荷兰型tetM因的流行株.
作者：李燕娃；石正琪；赵培来；吴兴中；潘洪亮 刊期： 2014年第03期
蛋白质在核糖体的合成受多个分子层面的精细调控,包括核糖体停靠(ribosome stalling,亦称为核糖体延宕)机制,即核糖体可与tRNA及氨基酸、肽或其它化合物如抗生素持久结合形成复合物,使核糖体停靠在正在转录的前导肽mRNA的开放阅读框内,并促使前导肽下游未翻译结构基因如耐药基因mRNA的表达.核糖体停靠需要前导肽参与,可分为非抗生素依赖和抗生素依赖两种类型,后者诱导多种作用于核糖体靶位抗生素(如大环内酯类、氯霉素类及四环素类等)的耐药性形成.对大环内酯类介导的核糖体停靠已有深入了解,这些研究有助于了解抗生素耐药机制及进化,并从干扰蛋白质表达的角度探索控制耐药性和研发新型抗菌化合物.本文也讨论了影响蛋白质表达的核糖体拯救(ribosme rescue)和核糖开关(riboswitch)机制.
作者：郑薇；凌保东；贾旭；李显志 刊期： 2014年第03期
目的 研究注射用头孢匹林钠在中国健康人体内的药动学.方法 采用LC-MS/MS法测定人血浆样品中主要成分头孢匹林的经时血药浓度,分别进行单次给药的药代试验和多次给药的药代试验.利用DAS ver2.1.1软件处理血药浓度数据并计算主要药动学参数.结果 单次静脉滴注注射用头孢匹林钠0.5、1.0、2.0g,主要药动学参数如下:AUC0-8为(12698.776±7107.851)、(34930.120±17944.260)、(156684.622±56574.675)μg/(h·L),AUC0-∞为(12729.473±7094.992)、(34943.027±17946.112)、(156741.695±56606.925)μg/(h·L),Cmax为(21441.600±14858.451)、(50912.000±25536.065)、(246044.444±111976.277)μg/L,t1/2为(0.968±0.239)、(0.789±0.128)、(0.968±0.239)h,Tmax为(0.432±0.088)、(0.458±0.119)、(0.432±0.088)h.多次给药主要药动学参数如下:AUCss为(45084.200±26883.281)μg/(h.L)、AUC0-1为(45233.808±27008.754)μg/(h·L)、AUC0-∞为(45276.641±27040.133)μg/(h·L),Cmax为(90216.000±66906.906)μg/L,t1/2为(0.994±0.230)h,Tmax为(0.318±0.164)h.蓄积因子以稳态AUC0-8与单次给药AUC0-8比值计算为1.420±0.900.结论 单次静脉滴注注射用头孢匹林钠0.5、1.0和2.0g后其主要药动学参数AUC0-8、AUC0-∞和Cmax与剂量成线性相关,注射用头孢匹林钠静脉滴注给药在0.5～2.0g剂量范围内呈线性动力学特征.不同性别对静脉滴注注射用头孢匹林钠后的药动学参数的影响差异不统计学意义.多次给药(1.0g/次,每天4次,连续给药5d)后药物在体内有一定的蓄积.
作者：施存元；蔡月苹；张海松；邓继峰 刊期： 2014年第03期
中国抗生素杂志
主管:中国医药集团总公司
主办：中国医药集团总公司四川抗菌素工业研究所,中国医学科学院医药生物技术研究所
