学术投稿

FQ-PCR技术检测乙型肝炎患者血清及单个核细胞中的HBV-DNA

谢番妮;潘杰;唐少华

关键词:外周血单个核细胞, 乙型肝炎病毒核酸, 聚合酶链反应
摘要:目的研究慢性乙肝患者外周血单个核细胞(PBMC)中HBV-DNA的存在及其与血清HBV-DNA的关系.方法用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测55例慢性乙肝患者的血清和外周血单个核细胞中的HBV-DNA.结果HBeAg(+)组血清与PBMC中HBV-DNA的阳性率分别为96%(24/25)和100%(25/25);HBV-DNA含量(以均值士标准差,拷贝/ml表示)分别为7.16±0.83和4.56±0.78,两者存在相关性(r=0.445,P<0.05),HBeAg(一)组血清与PBMC中HBV-DNA的阳性率分别为46.7%(14/30)和56.7%(17/30),HBV-DNA含量分别为5.81±1. 07和4.09±1.14,两者存在相关性(r=0.549,P<0.05).结论HBV可存在于感染者PBMC中,PBMC中HBV的存在与HBV病毒的传播和病情进展有一定相关性,慢性乙肝患者的血清和PBMC中HBV-DNA的联合检测可作为临床对患者病情的判断和药物治疗的辅助指标.
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  • 血清中一氧化氮浓度与精子活动度关系的分析

    目的探讨个体血清一氧化氮浓度对精子运动能力的影响.方法用721分光光度计测定血清中一氧化氮浓度,用OLYMPUS显微摄影系统等自动分析精子的运动情况.结果一氧化氮浓度在60~93μmol/L之间时显著促进精子的运动,一氧化氮浓度过高(>93μmol/L)和过低(≤59 μmol/L)都会抑制精子的运动.结论精子运动能力与个体血清中一氧化氮浓度有关.

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    洗板机是ELISA检测法中的重要工具,其洗涤效果直接影响到检测结果的准确性.DEM-III自动酶标洗板机在使用过程中,虽然洗涤效果很好,但还有值得改进的地方.

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    作者:顾向明;王胜岚;黄阶胜 刊期: 2005年第01期

  • 一起AC-900血细胞计数仪少见故障的排除

    AC-900是瑞典SWELAB公司的三分类单通道血液分析仪,操作简单,易于调试,我院1999年引进后,在日常工作量不大的情况下,正确使用,能够保证临床血液分析的准确性,但日常维护必不可少,近日我们排除了一起少见的故障很有体会.

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  • 早期免疫干预高危哮喘儿的γ-干扰素、白细胞介素及IgE的变化研究

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    作者:胡应龙;李志辉;周凤娟 刊期: 2005年第01期

  • 游离PSA和复合PSA在前列腺癌诊断中的应用

    目的评估三种形式的前列腺特异性抗原:总前列腺特异性抗原(tPSA)、游离前列腺特异性抗原(fPSA)、复合前列腺特异性抗原(cPSA)及其比值在前列腺癌诊断中的应用.方法150名研究对象分为三组:正常对照组50人,前列腺增生(BPH)组50人,前列腺癌(PCa)组50人.用全自动化学发光免疫法分别测定他们的tPSA、fPSA和cPSA,并计算其比值.结果Pca组的cPSA/tPSA、fPSA/tPSA和fPSA/cPSA比值的均值与BPH组有显著差异(分别为91.0%/68.0%,12.1%/26.3%和13.3%/38.8%,P<0.001),fPSA/cPSA与fPSA/tPSA比值密切相关(r=0.882 0).结论与tPSA相比,cPSA/tPSA、fPSA/tPSA和fPSA/cPSA都可增强其对BPH和PCa的鉴别诊断作用.

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    作者:宋建新;苏敏;张芹;方蒡;甸自金;欧阳红梅;陈斌;台虹 刊期: 2005年第01期

  • HCV基因分型检测芯片的临床应用及意义

    目的评价HCV基因分型检测芯片在HCV基因分型中的初步应用及意义.方法对117例抗HCV阳性和33例抗HCV阴性的血清标本同时进行基因芯片分型检测,并与测序结果进行比较.结果HCV基因分型芯片共检测出阳性92例,其中1b型71例(77.2%),2a型8例(8.7%),其它1a型3例(3.2%),3b型6例(6.5%),6型1例(1. 1%),la+1b型2例(2.2%),1b+2a型1例(1. 1%).结论HCV基因分型检测芯片可以用于血清HCV RNA的检测并进行基因分型,拥有较高的灵敏度和特异性,可以为临床诊断、治疗提供有效帮助.

    作者:陈连英;王跃国;施英娟;曹金德;张冬雷;毛红菊;赵建龙;毛丽萍;王惠民 刊期: 2005年第01期

  • 关于采用BACTEC血培养仪扩展厌养菌培养范围的可行性报告

    近年来,厌养菌在感染性疾病中越来越占有重要地位(蔡文城,实用临床微生物诊断学.第1版.南京:东南大学出版社,1998:620),其感染范围涉及临床各个科室.人体的各个组织和器官,在一定条件下都有可能发生厌养菌感染,其中大部分是与需氧菌混合感染,极少部分为厌养菌单独感染.过去对厌氧菌感染不够重视,只作需氧菌检查,导致单纯厌氧菌感染的病人查不到病源菌,混合感染的病人也只能培养出需氧菌.为此我科在1995年开始,采用BACTEC血培养仪做扩展厌氧菌培养范围的可行性研究,取得了令人满意的效果,现将情况介绍如下:

    作者:艾彪 刊期: 2005年第01期

  • 日立7150生化分析仪的常见故障及处理方法

    7150型生化分析仪是日立公司生产的一种全自动生化分析仪,具有加样量少、操作简便、性能稳定等优点,应用非常广泛.现将我们使用该仪器过程中的常见故障及处理方法作一简要总结,以供同行参考.

    作者:成守金;罗云杰 刊期: 2005年第01期

  • FQ-PCR技术检测乙型肝炎患者血清及单个核细胞中的HBV-DNA

    目的研究慢性乙肝患者外周血单个核细胞(PBMC)中HBV-DNA的存在及其与血清HBV-DNA的关系.方法用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测55例慢性乙肝患者的血清和外周血单个核细胞中的HBV-DNA.结果HBeAg(+)组血清与PBMC中HBV-DNA的阳性率分别为96%(24/25)和100%(25/25);HBV-DNA含量(以均值士标准差,拷贝/ml表示)分别为7.16±0.83和4.56±0.78,两者存在相关性(r=0.445,P<0.05),HBeAg(一)组血清与PBMC中HBV-DNA的阳性率分别为46.7%(14/30)和56.7%(17/30),HBV-DNA含量分别为5.81±1. 07和4.09±1.14,两者存在相关性(r=0.549,P<0.05).结论HBV可存在于感染者PBMC中,PBMC中HBV的存在与HBV病毒的传播和病情进展有一定相关性,慢性乙肝患者的血清和PBMC中HBV-DNA的联合检测可作为临床对患者病情的判断和药物治疗的辅助指标.

    作者:谢番妮;潘杰;唐少华 刊期: 2005年第01期

  • 贝克曼CX7生化分析仪故障一例处理

    贝克曼-库尔特CX7生化分析仪具有检测结果准确、重复性好、操作简便、故障率少等优点.我们在使用近4年过程中发现CX4冲洗站管道由于不完全堵塞,使反应杯清洗不干净,甚至反应杯内液体抽吸不完全,造成仪器停机故障一例介绍如下,供同行参考.

    作者:宋善勤;王学军 刊期: 2005年第01期

  • Sysmex SF-300O全自动血细胞分析仪对新生儿黄疸病人白细胞的检测

    新生儿黄疸,又称新生儿高胆红素血症,是指新生儿全身皮肤、黏膜及巩膜出现黄色的症候,分生理性和病理性两种.当血清胆红素高于85.5~102.5 μmol/L时,新生儿即呈现黄疸,使用Sysmex SF-3000血细胞分析仪测定新生儿黄疸病人的白细胞时,增高的胆红素会影响红细胞的溶解而产生较大的误差,本文探讨其检测失败的原因及其解决方法.

    作者:钱英超;梁映亮 刊期: 2005年第01期

  • 美国杜邦A/S-4微生物鉴定仪数据库损坏修复重建应注意的几个问题

    美国杜邦A/S-4微生物鉴定仪是较为普及的微生物鉴定仪器,它以准确、操作简便适用而深受广大检验工作者的欢迎.但在操作过程中往往会因为关机,热启动不正确,突然停电或两个操作平台没有退回主菜单,就可能造成正在使用的数据库损坏.损坏后如何修复重建数据库,虽然随机使用说明书上有几点说明,但并不详细,就此问题笔者将以往工作中碰到的情况,谈几点经验,以供同道借鉴参考.

    作者:刘兆林 刊期: 2005年第01期

  • 多重PCR检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

    目的建立一种直接、快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的多重PCR方法.方法设计3对引物,在同一反应管中同时扩增检测mecA、femA和IS431基因,扩增产物经凝胶成像系统分析.结果9株MRSA菌株mecA、fe-mA和IS431均阳性,5株凝固酶阴性的耐甲氧西林的葡萄球菌mecA和IS431阳性,7株甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌femA和IS431阳性,11株甲氧西林敏感的凝固酶阴性葡萄球菌IS431阳性,而大肠杆菌、肺炎链球菌等非葡萄球菌mecA、femA和IS431均阴性;当MRSA菌浓度达102CFU/ml时就可检出.结论通过同时扩增mecA、femA和IS431基因的多重PCR技术,能准确、快速地鉴定耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性的葡萄球菌.

    作者:杨学文;王礼文 刊期: 2005年第01期

  • PCR-RFLP分析HBV核心启动子基因突变的临床意义

    目的建立聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测HBV核心启动子(BCP)基因突变的方法,并探讨其临床意义.方法PCR扩增HBV BCP区(nt1642-nt2027)基因片段,经限制性内切酶Mbo Ⅰ酶切,琼脂糖凝胶电泳分析BCP(nt1762/nt1764)基因突变情况,同时应用定量PCR测定了HBV DNA含量.结果149例临床样本的检测结果显示:BCP基因突变在HBeAb(+)慢性乙型肝炎患者(CHB)和HBV无症状携带者(ASC)中的检出率显著高于相应的HBeAg(+)组患者(P<0.01);在HBeAb(+)和HBeAg(+)重症乙型肝炎(Severe hepatitis B,SHB)组中差异无显著性(P>0.05);BCP变异患者血清中HBV-DNA含量比相同模式的野毒株感染高(P<0.05).结论PCR-RFLP检测HBV BCP基因突变方法简单方便,结果与测序分析一致,具有较好的特异性,适合临床应用;BCP区基因突变可能是HBeAb(+)患者HBV感染的重要原因之一;BCP变异可能与乙型肝炎重症化有一定关系.

    作者:祝文彩;张冬雷;鞠少卿;王惠民;李立人;施健;徐云 刊期: 2005年第01期

  • 葡萄糖试剂对血清钾测定的影响及保护性防范

    我们在奥林巴斯640全自动生化分析仪上用Rondox公司提供的丙酮酸激酶法试剂测定血清钾,发现测定葡萄糖后紧随着测钾,可使钾结果明显升高,对此我们采用测钾前加上保护性实验项目的方法防范此种现象发生,现报道如下.

    作者:于成勇;王金环;王沙平 刊期: 2005年第01期

  • 四种乙肝表面抗原测定方法的比较

    目的探讨四种HBsAg检测方法的临床应用价值.方法①使用微粒子捕捉免疫发光法分析仪(Abbott);②ELISA立可读(国内著名品牌);③金标方法1(国内某品牌);④金标方法2(国内某品牌).四种方法测定血清HBsAg并进行比较.结果目前国产试剂存在假阴性和假阳性较多.结论以微粒子捕捉免疫发光法作为参照方法进行比较,ELISA方法假阳性结果较多、两种全标法存在假阴性结果.ELSIA阴性结果是可信的,而金标法阳性结果是可信的.两种方法都存在缺陷,应尽量使用公认的进口试剂来提高检测的准确性.

    作者:郭洁;陈永德;朝浩鹏;董国伟 刊期: 2005年第01期

  • 阴道脱落细胞苏木紫-伊红染色法步骤的改进

    阴道脱落细胞检查是早期发现子宫颈癌的一种重要诊断方法,在防癌普查中有很大作用,苏木紫-伊红染色法是常用的染色方法,根据自己多年来组织参加防癌普查大批量标本实际情况对该方法染色步骤及染色时间进行改进,加快了检验速度,染色效果不影响检验质量,现报告如下:

    作者:游跃星 刊期: 2005年第01期

  • 电化学发光免疫法检测TSH、T3、T4、FT3、FT4相关性观察

    目的观察电化学发光免疫检测血清TSH、T3、T4、FT3、FT4之间相关性.方法对134例临床标本同时进行TSH、T3、T4、FT3、FT4电化学发光免疫法检测,并对此五项指标间相关性进行统计学分析.结果TSH/T3、TSH/T4、TSH/FT3、TSH/FT4、T3/FT4、FT3/T4之间具有直线相关关系,相关系数分别为:0.362,0.324,0.404,0.335,0.907,0.819,0.808,0.839,0.839,0.955.结论T3/T4、FT3/FT4之间相关系数大,r2>0.8,具有一定的医学意义.

    作者:周万军;柳永和;陈卫群;唐孟萱 刊期: 2005年第01期

现代检验医学杂志

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