唐梅；王琪；李赫冬；杨凡
目的 构建人促甲状腺激素受体(hTSHR)稳定表达株,用于研究抗甲状腺新药.方法 AgeⅠ/NheⅠ双酶切载体GV266和hTSHR基因,T4连接酶连接构建GV266-hTSHR表达质粒.转染GV266-hTSHR到293T细胞后,Western blot证明hTSHR表达.用Opti-MEM、Lipofectamine 2000、辅助质粒在293T细胞构建GV266包装质粒.qPCR测定包装病毒滴度.用GV266包装质粒、GV266-hTSHR表达质粒共转染293T细胞获得GV266-hTSHR-293T稳定表达株.绿色荧光蛋白(GFP)荧光鉴定稳定表达株.结果 GV266-hTSHR构建物阳性大肠杆菌克隆的DNA测序结果与hTSHR序列比对100％吻合.Western blot显示,过表达hTSHR的HEK293T细胞出现相对分子质量为62×103的目的条带.qPCR测定包装质粒滴度达到了2×108TU/mL.GV266-hTSHR-293T细胞稳定表达株表达GFP荧光.结论 构建了GV266-hTSHR表达质粒,获得了GV266-h TS HRHEK 293T稳定表达株,为研究抗甲状腺多肽提供了必要的实验材料.
作者：唐恭顺 刊期： 2014年第01期
患者,女,40岁,因“全身红斑、水疱、口唇糜烂伴疼痛1+月,发热1周”入院.入院前1+月,患者无明显诱因全身出现红斑、丘疹、水疱,口唇糜烂,伴疼痛.入院前1周发热,高体温达39℃.入院查体:体温37.9℃,躯干、四肢散在分布约黄豆大小红斑、丘疱疹,疱壁薄.双眼睑红肿、糜烂,伴黄色污秽痂,结膜充血.口唇、口腔及外阴红斑、糜烂,伴黄白色分泌物.辅助检查:胸部CT提示胸腺瘤(附图).腹部彩超等未见异常.免疫全套检查IgA、IgG正常.诊断:副肿瘤性天疱疮(PNP)并发胸腺瘤.入院后予甲基强的松龙160 mg/d治疗(共5d),面部皮损分泌物培养查见金黄色葡萄球菌,血培养阴性,予万古霉素1.5 g/d治疗(共14d),体温波动在38～39℃.抗感染治疗10 d后,真菌G试验142.30 pg/mL (＜60),予伊曲康唑0.2 g/d治疗(共5d),患者体温正常,糜烂面愈合,痂皮脱落.患者拒绝行胸腺瘤手术治疗,皮损好转,激素减量至强的松40 mg/d后出院,于门诊随访.
作者：易勤；陈璐；蒋献；夏登梅；郭在培 刊期： 2014年第01期
目的 分析四川地区儿童呼吸道感染人博卡病毒(HBoV)的流行概况和临床特征,探讨HBoV四川分离株衣壳蛋白基因(VP1)变异特征.方法 收集787例呼吸道感染儿童鼻咽分泌物标本,PCR方法检测HBoV,扩增VP1基因序列全长并测序,分析核苷酸和氨基酸变异特征.结果 HBoV的检出率为8.26％(65/787),50.77％(33/65)混合感染其它呼吸道病毒.全年均有检出,主要感染＜3岁的儿童,其中男童检出率高于女童.引起的呼吸道症状主要有咳嗽、发热及咳痰.系统进化树分析表明8株四川分离株均为HBoV1基因型.碱基变异以GA+ AG转换为主,非同义突变大于同义突变.结论 HBoV是四川地区儿童呼吸道感染的重要病原之一;VP1基因核苷酸序列变异以碱基转换为主;氨基酸突变位点可能与免疫逃避有关.
作者：杨晶艳；胡鹏威；陈蕊；鲁蕾；裴晓方 刊期： 2014年第01期
骨关节炎和骨质疏松是影响老年人生活质量的两大主要骨与骨关节疾患.两病发病机制不同却又不无联系.近年来,国内外临床诊疗指南所推荐的一系列用于骨关节炎和骨质疏松的物理治疗方式,成为当前关注的热点问题,但其应用仍存在争议.这主要体现在:目前关于物理治疗对骨关节炎和骨质疏松的研究量较少、质量较差,临床结局测量指标不一致;而一些动物学研究的结果又难以转化为临床实践或在人体试验中证实.因此,物理治疗骨关节炎和骨质疏松研究的方向应是注重科学设计动物实验和临床试验,联合开展基础和临床研究,探讨物理治疗对骨关节炎和骨质疏松的作用机制、临床疗效和安全性,并注重基础研究和临床研究的相互转化;根据综合康复治疗的理念,注重不同物理因子及其参数之间的相互作用和相互配合,寻找佳的治疗方案,努力为骨质疏松和骨关节炎患者解决病痛.
作者：何成奇；王朴 刊期： 2014年第01期
目的 调查人脐带间充质干细胞(HUMSC)治疗对糖尿病大鼠足溃疡中血管内皮生长因子(VEGF)表达变化的影响.方法 用高脂饲料喂养的成年SD大鼠4周并给予链脲佐菌素腹腔注射(首次注射25 mg/kg,1周后再次注射40 mg/kg)制作糖尿病模型,然后挤压坐骨神经,并在足部制作切口涂抹金黄色葡萄球菌诱导大鼠糖尿病神经性足溃疡形成;随后将培养鉴定的HUMSC涂于溃疡表面,治疗10 d.测量溃疡体积,RT-PCR和Western blot测定溃疡组织VEGF基因和蛋白表达变化,免疫组化确定VEGF细胞定位及血管密度变化.结果 HUMSC移植促进足溃疡体积明显缩小(P＜0.05),VEGF基因和蛋白水平表达明显上调(P＜0.05) ;VEGF主要定位于血管;溃疡周组织血管密度明显增加(P＜0.05).结论 HUMSC移植可能通过调节VEGF的有效表达促进糖尿病神经性足溃疡修复.
作者：王瑛；但齐琴；王庆萍；周宁；金醒眆；侯宗柳；彭葆坤；王廷华 刊期： 2014年第01期
目的 将叠氮溴化乙锭(ethidium monoazide bromide,EMA)与PCR技术相结合,建立一种有效、快速检测活肠出血性大肠杆菌O157∶H7的方法.方法 以rfbE为PCR检测靶基因,O157∶H7培养物经EMA处理后制备模板进行PCR检测,并对EMA使用浓度、作用时间等进行优化.结果 不抑制O157∶H7活菌PCR扩增的大EMA浓度为10 μg/mL;抑制2×107 CFU/mL死菌PCR反应的小EMA浓度为0.5 μg/mL;该法对O157∶H7检测的灵敏度为2×104 CFU/mL,结果显示能检出混合体系中含有的1％的活菌.结论 EMA PCR技术能有效检测活的O157∶H7,在突发公共卫生事件的快速检测中具有良好的应用前景.
作者：黄偌颖；方梅；罗影殊；刘衡川；陆巧荣；王国庆 刊期： 2014年第01期
目的 从细胞免疫介导的炎症损伤角度,探讨健脾清化方对阿霉素致局灶节段硬化(focal segmental glomurular sclerosis,FSGS)模型大鼠FSGS的影响.方法 左侧肾切除加尾静脉注射阿霉素致大鼠肾脏FSGS,观察健脾清化方对模型大鼠脾淋巴细胞CD4+/CD8+比值,肾小管间质纤维连接蛋白(FN)mRNA、Ⅲ型胶原(ColⅢ)mRNA、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)6表达的影响.结果 健脾清化方能明显降低模型鼠脾淋巴细胞CD4+/CD8+比值,肾小管间质FN mRNA、ColⅢmRNA、TNF-α、IL6水平.结论 健脾清化方对阿霉素肾病模型大鼠肾脏FSGS有一定的改善作用,该机制可能与健脾清化方抑制细胞免疫介导的炎症损伤有关.
作者：马晓红；何立群 刊期： 2014年第01期
目的 了解四川省凉山州彝族城乡居民高血压患病率、知晓率、治疗率和控制情况.方法 对自然人群采用整群随机抽样的方法,于2007年6～9月在四川省凉山州西昌市区及3个乡村的20岁以上的彝族居民开展横断面调查.本研究纳入1 255例有完整人口学资料和实验室检查资料的调查对象进行分析,分为城市/农村、男/女两个层次进行高血压患病率、知晓率、治疗率和控制率的比较.结果 彝族居民高血压标化患病率为17.3％,城市居民标化患病率高于农村居民(25.9％ vs.8.9％,P＜0.001).彝族居民高血压知晓率、治疗率和控制率分别为29.8％、26.1％、8.8％;城市居民的知晓率(35.0％ vs.13.6％,P＜0.001)和治疗率(31.1％ vs.10.6％,P＜0.001)均高于农村居民.年龄增大、女性、年收入≥10 000元、超重或肥胖、总胆固醇升高是彝族城市居民高血压的独立危险因素;而彝族农村居民高血压的患病率仅与年龄和总胆固醇呈独立正相关.结论 彝族居民高血压患病率高,而知晓率、治疗率和控制率低,需加强防控力度.
作者：高赟；陈涛；冉兴无；任艳；谢小华；田浩明 刊期： 2014年第01期
患者,男,15岁,因反复发热6月入院.患者于6月前无明显诱因出现发热,高体温39.8℃,于当地医院发现脾脏及全身多处淋巴结长大,EB病毒(EBV) DNA 6.15×106拷贝/mL,骨髓涂片:异常淋巴细胞0.4,转入我院小儿外科,行“脾脏切除,腹腔内淋巴结活检”术,术后活检诊断为传染性单核细胞增多症,给予更昔洛韦抗病毒治疗后,体温及血液学各项指标恢复正常后出院.入院前2月患者受凉后出现发热,高体温40℃,伴咳嗽、咯少量黄色脓痰及全身淋巴结长大,收入我院,诊断为传染性单核细胞增多症并发肺部感染,给予更昔洛韦、哌拉西林钠他唑巴坦、甲基强的松龙等治疗后好转出院.
作者：卢家桀；徐缓；唐红 刊期： 2014年第01期
目的 观察罗格列酮对高脂饲料喂养的肥胖大鼠肾脏是否具有保护作用并探讨其机制.方法 雄性Wistar大鼠随机分为对照组、肥胖组、罗格列酮组,每组8只.分别予以普通饲料喂养4周后以生理盐水灌胃、高脂饲料喂养4周后以生理盐水灌胃或4 mg/(kg·d)罗格列酮灌胃.总共喂养24周后,称重,测量血液中的生化指标,留取尿液测定尿白蛋白/肌酐比值(ACR),测定主动脉血管舒张功能.观察肾脏形态学及肾小球CD31表达,测定肾小球一氧化氮(NO)水平,Western blot检测肾小球血管内皮生长因子(VEGF)蛋白水平.结果 肥胖组大鼠体质量、内脏脂肪质量、血游离脂肪酸(FFA)与甘油三酯(TG)水平较正常组增加(P＜0.05);与肥胖组比较,罗格列酮组大鼠体质量无明显变化,内脏脂肪质量、血FFA与TG下降(P＜0.0l),但仍高于正常组(P＜0.05).肥胖组大鼠ACR水平较正常组增加(P＜0.01),罗格列酮组大鼠ACR较肥胖组降低(P＜0.01),但仍高于正常组(P＜0.05).肥胖组大鼠内皮依赖性舒张功能(EDV)较正常组受损(P＜0.05),罗格列酮组大鼠EDV较肥胖组大鼠改善(P＜0.05),接近正常大鼠水平(P＞0.05).与正常组比较,肥胖组大鼠肾小球体积增大(P＜0.01),CD31表达增多(P＜0.05);罗格列酮组大鼠较肥胖组大鼠肾小球体积减小(P＜0.01),CD31表达减少(P＜0.05),接近正常大鼠水平(P＞0.05).与正常组比较,肥胖组大鼠肾小球VEGF水平增高(P＜0.05),肾小球NO水平下降(P＜0.05).罗格列酮组大鼠较肥胖组大鼠肾小球VEGF水平降低(P＜0.05),但仍高于正常组(P＜0.05),肾小球NO水平增加(P＜0.05),但仍低于正常组(P＜0.05).结论 罗格列酮降低肥胖大鼠尿白蛋白排出量减轻肾小球肥大,对肥胖大鼠肾脏有保护作用.其机制可能与改善脂质代谢,纠正肾小球VEGF-NO轴失衡及改善血管内皮细胞功能有关.
作者：孙晓东；余叶蓉 刊期： 2014年第01期
目的 观察亚临床甲状腺功能减退患者骨密度及骨代谢指标的变化,探讨甲状腺功能对骨密度及骨代谢指标的影响.方法 纳入符合亚临床甲状腺功能减退症标准的患者122例(亚临床甲减组),应用双能X线测定仪(DEXA)检测其骨密度(BMD),并检测其血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3),游离甲状腺素(FT4),促甲状腺素(TSH),血钙(Ca)、血磷(P)、碱性磷酸酶(ALP),按性别、绝经情况分层,同时纳入与其年龄和性别相匹配的健康志愿者153例(对照组),比较两组间骨密度及骨代谢指标的差异.结果 亚临床甲减组骨量丢失高于对照组(P＜0.005).亚临床甲减组血钙值均较对照降低,差异有统计学意义(P＜0.05),亚临床甲减组男性血磷、骨密度指标T值、Z值高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),绝经前妇女Z值高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01),而绝经期前妇女和绝经期后妇女T值、血磷较对照组差异均无统计学意义(P＞0.05).亚临床甲减组ALP较对照组差异均无统计学意义(P＞0.05).多元线性回归分析,性别(B=0.543,P＜0.000 1)与T值正相关,即与男性相比女性的T值更低;T值与绝经(B=-0.274,P=0.001),年龄(B=-0.161,P＜0.000 1),TSH(B=-0.108,P＜0.000 1)负相关.结论 亚临床甲状腺功能减退患者存在血钙下降,骨密度降低.
作者：梁利波；王佑娟；张玫；黄亨建；李双庆 刊期： 2014年第01期
目的 研究既往同侧肾脏手术史对肾结石患者再行经皮肾镜碎石术(PCNL)的影响.方法 收集我院2009年9月至2012年5月期间既往有同侧肾脏手术史,因复发性肾结石再行PCNL的患者共66例为病例组,随机抽取同期因初次肾结石行PCNL的患者72例为对照组.评价指标包括:手术时间、术中和术后出血量、术后残石率、术后严重感染/发热率、术中和术后输血率、二期手术率、住院天数及住院费用.结果 与对照组比较,病例组再行PCNL的手术时间(P＜0.001)、术后残石率(P=0.015)和术后严重感染/发热率(P=0.001)均增加,而术中和术后失血量、术中和术后输血率、二期手术率、住院天数和住院费用的差异无统计学意义;既往同侧肾脏PCNL、而非开放手术会增加再行PCNL术后二期手术率(P=0.002).结论 既往肾脏手术史可能增加再行PCNL术的手术风险和难度.
作者：徐鹏；王峥；李玉涛；沈朋飞；魏武然；王佳 刊期： 2014年第01期
目的 探讨信号转导与转录激活因子1(STAT1)、干扰素-γ(IFN-γ)在口腔扁平苔藓(OLP)病损发生发展中的作用.方法 48例OLP及10例正常口腔黏膜石蜡包埋组织,采用免疫组化SABC法检测相应组织中STAT1和IFN-γ蛋白的表达情况,分析其与OLP患者临床病理特征的相关性.结果 ①STAT1、IFN-γ在OLP病损区表达阳性率均高于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).②OLP病损区STAT1阳性表达率在IFN-γ阳性组高于IFN γ阴性组,差异有统计学意义(x2=5.042,P＜0.05);IFN-γ和STAT1表达之间存在正相关关系(r=0.324,P＜0.05).③STAT1阳性表达率在病程短于6个月OLP组高于病程长于6个月OLP组,差异有统计学意义(x2 =5.077,P＜0.05);IFN-γ阳性表达与基底细胞液化程度呈负相关(r=-0.388,P＜0.05).结论 OLP局部组织中存在STAT1和IFN-γ蛋白高表达,IFN-γ/STAT1通路在OLP局部病损形成过程中起到推动作用.
作者：何娟；蔡扬 刊期： 2014年第01期
目的 探讨氢气对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机制.方法 将18只成年雄性SD大鼠随机分成假手术(Sham)组、缺血再灌注(I/R)组、氢气治疗(H2)组3组,每组6只.I/R组大鼠右肾切除术后,制备左肾缺血再灌注损伤模型;Sham组大鼠右肾切除后,仅分离而不夹闭左肾肾蒂;H2组从再灌注前10 min开始吸入浓度为2.5％的氢气130 min,其余操作与I/R组相同.比较再灌注24h3组之间血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN),肾组织丙二醛(MDA)水平以及肾小管损伤的组织病理学半定量评分.结果 I/R可导致大鼠肾脏严重损伤.吸入浓度为2.5％的氢气可以降低大鼠BUN、Cr和MDA水平(P＜0.05);同时,H2组肾组织病理学评分低于I/R组(P＜0.05).结论 吸入低浓度的氢气对肾脏缺血再灌注损伤有保护作用,其机制与减少肾组织中MDA的生成有关.
作者：曾葵；黄瀚；江晓琴；陈筱静；黄蔚 刊期： 2014年第01期
目的 研究Ⅰ型胶原蛋白α1 (COLIA1)基因Sp1位点基因多态性与中国汉族老年性椎间盘退化的相关性.方法 以65岁以上汉族老年人为研究对象,375例中国汉族椎间盘退变疾病患者(病例组)与118例中国汉族非椎间盘退变疾病受访者(对照组),PCR检测COLIA1基因第一个内含子Sp1位点G→T多态性.检测病例组和对照组间等位基因频率/基因型分布频率的差异.结果 对照组和病例组一般人口学特征差异无统计学意义,两组COLIA1基因Sp1位点的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡;对照组和病例组中基因型分布频率分别为GG:264 (70.4％)/82 (69.5％)、GT:102 (27.2％)/26 (22.0％)、TT:9(2.4％)/10(8.5％),两组差异具有统计学意义(x2 =9.527,P=0.009);等位基因频率分别为G:630 (84.0％)/190 (80.5％)、T:120 (16.0％)/46(19.5％),差异无统计学意义(x2=1.563,P=0.211).结论 COLIA1 Sp1基因多态性可能是中国汉族老年椎间盘退化的遗传危险因素.
作者：林鹏；符俏 刊期： 2014年第01期
目的 寻找能预测胃腺癌(gastric adenocarcinoma,GAC)浸润、转移及预后的指标.方法 采用免疫组织化学法检测145例胃腺癌和50例癌旁正常胃黏膜组织抗癌1号(KAI1)、CD34及D2-40的表达.通过CD34的阳性表达计数微血管密度(microvessel density,MVD),通过D2-40的阳性表达计数淋巴管密度(lymph vessel density,LVD).分析KAI1、MVD及LVD之间的相互关系,以及它们与胃腺癌浸润、转移及预后的关系.结果 在癌旁正常胃黏膜组织中,KAI1的阳性表达率、MVD和LVD分别为92.0％、(9.2±7.8)/低倍镜(LP)和(7.5±7.6)/LP;在GAC组织中,KAI1、MVD和LVD分别为37.2％、(21.6±9.1)/LP和(22.6±12.7)/LP,两组之间差异均有统计学意义(P＜0.05).KAI1的表达水平、MVD及LVD的高低与肿瘤细胞的pTNM分期、浸润深度、淋巴结转移与否有关(P＜0.05);KAI1的表达与MVD及LVD呈负相关,MVD与LVD呈正相关(P均＜0.05).Cox回归分析示KAI1的表达、MVD及pTNM分期是影响GAC患者术后生存时间的独立因素.Kaplan-Meier生存分析表明,MVD≥22组和LVD≥23组患者其术后5年生存率低于MVD＜22组和LVD＜ 23组的患者(P＜0.01);KAI1表达阳性的患者其术后5年生存率高于阴性患者(P＜0.01).结论 早期联合检测KAI1、CD34及D2-40对GAC的浸润、转移及预后判断有重要意义.
作者：周蕾；武世伍；俞岚；宋文庆；承泽农；王丹娜 刊期： 2014年第01期
目的 观察采用经心脏逆行置管灌注肝脏的方法分离小鼠原代肝细胞的效果.方法 对传统的分离原代肝细胞方法(Seglen两步胶原酶灌注法)进行改良,即从小鼠右心房的裂口处经肝上下腔静脉向下方置管,并以输液器滴注含体积分数10％胎牛血清的胶原酶灌注液进行肝脏灌注.评价此法与传统方法的置管成功率及所得肝原代细胞的数量及活力.结果 改良组总的置管操作成功率高达95％,且在一次置管成功率上改良组高于传统组(94.7％ vs.68.8％,P＜0.05).改良组小鼠肝脏灌注均匀,肝细胞产量高达1.07×106/g小鼠体质量,细胞活力平均为92.16％,两者均高于传统组(分别为0.99×106/g小鼠体质量及86.44％,P＜0.05或P＜0.01).结论 经心脏逆行置管灌注法分离小鼠原代肝细胞简便易学,重复性高,且能保证分离所得的肝细胞产量和质量.
作者：余招焱；白燕南；张涛；吴泓；曾勇 刊期： 2014年第01期
目的 了解汶川地震后1年绵竹市板房社区老年人孤独感的现状及其影响因素,以指导对特殊情况下的老年人的心理干预措施.方法 对绵竹市居住在板房社区的60岁以上的老年人进行问卷调查.结果 调查的188名老年人中只有2名无孤独感,其余186名老年人均有以轻中度为主的孤独感.社会支持得分越高(B=-0.366)、家庭功能得分越高(B=0.237)、兴趣数量越多(B=-0.110),孤独得分越低,孤独症状越轻.结论 地震后板房社区老年人的心理状态不容忽视,不仅需要医务工作者给予专业的指导和关怀,也需要家庭、社区和政府给予足够的重视,采取一定措施减轻或预防老年人的孤独.
作者：陈妍伶；陈红；李芸；区美兰；冯灵；郭红霞；陈茜；钱黄碧君 刊期： 2014年第01期
目的 探讨Neurac训练对神经根型颈椎病(cervical radiculopathy,CR)的临床疗效.方法 纳入60例符合研究标准的CR患者,随机分为Neurac治疗组和对照组.对照组接受每周2次颈椎牵引、手法治疗和电疗.Neurac治疗组除了接受上述治疗外,同时接受Neurac训练.在治疗前、治疗后1周和2周对两组患者进行数字疼痛评分(numerical pain rating scale,NPRS)和颈部功能受限指数(neck disability index,NDI)评分.结果 治疗后两组NPRS和NDI评分均较治疗前改善(P＜0.05).Neurac治疗组改善程度大于对照组(P＜0.05).结论 Neurac训练可增加牵引、手法和电疗治疗对CR的效果.
作者：杨霖；雷中杰；姜俊良；张黎明；何成奇 刊期： 2014年第01期
目的 研究小鼠Rnf148基因表达的时空特异性及其环指结构域的E3泛素连接酶功能.方法 提取不同成年小鼠组织、不同胚胎期组织和出生后小鼠睾丸组织的总RNA,通过实时荧光RT-PCR和Northern杂交分析小鼠Rnf148基因的表达谱.构建包含整个Rnf148蛋白的环指结构域与谷胱甘肽-S-转移酶(GST)的融合蛋白原核表达载体,在BL21细菌中诱导表达后,经GST琼脂糖凝胶纯化GST-Rnf148重组蛋白.体外泛素化反应试验检测GST-Rnf148重组蛋白的E3泛素连接酶功能.结果 在小鼠13种不同器官组织中,Rnf148 mRNA仅存在于睾丸组织中.进一步Northern杂交验证了只在小鼠睾丸组织表达一个1.2 kb左右的Rnf148基因mRNA片段.小鼠Rnf148基因在胚胎期及出生后3周内不表达,出生后21 d开始表达,25 d后达到表达高峰并一直持续表达.实验成功诱导表达并纯化了GST-Rnf148重组蛋白,体外蛋白泛素化反应显示该重组蛋白具有E3泛素连接酶的功能.结论 小鼠Rnf148基因特异地表达在出生3周后的睾丸组织中,Rnf148蛋白的环指结构域具有泛素连接酶活性.
作者：刘运强；陶大昌；廖顺尧；杨元；马用信；张思仲 刊期： 2014年第01期
四川大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：四川大学
