徐杰;庄万强;斯海波;陈世荣
目的 采用HPSEC法测定头孢美唑钠中聚合物含量.方法 采用TSKgel G2000SWXL色谱柱(7.8mm I.D×30cm,5μm);以pH7.0的0.005mo/L磷酸盐缓冲液[0.005mol/L磷酸氢二钠-0.005mol/L磷酸二氢钠(61:39),V/V]-乙腈(90:10,V/V)为流动相;检测波长为254nm;流速为0.6mL/min;柱温为25℃.结果 在该条件下头孢美唑钠峰与聚合物峰分离良好;头孢美唑钠进样浓度为25~0.5 μg/mL范围内(r=0.9999,n=6),浓度与峰面积呈良好的线性关系;本法的定量限(S/N=10)为6ng;检测限(S/N=3)为2ng.结论 本方法简便、准确、灵敏、可靠,比文献方法更能有效的测定头孢美唑钠中聚合物的含量.
作者:徐明琴;张静霞;张春然;王宇驰;李喆宇;唐克慧 刊期: 2014年第05期
目的 了解广西地区临床分离细菌的分布及其对常用抗菌药物的耐药性.方法 对2012年广西地区14家主要医院临床分离的细菌采用自动化仪器法或纸片扩散法按统一方案进行细菌药敏实验,按CLSI2011年版判读药敏结果.结果 2012年广西地区收集各临床分离细菌10895株,其中革兰阴性菌7627株,占70%,革兰阳性菌3268株,占30%.标本以呼吸道标本为多见.金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌中甲氧西林耐药株分别为19.2%和71.4%.未发现万古霉素、替考拉宁及利奈唑胺耐药菌株.屎肠球菌与粪肠球菌对万古霉素耐药率分别为3.6%和1.5%;对利奈唑胺耐药率分别为5.9%和3.1%.肺炎链球菌对青霉素的耐药率为1.2%,对红霉素的耐药率为96.6%,对头孢呋辛、头孢噻肟的耐药率分别为70%和61%.大肠埃希菌和克雷伯菌属中产ESBLs株分别为27.3%和25.3%.铜绿假单胞菌对碳青霉烯类药物耐药率为10.5%~12.8%,鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药率为25.3%~28.2%.结论 细菌耐药性较严重;应加强抗生素的合理应用和耐药性监测,采取有效的控制措施.
作者:农生洲;梁亮;周莹 刊期: 2014年第05期
目的 分析念珠菌感染的分布特点,监测其对两性霉素B、酮康唑和克霉唑的药物敏感性,为指导临床合理用药及控制感染提供参考.方法 采用CHROMagar显色培养基和Vitek2 YST鉴定条进行菌株鉴定,并根据美国临床试验标准化研究所(CLSI)制订的抗真菌药物敏感试验方案(M27-A2)进行体外药敏试验.结果 共收集念珠菌1214株,其中白念珠菌862株,占71.0%;其次为光滑念珠菌195株,占16.1%.白念珠菌在痰液和白带中所占比例分别为79.7%和66.8%,而非白念珠菌在血液、尿液中所占比重超过50%.1214株念珠菌对两性霉素B、酮康唑和克霉唑的敏感率分别为65.4%、41.2%和49.7%.结论 念珠菌临床分离株对两性霉素B、酮康唑和克霉唑的耐药率比以往报道结果有所升高;不同来源部位的念珠菌对不同抗生素的敏感性有较大差异,临床上选择抗真菌药物进行治疗时不但要考虑念珠菌种类别,还可能要考虑菌种感染部位的差别.
作者:张静怡;张洁妤;应颖;刘发娣;张志勤;朱娜;邹伟文;黄孝天 刊期: 2014年第05期
目的 在动物体内观察环丙沙星联合阿米卡星,能否缩小环丙沙星对鲍曼不动杆菌的耐药突变选择窗.方法 体外测定环丙沙星与阿米卡星对鲍曼不动杆菌标准菌株ATCC 19606的低抑菌浓度、防耐药突变浓度、并计算突变选择指数;高效液相色谱法测定环丙沙星在兔组织液中药代动力学参数.建立55只兔组织笼感染模型,随机分为11组,l组为生理盐水组(对照组),5组单用环丙沙星(环丙沙星组),5组为环丙沙星联合阿米卡星组.环丙沙星每次给药间隔2h,连续给药10次,使兔组织液环丙沙星稳态浓度分别均达到0.5、1.0、2.0、4.0和8.0mg/L浓度;阿米卡星4mg/(kg·d),其组织液浓度在5~20mg/L,恰好在MSW内.3d后抽取组织液,涂布于含有0.5mg/L浓度环丙沙星的琼脂平板,有细菌生长者为耐药突变体.结果 体外环丙沙星与阿米卡星对鲍曼不动杆菌的MIC、MPC及SI分别为0.5mg/L、8mg/L、16与4.0mg/L、64mg/L、16.环丙沙星组:环丙沙星浓度0.5、1.0、2.0及4.0mg/L亚组家兔组织液中均有耐药突变体的生长,8.0mg/L亚组没有耐药突变体生长;即体内环丙沙星MPC与体外相同,SI为16.联合组:环丙沙星浓度0.5和1.0mg/L亚组有耐药突变体生长,2.0、4.0及8.0mg/L亚组没有耐药突变体的生长,即联合阿米卡星后环丙沙星的MPC为2.0mg/L,联合后MIC为0.25mg/L,因此SI为8.结论 环丙沙星联合阿米卡星可以缩小环丙沙星对鲍曼不动杆菌的耐药突变选择窗,从而减少耐药突变体的产生,有利于减少细菌耐药.
作者:刘明涛;李凯述;李燕燕;闫鹏鹏;欧阳修河 刊期: 2014年第05期
目的 研究多重耐药纹带棒状杆菌(MDR-Cs)的耐药机制.方法 用微量肉汤稀释法检测临床分离的48株MDR-Cs的低抑菌浓度(MIC);聚合酶连反应检测菌株的核糖体甲基化酶基因(ermⅩ)、核糖体保护蛋白基因(tet(W))、DNA螺旋酶A亚单位基因(gyrA)和接合型转座子Tn 1545整合酶基因(intTn)、L,D-转肽酶基因(ldtl/2),并测序分析.结果 根据2007年CLSI M45文件的标准检测14种抗菌药物的敏感性,所有被测菌株均表现出多重耐药;ermⅩ、tet(W)和intTn基因检出率分别为93.8%、100%和100%;与标准菌株比对,所有菌株的gyrA基因序列均表现为以间隔3个氨基酸的丝氨酸和天冬氨酸分别突变为苯丙氨酸和丙氨酸的双点突变;未检出ldtl/2.结论 中国重庆地区的MDR-Cs对青霉素、Ⅲ、Ⅳ代头孢菌素、四环素、喹诺酮类和复方磺胺甲噁唑表现出全耐药,对万古霉素、利奈唑胺表现为全敏感;菌株介导ermⅩ和tet(W)基因分别对红霉素和四环素耐药,介导gyrA基因双位点突变对喹诺酮类高水平耐药,所有菌株均携带转座子Tn 1545整合酶intTn基因.
作者:李科;张德纯;张名均;杨金梅;杨晓容;刘胜男 刊期: 2014年第05期
目的 了解2012年广东地区细菌耐药性监测网所属44所医院临床分离株的耐药情况,通过与中国其它地区和2010年本地资料比较,明确广东地区的耐药特点.方法 采用纸片扩散法(KB法)和自动化仪器对66470株临床分离株作药敏试验.以2012年CLSI标准判断药敏结果.结果 66470株细菌中革兰阳性菌占27.9%(18515/66470),革兰阴性菌占72.1%(47955/66470).耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别为39.6%和73.0%.未发现万古霉素中介株(VISA)或耐药株(VRSA).肺炎链球菌(非脑膜炎分离株)对青霉素耐药率为2.6%.在大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形菌中产ESBLs株的检出率分别为54.7%、36.8%和18.9%.肠杆菌科细菌产ESBLs株对监测药物的耐药率比非产ESBLs株高.对不动杆菌属(鲍曼不动杆菌占92%)耐药率低的依次是米诺环素(21.1%)、头孢哌酮/舒巴坦(25.9%)和阿米卡星(32.5%).与2010年本地资料相比,不动杆菌属对亚胺培南的耐药率已由29.7%增加至46.1%,美罗培南耐药率由31.6%增加到44.2%.结论 总体耐药形势虽有所改善但仍然相当严峻,其中不动杆菌属对碳青霉烯类耐药问题表现为突出.耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)检出率的逐年增加给临床治疗带来了巨大的挑战,急需加强耐药性的监测以指导临床抗生素的合理运用.
作者:林倍州;肖书念;卓超 刊期: 2014年第05期
目的 对盐酸瑞芬太尼的2个主要有关物质进行结构鉴定.方法 采用制备高效液相法和样品降解再纯化分离获得杂质,并应用LC/MS、NMR、UV、IR等对主要有关物质进行结构分析.结果 确证其中一个杂质是4-甲氧羰基-4-[(1-氧代丙基)苯胺基]哌啶,另外一个杂质是4-甲氧羰基-4-[(1-氧代丙基)苯胺基]-1-哌啶丙酸.结论 为盐酸瑞芬太尼的质量控制提供了重要的依据.
作者:马春华;曹俊涵;杨争;杨晨;马玉洁;杨红 刊期: 2014年第05期
目的 探讨泛耐药肺炎克雷伯菌血液分离株耐药机制.方法 对我院ICU住院患者血液分离的泛耐药肺炎克雷伯菌株,采用K-B纸片法药敏试验;采用聚合酶链反应(PCR)方法对该菌株可能携带的β-内酰胺酶编码基因及膜孔蛋白编码基因、与氨基糖苷类药物耐药相关的氨基糖苷类修饰酶编码基因、与氟喹诺酮类药物耐药相关基因以及与利福平耐药相关的aar基因进行检测,并对阳性产物进行测序,测序结果作BLAST对比分析.结果 该株泛耐药肺炎克雷伯菌株检出TEM、SHV、DHA3种β-内酰胺酶编码基因,OmpK35膜孔蛋白编码基因检测呈阳性,OmpK36膜孔蛋白编码基因检测呈阴性,即该菌OmpK36膜孔蛋白编码基因为缺失型;aac(6')-Ⅰ b氨基糖苷类修饰酶编码基因阳性;氟喹诺酮类药物作用靶位gyrA基因第83位密码子存在TCC→ATC有义突变(氨基酸序列S→I)、parC基因第80位密码子存在AGC→ATC有义突变(氨基酸序列S→I),且氟喹诺酮类药物作用靶位保护蛋白编码基因qnrB检测阳性;利福平获得性耐药基因arr检测阳性.结论 泛耐药肺炎克雷伯菌同时存在多种耐药机制,从而对不同类抗菌药物形成耐药,给临床治疗带来极大的挑战;加强对该类菌株的监控、减少其在医院的传播、积极探寻对该类菌株的有效治疗措施迫在眉睫.
作者:孙伏喜;冯旰珠;姚静;崔进;高天明;赵水娣 刊期: 2014年第05期
目的 了解重庆市主要医院临床分离菌对常用抗菌药物的敏感性和耐药性.方法 重庆市34所医院(包括一所儿童医院)临床分离菌采用MIC法及K-B法按统一方案进行细菌药物敏感试验,结果按CLSI 2012年版标准判断.结果 2012年1月至12月共收集重庆市临床分离菌共49636株,其中革兰阳性菌占26.6%,革兰阴性菌占73.4%.金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌中甲氧西林耐药株(MRSA和MRCNS)分别为26.9%和72.2%.葡萄球菌属中甲氧西林耐药株对β-内酰胺类抗生素和其他测试药的耐药率显著高于甲氧西林敏感株,未发现万古霉素和利奈唑胺耐药株.肠球菌属中粪肠球菌对多数测试药物的耐药率低于屎肠球菌,两者中均有少数万古霉素耐药株和利奈唑胺耐药株.非脑膜炎肺炎链球菌PISP和PRSP比例较高,未发现万古霉素耐药株.大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌中产ESBLs株分别为59.9%和30.9%.肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,总耐药率小于1.0%.铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南耐药率分别为20.2%和18.2%,鲍曼不动杆菌对两者的耐药率分别为52.1%和48.3%.多重耐药肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌增加明显.结论 细菌耐药性严重,尤其是多重耐药菌对临床构成严重威胁.合理选用抗菌药,加强感染控制措施是当务之急.
作者:牛司强;阳苹;张莉萍 刊期: 2014年第05期
目的 统计分析四川省细菌耐药监测网成员单位2012年细菌分布及耐药情况,为我省抗菌药物合理应用提供依据.方法 各成员单位按照监测方案要求,进行目标细菌鉴定、药敏试验,依据CLSI2012年标准,用WHONET 5.6软件进行数据分析.结果 按患者首次分离菌株进行统计分析,共收集细菌98571株,其中革兰阴性菌72340株,占73.4%,革兰阳性菌26231株,占26.6%.革兰阳性菌中,分离出葡萄球菌属细菌16435株,占阳性菌62.7%,其中金黄色葡萄球菌9315株,占葡萄球菌属56.7%;革兰阴性菌中分离率排列前三位的分别是大肠埃希菌26.8%、肺炎克雷伯菌16.2%、铜绿假单胞菌11.9%.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别为31.1%和70.6%,未发现万古霉素、利奈唑胺耐药的葡萄球菌.万古霉素耐药粪肠球菌和屎肠球菌分别占1.0%和5.1%,耐青霉素肺炎链球菌为4.5%,革兰阴性杆菌中,大肠埃希菌耐药比较突出,对喹诺酮类耐药率在40.0%以上,对头孢噻肟和头孢曲松的耐药率均在60.0%以上,肠杆菌科细菌对碳青酶烯类抗生素耐药率<10.0%.鲍曼不动杆菌对包括亚胺培南在内的大多数监测药物耐药率超过50.0%,而铜绿假单胞菌对大多数药物保持了较高的抗菌活性.结论 我省细菌耐药情况较为严重,应充分利用本地细菌耐药监测结果进行监督管理,促进抗菌药物合理应用.
作者:喻华;刘华;黄文芳;袁红;黄湘宁;乔宁;殷琳;张凯 刊期: 2014年第05期
目的 了解2012年新疆地区临床分离菌对常用抗菌药的敏感性和耐药性.方法 对2012年新疆地区14家三甲医院临床标本中分离的常见细菌,采用纸片扩散法或自动化仪器法按统一方案进行细菌药敏试验.按CLSI 2013年版判断结果.数据分析采用WHONET5.6软件.结果 共收集临床分离株18374株,其中革兰阳性菌5051株(27.5%),革兰阴性菌13323株(72.5%).革兰阴性菌中肠杆菌科细菌占革兰阴性杆菌的65.6%;非发酵糖革兰阴性杆菌占革兰阴性杆菌的34.4%.金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌中甲氧西林耐药株的检出率平均分别为44.7%和74.6%,未检出利奈唑胺及万古霉素的耐药株.肠球菌属细菌中粪肠球菌对所测试的抗菌药的耐药率均显著低于屎肠球菌,耐万古霉素(VRE)粪肠球菌和屎肠球菌检出率为4.9%和2.8%,耐替考拉宁粪肠球菌检出率为11.1%明显高于屎肠球菌,已发现耐利奈唑胺粪肠球菌(0.4%)和屎肠球菌(0.3%).肺炎链球菌按照颅内感染折点判定,青霉素耐药率为68.9%,按照非颅内感染折点判断,青霉素耐药率为1.0%;肠杆菌科大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐碳青酶烯酶占0.8%~9.2%.鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药率高于铜绿假单胞菌,同时对多种抗菌药物耐药或泛耐药.结论 新疆地区细菌耐药性从整体情况看,细菌耐药情况普遍存在,也存在严重的多重耐药和泛耐药菌株,要引起医院及管理部门的高度重视.应进行流行病学调查并采取有效的控制措施.
作者:季萍;张琼;张朝霞 刊期: 2014年第05期
目的 了解2012年贵州地区7所医院临床分离株对常用抗菌药物的耐药性.方法 临床分离菌按KB法或仪器方法进行抗菌药物敏感试验,按CLSI2012版判断结果,对所得数据用WHONET5.4软件进行统计分析.结果 共分离出病原菌13212株,其中革兰阴性菌9103株,占68.90%,革兰阳性菌4109株,占31.10%;金黄色葡萄球菌中,耐甲氧西林葡萄球(MRSA)检出率为40.0%;未发现耐万古霉素和利奈唑胺的菌株;肠球菌属中,屎肠球菌和粪肠球菌均出现对万古霉素和利奈唑胺耐药的菌株.肠杆菌科中大肠埃希菌对亚胺培南的耐药率为2.6%,肺炎克雷伯菌对亚胺培南的耐药率为3.1%;非发酵菌中铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药率为33.0%,鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药率为41.6%.结论 我省细菌耐药性呈增长趋势,需加强监测,并采取有效控制措施.
作者:胡方芳;罗湘蓉;袁军;蒲海;李红凌;金婷婷;杨斌 刊期: 2014年第05期
目的 了解引起血流感染肠球菌的种类、对高浓度氨基糖苷类的耐药性及耐万古霉素肠球菌的耐药基因和分子流行特征.方法 选取2008-2012年发生肠球菌血流感染患者的血培养分离株,进行菌种鉴定和药敏试验.用PCR方法对其中的耐万古霉素肠球菌的耐万古霉素基因进行检测以,脉冲场凝胶电泳对耐万古霉素肠球菌进行分子分型.结果 在5年间共分离到肠球菌属细菌211株中,屎肠球菌161株,占76.3%,粪肠球菌50株,占23.7%.经琼脂稀释法筛选出耐高浓度氨基糖苷类肠球菌144株,占71.6%.检测到耐万古霉素的肠球菌9株,均携带有vanA基因,未检测到vanB基因.脉冲场凝胶电泳分型的结果显示,耐万古霉素的肠球菌各菌株具有不同的分子表型.多位点序列分型的结果显示,9株耐万古肠球菌株分别属于ST78(7/9)、ST192(1/9)和ST804(1/9)型.结论 肠球菌引起的血流感染以屎肠球菌为主,呈多重耐药性,致血流感染的耐万古霉素肠球菌之间没有相似性,其中的8株耐万古霉素肠球菌的多位点序列分型属于CC17克隆复合体.
作者:李东冬;陈荣;沈定霞;褚佳琪 刊期: 2014年第05期
目的 为了筛选出具有生物活性的放线菌,并研究其可能存在的潜在研究及商业价值.方法 从台州市剑门港海区海底淤泥中采样并分离到3株具有抗菌活性的放线菌,通过分子生物学、(G+C)mol%含量、菌落及形态学进行菌种鉴定,应用BLAST Clustal W(V 1.83)和Mega(V 5.1)等软件进行系统发育树分析,以鉴定其分离地位,并对其发酵产物进行活性检测.结果 经研究发现一株菌株经不同发酵配方发酵,其胞内胞外物质均具有较好的抑菌效果,该菌经鉴定为星状诺卡菌,命名为Nocardia asteroids Ⅺ.结论 Nocardia asteroides Ⅺ筛选与鉴定丰富了抗生素产生菌资源,有潜在的开发出新的抗菌药物的可能性,值得进一步深入研究.
作者:奚逢源;薛长艳;郝之奎 刊期: 2014年第05期
目的 揭示在不同种类的亚抑菌浓度抗生素作用下,细菌耐药基因水平传播的一般规律.方法 选择四种不同抑菌机制的抗生素(氨苄西林、环丙沙星、红霉素和链霉素),在亚抑菌浓度条件下,将供体菌和受体菌共培养,通过PCR法和整合效率的测定,研究了整合酶对耐药基因整合效率的变化规律,并使用了不同耐药基因进行验证.结果 除红霉素外,在低于50% MIC浓度抗生素的作用下,随着抗生素作用剂量的提高,整合酶整合效率有增高的趋势.结论 亚抑菌浓度的抗生素作用下,提高了整合酶的整合效率,能够促进耐药基因的水平传播.
作者:鲁曦;金发光;徐冬旸;吴少云;闫鹤;石磊 刊期: 2014年第05期
目的 对非痰标本来源的肠杆菌科细菌抗菌素耐药趋势进行调查分析,为临床合理使用抗菌药物提供参考依据.方法 收集华西医院2007-2011年,住院患者送检非痰标本中分离到的肠杆菌科细菌临床数据,采用WHONET 5.5和SPSS16软件进行统计分析.结果 5年从非痰标本中分离肠杆菌科细菌8322株.非痰液标本构成以尿液(32%)、分泌物(26%)及血液(16%)为主,菌株构成以埃希菌属(55%)、克雷伯菌属(17%)及肠杆菌属(14%)为主.肠杆菌科细菌对氨苄西林、头孢唑林的耐药率较高,对哌拉西林/三唑巴坦、亚胺培南耐药率较低.对亚胺培南敏感的细菌,其MIC值有左移趋势,哌拉西林/三唑巴坦和亚胺培南交叉耐药率低(0.3%).肠杆菌各菌属对部分抗菌药物耐药率有逐年下降的趋势.结论 宣传合理用药,加强检验质量,控制院内感染是降低细菌耐药性的重要手段.
作者:巫丽娟;康梅;陈知行;陈慧莉;郭靓;何超;肖玉玲;谢轶 刊期: 2014年第05期
目的 研究低频超声联合不同抗生素对表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis) RP62A生物被膜(biofilm,BF)渗透性的影响.方法 体外建立成熟RP62A BF模型,用扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)确认并观察BF的形态结构;平板计数法计算活菌总量;建立生物膜抗生素渗透模型,低频超声联合干预治疗1h、3h,测量抑菌环直径大小.结果 低频超声显著增强了庆大霉素和头孢噻肟对表皮葡萄球菌生物膜的渗透性,头孢噻肟联合超声组(1h、3h)和庆大霉素联合超声组(3h)与CB对照组相比均有显著差异(P<0.05);当超声延长至3h后,万古霉素的渗透性略有增强.结论 低频超声可不同程度增强抗生素对表皮葡萄球菌生物膜的渗透性.
作者:徐杰;庄万强;斯海波;陈世荣 刊期: 2014年第05期