学术投稿

产ESBLs肺炎克雷伯菌基因型分析

韦洁宏;黄烈;林广城;刘键;杨来智;陆学东

关键词:肺炎克雷伯菌, 超广谱β-内酰胺酶, 基因分型
摘要:目的 分析肺炎克雷伯菌临床分离株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的主要基因型.方法 用表型确定的临床分离产ESBLs的肺炎克雷伯菌34株,分别用TEM,SHV,CTX-M-1,CTX-M-2和CTX-M-9扩增引物进行聚合酶链反应(PCR)扩增,并对PCR产物进行序列分析.结果 PCR扩增结果 显示TEM,SHV,CTX-M-1,CTX-M-2和CTX-M9的阳性率分别为47.06%,85.29%,26.47%,32.35%和52.94%,CTX-M型总阳性率为88.24%,序列分析证实扩增为目的产物.结论 34株ESBLs肺炎克雷伯菌的主要基因型是CTX-M型和SHV型,且同时携带2种以上基因的菌株占所测菌株的82.35%,需引起临床的高度重视.
现代检验医学杂志相关文献
  • 血浆与血清标本检测B型脑钠肽的结果比较

    目的 研究血浆与血清标本检测B型脑钠肽的异同.方法 使用微粒子捕捉免疫化学发光法(MELA)检测50例对照组和259例充血性心力衰竭(CHF)患者的B型脑钠肽水平.结果 血浆与血清标本检测B型脑钠肽结果 差异无显著性;而充血性心力衰竭患者随着病情加重B型脑钠肽水平升高.结论 血浆与血清标本均可检测B型脑钠肽,其结果 基本相同.

    作者:张保平;宿瑞俊;冯新平;郝艳萍 刊期: 2007年第03期

  • 诱导型一氧化氮合酶与肿瘤

    一氧化氮(NO)是脊椎动物体内普遍存在的一种重要的无机小分子,早发现于巨噬细胞,由一氧化氮合酶(NOS)催化L-精氨酸胍基末端上的氮氧化而成,自1987年证实内皮衍是舒张因子的本质即为NO之后,引起了人们的广泛关注.随着研究的深入,发现其作为第二信使和神经递质,是细胞间信息传递的重要调节因子,也是介导细胞免疫和细胞毒作用的重要物质,参与机体多种生理和病理过程.由于NOS是合成NO的关键酶,因此,NOS/NO与疾病的关系成为研究热点.现将其与肿瘤的相关研究简要综述如下:

    作者:刘庚勋;肖创清 刊期: 2007年第03期

  • HC9886全自动电解质分析仪的常见故障和处理

    航创HC-9886分析仪是由深圳航创公司生产的包括自动进样仪的全自动电解质分析仪,在国内广泛使用,具有操作简单,响应时间快等特点.下面将一年来使用中出现的故障和维护保养的经验介绍如下,供同道参考.

    作者:李晓东 刊期: 2007年第03期

  • 化学发光免疫法检测AFP的分析灵敏度核实实验及评价

    目的 核实Bayer Centaur 240全自动化学发光仪甲胎蛋白(AFP)的分析灵敏度.方法 用甲胎蛋白配套稀释液作为空白样品,将合适浓度的新鲜血清重复测定5次,计算其均值.用稀释液作系列稀释,组成0,0.94,1.90,2.80,3.80,5.60 ng/ml的甲胎蛋白系列检测样品,重复测定10次,记录光强度值(RLUs).结果 按99.7%的可信限计算,AFP检测低限为0.94 ng/ml;按照国际纯粹和应用化学联合会的规定,AFP检测低限1.15 ng/ml,生物检测限在1.90~2.80 ng/ml之间,功能灵敏度为1.9 ng/ml.结论 实验两种方法 计算的检测低限均小于厂家所给检测低限1.3 ng/ml.

    作者:孙蕾;郑松柏;徐建华;张秀明;林莲英 刊期: 2007年第03期

  • 血自由基和肿瘤坏死因子的含量与肝炎病毒感染关系的研究

    目的 探讨肝炎病毒感染与自由基及肿瘤坏死因子的关系.方法 用ELISA、显色、比色法检测肝炎病毒感染者、肝炎患者血液中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、脂质氧化物(LPO)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、肿瘤坏死因子(TNF)的含量.结果 肝炎病毒感染者、肝炎患者血中LPO,MDA,TNF含量明显高于对照组(P<0.05,P<0.01);而SOD,GSH-PX,CAT的含量明显低于对照组(P<0.05,P<0.01),与肝炎病毒感染的种类及肝炎发生的程度密切相关.结论 肝炎病毒感染者、肝炎患者的SOD,GSH-PX,CAT,LPO,MDA,TNF的含量检测,对了解肝脏损伤及肝炎的防治有一定意义.

    作者:崔相法;卢志明;王红霞 刊期: 2007年第03期

  • 男性恶性肿瘤患者血清性激素水平变化的研究探讨

    目的 探讨男性恶性肿瘤患者性激素水平的变化.方法 应用免疫放射分析法(IRMA)对70例男性恶性肿瘤患者血清中睾酮(T)和雌二醇(E2)进行含量检测,并与正常对照组进行比较.结果 恶性肿瘤组血清T明显低于正常对照组;E2是正常对照组的4倍;E2/T水平是正常对照组的12倍.结论 T,E2,E2/T可作为诊断恶性肺癌和消化道恶性肿瘤的过筛参考指标.

    作者:王宁慧;徐莉 刊期: 2007年第03期

  • 免疫透射比浊法定标方式的探讨

    目的 研究不同的定标方式对免疫透射比浊法测定免疫球蛋白、补体结果 的影响.方法 使用OLYMPUS AU640自动生化分析仪和立德曼免疫透射比浊法试剂,采用不同的定标方法 对40例血清的IgG,IgA,IgM,C3和C4进行测定.结果 使用多标准POLYGONAL和SPLINE方法 拟合定标曲线后测定结果 表现良好的一致性,多点定标与单点定标测定结果 具有显著性差异.结论 免疫透射比浊测定,应当根据仪器情况,选择适当的非线性曲线拟合方式建立标准工作曲线.

    作者:朱铭 刊期: 2007年第03期

  • 日立7180全自动临床生化分析仪常见故障原因分析及保养

    临床生化分析仪自20世纪50年代诞生以来,经过不断发展完善,目前已经成为临床实验室常用的分析仪器.由于它应用了多个学科的尖端技术和概念,所以如果不熟练掌握整个分析系统的使用和维护,会对日常工作的正常进行带来一些困难.我院2004年初购进了一台日立7180全自动生化分析仪,该系列仪器有相对完善的报警系统和报警处理检索系统,大部分故障都可以参照说明书进行处理,但是也有一些异常结果和错误报告不会出现在报警系统中或提示不够具体,这就需要在日常工作中根据经验去发现和排除这些因素.以下是日立7180使用过程中的一些体会供参考.

    作者:周炳烨;孙延河;李六红 刊期: 2007年第03期

  • 意大利AUTOLAB-18全自动生化分析仪故障分析

    引进意大利AUTOLAB-18全自动生化分析仪六年多来,严格按照仪器操作规程使用并认真保养,在仪器的使用过程中,其检测结果的准确性、重复性、稳定性等方面均很理想.室内质量控制检测结果及参加陕西省室间质量控制的全部生化检验项目均由该仪器完成,并取得优良成绩.但在近的使用中发生了二次故障,影响到正常工作,现将故障原因及处理情况作以下报道,为同行遇到同类问题时借鉴.

    作者:王秦芳;安银东;余妍 刊期: 2007年第03期

  • NY/MMJ型酶联免疫反应加速仪在高原地区的临床使用

    目的 在昆明高原地区使用NY/MMJ型酶联免疫反应加速仪,与传统水浴箱两种仪器在使用同种诊断试剂条件下,评价该仪器的临床使用价值.方法 依据美国NCCLS方案和《全国临床检验操作规程》,分别对90份乙肝两对半检测、60份丙肝病毒抗体检测、20份癌症标志物定量检测血清实行随机抽样,使用这两种仪器进行孵育反应,并对检测结果 进行对比分析.结果 NY/MMJ型酶联免疫反应加速仪在酶联免疫吸附分析(ELISA)中缩短反应时间而不影响反应后的结果 ,同时具有较好的线性、重复性、灵敏度和特异性.结论 该仪器操作简易、性能稳定,对临床正确、快速诊断有很大的积极意义.

    作者:瞿良;李云;滕仪;夏正武 刊期: 2007年第03期

  • 在HBV DNA检测中使用的若干新PCR改良技术

    自1988年PCR技术被成功地应用于检测血清HBV DNA以来,因其具有灵敏度高、速度快、简便,被广泛应用于临床HBV DNA的检测,并在使用过程中不断的被改进,该文介绍了目前国内外使用较多的几种新PCR改良技术.

    作者:王萍 刊期: 2007年第03期

  • PCR误差分析

    PCR技术即聚合酶联链式反应,它是直接测定生物体的特定的遗传物质DNA、RNA的分子生物学方法,该技术自美国mulis教授于1985年发明,并因此获1995年诺贝尔奖以来,其操作简单、快速、特异性强、敏感性高等优点在疾病的诊断、治疗、疗效的观察中具有十分重要的意义.但也正因为其某一些优点,反而隐含了它某种程度上的不可避免的缺点.

    作者:赵涌胜;熊玲 刊期: 2007年第03期

  • 不同定量PCR法测定血清和外周血单个核细胞HBV DNA的评价

    目的 探讨乙肝患者外周血单个核细胞和血清中HBV-DNA含量及其与HBVM之间的关系.方法 62例乙肝患者为检测对象,20例健康献血者为对照组,分别用FQ-PCR定量测定,内对照法定量测定血清HBV-DNA,免疫荧光定量测定HBVM.结果 外周血单个核细胞HBV-DNA检出阳性率为72.6%(45/62),与血清的符合率为87.1%,但慢性乙肝患者外周血单个核细胞HBV-DNA检出率高于血清,且与病情呈正相关.结论 三个指标的联合检测有助于反映肝细胞病毒复制情况,对进一步指导抗病毒治疗有一定意义.

    作者:毛丽萍;王惠民;王陆军;吴月平;凌勇武;鞠少卿;王跃国 刊期: 2007年第03期

  • 干化学试带法尿微量清蛋白测定的探讨

    目的 观察干化学试带法检测尿微量清蛋白的可行性.方法 使用尿微量清蛋白干化学试带对58例尿液标本进行检测,同时进行尿液总蛋白浓度测定及使用免疫比浊法进行尿微量清蛋白定量测定.结果 与免疫比浊法测定尿微量清蛋白结果 相比,干化学试带法测定的敏感性为92%,特异性为79%.干化学试带法测定阳性标本的尿总蛋白浓度与阴性标本相比,结果 有极显著性差异(P<0.01).结论 干化学试带法检测尿微量清蛋白是一种简便可靠的方法,有一定的应用价值.

    作者:邢辉;王帆;曾耀;胡丽华 刊期: 2007年第03期

  • 哮喘患儿血清中sIL-2R,IL-2,IL-4,IL-13的测定与临床意义

    目的 探讨哮喘患儿血清中sIL-2R,IL-2,IL-4,IL-13的水平变化及其与哮喘发病机制的关系.方法 每例患儿及正常对照组均取空腹静脉血并即时分离血清1 ml,用ELISA法检测血清中sIL-2R,IL-2,IL-4,IL-13的水平,并对检测结果 进行医学统计学分析处理.结果 哮喘急性发作组、哮喘缓解组的患儿血清中sIL-2R,IL-2,IL-4,IL-13的测定结果与正常对照组相比较经统计学分析均存在极其显著的差异(P<0.05).其中患儿哮喘急性发作组、哮喘缓解组血清中sIL-2R,IL-4,IL-13的测定结果 要明显高于正常对照组,而IL-2则明显低于正常对照组.此外,哮喘急性发作组与哮喘缓解组血清中IL-2,IL-4,IL-13的测定结果 相比较经统计学分析均存在显著的差异(P<0.05),而sIL-2R则无显著差异.结论 哮喘患儿血清中sIL-2R,IL-2,IL-4,IL-13的水平均存在显著的变化,说明它们在哮喘的发病机制中起着重要的作用.

    作者:张国祥;许文龙 刊期: 2007年第03期

  • SE-9000血液分析仪鞘液的研制及应用

    目的 研究国产鞘液的自主配方及其在SE-9000全自动血液分析仪上的应用.方法 优选国产鞘液的配方组成;以国产鞘液与进口原装鞘液对进口配套的全血质控物、新鲜血液标本作系统的比对实验.结果 国产鞘液与进口原装鞘液的各项检测结果 基本一致,无显著性差异,P>0.05;两者间的相关系数均大于0.983,相关性良好;各检测项目的 回归方程中,斜率均大于0.981,且截距非常小.结论 国产鞘液实验结果 准确、重复性良好、质量稳定,能替代进口原装鞘液用于SE-9000全自动血液分析仪的配套使用.

    作者:刘更夫;龚永启;饶平妹;骆明波 刊期: 2007年第03期

  • ELISA预包被板条室内预检方法的建立及初步应用

    目的 建立一种快速预检ELISA预包被板条的实验室方法.方法 利用现代优质酶联免疫检测仪的基础酶联软件对预包被板条基础空白比色,并与以预包被板条模拟未包被板条批检的标准方法(参考方法)进行比较.结果 模拟前后,总体方差齐(F检验P>0.05,a=0.05),相应的行预检与模拟A平均值的离均差与行模拟净显色A平均值的离均差均无显著性差异(配对计量资料比较t检验:P>0.05,a=0.05).结论 利用基础酶联软件直接预检预包被板条是简便实用的,具有评价预包被板条质量和选板设置数据复核的双重功效;试剂生产单位或厂家也可以对预包被板条二次批检.

    作者:李宏杰;祖华;王元桂;王良玲 刊期: 2007年第03期

  • 自动工作站提取基因组DNA方法的建立及其在HLA基因分型中的应用

    目的 研究和建立从大量全血标本中提取基因组DNA的有效方法 ,以应用于Luminex HLA流式磁珠基因分型.方法 使用自动工作站(瑞士TECAN公司)从600 μl全血中提取基因组DNA,提取的DNA样本用紫外分光光度仪测定其浓度和纯度,DNA的完整性用琼脂糖凝胶电泳检测,并统计分析每一DNA样本流式磁珠HLA-A,B和DRB1基因扩增产物经探针分子杂交后的荧光信号强度.结果 从600 μl全血中提取基因组DNA,含量平均为10.052±0.824 μg,样本的A260nm/A280nm值平均为1.821±0.201.琼脂糖电泳法测得DNA的分子量约为21kb,HLA-A,B和DRB1位点PCR产物杂交后的平均荧光信号强度分别为2 183.84±478.12(exon2),2 168.28±338.59(exon3);2 057.27±397.41(exon2),1959.78±283.24(exon3);3 643.38±327.85.结论 此方法适用于从大量全血样本中快速提取基因组DNA,所得基因组DNA适用于高通量HLA流式磁珠基因分型等下游的分子生物学实验.

    作者:王大明;唐斯;邹红岩;邓志辉;李桢 刊期: 2007年第03期

  • 麻疹病毒多肽抗原免疫原性分析

    目的 分析麻疹病毒(measles virus,MV)主要多肽抗原成分,筛选可用于麻疹病毒特异性抗体诊断的抗原成分.方法 应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹技术(immunoblots,IB)对比分析细胞抗原与麻疹病毒抗原,确定病毒多肽抗原的存在,利用不同时期免疫动物的多克隆抗体分析病毒多肽抗原免疫原性的强弱.结果 SDS-PAGE和多克隆抗体免疫印迹结果表明,麻疹病毒分子量为60 kD和55 kD抗原的免疫原性强,72 kD抗原性较弱,200kD抗原性弱.结论 针对麻疹病毒60 kD和55 kD抗原成分的抗体检测可以作为麻疹病毒感染的早期诊断指标.

    作者:张银辉;杨来智;张小艳;陆学东 刊期: 2007年第03期

  • AVE-762智能尿沉渣分析仪计数池清洗处理

    近,我科购置了一台AVE-762智能尿沉渣分析仪,该仪器是通过显微镜数码照相技术和计算机智能识别技术结合为一体的尿液有形成分定量分析仪器.笔者在使用过程中发现,该仪器计数池常黏附尿液中多种有形成分,致计数出现差错.根据笔者对该仪器一段时间的操作经验,就计数池清洗处理方法总结如下,供同行参考.

    作者:卢其明 刊期: 2007年第03期

现代检验医学杂志

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主管:陕西省卫生厅

主办:陕西省临床检验中心,陕西省人民医院