学术投稿

视网膜色素变性视紫红质部分基因序列检测

崔之础;杨玲;张冬雷;管怀进;白沂涛

关键词:视紫红质, 基因, 序列
摘要:建立了重盐、异丙醇提取视紫红质(RHO)基因DNA序列检测方法. 结果显示正常人RHO第5外显子基因所选277碱基排列与Nathans-Hogness报道的基因密码一致.RHO基因直接提取法不能用于序列测定.该法与酚提取法相比,时间缩短数个小时,成本降低50%.
现代检验医学杂志相关文献
  • [3H]-油酸标记的大肠杆菌底物测定血清磷脂酶A2活性的方法及评价

    目的:探讨血清磷脂酶A2(PLA2)活性测定动力学特点并进行方法学评价.方法:采用[3H]-油酸标记大肠杆菌膜为底物,观察不同条件下PLA2的作用特点,选择适反应条件,并进行方法学评价试验.结果:PLA2的适pH为8.0~8.5;当Ca 2+≤8 nmol/L时,PLA2活性呈Ca2+浓度依赖性;PLA2催化水解大肠杆菌膜磷脂的反应有底物饱和性,其表观Km为6.0 μmol/L;血清用量在2~14 μl内呈线性关系(r=0.924 8,P<0.05);蛇毒PLA2在0.5~10 ng范围内呈线性(r=0.960 4 ,P<0.01);当血清用量为10 μl,反应在25 min内呈线性(r=0.929 9,P <0.005).批内CV为6.2%,批间CV为9.3%,回收率为92.6%;轻度溶血、1.06 mmol/L的TG及0.16 mmol/L的Triton X-100对该法无明显干扰;48例健康人血清PLA2活力的95%可信区间为461.9~623.2 u/L((x)±t0.05,vS(x)).结论:以[3H]-油酸标记的大肠杆菌膜为底物测定血清磷脂酶A2活力是一种灵敏度极高,特异性较强,准确度满意的放射化学分析法.该法较为简单、快速、适于临床批量测定以及科学研究.

    作者:李廷富;涂植光;康格非;徐勇 刊期: 2000年第04期

  • 三种不同包被抗原用于RF的测定与比较

    用50%与33%饱和硫酸铵分级沉淀法分别自人、兔和大白鼠血清中提取得IgG组分,并将其变性成聚合物,以此为包被抗原建立了检测类风湿因子(RF)的双抗原夹心与间接ELISA法,经初步的临床检测发现,以AgHIgG作为包被抗原时,方法敏感,A gRIgG次之,而AgMIgG差,相关分析结果表明,间接法中(以AgRIgG为包被物)与双抗原夹心法(包被抗原分别为AgHIgG、AgRIgG)所测RF有较好的同步性(P<0.05或P<0.0 1)

    作者:冯琳琳;谈华;虞伟;武建国 刊期: 2000年第04期

  • Precinorm质控品复溶后平衡时间的选择

    随着生化酶类项目质量控制工作的普及,项目多、质量稳的进口质控品在各实验室得到广泛应用.在使用过程中我们发现,进口质控品和国产质控品复溶后的平衡时间有所差异.为此,我们对本科使用的德国Precinorm定值血清,进行了不同平衡时间的观察,以选择该质控品复溶的佳平衡时间.

    作者:金宗华 刊期: 2000年第04期

  • 中性粒细胞NA基因检测在粒细胞减少的临床应用

    粒细胞减少是临床上较为常见的一种疾病,主要有自身免疫性粒细胞减少、同种免疫性粒细胞减少等,这类病人通常血清中存在粒细胞抗体,导致患者粒细胞减少.

    作者:蒋冬玲;刘孟黎;郭菊莲;杜晓平 刊期: 2000年第04期

  • 一种提高尿红细胞形态应用的新方法

    目的:为了提高尿红细胞形态检查的应用价值,寻找一种简便而又有效的判定方法.方法:用普通光学显微镜观察了68例各类型的肾小球性疾病病人和83例非肾小球性疾病病人的血尿标本,并用畸形、畸/环形、环形、正形四种方式进行判定其形态.结果:用畸形、畸/环形诊断肾小球性血尿的敏感性和特异性分别为77.5%和94.7%、1 3.8%和59.4%;用正形、环形诊断肾小球性血尿的敏感性和特异性分别为:59.2%和95.9 %、25%和76.9%.结论:该法能大限度地区别肾小球性与非肾小球性血尿,又能给检查者以明确的判定方法和临床应用的明朗指征,是一种简便而又有效的方法.

    作者:张汉奎;杜满兴;崔惠敏;周再生;梁荣任;董秀清 刊期: 2000年第04期

  • 腺苷脱氨酶和溶菌酶测定在胸腔积液鉴别诊断中的价值

    不同病因引起的胸膜腔积液,在进行鉴别诊断时必须对临床、实验室和X线检查资料进行综合分析.结核性胸膜炎患者只有10%~20%能从胸水中培养出结核杆菌,甚至多次胸膜活检仍有20%~30%的病例不能确诊.本文通过对胸水、血清中腺苷脱氨酶(ADA)和溶菌酶(LZM)测定来探讨其对结核性胸膜炎的鉴别诊断价值.

    作者:赵娟;毛达勇 刊期: 2000年第04期

  • 脂蛋白(a)对鼠腹腔巨噬细胞释放一氧化氮的影响

    为探讨脂蛋白(a)对巨噬细胞释放一氧化氮的影响,进一步了解脂蛋白(a)在动脉粥样硬化发生发展中的作用,将脂蛋白(a)(终浓度为2.5~40 mg/L )与鼠腹腔巨噬细胞共孵,检测上清液中乳酸脱氢酶活性、一氧化氮含量和细胞一氧化氮合酶活性 .结果发现,在基础及脂多糖诱导状态下,细胞上清液中一氧化氮含量与脂蛋白(a)呈显著剂量依赖性降低,并呈时间效应.而细胞一氧化氮合酶活性则不受脂蛋白(a)刺激的影响. 结果提示脂蛋白(a)对巨噬细胞释放NO有明显抑制作用.

    作者:吉维民;朱联;张春妮;庄一义;卢其明 刊期: 2000年第04期

  • PIVKA-Ⅱ检测应用于肝细胞癌的早期诊断

    作为肝细胞癌(HCC)的血清学诊断方法,AFP及PIVKA-Ⅱ已广泛应用于临床检测.AFP阳性率高,PIVKA-Ⅱ则具有显著的疾患特异性,二者互有相补的关系 .推荐同时进行AFP和PIVKA-Ⅱ的检测.

    作者:廖远泉;宋璆 刊期: 2000年第04期

  • Ⅱ型糖尿病患者血清TNF-α和NO的变化及相关性研究

    为探讨血清肿瘤坏死因子(TNF-α)和一氧化氮(NO)在Ⅱ型糖尿病(NIDDM)及其并发症中的变化,分别采用ELISA法和Griess法对76例NIDDM患者血清TNF-α及NO含量进行了检测,并与38例正常人进行比较.结果表明NIDDM患者血清TNF-α和NO代谢产物亚硝酸盐(NO2)含量显著高于正常对照组(P<0.01);有并发症组升高更为显著( P<0.01);血清TNF-α和NO水平与空腹血糖(FPG)不相关;TNF-α与病程、脂蛋白(a )[LP(a)]、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)呈正相关;NO与病程不相关,与LP(a)、TG 、LDL呈正相关;TNF-α和NO之间亦具有显著的相关性.结果提示TNF-α和NO共同参与糖尿病及其并发症的发生发展,动态检测血清TNF-α和NO含量可作为临床观察NIDDM病情变化的细胞因子指标.

    作者:张芬莲;胡永芳;刘艳芹;王建金;孙德军;刘建华 刊期: 2000年第04期

  • MTS/PMS用于超氧化物歧化酶总活性检测的实验探讨

    将MTS/PMS显色系统用于人红细胞超氧化歧化酶总活力测定.在固定的实验条件下,检测待检样品在500 nm处的吸光度值,然后查SOD标准曲线得SOD实测值并通过换算[SOD(U·gHb-1·ml-1)=50×实测值÷36.8÷AHiCN]求得样品中的SOD总活力.该法具有简便、快速、重现性好(批内CV3.36%,批间CV4.31%)等特点.100名正常人的红细胞SOD总活力为91.3±17.8U·gHb-1·ml-1.

    作者:闻平;邰宏明 刊期: 2000年第04期

  • 20例典型流行性出血热患者肾功能及血清酶的动态观察

    笔者对20例典型流行性出血热(EHF)患者做了血清BUN、CO2CP、CRE 、ALT、AST、ALP、γ-GT的动态观察.以探讨以上检测在EHF诊断中的意义.

    作者:乔军;李小平;王小利;关利亚 刊期: 2000年第04期

  • HMDS与AA的骨髓细胞学比较

    低增生型非原始细胞增多骨髓增生异常综合征(HMDS),与低增生型再生障碍性贫血(AA)在临床、血液等方面极为相似.临床工作中,不少HMDS患者被误诊为AA,当部分病例发生白血病变时,才发现原始诊断的错误.

    作者:刘汉芳;武胜 刊期: 2000年第04期

  • 超广谱β-内酰胺酶的检测及其临床意义

    1 概述 超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum beta-lactamases,ESBLs)是质粒介导的一类水解酶,由普通β-内酰胺酶基因(TEM-1、TEM-2、SHV-1)突变而来,多见于使用青霉素类和头孢菌素类抗生素诱导肠杆菌科细菌产生.

    作者:张银旺 刊期: 2000年第04期

  • 急性白血病患者血清肿瘤坏死因子的检测分析

    肿瘤坏死因子(TNF)主要来源于单核巨噬细胞,是具有多种生物学效应的重要生理炎性介质.在正常情况下,机体产生的适量TNF对维持机体内部的稳定状态及抵抗各种致病菌的侵入具有重要的意义.近年来,小鼠和人TNF基因已被克隆化并表达成功, 从而推动了有关TNF生物学效应的深入研究,并为其临床应用提供了广阔前景.本文分析急性白血病(AL)患者血清中TNF的水平变化,以探讨两者之间的关系及临床价值.

    作者:佟力;杨玲;刘月波 刊期: 2000年第04期

  • 丙型肝炎病毒(HCV)NS3抗原检测方法的建立与临床应用

    用基因工程表达的丙型肝炎病毒(HCV)NS3蛋白,制备兔抗-HCV NS3抗体,建立检测HCV NS3抗原的ELISA法.该法特异性好,批内和批间CV分别为5.4% ~8.9%和7.8%~9.8%,临床检测结果表明:60例慢性丙型肝炎患者;30例抗-HCV-IgG 合并IgM阳性病人;250例抗-HCV-IgG病人;200例透析病人;20例白血病病人;150例普通病人;300例供血员中HCV NS3抗原阳性检出率分别为13.3%,23.3%,10.4%,3.0%,5. 0%,2.6%,1.0%.结果显示NS3抗原的检测,可作为一种新的方法,能更好地反映患者体内HCV的感染情况.

    作者:郭满盈;李谋深;李保仝;李越希;杨毓华 刊期: 2000年第04期

  • 用Planella公式估算血清低密度脂蛋白胆固醇

    血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)是血脂分析的常规项目,高LDL-C 与临床心血管病事件发生率密切相关.众多流行病学、遗传学与临床研究证实,血清LDL-C 水平与动脉粥样硬化、冠心病的发生率呈正相关,通常以高LDL-C作为冠心病的首要致病因素.

    作者:郭梅;宋艳康;丁乐顺 刊期: 2000年第04期

  • 两种IgG抗体快速检测试剂的应用

    目的:比较聚凝胺试剂及不完全抗体快速检测试剂.方法:应用台湾聚凝胺试剂及广州血液中心血型研究室提供的不完全抗体快速检测试剂检测临床常规送检的交叉配血标本120例及产前检查标本30例的IgG抗体.结果:120例交叉配血标本中,二种方法均能检出3例自身抗体;产前检查的不完全抗体筛选试验中,两种方法均检测出1例冷抗体;不完全抗体快速检测试剂较聚凝胺试剂测定的IgG抗体效价高于或等于一个稀释度. 结论:聚凝胺试剂及不完全抗体快速检测试剂在交叉配血和不完全抗体筛选试验中,敏感性均较抗人球蛋白法高,且快速简便,不完全抗体快速检测试剂较聚凝胺试剂更为快速简便,更加适合急诊及大量标本的检测.

    作者:郑琼珍;单桂秋;罗广平 刊期: 2000年第04期

  • 流式细胞术DNA含量分析的影响因素探讨

    目的:探讨流式细胞术分析DNA时的影响因素.方法:用FCM对用不同方法制备的标本进行比较分析.结果:对于鼠肝、肺、肾组织,剪碎法优于匀浆器法; 75%~100%之间的乙醇浓度不影响DNA直方图的质量;固定1~3 d不影响DNA直方图的质量; 细胞浓度与染色剂的比例与DNA峰的形状和位置密切相关.结论:在作DNA分析时,细胞悬液的制备首选剪碎法,将细胞浓度调到适范围,并用同一温度的乙醇固定细胞,否则将会降低DNA分析的准确性.

    作者:贺兰湘;周济兰;杨峰 刊期: 2000年第04期

  • 处理CIBA*CORNING 644 K+、Na+、Cl-分析仪常见故障的方法

    CIBA*CORNING 644 K+、Na+、Cl-电解质分析仪以标本用量少、测定速度快、结果准确度好、仪器性能稳定等等优点深受同行和临床科室的欢迎.但是我们在四年多的使用中也遇到一些故障,并摸索出一些处理的方法,现总结如下,供使用该仪器的同道参考.

    作者:宋大宇;刘晓华;陈武 刊期: 2000年第04期

  • SABA 18型全自动生化分析仪常见故障及排除

    SABA 18型全自动生化分析仪具有操作简便、价格低廉、试剂用量少、性能可靠等特点.非常适合在基层医院推广使用,在我科和其它一些医院使用后,检验质量和检测速度都得到了很大提高.经过二年多的使用,摸索到一些常见问题及排除方法,现将常见故障及处理措施介绍如下,供同行参考使用.

    作者:常若云;孙菊兰;韩平治 刊期: 2000年第04期

现代检验医学杂志

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主管:陕西省卫生厅

主办:陕西省临床检验中心,陕西省人民医院