王宁慧；徐莉
目的 构建表达藤黄微球菌RPF基因蛋白的重组质粒,并在大肠埃希菌中表达获得基因重组蛋白.方法 提取藤黄微球菌基因组DNA,以PCR扩增RPF基因,克隆入pGEX-4T-2表达载体,测序证实正确后转化大肠埃希菌BL21(DE3),在30℃用IPTG诱导3 h后进行SDS-PAGE分析.结果 测序结果 证实获得了藤黄微球菌RPF基因,其序列与GenBank中报道完全一致;SDS-PAGE分析表明,RPF基因在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达了重组蛋白,表达的蛋白量约占菌体蛋白的33.8%.结论 成功克隆了藤黄微球菌RPF基因,并在大肠埃希菌中获得了高效表达,为进一步研究该蛋白的生物学活性及其功能奠定基础.
作者：苏明权；岳乔红；杨柳；王薇；刘家云；郝晓柯 刊期： 2007年第03期
目的 比较湿片法和革兰氏染色法在判断阴道清洁度中的差异,寻找阴道清洁度判断的适当的方法.方法 收集妇科门诊病人的阴道分泌物标本,分别用湿片法和革兰氏染色法对同一标本进行白细胞、上皮细胞、阴道毛滴虫、真菌、线索细胞、阴道乳酸杆菌和杂菌等常规项目的 检查,记录结果 ,分别对各项目进行统计学分析,判断阴道清洁度.结果 湿片法对白细胞、上皮细胞、滴虫的检出率高于革兰氏染色法(P＜0.01);革兰氏染色法对真菌、阴道乳酸杆菌和杂菌的检出率高于湿片法(P＜0.01).结论 湿片法和革兰氏染色法两者相结合能较准确地划分清洁度,明确阴道炎的性质.
作者：朱浩稳；苏俏辉；彭萍 刊期： 2007年第03期
目的 克隆、表达高迁移率族蛋白1(HMGB1).方法 从人外周血淋巴细胞中提取总RNA,经RT-PCR获得HMGB1基因;将该基因克隆到PMD18-T载体中,测序鉴定;将HMGB1基因插入pET32-A表达载体中,30℃诱导表达4h,进行SDS-PAGE分析;目的蛋白在变性条件下经Ni2+-NTA亲和层析纯化后用Western-Blot证实.结果 DNA测序证明,获得了HMGB1基因,其序列与Gen Bank中报道序列完全一致;SDS-PAGE分析表明,HMGB1蛋白在原核中获得高效表达,表达量约占菌体总蛋白的32%;诱导表达产物主要以包涵体形式存在,6 His-NTA纯化后获得目的 蛋白,Western-Blot结果 显示纯化蛋白具有良好的抗原性.结论 成功表达和纯化了HMGB1基因.
作者：姜南艳；张伟；任君萍；顾炳权；沈建军；张惠中 刊期： 2007年第03期
目的 探讨链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导SD大鼠1型糖尿病模型的方法 并观察模型稳定性.方法 按禁食与否、不同体重、不同给药剂量及不同给药途径对SD大鼠进行分组实验,观察其成模率,并在以佳方式制备糖尿病模型后,分别于3,7,14,21 d和28 d对成模动物的血糖、每日采食量、饮水量和排尿量进行测定,并与对照组作比较分析.结果 选择体重范围为201～240 g SD大鼠,禁食后以50mg/kg STZ一次性腹腔注射为佳诱发糖尿病模型方式,其成模率可达到83.3%,成模大鼠于注射后72 h,血糖均稳定维持在18.7～21.1 mmol/L左右,同时成模后即出现多饮、多尿和多食表现,其症状体征与临床病人比较相似.结论 成功制备1型SD大鼠糖尿病模型,且具有较好的稳定性.
作者：黄琛；顾志峰；曹晓蕾；印彤；余江毅；朱晓晖；王粹芳；崔世维 刊期： 2007年第03期
ABX全自动血液分析仪能够自动定量人外周血中有关细胞的十八项参数,并绘制出白细胞、红细胞、血小板三个直方图,我院于2002年购进,在四年多的使用过程中也发现了一些问题,现从以下几点浅谈使用ABX血细胞分析仪的质量控制.
作者：孙继红 刊期： 2007年第03期
目的 提高实验室内部生化项目的 可比性.方法 用cfas校准的日常检测系统对新鲜混合人血清定值,将该血清作为急诊系统的校准品对病人标本测定.结果 校准后的两个系统间尿素检测结果 的允许误差EA=0.31 mmol/L,小于美国CLIA88尿素系统误差标准允许限值SE=0.50 mmol/L.结论 用赋值的新鲜混合人血清校准的急诊生化系统与日常生化系统两者间的生化结果 具有可比性.
作者：李鑫；王德梅 刊期： 2007年第03期
PCR技术即聚合酶联链式反应,它是直接测定生物体的特定的遗传物质DNA、RNA的分子生物学方法,该技术自美国mulis教授于1985年发明,并因此获1995年诺贝尔奖以来,其操作简单、快速、特异性强、敏感性高等优点在疾病的诊断、治疗、疗效的观察中具有十分重要的意义.但也正因为其某一些优点,反而隐含了它某种程度上的不可避免的缺点.
作者：赵涌胜；熊玲 刊期： 2007年第03期
近,我科购置了一台AVE-762智能尿沉渣分析仪,该仪器是通过显微镜数码照相技术和计算机智能识别技术结合为一体的尿液有形成分定量分析仪器.笔者在使用过程中发现,该仪器计数池常黏附尿液中多种有形成分,致计数出现差错.根据笔者对该仪器一段时间的操作经验,就计数池清洗处理方法总结如下,供同行参考.
作者：卢其明 刊期： 2007年第03期
目的 确定性别和年龄因素对C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平有无影响.方法 采用胶乳增强免疫透射比浊法对1 270例门诊健康体检者进行血清CRP浓度的检测.结果 健康人群CRP水平呈偏态分布,中位数男性为1.92mg/L,女性为2.97 mg/L,女性高于男性,差异具有显著性(P＜0.05),50 y以上年龄组CRP水平明显高于其他年龄组(P＜0.05).结论 健康人群CRP浓度受年龄和性别因素影响,应根据不同人群特征建立参考值范围;并需要进行进一步研究以确定CRP水平的性别和年龄差异是否影响用于心血管病风险评价的临界值.
作者：鞠晓红；方德洋；马爱新；方芳 刊期： 2007年第03期
输血作为一种替代疗法,其临床意义不可低估,但是血液安全性问题愈来愈受到关注,血液成分的病毒灭活是提高输血安全的重要手段.该文就近几年这方面的研究进展及其效果作一综述.
作者：姚自同；张献清 刊期： 2007年第03期
我科于2004年2月使用日立7080全自动生化分析仪,该机具有操作简便、灵敏度高、稳定性好、自动化程度高等优点.虽然该机的故障率低,但也发现一些常见问题,若处理不当会影响正常工作.现将我们遇到的常见故障、处理及仪器保养作一介绍,仅供同行参考.
作者：张粤；郝伟；廉科；王岚平 刊期： 2007年第03期
目的 分析肺炎克雷伯菌临床分离株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的主要基因型.方法 用表型确定的临床分离产ESBLs的肺炎克雷伯菌34株,分别用TEM,SHV,CTX-M-1,CTX-M-2和CTX-M-9扩增引物进行聚合酶链反应(PCR)扩增,并对PCR产物进行序列分析.结果 PCR扩增结果 显示TEM,SHV,CTX-M-1,CTX-M-2和CTX-M9的阳性率分别为47.06%,85.29%,26.47%,32.35%和52.94%,CTX-M型总阳性率为88.24%,序列分析证实扩增为目的产物.结论 34株ESBLs肺炎克雷伯菌的主要基因型是CTX-M型和SHV型,且同时携带2种以上基因的菌株占所测菌株的82.35%,需引起临床的高度重视.
作者：韦洁宏；黄烈；林广城；刘键；杨来智；陆学东 刊期： 2007年第03期
目的 加强临床用血的管理,进一步做好节约血资源、指导临床科学、合理、安全用血.方法 对5 y临床用血情况进行回顾性总结并分析.结果 成分输血比例2005年达到99.8%,各种成分输血的比例分别为:血浆48%,红细胞制品36%,血小板8%,冷沉淀6%,白细胞0%.手术自体血回输比例2005年达到19.4%,手术用血平均比例为64%.结论 成分输血的理念得到进一步的加强,但要降低血浆应用的比例,提倡手术自体血回输,要积极开展血液成分病毒或病原体的灭活工作.
作者：李振江；成军；孙长贵；张伟强 刊期： 2007年第03期
目的 探讨肝炎病毒感染与自由基及肿瘤坏死因子的关系.方法 用ELISA、显色、比色法检测肝炎病毒感染者、肝炎患者血液中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、脂质氧化物(LPO)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、肿瘤坏死因子(TNF)的含量.结果 肝炎病毒感染者、肝炎患者血中LPO,MDA,TNF含量明显高于对照组(P＜0.05,P＜0.01);而SOD,GSH-PX,CAT的含量明显低于对照组(P＜0.05,P＜0.01),与肝炎病毒感染的种类及肝炎发生的程度密切相关.结论 肝炎病毒感染者、肝炎患者的SOD,GSH-PX,CAT,LPO,MDA,TNF的含量检测,对了解肝脏损伤及肝炎的防治有一定意义.
作者：崔相法；卢志明；王红霞 刊期： 2007年第03期
目的 探讨各型乙肝患者病毒复制指标(HBV-DNA)分别与其它血清标志物以及肝功能的关系.方法 采用荧光标记探针定量聚合酶链反应(PCR)技术,酶联免疫吸附测定法,肝功能检验用常规法.对500例各型乙肝病毒感染者血清HBV-DNA含量及血清学标志物检测,同时测定了各型乙肝时血清TBIL,ALT,AST,ALP,γ-GPT,AST/ALT及胆红素的含量变化.结果 大三阳组的HBV-DNA含量显著高于小三阳组的HBV-DNA含量,差异有统计学意义(P＜0.01),小三阳与其它各型之间比较差异较明显(P＜0.05).临床各型HBV-DNA阳性组和阴性组之间肝功能无显著性差异(P＞0.05),结论 HBeAg与HBV-DNA含量明显相关,HBeAg阴性或HBeAg/抗HBe血清转换,不表明病毒停止复制.通过相关性分析HBV-DNA含量与肝功能指标之间没有明显的相关性(P＞0.05),肝功能的损害程度与HBV-DNA含量之间无揶相关性,定量检测HBV-DNA可以直接反映HBV在血液中的复制情况,并能准确地解释感染HBV后的传染性.
作者：石晓霞；任超杰；张秀华；陈秀生；汪建军 刊期： 2007年第03期
钩虫头部的结构,尤其是口囊结构、形态以及钩齿是鉴别本虫种的重要依据之一.因此,在医学院校中常需经常制作此标本,以供教学之用.我们用卡拉唑黑染料E(Chlorazol Black E)(此法过去文献未见报道)对虫体进行染色制片,经二十多年教学重复使用,至今标本没有褪色,口囊内的钩齿依然清晰,效果很好.现将染色方法介绍如下:1 染色液配制甲液:95%(v/v)酒精170 ml,甲醇160 ml,冰醋酸20 ml,石炭酸20 ml,1 g/L磷钼酸12 ml,蒸馏水618 ml,共1000 ml.
作者：林丽卿；洪延波；李洁藏 刊期： 2007年第03期
目的 探讨超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、脂蛋白(a)[LP(a)]、D-二聚体(DD)和同型半胱氨酸(HCY)与急性脑梗死的关系.方法 检测82例急性脑梗死患者血清LP(a),hs-CRP,HCY和血浆DD的浓度,另外选择健康人群40例作为对照组.结果 急性脑梗死患者hs-CRP,LP(a),HCY和DD的浓度显著高于正常对照组(P＜0.01).结论 HCY,LP(a),hs-CRP,DD联合检测有助于了解急性脑梗死患者的发生和病情变化,另外HCY,LP(a),hs-CRP作为独立的动脉粥样硬化危险因素对急性脑梗死的预防和早期诊断有着积极的临床意义.
作者：康建华 刊期： 2007年第03期
目的 分析麻疹病毒(measles virus,MV)主要多肽抗原成分,筛选可用于麻疹病毒特异性抗体诊断的抗原成分.方法 应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹技术(immunoblots,IB)对比分析细胞抗原与麻疹病毒抗原,确定病毒多肽抗原的存在,利用不同时期免疫动物的多克隆抗体分析病毒多肽抗原免疫原性的强弱.结果 SDS-PAGE和多克隆抗体免疫印迹结果表明,麻疹病毒分子量为60 kD和55 kD抗原的免疫原性强,72 kD抗原性较弱,200kD抗原性弱.结论 针对麻疹病毒60 kD和55 kD抗原成分的抗体检测可以作为麻疹病毒感染的早期诊断指标.
作者：张银辉；杨来智；张小艳；陆学东 刊期： 2007年第03期
目的 研究不同的定标方式对免疫透射比浊法测定免疫球蛋白、补体结果 的影响.方法 使用OLYMPUS AU640自动生化分析仪和立德曼免疫透射比浊法试剂,采用不同的定标方法 对40例血清的IgG,IgA,IgM,C3和C4进行测定.结果 使用多标准POLYGONAL和SPLINE方法 拟合定标曲线后测定结果 表现良好的一致性,多点定标与单点定标测定结果 具有显著性差异.结论 免疫透射比浊测定,应当根据仪器情况,选择适当的非线性曲线拟合方式建立标准工作曲线.
作者：朱铭 刊期： 2007年第03期
目的 研究超高倍显微分析仪在诊断泌尿生殖系感染中的应用价值.方法 用清华同方多媒体超高倍显微分析仪检测3 544例门诊妇科和泌尿科患者阴道或尿道分泌物,并对部分标本与PCR法和培养法作对照分析.结果 一种病原体感染者占54.56%,两种至四种病原体混合感染者占41.49%.超高倍显微分析仪病原体检出率占96.05%.超高倍显微分析仪对沙眼衣原体和解脲支原体的检出率与培养法和PCR法比较无显著性差异(P＞0.05).结论 超高倍显微分析仪可同时动态观察多种病原体,对于多重混合感染患者可避免漏检.方法 简便、快速、准确、直观,为泌尿生殖系感染的诊断、指导用药和疗效观察提供了可靠依据.
作者：李志清；魏瑞全；李彤；李旭光；高西娥；倪颖 刊期： 2007年第03期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
