鞠晓红；方德洋；马爱新；方芳
自1988年PCR技术被成功地应用于检测血清HBV DNA以来,因其具有灵敏度高、速度快、简便,被广泛应用于临床HBV DNA的检测,并在使用过程中不断的被改进,该文介绍了目前国内外使用较多的几种新PCR改良技术.
作者：王萍 刊期： 2007年第03期
目的 克隆、表达高迁移率族蛋白1(HMGB1).方法 从人外周血淋巴细胞中提取总RNA,经RT-PCR获得HMGB1基因;将该基因克隆到PMD18-T载体中,测序鉴定;将HMGB1基因插入pET32-A表达载体中,30℃诱导表达4h,进行SDS-PAGE分析;目的蛋白在变性条件下经Ni2+-NTA亲和层析纯化后用Western-Blot证实.结果 DNA测序证明,获得了HMGB1基因,其序列与Gen Bank中报道序列完全一致;SDS-PAGE分析表明,HMGB1蛋白在原核中获得高效表达,表达量约占菌体总蛋白的32%;诱导表达产物主要以包涵体形式存在,6 His-NTA纯化后获得目的 蛋白,Western-Blot结果 显示纯化蛋白具有良好的抗原性.结论 成功表达和纯化了HMGB1基因.
作者：姜南艳；张伟；任君萍；顾炳权；沈建军；张惠中 刊期： 2007年第03期
航创HC-9886分析仪是由深圳航创公司生产的包括自动进样仪的全自动电解质分析仪,在国内广泛使用,具有操作简单,响应时间快等特点.下面将一年来使用中出现的故障和维护保养的经验介绍如下,供同道参考.
作者：李晓东 刊期： 2007年第03期
目的 分析经日立-罗氏检测系统(A系统)量值传递后的新鲜混合血清作临时酶校准品的可行性.方法 先用日立-罗氏检测系统将c.f.a.s的酶的量值传递给新鲜混合血清作临时酶校准品,然后用A系统、Roehe Modular P分析仪与科华-东菱试剂(B系统)、Dade Dimension RxL分析仪与配套试剂(C系统)、Dade Dimension RxL分析仪与科华-东菱试剂(D系统)、Beckman CX9分析仪与配套试剂(E系统)、Hitachi 7170A分析仪与Randox试剂(F系统)、Olympus 640分析仪与北京中生试剂(G系统)测定50份新鲜血清和临时酶校准品的ALT,AST,CK,LDH,ALP,γ-GT活性,后用临时酶校准品标示值与测定值之比作为校正因子,校正50份新鲜血清的测定结果,并进行校正前后的结果 比较和临时酶校准品互通性分析.结果 校正前各检测系统测定结果 间有较大的差异(CV4.99%～13.98%),校正后差异变小(CV1.30%～10.34%),其中B,C,E,F系统中ALT,AST,CK,LDH,ALP,γ-GT和D,G系统中ALT,AST,CK与A系统结果偏差明显变小,并且仪器与试剂配套的C,E系统间为备检测系统间小;但D,G系统中LDH,ALP,γ-GT差异改变不明显.结论 采用新鲜混合血清作临时酶校准品有一定的应用价值,但使用前必须进行酶校准品互通性检验,才能保证每项酶的测定结果 的准确和可靠.
作者：顾国龙；谢智光；梁景云；唐芳玫；徐文丽；冯玉清；李颖；黄冬梅 刊期： 2007年第03期
目的 应用CD3单克隆抗体(CD3McAb)和重组人白细胞介素-2(rhIL-2)共同诱导外周血单个核细胞制备CD3AK细胞,研究其对白血病细胞的杀伤作用.方法 用台盼蓝活细胞计数法计算细胞扩增倍数,MTT法检测CD3AK细胞杀伤活性.结果 正常人CD3AK细胞对各型急性白血病细胞及K562细胞均有明显的杀伤活性,且无显著性差异(P＞0.05);急性白血病完全缓解期CD3AK细胞与正常人CD3AK细胞对白血病细胞的杀伤活性,亦无显著性差异(P＞0.05);急性白血病未缓解期CD3AK对白血病细胞杀伤活性明显减弱,与正常人CD3AK细胞比较,差异非常显著(P＜0.01).结论 正常人与急性白血病完全缓解期CD3AK细胞具有明显的抗白血病作用,急性白血病未缓解期CD3AK细胞杀伤活性明显减弱.
作者：杨娣娣；韩秀蕊；魏绪仓；邢佩倪；李梅生 刊期： 2007年第03期
PCR技术即聚合酶联链式反应,它是直接测定生物体的特定的遗传物质DNA、RNA的分子生物学方法,该技术自美国mulis教授于1985年发明,并因此获1995年诺贝尔奖以来,其操作简单、快速、特异性强、敏感性高等优点在疾病的诊断、治疗、疗效的观察中具有十分重要的意义.但也正因为其某一些优点,反而隐含了它某种程度上的不可避免的缺点.
作者：赵涌胜；熊玲 刊期： 2007年第03期
目的 比较湿片法和革兰氏染色法在判断阴道清洁度中的差异,寻找阴道清洁度判断的适当的方法.方法 收集妇科门诊病人的阴道分泌物标本,分别用湿片法和革兰氏染色法对同一标本进行白细胞、上皮细胞、阴道毛滴虫、真菌、线索细胞、阴道乳酸杆菌和杂菌等常规项目的 检查,记录结果 ,分别对各项目进行统计学分析,判断阴道清洁度.结果 湿片法对白细胞、上皮细胞、滴虫的检出率高于革兰氏染色法(P＜0.01);革兰氏染色法对真菌、阴道乳酸杆菌和杂菌的检出率高于湿片法(P＜0.01).结论 湿片法和革兰氏染色法两者相结合能较准确地划分清洁度,明确阴道炎的性质.
作者：朱浩稳；苏俏辉；彭萍 刊期： 2007年第03期
目的 核实Bayer Centaur 240全自动化学发光仪甲胎蛋白(AFP)的分析灵敏度.方法 用甲胎蛋白配套稀释液作为空白样品,将合适浓度的新鲜血清重复测定5次,计算其均值.用稀释液作系列稀释,组成0,0.94,1.90,2.80,3.80,5.60 ng/ml的甲胎蛋白系列检测样品,重复测定10次,记录光强度值(RLUs).结果 按99.7%的可信限计算,AFP检测低限为0.94 ng/ml;按照国际纯粹和应用化学联合会的规定,AFP检测低限1.15 ng/ml,生物检测限在1.90～2.80 ng/ml之间,功能灵敏度为1.9 ng/ml.结论 实验两种方法 计算的检测低限均小于厂家所给检测低限1.3 ng/ml.
作者：孙蕾；郑松柏；徐建华；张秀明；林莲英 刊期： 2007年第03期
目的 探讨肝炎病毒感染与自由基及肿瘤坏死因子的关系.方法 用ELISA、显色、比色法检测肝炎病毒感染者、肝炎患者血液中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、脂质氧化物(LPO)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、肿瘤坏死因子(TNF)的含量.结果 肝炎病毒感染者、肝炎患者血中LPO,MDA,TNF含量明显高于对照组(P＜0.05,P＜0.01);而SOD,GSH-PX,CAT的含量明显低于对照组(P＜0.05,P＜0.01),与肝炎病毒感染的种类及肝炎发生的程度密切相关.结论 肝炎病毒感染者、肝炎患者的SOD,GSH-PX,CAT,LPO,MDA,TNF的含量检测,对了解肝脏损伤及肝炎的防治有一定意义.
作者：崔相法；卢志明；王红霞 刊期： 2007年第03期
目的 探讨精神分裂症患者与一氧化氮的关系.方法 使用李恩明改良的Griess法测定59例精神分裂症阳性症状患者与40例正常健康人血清中一氧化氮含量.结果 精神分裂症阳性症状患者血清一氧化氮含量明显高于正常健康组(P＜0.01).结论 一氧化氮作为一种非典型的神经递质,可能在精神分裂症发病机制中起一定作用.
作者：许家超；高镇松；吴顺彬 刊期： 2007年第03期
目的 提高实验室内部生化项目的 可比性.方法 用cfas校准的日常检测系统对新鲜混合人血清定值,将该血清作为急诊系统的校准品对病人标本测定.结果 校准后的两个系统间尿素检测结果 的允许误差EA=0.31 mmol/L,小于美国CLIA88尿素系统误差标准允许限值SE=0.50 mmol/L.结论 用赋值的新鲜混合人血清校准的急诊生化系统与日常生化系统两者间的生化结果 具有可比性.
作者：李鑫；王德梅 刊期： 2007年第03期
目的 研究超高倍显微分析仪在诊断泌尿生殖系感染中的应用价值.方法 用清华同方多媒体超高倍显微分析仪检测3 544例门诊妇科和泌尿科患者阴道或尿道分泌物,并对部分标本与PCR法和培养法作对照分析.结果 一种病原体感染者占54.56%,两种至四种病原体混合感染者占41.49%.超高倍显微分析仪病原体检出率占96.05%.超高倍显微分析仪对沙眼衣原体和解脲支原体的检出率与培养法和PCR法比较无显著性差异(P＞0.05).结论 超高倍显微分析仪可同时动态观察多种病原体,对于多重混合感染患者可避免漏检.方法 简便、快速、准确、直观,为泌尿生殖系感染的诊断、指导用药和疗效观察提供了可靠依据.
作者：李志清；魏瑞全；李彤；李旭光；高西娥；倪颖 刊期： 2007年第03期
滥用抗生素的四种原因:不习惯应用微生物检查或嫌麻烦不愿做;对抗生素的使用指征及细菌的耐药性认识不足;用药模式不当;对广谱性抗生素的合理性使用认识不足.滥用抗生素的严重性:引起细菌耐药以及产生各种不良反应、引起医疗纠纷等:①尽管新型抗菌药物不断出现,但常见感染菌的耐药性也随之增加,如:耐万古霉素的肠球菌,耐甲氧西林的葡萄球菌和具有超广谱β-内酰胺酶(ESBLS)的肠杆菌科菌的检出率也在增多,这说明我国面临着细菌耐药率增多的威胁,这些现象与抗生素的滥用有着很大的关系;②滥用耳毒性抗生素(如:庆大霉素、丁胺卡那霉素、新霉素)对耳蜗神经造成伤害,产生听力下降;③随着《医疗事故处理条例》的颁布和实施以及人们自我保护意识的增加,医疗事故和纠纷会涉及到医疗系统的各个领域,而如此滥用抗生素有可能被控告为误诊或不合理使用抗生素.微生物检查及药物监测的目的 :提供病原菌的诊断、指导临床医生合理使用抗生素及时控制感染.合理使用抗生素基本的三个要素:①明确感染菌;②根据体外药敏试验选择抗生素;③合理选药.
作者：覃琼英；赖极隆；李健玲 刊期： 2007年第03期
目的 评价缺血修饰清蛋白(IMA)对急性冠脉综合征(ACS)具有早期辅助诊断的意义.疾病类型不同其诊断意义亦不同.方法 选择急性胸痛入院患者120例,其中急性心梗44例,心绞痛46例,非心源性胸痛30例.在胸痛发作5 h内采血做IMA实验,测定结果 用ACB值(清蛋白钴结合能力,单位:U/ml)表示,观察IMA对各组疾病的诊断价值.另选30例急性心梗入院需溶栓治疗的患者,分别于溶栓前、溶栓开始后2,4,6,8,10,16,24 h采血做IMA实验,测定血清ACB值观察IMA对溶栓监测的意义.结果 急性心梗组、心绞痛组患者血清IMA实验ACB值与正常对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.01),且心梗组患者血清IMA实验ACB值与心绞痛组比较差异有显著性(P＜0.05).在溶栓监测中各时间段的IMA实验ACB值比较差异无显著性(P＞0.05).结论 IMA是诊断心肌缺血的早期指标,可用于ACS的早期诊断,且可明显提高对心绞痛早期诊断的灵敏性,但用于溶栓监测意义不大.
作者：张东玲；朱广博；郭禹；刘蕊 刊期： 2007年第03期
目的 研究血浆与血清标本检测B型脑钠肽的异同.方法 使用微粒子捕捉免疫化学发光法(MELA)检测50例对照组和259例充血性心力衰竭(CHF)患者的B型脑钠肽水平.结果 血浆与血清标本检测B型脑钠肽结果 差异无显著性;而充血性心力衰竭患者随着病情加重B型脑钠肽水平升高.结论 血浆与血清标本均可检测B型脑钠肽,其结果 基本相同.
作者：张保平；宿瑞俊；冯新平；郝艳萍 刊期： 2007年第03期
我科于2004年2月使用日立7080全自动生化分析仪,该机具有操作简便、灵敏度高、稳定性好、自动化程度高等优点.虽然该机的故障率低,但也发现一些常见问题,若处理不当会影响正常工作.现将我们遇到的常见故障、处理及仪器保养作一介绍,仅供同行参考.
作者：张粤；郝伟；廉科；王岚平 刊期： 2007年第03期
目的 确定性别和年龄因素对C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平有无影响.方法 采用胶乳增强免疫透射比浊法对1 270例门诊健康体检者进行血清CRP浓度的检测.结果 健康人群CRP水平呈偏态分布,中位数男性为1.92mg/L,女性为2.97 mg/L,女性高于男性,差异具有显著性(P＜0.05),50 y以上年龄组CRP水平明显高于其他年龄组(P＜0.05).结论 健康人群CRP浓度受年龄和性别因素影响,应根据不同人群特征建立参考值范围;并需要进行进一步研究以确定CRP水平的性别和年龄差异是否影响用于心血管病风险评价的临界值.
作者：鞠晓红；方德洋；马爱新；方芳 刊期： 2007年第03期
目的 研究和建立从大量全血标本中提取基因组DNA的有效方法 ,以应用于Luminex HLA流式磁珠基因分型.方法 使用自动工作站(瑞士TECAN公司)从600 μl全血中提取基因组DNA,提取的DNA样本用紫外分光光度仪测定其浓度和纯度,DNA的完整性用琼脂糖凝胶电泳检测,并统计分析每一DNA样本流式磁珠HLA-A,B和DRB1基因扩增产物经探针分子杂交后的荧光信号强度.结果 从600 μl全血中提取基因组DNA,含量平均为10.052±0.824 μg,样本的A260nm/A280nm值平均为1.821±0.201.琼脂糖电泳法测得DNA的分子量约为21kb,HLA-A,B和DRB1位点PCR产物杂交后的平均荧光信号强度分别为2 183.84±478.12(exon2),2 168.28±338.59(exon3);2 057.27±397.41(exon2),1959.78±283.24(exon3);3 643.38±327.85.结论 此方法适用于从大量全血样本中快速提取基因组DNA,所得基因组DNA适用于高通量HLA流式磁珠基因分型等下游的分子生物学实验.
作者：王大明；唐斯；邹红岩；邓志辉；李桢 刊期： 2007年第03期
我院于2001年、2006年先后引进一台深圳希莱恒医用电子有限公司生产的IMS-972型电解质分析仪,该机具有操作简单、结果可靠、重复性好等优点.由于长期使用,积累了大量操作及故障处理的经验,现将该机的一些常见故障及处理办法分述于下,供同仁参考.
作者：田居祥 刊期： 2007年第03期
目的 了解预稀释血样本不同放置时间对血细胞参数的影响,掌握佳测定时间,得到准确可靠的测定值.方法 血液标本预稀释后放置0,5,10,20,30,60和180min后测定其各参数值,并用统计学处理.结果 发现RBC,HGB,HCT,MCH,MCHC五项参数的测定结果 基本不发生改变;在30 min时,LYM%明显升高(P＜0.05),GRN%明显降低(P＜0.05),PLT降低在60 min,WBC,MPV在0 min时明显升高(P＜0.01).结论 使用血细胞分析仪时,已稀释血标本测定应在5～20 min以内完成.
作者：黄欢；王琼 刊期： 2007年第03期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
