张银辉;杨来智;张小艳;陆学东
目的 参照MET HC1022血液分析仪的技术参数及相关的理论知识自行研制其配套试剂.方法 ①分别测定MET HC1022血液分析仪的原装配套试剂和自配配套试剂的离子浓度、渗透浓度、电极电压、pH值,进行试剂的主要理化指标对比,观察是否有明显的差异;②分别用MET HC1022血液分析仪的原装配套试剂和自配配套试剂测定高、中、低值全血质控物的RBC,HGB,MCV,WBC,PLT五项血细胞指标20次,结果 进行t检验,确定有无显著性差异.结果 ①MET HC1022血液分析仪的自配配套试剂与原装配套试剂的主要理化指标,通过对比显示无明显差异;②分别用两种试剂测定高、中、低值质控物20次,血细胞五项指标经t检验P>0.05,无显著性差异.结论 自配配套试剂与原装配套试剂主要理化特性无明显的差异;分别用两种试剂测定高、中、低值质控物20次,五项血细胞指标无显著性差异.自配试剂精密度、准确性良好,价廉,有应用价值.
作者:高英鸿;严碧琼;冯汉斌;江小红;余丽文 刊期: 2007年第03期
目的 分析肺炎克雷伯菌临床分离株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的主要基因型.方法 用表型确定的临床分离产ESBLs的肺炎克雷伯菌34株,分别用TEM,SHV,CTX-M-1,CTX-M-2和CTX-M-9扩增引物进行聚合酶链反应(PCR)扩增,并对PCR产物进行序列分析.结果 PCR扩增结果 显示TEM,SHV,CTX-M-1,CTX-M-2和CTX-M9的阳性率分别为47.06%,85.29%,26.47%,32.35%和52.94%,CTX-M型总阳性率为88.24%,序列分析证实扩增为目的产物.结论 34株ESBLs肺炎克雷伯菌的主要基因型是CTX-M型和SHV型,且同时携带2种以上基因的菌株占所测菌株的82.35%,需引起临床的高度重视.
作者:韦洁宏;黄烈;林广城;刘键;杨来智;陆学东 刊期: 2007年第03期
目的 研究血清胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)及促胃液素(GS)与胃癌发生的关系,探讨检验血清PG Ⅰ,PG Ⅱ,GS对胃癌的诊断价值.方法 采用免疫放射分析法(IRMA)和放射免疫分析法(RIMA)检测36例胃癌患者、23例胃良性病、11例萎缩性胃炎和34例正常人血清蛋白酶原、促胃液素水平并进行比较.结果 胃癌患者血清PG Ⅰ,PG Ⅱ的水平显著低于胃良性病和正常人组(P<0.05),而血清GS水平显著高于胃良性病和正常人组(P<0.05),其中不同分化程度间差异不明显(P>0.05),术后血清PG Ⅰ,PG Ⅱ,GS水平显著低于术前水平(P<0.05),复发组的水平显著高于术后未复发组(P<0.05).结论 检测血清PG Ⅰ,PG Ⅱ,GS对胃癌的诊断及区别胃良性病具有较高的临床价值.
作者:刘家云;陈名声;苏明权;于文彬;郝晓柯 刊期: 2007年第03期
目的 调查临床分离肺炎克雷伯菌产质粒AmpC酶的流行基因型和传播机制,以及时发现并监控这些高危菌群.方法 收集临床分离的肺炎克雷伯菌,对头孢西丁耐药株采用酶提取物改良三维试验筛选高产AmpC酶株,采用聚合酶链反应(PCR)和DNA测序分析质粒介导AmpC酶的流行基因型,并通过质粒接合实验、肠杆菌科基因组内重复一致序列-PCR(ERIC-PCR)探讨流行基因型的传播机制.结果 16株高产AmpC酶肺炎克雷伯菌中,DHA组10株,EBC组6株,未发现MOX组、CIT组、ACC组和FOX组质粒AmpC基因.对部分PCR产物进行序列分析,证实为DHA-1型和ACT-1样质粒AmpC基因.16株产AmpC酶菌株中10株质粒接合实验成功,DNA同源性分析显示16株质粒介导AmpC酶肺炎克雷伯菌分属于14种基因型.结论 在临床分离肺炎克雷伯菌中发现DHA和EBC组质粒AmpC酶,其传播途径以水平传播为主导,产酶菌克隆垂直传播居次要地位,未发生同一克隆株的流行.
作者:李从荣;黄俊;吕霞;彭少华 刊期: 2007年第03期
目的 研究不同的定标方式对免疫透射比浊法测定免疫球蛋白、补体结果 的影响.方法 使用OLYMPUS AU640自动生化分析仪和立德曼免疫透射比浊法试剂,采用不同的定标方法 对40例血清的IgG,IgA,IgM,C3和C4进行测定.结果 使用多标准POLYGONAL和SPLINE方法 拟合定标曲线后测定结果 表现良好的一致性,多点定标与单点定标测定结果 具有显著性差异.结论 免疫透射比浊测定,应当根据仪器情况,选择适当的非线性曲线拟合方式建立标准工作曲线.
作者:朱铭 刊期: 2007年第03期
目的 干化学FDC3500和湿化学AVL9180两种方法 检测电解质结果 的初步比较及相关性分析.方法 收集50份新鲜血浆标本,分别在FDC3500和AVL9180上检测电解质(K+,Na+,Cl-).结果 两种方法测定结果间比较无显著性差异(P>0.05),分析结果一致;K+r>0.975呈高度正相关,Na+,Cl- r>0.870正相关性较好.结论 干化学FDC3500和湿化学AVL9180可同样准确、快速地为临床诊断提供电解质项目的参考依据.
作者:聂庆东;张秀梅 刊期: 2007年第03期
目的 应用CD3单克隆抗体(CD3McAb)和重组人白细胞介素-2(rhIL-2)共同诱导外周血单个核细胞制备CD3AK细胞,研究其对白血病细胞的杀伤作用.方法 用台盼蓝活细胞计数法计算细胞扩增倍数,MTT法检测CD3AK细胞杀伤活性.结果 正常人CD3AK细胞对各型急性白血病细胞及K562细胞均有明显的杀伤活性,且无显著性差异(P>0.05);急性白血病完全缓解期CD3AK细胞与正常人CD3AK细胞对白血病细胞的杀伤活性,亦无显著性差异(P>0.05);急性白血病未缓解期CD3AK对白血病细胞杀伤活性明显减弱,与正常人CD3AK细胞比较,差异非常显著(P<0.01).结论 正常人与急性白血病完全缓解期CD3AK细胞具有明显的抗白血病作用,急性白血病未缓解期CD3AK细胞杀伤活性明显减弱.
作者:杨娣娣;韩秀蕊;魏绪仓;邢佩倪;李梅生 刊期: 2007年第03期
目的 研究超高倍显微分析仪在诊断泌尿生殖系感染中的应用价值.方法 用清华同方多媒体超高倍显微分析仪检测3 544例门诊妇科和泌尿科患者阴道或尿道分泌物,并对部分标本与PCR法和培养法作对照分析.结果 一种病原体感染者占54.56%,两种至四种病原体混合感染者占41.49%.超高倍显微分析仪病原体检出率占96.05%.超高倍显微分析仪对沙眼衣原体和解脲支原体的检出率与培养法和PCR法比较无显著性差异(P>0.05).结论 超高倍显微分析仪可同时动态观察多种病原体,对于多重混合感染患者可避免漏检.方法 简便、快速、准确、直观,为泌尿生殖系感染的诊断、指导用药和疗效观察提供了可靠依据.
作者:李志清;魏瑞全;李彤;李旭光;高西娥;倪颖 刊期: 2007年第03期
目的 研究和建立从大量全血标本中提取基因组DNA的有效方法 ,以应用于Luminex HLA流式磁珠基因分型.方法 使用自动工作站(瑞士TECAN公司)从600 μl全血中提取基因组DNA,提取的DNA样本用紫外分光光度仪测定其浓度和纯度,DNA的完整性用琼脂糖凝胶电泳检测,并统计分析每一DNA样本流式磁珠HLA-A,B和DRB1基因扩增产物经探针分子杂交后的荧光信号强度.结果 从600 μl全血中提取基因组DNA,含量平均为10.052±0.824 μg,样本的A260nm/A280nm值平均为1.821±0.201.琼脂糖电泳法测得DNA的分子量约为21kb,HLA-A,B和DRB1位点PCR产物杂交后的平均荧光信号强度分别为2 183.84±478.12(exon2),2 168.28±338.59(exon3);2 057.27±397.41(exon2),1959.78±283.24(exon3);3 643.38±327.85.结论 此方法适用于从大量全血样本中快速提取基因组DNA,所得基因组DNA适用于高通量HLA流式磁珠基因分型等下游的分子生物学实验.
作者:王大明;唐斯;邹红岩;邓志辉;李桢 刊期: 2007年第03期
目的 探讨哮喘患儿血清中sIL-2R,IL-2,IL-4,IL-13的水平变化及其与哮喘发病机制的关系.方法 每例患儿及正常对照组均取空腹静脉血并即时分离血清1 ml,用ELISA法检测血清中sIL-2R,IL-2,IL-4,IL-13的水平,并对检测结果 进行医学统计学分析处理.结果 哮喘急性发作组、哮喘缓解组的患儿血清中sIL-2R,IL-2,IL-4,IL-13的测定结果与正常对照组相比较经统计学分析均存在极其显著的差异(P<0.05).其中患儿哮喘急性发作组、哮喘缓解组血清中sIL-2R,IL-4,IL-13的测定结果 要明显高于正常对照组,而IL-2则明显低于正常对照组.此外,哮喘急性发作组与哮喘缓解组血清中IL-2,IL-4,IL-13的测定结果 相比较经统计学分析均存在显著的差异(P<0.05),而sIL-2R则无显著差异.结论 哮喘患儿血清中sIL-2R,IL-2,IL-4,IL-13的水平均存在显著的变化,说明它们在哮喘的发病机制中起着重要的作用.
作者:张国祥;许文龙 刊期: 2007年第03期
目的 克隆、表达高迁移率族蛋白1(HMGB1).方法 从人外周血淋巴细胞中提取总RNA,经RT-PCR获得HMGB1基因;将该基因克隆到PMD18-T载体中,测序鉴定;将HMGB1基因插入pET32-A表达载体中,30℃诱导表达4h,进行SDS-PAGE分析;目的蛋白在变性条件下经Ni2+-NTA亲和层析纯化后用Western-Blot证实.结果 DNA测序证明,获得了HMGB1基因,其序列与Gen Bank中报道序列完全一致;SDS-PAGE分析表明,HMGB1蛋白在原核中获得高效表达,表达量约占菌体总蛋白的32%;诱导表达产物主要以包涵体形式存在,6 His-NTA纯化后获得目的 蛋白,Western-Blot结果 显示纯化蛋白具有良好的抗原性.结论 成功表达和纯化了HMGB1基因.
作者:姜南艳;张伟;任君萍;顾炳权;沈建军;张惠中 刊期: 2007年第03期
目的 探讨UF-100尿液有形成分分析仪精子细胞参数的准确性及其影响因素.方法 对6 340份尿液标本同时用UF-100和离心镜检法进行精子细胞检测;正常人尿上清液中加入不同浓度的精子用仪器检测.结果 UF-100对精子细胞检测的准确率为98.6%,阳性预测值为59.8%,非晶形盐类结晶、真菌、红细胞、细菌、黏液丝等可造成精子细胞假阳性,同样高浓度的精子细胞使得UF-100检测红细胞、白细胞、上皮细胞及管型计数结果 假性增高.结论 UF-100检测精子细胞结果 不能作为确定性报告,应通过镜检复审,以免发生误报.
作者:陈立松;马骏龙 刊期: 2007年第03期
目的 探讨乙肝患者外周血单个核细胞和血清中HBV-DNA含量及其与HBVM之间的关系.方法 62例乙肝患者为检测对象,20例健康献血者为对照组,分别用FQ-PCR定量测定,内对照法定量测定血清HBV-DNA,免疫荧光定量测定HBVM.结果 外周血单个核细胞HBV-DNA检出阳性率为72.6%(45/62),与血清的符合率为87.1%,但慢性乙肝患者外周血单个核细胞HBV-DNA检出率高于血清,且与病情呈正相关.结论 三个指标的联合检测有助于反映肝细胞病毒复制情况,对进一步指导抗病毒治疗有一定意义.
作者:毛丽萍;王惠民;王陆军;吴月平;凌勇武;鞠少卿;王跃国 刊期: 2007年第03期
目的 确定实验室每个分析项目的 质量要求和性能特征,制定系统化的质量控制总策略,对每个分析项目选择有效的质控方案.方法 依据NCCLS C24-A2和CLIA'88建立统计质量控制和非统计质量控制方案,步骤:①根据实验室的不精密度(S)和不准确度(bias),利用功效函数图和操作过程规范图设计室内质量控制方法 ,评估误差检出率(Ped)和假失控率(Prf);②根据误差检出率的大小将分析项目分为三个组:高误差检出率(Ped>90%)、中等误差检出率(Ped=50%~90%)和低误差检出率(Ped<50%);③对高误差检出率(Ped>90%)的分析项目重点应用统计质量控制,进行少的非统计质量控制的管理工作;中等误差检出率(Ped=50%~90%)的分析项目,统计质量控制和非统计质量控制的工作都要同等重视;低误差检出率(Ped<50%)的分析项目,统计质量控制不是质量控制的重点,须重点加强的是非统计质量控制.结论 性能良好的分析方法 要求较少的质控规则和非统计质量控制的管理工作,性能差的分析方法 要求较多的质控规则和更多的非统计质量管理工作.
作者:黄亨建;李萍;宋昊岚;彭志英 刊期: 2007年第03期
我科2004年9月引进该款仪器,该仪器为日本SYSMEX生产,可提供21个参数,具中英文操作系统,仪器操作简便、结果准确可靠,具较高的性价比.现将我们在工作中常见故障和处理方法报告如下,供同行们参考.
作者:罗晓璐 刊期: 2007年第03期
目的 探讨不同温育温度对BV Blue检测法诊断细菌性阴道病的影响.方法 用无菌棉拭子采集460例妇科病人阴道分泌物,用BV Blue法检测分泌物中的唾液酸酶活性,比较三种不同温育温度(25,30,37℃)对细菌性阴道病阳性率的影响,所得数据进行统计学分析.结果 460例标本37℃温育条件下,BV阳性率为15.4%,30℃温育时,BV阳性率为3.3%,25℃温育时,BV阳性率为2.6%,三种不同温育温度比较,BV阳性率有统计学差异.结论 温育温度对BV Blue试剂盒检测细菌性阴道病有较大的影响,应该引起实验室的高度重视,随时监测温箱的温度,防止由于温度的差异,引起细菌性阴道病的阳性率降低.
作者:贾忠兰;王青;徐鸿雁 刊期: 2007年第03期
目的 探讨超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、脂蛋白(a)[LP(a)]、D-二聚体(DD)和同型半胱氨酸(HCY)与急性脑梗死的关系.方法 检测82例急性脑梗死患者血清LP(a),hs-CRP,HCY和血浆DD的浓度,另外选择健康人群40例作为对照组.结果 急性脑梗死患者hs-CRP,LP(a),HCY和DD的浓度显著高于正常对照组(P<0.01).结论 HCY,LP(a),hs-CRP,DD联合检测有助于了解急性脑梗死患者的发生和病情变化,另外HCY,LP(a),hs-CRP作为独立的动脉粥样硬化危险因素对急性脑梗死的预防和早期诊断有着积极的临床意义.
作者:康建华 刊期: 2007年第03期
2005年我院购进一台法国STAGO公司生产的STA Compact全自动血凝仪,该仪器以其准确、灵敏、快速的特点,为临床出血性疾病、血栓性疾病的诊断治疗,为抗凝、溶栓治疗的实验检测,以及一些特殊检查前的凝血功能检测带来很大帮助.不过,仪器使用不久即出现室内质控样品APTT值总超标的现象,为此我们多方面查找原因,如复溶质控样品,严格控制溶解试剂时间,改用蒸馏水为注射用水等,但问题并没有得到解决,且PT、FIB质控样品测定值也出现超标.后来,经多方咨询和反复实验,终于找准了原因:为了节省试剂把用剩的旧试剂倒回新试剂瓶中继续使用,而开瓶后的试剂在氧化等作用下出现了变质,且时间越长变质越严重,试剂受到的污染也越严重,到一定程度后质控检查就无法通过.对于较为敏感的APTT,试剂变质或污染对检测结果的影响尤为明显.
作者:高相珍 刊期: 2007年第03期
目的 比较湿片法和革兰氏染色法在判断阴道清洁度中的差异,寻找阴道清洁度判断的适当的方法.方法 收集妇科门诊病人的阴道分泌物标本,分别用湿片法和革兰氏染色法对同一标本进行白细胞、上皮细胞、阴道毛滴虫、真菌、线索细胞、阴道乳酸杆菌和杂菌等常规项目的 检查,记录结果 ,分别对各项目进行统计学分析,判断阴道清洁度.结果 湿片法对白细胞、上皮细胞、滴虫的检出率高于革兰氏染色法(P<0.01);革兰氏染色法对真菌、阴道乳酸杆菌和杂菌的检出率高于湿片法(P<0.01).结论 湿片法和革兰氏染色法两者相结合能较准确地划分清洁度,明确阴道炎的性质.
作者:朱浩稳;苏俏辉;彭萍 刊期: 2007年第03期
目的 研究系统性红斑狼疮(SLE)患者血清B淋巴细胞刺激因子(BLyS)水平,并探讨其与其它临床指标的关系.方法 应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测正常对照组(30例)和SLE患者组(37例)血清BLyS水平.结果 SLE患者血清BLyS水平明显高于健康对照组(P<0.05).结论 SLE患者BLyS水平升高,提示BLyS可能与SLE的发病有关.
作者:刘才旺;倪红兵;鞠少卿 刊期: 2007年第03期