杨亚平；关慧臻；薛承岩；张凤侠；李桂洁
一氧化氮(NO)是脊椎动物体内普遍存在的一种重要的无机小分子,早发现于巨噬细胞,由一氧化氮合酶(NOS)催化L-精氨酸胍基末端上的氮氧化而成,自1987年证实内皮衍是舒张因子的本质即为NO之后,引起了人们的广泛关注.随着研究的深入,发现其作为第二信使和神经递质,是细胞间信息传递的重要调节因子,也是介导细胞免疫和细胞毒作用的重要物质,参与机体多种生理和病理过程.由于NOS是合成NO的关键酶,因此,NOS/NO与疾病的关系成为研究热点.现将其与肿瘤的相关研究简要综述如下:
作者：刘庚勋；肖创清 刊期： 2007年第03期
目的 探讨不同温育温度对BV Blue检测法诊断细菌性阴道病的影响.方法 用无菌棉拭子采集460例妇科病人阴道分泌物,用BV Blue法检测分泌物中的唾液酸酶活性,比较三种不同温育温度(25,30,37℃)对细菌性阴道病阳性率的影响,所得数据进行统计学分析.结果 460例标本37℃温育条件下,BV阳性率为15.4%,30℃温育时,BV阳性率为3.3%,25℃温育时,BV阳性率为2.6%,三种不同温育温度比较,BV阳性率有统计学差异.结论 温育温度对BV Blue试剂盒检测细菌性阴道病有较大的影响,应该引起实验室的高度重视,随时监测温箱的温度,防止由于温度的差异,引起细菌性阴道病的阳性率降低.
作者：贾忠兰；王青；徐鸿雁 刊期： 2007年第03期
目的 分析麻疹病毒(measles virus,MV)主要多肽抗原成分,筛选可用于麻疹病毒特异性抗体诊断的抗原成分.方法 应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹技术(immunoblots,IB)对比分析细胞抗原与麻疹病毒抗原,确定病毒多肽抗原的存在,利用不同时期免疫动物的多克隆抗体分析病毒多肽抗原免疫原性的强弱.结果 SDS-PAGE和多克隆抗体免疫印迹结果表明,麻疹病毒分子量为60 kD和55 kD抗原的免疫原性强,72 kD抗原性较弱,200kD抗原性弱.结论 针对麻疹病毒60 kD和55 kD抗原成分的抗体检测可以作为麻疹病毒感染的早期诊断指标.
作者：张银辉；杨来智；张小艳；陆学东 刊期： 2007年第03期
我科2004年9月引进该款仪器,该仪器为日本SYSMEX生产,可提供21个参数,具中英文操作系统,仪器操作简便、结果准确可靠,具较高的性价比.现将我们在工作中常见故障和处理方法报告如下,供同行们参考.
作者：罗晓璐 刊期： 2007年第03期
我科在对日立7020全自动生化分析仪几年的使用过程中,不断摸索和探讨,积累了一些故障排除及应用方面的经验,在此介绍如下.
作者：阴志琦 刊期： 2007年第03期
输血作为一种替代疗法,其临床意义不可低估,但是血液安全性问题愈来愈受到关注,血液成分的病毒灭活是提高输血安全的重要手段.该文就近几年这方面的研究进展及其效果作一综述.
作者：姚自同；张献清 刊期： 2007年第03期
我院于2004年购进美国雅培公司的AXSYM全自动免疫发光分析仪,它采用微粒子酶免分析(MEIA)、荧光偏振免疫分析(FPIA)、离子捕捉免疫分析(ICIA)三种技术,可以对血清或血浆中的蛋白质、病毒抗原、血药浓度、激素等进行测定,具有极高的灵敏度、特异性和稳定性,至此运行两年多,也得到了临床科室的认可.但是,我们在使用过程中遇到了一些问题,得到一些体会,特将常见的几种故障排除及应用体会报告如下,以期与同行共同探讨.
作者：刘紫强 刊期： 2007年第03期
目的 构建表达藤黄微球菌RPF基因蛋白的重组质粒,并在大肠埃希菌中表达获得基因重组蛋白.方法 提取藤黄微球菌基因组DNA,以PCR扩增RPF基因,克隆入pGEX-4T-2表达载体,测序证实正确后转化大肠埃希菌BL21(DE3),在30℃用IPTG诱导3 h后进行SDS-PAGE分析.结果 测序结果 证实获得了藤黄微球菌RPF基因,其序列与GenBank中报道完全一致;SDS-PAGE分析表明,RPF基因在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达了重组蛋白,表达的蛋白量约占菌体蛋白的33.8%.结论 成功克隆了藤黄微球菌RPF基因,并在大肠埃希菌中获得了高效表达,为进一步研究该蛋白的生物学活性及其功能奠定基础.
作者：苏明权；岳乔红；杨柳；王薇；刘家云；郝晓柯 刊期： 2007年第03期
目的 了解西安地区葡萄球菌对红霉素和克林霉素的不同耐药表型及其诱导型克林霉素耐药的发生率.方法 采用K-B法检测葡萄球菌对红霉素和克林霉素的耐药性,头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌,D试验检测诱导型克林霉素耐药表型.结果 所有204株葡萄球菌中,90株(44.12%)为结构型耐药(cMLS),即对红霉素和克林霉素同时耐药;57株(27.94%)为诱导型耐药(iMLS),即对红霉素耐药对克林霉素敏感,但D试验阳性;32株(15.69%)为MS表型,即对红霉素耐药,对克林霉素敏感,但D试验阴性(MS);其中在红霉素耐药、克林霉素敏感体外表型中,显示诱导型克林霉素耐药在MRSA,MSSA,MRCNS和MSCNS中的比例分别为65.22%,58.33%,67.65%和60%;在所有耐红霉素菌株所占比例分别为31.25%,36.84%,31.94%和30%.结论 西安地区耐红霉素葡萄球菌中诱导型克林霉素耐药的发生率处于相对较高水平,临床细菌室应重视D-试验以指导临床合理选择抗生素.
作者：耿燕；王香玲；赵丽华；刘军；张毅；高宁 刊期： 2007年第03期
目的 确定实验室每个分析项目的 质量要求和性能特征,制定系统化的质量控制总策略,对每个分析项目选择有效的质控方案.方法 依据NCCLS C24-A2和CLIA'88建立统计质量控制和非统计质量控制方案,步骤:①根据实验室的不精密度(S)和不准确度(bias),利用功效函数图和操作过程规范图设计室内质量控制方法 ,评估误差检出率(Ped)和假失控率(Prf);②根据误差检出率的大小将分析项目分为三个组:高误差检出率(Ped＞90%)、中等误差检出率(Ped=50%～90%)和低误差检出率(Ped＜50%);③对高误差检出率(Ped＞90%)的分析项目重点应用统计质量控制,进行少的非统计质量控制的管理工作;中等误差检出率(Ped=50%～90%)的分析项目,统计质量控制和非统计质量控制的工作都要同等重视;低误差检出率(Ped＜50%)的分析项目,统计质量控制不是质量控制的重点,须重点加强的是非统计质量控制.结论 性能良好的分析方法 要求较少的质控规则和非统计质量控制的管理工作,性能差的分析方法 要求较多的质控规则和更多的非统计质量管理工作.
作者：黄亨建；李萍；宋昊岚；彭志英 刊期： 2007年第03期
我科于1999年引进一台日立公司生产的日立7170S自动生化分析仪,该仪器操作简便,采用触屏电脑操作控制,为分立式生化仪,小加样量可达到2μl,具有340～800 nm的12个波长(单波长或双波长),处理能力达800次测定/h,自引进该仪器大大提高了工作效率,更快地提供及时准确的检验结果,但是在实际应用中也会出现一些报警,参照说明书即可解决,但是前段时间却遇到一例未曾遇到的报警,现将解决过程总结如下:
作者：刘丹 刊期： 2007年第03期
目的 探讨UF-100尿液有形成分分析仪精子细胞参数的准确性及其影响因素.方法 对6 340份尿液标本同时用UF-100和离心镜检法进行精子细胞检测;正常人尿上清液中加入不同浓度的精子用仪器检测.结果 UF-100对精子细胞检测的准确率为98.6%,阳性预测值为59.8%,非晶形盐类结晶、真菌、红细胞、细菌、黏液丝等可造成精子细胞假阳性,同样高浓度的精子细胞使得UF-100检测红细胞、白细胞、上皮细胞及管型计数结果 假性增高.结论 UF-100检测精子细胞结果 不能作为确定性报告,应通过镜检复审,以免发生误报.
作者：陈立松；马骏龙 刊期： 2007年第03期
CA530血凝仪是日本Sysmex公司生产的全自动血凝分析仪,因其具有设计先进、操作方便、性能可靠等特点而在我国得到较广泛的应用.我们自2000年引进后使用良好,但长期使用或操作不当也会出现一些问题,现将常见故障及处理措施介绍如下.
作者：范永熙；逄明英；吕志海 刊期： 2007年第03期
目的 研究和建立从大量全血标本中提取基因组DNA的有效方法 ,以应用于Luminex HLA流式磁珠基因分型.方法 使用自动工作站(瑞士TECAN公司)从600 μl全血中提取基因组DNA,提取的DNA样本用紫外分光光度仪测定其浓度和纯度,DNA的完整性用琼脂糖凝胶电泳检测,并统计分析每一DNA样本流式磁珠HLA-A,B和DRB1基因扩增产物经探针分子杂交后的荧光信号强度.结果 从600 μl全血中提取基因组DNA,含量平均为10.052±0.824 μg,样本的A260nm/A280nm值平均为1.821±0.201.琼脂糖电泳法测得DNA的分子量约为21kb,HLA-A,B和DRB1位点PCR产物杂交后的平均荧光信号强度分别为2 183.84±478.12(exon2),2 168.28±338.59(exon3);2 057.27±397.41(exon2),1959.78±283.24(exon3);3 643.38±327.85.结论 此方法适用于从大量全血样本中快速提取基因组DNA,所得基因组DNA适用于高通量HLA流式磁珠基因分型等下游的分子生物学实验.
作者：王大明；唐斯；邹红岩；邓志辉；李桢 刊期： 2007年第03期
目的 研究超高倍显微分析仪在诊断泌尿生殖系感染中的应用价值.方法 用清华同方多媒体超高倍显微分析仪检测3 544例门诊妇科和泌尿科患者阴道或尿道分泌物,并对部分标本与PCR法和培养法作对照分析.结果 一种病原体感染者占54.56%,两种至四种病原体混合感染者占41.49%.超高倍显微分析仪病原体检出率占96.05%.超高倍显微分析仪对沙眼衣原体和解脲支原体的检出率与培养法和PCR法比较无显著性差异(P＞0.05).结论 超高倍显微分析仪可同时动态观察多种病原体,对于多重混合感染患者可避免漏检.方法 简便、快速、准确、直观,为泌尿生殖系感染的诊断、指导用药和疗效观察提供了可靠依据.
作者：李志清；魏瑞全；李彤；李旭光；高西娥；倪颖 刊期： 2007年第03期
目的 探讨各型乙肝患者病毒复制指标(HBV-DNA)分别与其它血清标志物以及肝功能的关系.方法 采用荧光标记探针定量聚合酶链反应(PCR)技术,酶联免疫吸附测定法,肝功能检验用常规法.对500例各型乙肝病毒感染者血清HBV-DNA含量及血清学标志物检测,同时测定了各型乙肝时血清TBIL,ALT,AST,ALP,γ-GPT,AST/ALT及胆红素的含量变化.结果 大三阳组的HBV-DNA含量显著高于小三阳组的HBV-DNA含量,差异有统计学意义(P＜0.01),小三阳与其它各型之间比较差异较明显(P＜0.05).临床各型HBV-DNA阳性组和阴性组之间肝功能无显著性差异(P＞0.05),结论 HBeAg与HBV-DNA含量明显相关,HBeAg阴性或HBeAg/抗HBe血清转换,不表明病毒停止复制.通过相关性分析HBV-DNA含量与肝功能指标之间没有明显的相关性(P＞0.05),肝功能的损害程度与HBV-DNA含量之间无揶相关性,定量检测HBV-DNA可以直接反映HBV在血液中的复制情况,并能准确地解释感染HBV后的传染性.
作者：石晓霞；任超杰；张秀华；陈秀生；汪建军 刊期： 2007年第03期
目的 分析经日立-罗氏检测系统(A系统)量值传递后的新鲜混合血清作临时酶校准品的可行性.方法 先用日立-罗氏检测系统将c.f.a.s的酶的量值传递给新鲜混合血清作临时酶校准品,然后用A系统、Roehe Modular P分析仪与科华-东菱试剂(B系统)、Dade Dimension RxL分析仪与配套试剂(C系统)、Dade Dimension RxL分析仪与科华-东菱试剂(D系统)、Beckman CX9分析仪与配套试剂(E系统)、Hitachi 7170A分析仪与Randox试剂(F系统)、Olympus 640分析仪与北京中生试剂(G系统)测定50份新鲜血清和临时酶校准品的ALT,AST,CK,LDH,ALP,γ-GT活性,后用临时酶校准品标示值与测定值之比作为校正因子,校正50份新鲜血清的测定结果,并进行校正前后的结果 比较和临时酶校准品互通性分析.结果 校正前各检测系统测定结果 间有较大的差异(CV4.99%～13.98%),校正后差异变小(CV1.30%～10.34%),其中B,C,E,F系统中ALT,AST,CK,LDH,ALP,γ-GT和D,G系统中ALT,AST,CK与A系统结果偏差明显变小,并且仪器与试剂配套的C,E系统间为备检测系统间小;但D,G系统中LDH,ALP,γ-GT差异改变不明显.结论 采用新鲜混合血清作临时酶校准品有一定的应用价值,但使用前必须进行酶校准品互通性检验,才能保证每项酶的测定结果 的准确和可靠.
作者：顾国龙；谢智光；梁景云；唐芳玫；徐文丽；冯玉清；李颖；黄冬梅 刊期： 2007年第03期
目的 探讨肝炎病毒感染与自由基及肿瘤坏死因子的关系.方法 用ELISA、显色、比色法检测肝炎病毒感染者、肝炎患者血液中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、脂质氧化物(LPO)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、肿瘤坏死因子(TNF)的含量.结果 肝炎病毒感染者、肝炎患者血中LPO,MDA,TNF含量明显高于对照组(P＜0.05,P＜0.01);而SOD,GSH-PX,CAT的含量明显低于对照组(P＜0.05,P＜0.01),与肝炎病毒感染的种类及肝炎发生的程度密切相关.结论 肝炎病毒感染者、肝炎患者的SOD,GSH-PX,CAT,LPO,MDA,TNF的含量检测,对了解肝脏损伤及肝炎的防治有一定意义.
作者：崔相法；卢志明；王红霞 刊期： 2007年第03期
自1988年PCR技术被成功地应用于检测血清HBV DNA以来,因其具有灵敏度高、速度快、简便,被广泛应用于临床HBV DNA的检测,并在使用过程中不断的被改进,该文介绍了目前国内外使用较多的几种新PCR改良技术.
作者：王萍 刊期： 2007年第03期
目的 研究血清胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)及促胃液素(GS)与胃癌发生的关系,探讨检验血清PG Ⅰ,PG Ⅱ,GS对胃癌的诊断价值.方法 采用免疫放射分析法(IRMA)和放射免疫分析法(RIMA)检测36例胃癌患者、23例胃良性病、11例萎缩性胃炎和34例正常人血清蛋白酶原、促胃液素水平并进行比较.结果 胃癌患者血清PG Ⅰ,PG Ⅱ的水平显著低于胃良性病和正常人组(P＜0.05),而血清GS水平显著高于胃良性病和正常人组(P＜0.05),其中不同分化程度间差异不明显(P＞0.05),术后血清PG Ⅰ,PG Ⅱ,GS水平显著低于术前水平(P＜0.05),复发组的水平显著高于术后未复发组(P＜0.05).结论 检测血清PG Ⅰ,PG Ⅱ,GS对胃癌的诊断及区别胃良性病具有较高的临床价值.
作者：刘家云；陈名声；苏明权；于文彬；郝晓柯 刊期： 2007年第03期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
