HBV-DNA与HBV-TRFIA检测结果比较分析

白艳丽；李建平；计玉仙

关键词：乙肝病毒(HBV)及其血清学标志物(HBV-M), 荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR), 时间分辨荧光技术(TRFIA)

摘要：目的探讨乙肝患者血清HBV DNA的表达水平及其与乙肝标志物的相互关系,了解用TRFIA法检测HBV-M,其对应的HBV-DNA拷贝数.方法用荧光聚合酶链反应(FQ-PCR)对患者进行HBV-DNA检测,同时用TRFIA法定量测定乙肝表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体和核心抗体指标.结果在39例患者血清中检测出HBV-DNA病毒基因拷贝值范围为2.1×103～3.8×108copies/ml,平均含量为2.95×106copies/ml,总阳性检出率为43.3%;20例HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗-HBc(+),其HBV-DNA阳性为16例,阳性检出率为80%;42例HBsAg(+)、抗-HBe(+)、抗HBc(+),其HBV-DNA阳性为17例,阳性检出率为40.5%;9例HBsAg(+)、抗-HBc(+),其HBV-DNA阳性为3例,阳性检出率为33.3%;10例抗-HBs(+)、抗-HBe(+)、抗-HBc(+),其HBV-DNA阳性为1例,阳性检出率为10%;3例HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗-HBe(+)、抗-HBc(+),其HBV-DNA阳性为2例,阳性检出率为66.7%;而2例HBV-M全(-)的HBV-DNA也全(-).结论FQ-PCR是测定乙肝病人血清中HBVDNA含量较特异、灵敏的方法,能反映乙肝病毒的复制水平和活跃程度;乙肝血清学标志物定量检测结合HBV DNA定量检测能分别从蛋白质水平和DNA水平反映患者体内病毒的存在状态和机体的免疫状况,对疾病诊断,病情监测,药效评价,愈后监控及筛选用药方案等都具有很高的实用价值.

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临床生化实验室对仪器性能评价探讨

多年来,临床检验质量一直是检验工作者关注的核心问题,如何提高临床实验室的质量,特别是在与国际临床实验室接轨的同时,这就要求我们实验室必须使用能确保检验结果准确和可靠的检测系统,由于仪器在检测系统中起关键环节,因此,对仪器性能的评价就非常重要,我们对仪器性能评价指标及结果处理做初步探讨,供临床检验工作者参考.

作者：李顺君刊期： 2004年第05期
芯片检测HBV DNA聚合酶区基因突变及其临床应用

目的基因芯片方法检测HBV DNA聚合酶区基因突变,并初步探讨其临床应用价值.方法PCR扩增HBV DNA P区nt455～796片断.与预制的基因芯片杂交,运用激光共聚焦荧光检测系统扫描芯片分析基因突变类型.结果芯片检测HBV DNA P区变异具有较好的特异性和准确性,初步应用显示:慢性乙肝组aa528/552突变率分别为8.6%和9.6%,而无症状肝炎组扣重症肝炎组突变率均为0;拉米夫定治疗组与非拉米夫定治疗组比较,aa528突变率分别为10.5%和8.1%,aa552突变率分别为15.8%和8.1%.结论研究显示HBV DNA聚合酶区基因多态性分布与病情轻重无关,而与病程慢性迁延有关;拉米夫定在耐药突变中发挥了重要作用;基因芯片检测乙肝患者耐药基因有着十分重要的应用价值.

作者：徐建辉；孙承龙；王惠民；王跃国；张冬雷；赵建龙；吴月平刊期： 2004年第05期
OLYMPUS AU2700全自动生化分析仪使用常见问题分析

OLYMPUS AU2700全自动生化分析仪是由日本OLYMPUS公司生产的大型、高档生化分析仪器,它采用先进的光一数码转移技术,具有速度快、精度高、能自动报警、自动复查等许多优点.我们经过一年多的使用,获得了许多体会,特总结报告如下,以期与各位同行共同探讨.

作者：宿振国；周玉明；李凤英；纪冰；鞠胜芝刊期： 2004年第05期
COULTER GEN'S血细胞计数仪常见白细胞分类故障与处理

COULTER GEN'S血细胞计数仪是美国库尔特公司生产的五分类全自动血液分析仪,该机操作简单、检测速度快、重复性好、准确度高,极大地满足了临床血常规检测的需要.该机器在我科使用二年来,运行状态良好,但在使用过程中笔者屡次发现仪器提示白细胞(WBC)分类故障,现将常见的故障现象及原因与解决方法介绍如下:

作者：曾雪霞刊期： 2004年第05期
时间分辨荧光免疫技术在HBV定量检测中的应用

目的探讨铕标记时间分辨荧光免疫技术(TR-FIA)对乙型肝炎病毒标志物(HBV M)定量检测在临床的应用价值.方法TR-FIA法、放射免疫(RIA)法及ELISA法检测并统计分析.结果TR-FIA法较RIA法灵敏度高,测量范围宽,准确度相近.结论在乙肝病毒标志物定量检测上,两种方法检测结果的临床符合性基本一致,TR-FIA较RIA测量范围宽,标记物稳定,无放射性污染,具有良好的应用价值.

作者：党淑萍；张新利；谭玉华刊期： 2004年第05期
ACS:180SE常见故障及解决办法

全自动化学发光免疫分析技术具有敏感度高,精密度和准确性好,试剂稳定无毒害,测定耗时短,自动化程度高,操作简便等优点,可用于甲状腺系列、肿瘤系列、性腺系列、药物浓度等项目的检测.但使用中会出现一些故障,尽管我们可以利用在线分析进行解决,但如何正确合理使用仪器,及时做好日常维护和保养对于减少故障发生率,保证检验工作的正常进行是尤为重要的.笔者在使用ACS-180SE的过程中有些心得与大家共享,现介绍如下:

作者：董作亮；黄毅文；宋溪刊期： 2004年第05期
顶空气相色谱法分析生活饮用水中的卤代烃方法探讨

随着生活水平的提高,人们对生活饮用水的质量要求越来越高,氯化消毒在防止大规模水性疾病暴发流行方面起了重要作用.饮用水由于加氯消毒而产生一些新的有机卤代烃,氯仿和四氯化碳是其中的主要成分;氯仿和四氯化碳有致癌、致畸及慢性致毒作用,故被列为重点检测指标之一.此实验结合本实验室实际情况,用气相色谱法电子捕获检测器对水中易挥发的卤代烃进行测定,该方法具有快速灵敏、简单易行的优点,同时精密度和准确度也符合检测的要求.

作者：冯芸；劳宝法；周睿刊期： 2004年第05期
康艺全自动生化分析仪常见故障及处理

我科自1998年引进了一台芬兰产的康艺KONEPRO全自动生化分析仪,该仪器操作简便,结果准确可靠.经过几年的摸索,我们在仪器的使用及维修方面积累了一些经验,现介绍如下,供同行参考.

作者：黄永东；张艳刊期： 2004年第05期
规范检验科质量管理是防范医患纠纷的前提

《医疗事故处理条例》的正式实施和医疗制度的改革,增强了患者的自我保护意识,也对检验科的各项服务和质量提出了更高的要求.检验质量的好坏直接影响着临床医师的诊疗,如不能准确提供检验数据,无论什么原因,病人只要拿到化验报告单(化验单作为客观病历可以复印),检验科就必须承担无过的举证.所以,检验科要想杜绝医疗事故和纠纷,就必须从自身做起,规范检验科的各项管理,提高检验质量,增加服务内容,改善服务态度,培养良好的职业道德.下面就规范检验科管理提出自己的一些看法,供同道商讨.

作者：连莲；刘丽刊期： 2004年第05期
CK、AST和cTnT对急性心肌梗死诊断的比较

目的对急性心肌梗死(AMI)可疑患者检测CK、AST和cTnT并进行比较,为AMI的早期诊断提供较合理的检测指标.方法对123例高度可疑的AMI患者在症状出现后24 h内系列检测CK、AST和cTnT,比较它们对AMI诊断的敏感性和特异性,并进行优化组合.结果①在症状出现后24 h内CK、AST和cTnT对AMI的敏感性分别为89.3%,92.2%和94.2%;特异性分别为80%,65%和100%;②CK比AST提前出现阳性(平均早约1 h),而且升高水平明显高于AST;③CK与cTnT联合检测对AMI的敏感性为97.1%,特异性为80%,AST检测没有增加其敏感性和特异性.结论CK与cTnT联合检测对AMI具有高度的敏感性和特异性,在此基础上再检测AST不会增加其敏感性和特异性.

作者：赵芳；赵缜刊期： 2004年第05期
微柱凝集技术检测血小板抗体

血小板输注无效(refractoriness to platelet transfusion,RPT)是长期困扰临床的棘手问题.RPT的产生有两种因素,即免疫性因素和非免疫性因素,反复输血者中约有30%～50%可能产生抗血小板抗体.检测血小板抗体的方法主要有固相红细胞黏附试验、双抗体夹心固相酶联免疫法、血小板单克隆抗体固定实验等.本文采用微柱凝集技术检测血小板抗体,方法简便,结果可靠,报告如下.

作者：翁彬；王雷萍刊期： 2004年第05期
麦迪克氯电极的复活及评价

麦迪克氯电极是离子选择性电极,仅对氯离子敏感.在通常条件下,有电极老化和蛋白质中毒等缺点[1].我们在实际工作中发现,该电极的这一缺点可以被纠正,即可以使氯电极恢复其对氯离子的敏感性.

作者：李丰尧；孙开梅；秦学军刊期： 2004年第05期
细菌抑制法筛查新生儿苯丙酮尿症标准曲线拟合公式的选择

采用细菌抑制法筛查新生儿苯丙酮尿症,对试剂盒所提供标准品(Y)和相应细菌环直径(X)经过微机处理,比较了7种不同拟合方式其曲线拟合的准确性,利用各回归方程计算结果与理论值的相符程度,结果表明:应用lgy=a+blgX方程计算较为合适.

作者：李增新；张明霞刊期： 2004年第05期
多发性骨髓瘤(MM)免疫鉴定与讨论

目的探讨多发性骨髓瘤患者血清单克隆免疫球蛋白(M-蛋白)的分布及临床意义.方法收集2003年1月～2003年11月临床血液学诊断MM患者100例,分别对其血、尿各项免疫检测进行分析.结果不同类型的MM患者各项实验结果有明显差异.血清蛋白电泳出现密集的M蛋白带,扫描呈明显高尖峰者见于IgG型、IgA型和部分IgD型、轻链型及非分泌型无M蛋白带;尿本-周蛋白阳性者以轻链型IgD型多见,IgA型较少见,非分泌型均阴性.血清蛋白定量总蛋白及球蛋白明显增高,白/球比例倒置者主要见于IgG型和IgA型,而IgD型轻链型及非分泌型多在正常范围.免疫球蛋白定量IgG型、IgA型和IgD型除相应的免疫球蛋白单克隆增高外,其余各类免疫球蛋白均减低,轻链型及不分泌型各类免疫球蛋白均明显减低.结论不同类型的MM患者具有不同的预后,可作为临床治疗的参考依据.

作者：牛颖；翟玉华；宿莉刊期： 2004年第05期
IgA肾病与肿瘤坏死因子β基因多态性的关联性研究

目的探讨江苏汉族人群肿瘤坏死因子β(tumor necrosis factor β,TNFβ)1069位点等位基因多态性与IgA肾病的关系.方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法对84名健康人和45例IgA肾病患者TNFβ基因的单碱基突变多态性进行了分析.结果IgA肾病患者的TNFβ*2等位基因频率(67.4%)较正常人(55.1%)明显升高(P=0.015,RR=1.68).结论TNFβ*2等位基因频率与IgA肾病发病易患性相关.

作者：倪红兵；张芹；鞠少卿；王跃国；徐云；王惠民刊期： 2004年第05期
大便乳糖测定在婴幼儿腹泻诊疗中的应用研究

目的用醋酸铅定性法检测迁延性慢性腹泻婴幼儿大便乳糖,统计其年龄分布,并探讨其临床意义.方法用醋酸铅加氢氧化铵法检测232例慢性腹泻患儿大便乳糖.结果四个年龄组中,随年龄增加阳性率减低,其中1.5～3 y阳性率与总体阳性率有显著差异(P＜0.01).结论乳糖不耐受是小儿腹泻的一个重要原因,且患儿年龄越小,阳性率越高.大便乳糖的检测对诊断小儿乳糖不耐受症有重要作用.

作者：李小平；刘志刚刊期： 2004年第05期
尿NAG、RBP的变化在肾功能正常的肾病患者中的应用

目的探讨肾功能正常的肾小球和肾血管疾病患者尿NAG、RBP的变化,以确定在上述患者中尿NAG和RBP的应用价值.方法选择肾功能正常的慢性肾小球肾炎患者(CGN)20例、原发性肾病综合征(NS)未缓解期患者18例、高血压肾损害患者(HN)10例、糖尿病性肾病患者(DN)20例,分别进行尿NAG/尿肌酐、RBP检测,并与12例正常人对照.结果与正常组相比,各肾脏病组尿NAG/尿肌酐、RBP均有不同程度升高,以NS组明显.结论肾小球扣肾血管疾病在出现肾功能减退之前,即可能存在一定程度的肾小管-间质损伤,从而在尿NAG和RBP的变化中反映出来.

作者：金磊；孟伟；龚学忠；石娟娟；张珏刊期： 2004年第05期
Resistin与肥胖症和糖尿病的关系及其意义

胰岛素抵抗(IR)和β细胞分泌功能障碍系Ⅱ型糖尿病发病过程中的一个重要环节.肥胖会引起胰岛素抵抗,是造成Ⅱ型糖尿病的主要因素之一.通过研究胰岛素阻滞物(insulin resistance,Ⅱ型糖尿病或成人发作型糖尿病的明显特征),已经找到了二者之间的一个连环.脂肪细胞作为一系列重要的肽源,可影响葡萄糖和脂肪代谢.Steppan等[1]在研究一类抗糖尿病新药thiazoliinedjones(TZDs)的作用机制时,发现识别出的一种叫做resistin(resistance to insulin)的激素,它是由脂肪细胞分泌的一种独特的促胰岛抵抗的信号分子.Resistin至少可部分的解释肥胖病与糖尿病之间的关系[1,2].

作者：郭炫；王刚；范桂香刊期： 2004年第05期
小儿肺炎支原体感染不同血清学方法检测及临床应用

目的通过对小儿肺炎支原体感染不同血清学方法检测的结果探讨,评价几种方法对肺炎支原体感染的诊断价值.方法选择儿科病房以呼吸道感染收治的住院患者161例,分别采用SERODIAMYCO凝集试验、ELISA法、金标渗滤法检测血清抗MP IgM和冷凝集试验.结果161例受检样品中阳性结果分别为33例(20.5%),28例(17.4%),22例(13.7%),冷凝集试验阳性结果13例(8.1%).血清抗MP IgM敏感性分别为94.3%,80%,62.9%;特异性分别为97.7%,96.7%,99.2%;冷凝集试验敏.感性为37.1%,特异性为94.7%.结论抗MP IgM是机体受肺炎支原体感染时早出现的特异性抗体,血清抗MP IgM检测具有操作简便、灵敏度高、特异性强能早期诊断的优点,目前适用一般实验室常规应用.

作者：庞保军；朱桂峰；刘桂莲；胡艳军；吴红敏；蔡新萌刊期： 2004年第05期
淋球菌外膜蛋白IB的纯化与鉴定

目的分离淋球菌外膜蛋白IB,进而研究其结构、功能及遗传性.方法用十六烷基溴化铵粗提外膜蛋白IB,两性表面活性剂(N-十四烷基-N,N-二甲基-3-氨-1-丙烷磺酸盐(Z314)萃取后行DEAE-Sepharose CL-6B离子交换层析.间接ELISA法检测其活性和特异性.结果SDS-PAGE电泳显示纯化后外膜蛋白IB为单一蛋白区带,分子量为36.3 kD,可见先扫描纯度为98.5%.间接ELISA证实其抗原性良好、特异性较强.结论纯化外膜蛋白IB可用于淋球菌研究.

作者：郑和平；余模松刊期： 2004年第05期