周炳烨;孙延河;李六红
2005年我院购进一台法国STAGO公司生产的STA Compact全自动血凝仪,该仪器以其准确、灵敏、快速的特点,为临床出血性疾病、血栓性疾病的诊断治疗,为抗凝、溶栓治疗的实验检测,以及一些特殊检查前的凝血功能检测带来很大帮助.不过,仪器使用不久即出现室内质控样品APTT值总超标的现象,为此我们多方面查找原因,如复溶质控样品,严格控制溶解试剂时间,改用蒸馏水为注射用水等,但问题并没有得到解决,且PT、FIB质控样品测定值也出现超标.后来,经多方咨询和反复实验,终于找准了原因:为了节省试剂把用剩的旧试剂倒回新试剂瓶中继续使用,而开瓶后的试剂在氧化等作用下出现了变质,且时间越长变质越严重,试剂受到的污染也越严重,到一定程度后质控检查就无法通过.对于较为敏感的APTT,试剂变质或污染对检测结果的影响尤为明显.
作者:高相珍 刊期: 2007年第03期
我院于2004年购进美国雅培公司的AXSYM全自动免疫发光分析仪,它采用微粒子酶免分析(MEIA)、荧光偏振免疫分析(FPIA)、离子捕捉免疫分析(ICIA)三种技术,可以对血清或血浆中的蛋白质、病毒抗原、血药浓度、激素等进行测定,具有极高的灵敏度、特异性和稳定性,至此运行两年多,也得到了临床科室的认可.但是,我们在使用过程中遇到了一些问题,得到一些体会,特将常见的几种故障排除及应用体会报告如下,以期与同行共同探讨.
作者:刘紫强 刊期: 2007年第03期
钩虫头部的结构,尤其是口囊结构、形态以及钩齿是鉴别本虫种的重要依据之一.因此,在医学院校中常需经常制作此标本,以供教学之用.我们用卡拉唑黑染料E(Chlorazol Black E)(此法过去文献未见报道)对虫体进行染色制片,经二十多年教学重复使用,至今标本没有褪色,口囊内的钩齿依然清晰,效果很好.现将染色方法介绍如下:1 染色液配制甲液:95%(v/v)酒精170 ml,甲醇160 ml,冰醋酸20 ml,石炭酸20 ml,1 g/L磷钼酸12 ml,蒸馏水618 ml,共1000 ml.
作者:林丽卿;洪延波;李洁藏 刊期: 2007年第03期
目的 探讨血样品低温(2~8 ℃)保存1 w对血细胞8个参数测定结果 的影响.方法 采集31例健康人静脉血在7d内每日测定一次血细胞的参数.结果 白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白(Hb)、红细胞比积(HCT)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、血小板计数(PLT)在1 w内结果 无显著性改变(P>0.05).结论 全血样品低温放置1 w仍然可为临床提供有参考价值的血细胞参数.
作者:龚永启;毕红琳;刘更夫;左芳 刊期: 2007年第03期
目的 建立一种快速预检ELISA预包被板条的实验室方法.方法 利用现代优质酶联免疫检测仪的基础酶联软件对预包被板条基础空白比色,并与以预包被板条模拟未包被板条批检的标准方法(参考方法)进行比较.结果 模拟前后,总体方差齐(F检验P>0.05,a=0.05),相应的行预检与模拟A平均值的离均差与行模拟净显色A平均值的离均差均无显著性差异(配对计量资料比较t检验:P>0.05,a=0.05).结论 利用基础酶联软件直接预检预包被板条是简便实用的,具有评价预包被板条质量和选板设置数据复核的双重功效;试剂生产单位或厂家也可以对预包被板条二次批检.
作者:李宏杰;祖华;王元桂;王良玲 刊期: 2007年第03期
目的 探讨链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导SD大鼠1型糖尿病模型的方法 并观察模型稳定性.方法 按禁食与否、不同体重、不同给药剂量及不同给药途径对SD大鼠进行分组实验,观察其成模率,并在以佳方式制备糖尿病模型后,分别于3,7,14,21 d和28 d对成模动物的血糖、每日采食量、饮水量和排尿量进行测定,并与对照组作比较分析.结果 选择体重范围为201~240 g SD大鼠,禁食后以50mg/kg STZ一次性腹腔注射为佳诱发糖尿病模型方式,其成模率可达到83.3%,成模大鼠于注射后72 h,血糖均稳定维持在18.7~21.1 mmol/L左右,同时成模后即出现多饮、多尿和多食表现,其症状体征与临床病人比较相似.结论 成功制备1型SD大鼠糖尿病模型,且具有较好的稳定性.
作者:黄琛;顾志峰;曹晓蕾;印彤;余江毅;朱晓晖;王粹芳;崔世维 刊期: 2007年第03期
目的 干化学FDC3500和湿化学AVL9180两种方法 检测电解质结果 的初步比较及相关性分析.方法 收集50份新鲜血浆标本,分别在FDC3500和AVL9180上检测电解质(K+,Na+,Cl-).结果 两种方法测定结果间比较无显著性差异(P>0.05),分析结果一致;K+r>0.975呈高度正相关,Na+,Cl- r>0.870正相关性较好.结论 干化学FDC3500和湿化学AVL9180可同样准确、快速地为临床诊断提供电解质项目的参考依据.
作者:聂庆东;张秀梅 刊期: 2007年第03期
目的 了解西安地区葡萄球菌对红霉素和克林霉素的不同耐药表型及其诱导型克林霉素耐药的发生率.方法 采用K-B法检测葡萄球菌对红霉素和克林霉素的耐药性,头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌,D试验检测诱导型克林霉素耐药表型.结果 所有204株葡萄球菌中,90株(44.12%)为结构型耐药(cMLS),即对红霉素和克林霉素同时耐药;57株(27.94%)为诱导型耐药(iMLS),即对红霉素耐药对克林霉素敏感,但D试验阳性;32株(15.69%)为MS表型,即对红霉素耐药,对克林霉素敏感,但D试验阴性(MS);其中在红霉素耐药、克林霉素敏感体外表型中,显示诱导型克林霉素耐药在MRSA,MSSA,MRCNS和MSCNS中的比例分别为65.22%,58.33%,67.65%和60%;在所有耐红霉素菌株所占比例分别为31.25%,36.84%,31.94%和30%.结论 西安地区耐红霉素葡萄球菌中诱导型克林霉素耐药的发生率处于相对较高水平,临床细菌室应重视D-试验以指导临床合理选择抗生素.
作者:耿燕;王香玲;赵丽华;刘军;张毅;高宁 刊期: 2007年第03期
目的 了解预稀释血样本不同放置时间对血细胞参数的影响,掌握佳测定时间,得到准确可靠的测定值.方法 血液标本预稀释后放置0,5,10,20,30,60和180min后测定其各参数值,并用统计学处理.结果 发现RBC,HGB,HCT,MCH,MCHC五项参数的测定结果 基本不发生改变;在30 min时,LYM%明显升高(P<0.05),GRN%明显降低(P<0.05),PLT降低在60 min,WBC,MPV在0 min时明显升高(P<0.01).结论 使用血细胞分析仪时,已稀释血标本测定应在5~20 min以内完成.
作者:黄欢;王琼 刊期: 2007年第03期
目的 为探讨UF-100尿液分析仪检测浆膜积液的临床价值.方法 运用传统手工法和UF-100全自动尿液分析仪同时检测患者浆膜积液.结果 两种方法中白细胞数(WBC)无显著性差异(P>0.05),漏出液与渗出液间白细胞数、间皮细胞、细菌数均有显著性差异(P<0.05),非化脓性与化脓性细菌感染性积液中WBC数、细菌数均有显著性差异(P<0.05),间皮细胞数无显著性差异(P>0.05).结论 用UF-100尿液分析仪检测脑脊液、胸腹水标本简单、易行,检测结果
作者:董莉;张波 刊期: 2007年第03期
目的 研究国产鞘液的自主配方及其在SE-9000全自动血液分析仪上的应用.方法 优选国产鞘液的配方组成;以国产鞘液与进口原装鞘液对进口配套的全血质控物、新鲜血液标本作系统的比对实验.结果 国产鞘液与进口原装鞘液的各项检测结果 基本一致,无显著性差异,P>0.05;两者间的相关系数均大于0.983,相关性良好;各检测项目的 回归方程中,斜率均大于0.981,且截距非常小.结论 国产鞘液实验结果 准确、重复性良好、质量稳定,能替代进口原装鞘液用于SE-9000全自动血液分析仪的配套使用.
作者:刘更夫;龚永启;饶平妹;骆明波 刊期: 2007年第03期
目的 研究和建立从大量全血标本中提取基因组DNA的有效方法 ,以应用于Luminex HLA流式磁珠基因分型.方法 使用自动工作站(瑞士TECAN公司)从600 μl全血中提取基因组DNA,提取的DNA样本用紫外分光光度仪测定其浓度和纯度,DNA的完整性用琼脂糖凝胶电泳检测,并统计分析每一DNA样本流式磁珠HLA-A,B和DRB1基因扩增产物经探针分子杂交后的荧光信号强度.结果 从600 μl全血中提取基因组DNA,含量平均为10.052±0.824 μg,样本的A260nm/A280nm值平均为1.821±0.201.琼脂糖电泳法测得DNA的分子量约为21kb,HLA-A,B和DRB1位点PCR产物杂交后的平均荧光信号强度分别为2 183.84±478.12(exon2),2 168.28±338.59(exon3);2 057.27±397.41(exon2),1959.78±283.24(exon3);3 643.38±327.85.结论 此方法适用于从大量全血样本中快速提取基因组DNA,所得基因组DNA适用于高通量HLA流式磁珠基因分型等下游的分子生物学实验.
作者:王大明;唐斯;邹红岩;邓志辉;李桢 刊期: 2007年第03期
我院于2001年、2006年先后引进一台深圳希莱恒医用电子有限公司生产的IMS-972型电解质分析仪,该机具有操作简单、结果可靠、重复性好等优点.由于长期使用,积累了大量操作及故障处理的经验,现将该机的一些常见故障及处理办法分述于下,供同仁参考.
作者:田居祥 刊期: 2007年第03期
目的 评价缺血修饰清蛋白(IMA)对急性冠脉综合征(ACS)具有早期辅助诊断的意义.疾病类型不同其诊断意义亦不同.方法 选择急性胸痛入院患者120例,其中急性心梗44例,心绞痛46例,非心源性胸痛30例.在胸痛发作5 h内采血做IMA实验,测定结果 用ACB值(清蛋白钴结合能力,单位:U/ml)表示,观察IMA对各组疾病的诊断价值.另选30例急性心梗入院需溶栓治疗的患者,分别于溶栓前、溶栓开始后2,4,6,8,10,16,24 h采血做IMA实验,测定血清ACB值观察IMA对溶栓监测的意义.结果 急性心梗组、心绞痛组患者血清IMA实验ACB值与正常对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01),且心梗组患者血清IMA实验ACB值与心绞痛组比较差异有显著性(P<0.05).在溶栓监测中各时间段的IMA实验ACB值比较差异无显著性(P>0.05).结论 IMA是诊断心肌缺血的早期指标,可用于ACS的早期诊断,且可明显提高对心绞痛早期诊断的灵敏性,但用于溶栓监测意义不大.
作者:张东玲;朱广博;郭禹;刘蕊 刊期: 2007年第03期
目的 确定性别和年龄因素对C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平有无影响.方法 采用胶乳增强免疫透射比浊法对1 270例门诊健康体检者进行血清CRP浓度的检测.结果 健康人群CRP水平呈偏态分布,中位数男性为1.92mg/L,女性为2.97 mg/L,女性高于男性,差异具有显著性(P<0.05),50 y以上年龄组CRP水平明显高于其他年龄组(P<0.05).结论 健康人群CRP浓度受年龄和性别因素影响,应根据不同人群特征建立参考值范围;并需要进行进一步研究以确定CRP水平的性别和年龄差异是否影响用于心血管病风险评价的临界值.
作者:鞠晓红;方德洋;马爱新;方芳 刊期: 2007年第03期
对氧磷酶(paraoxonase,PON)家族是由PON1,PON2,PON3三大成员组成的.三者在分子结构、基因结构及生物学特性上都有很多相似性.对氧磷酶重要的生物学特性是抗氧化性,这与许多疾病的发生发展有关.目前的研究已经肯定对氧磷酶具有抗心血管疾病(主要是动脉粥样硬化、冠心病)的作用,但是这种关系主要是由PON1活性决定的,而与PON1的基因多态性关系不大.对氧磷酶的活性与糖尿病(DM)及其并发症的发生呈负相关,但是其基因型与DM的关系还需要有更多的研究来证实.吸烟可以降低血清对氧磷酶的活性和浓度,酒精对PON的影响与酒精的摄入量有关,而维生素E等影响的研究结论 尚不一致,需要进行更多的实验.
作者:李园园;李萍 刊期: 2007年第03期
目的 构建表达藤黄微球菌RPF基因蛋白的重组质粒,并在大肠埃希菌中表达获得基因重组蛋白.方法 提取藤黄微球菌基因组DNA,以PCR扩增RPF基因,克隆入pGEX-4T-2表达载体,测序证实正确后转化大肠埃希菌BL21(DE3),在30℃用IPTG诱导3 h后进行SDS-PAGE分析.结果 测序结果 证实获得了藤黄微球菌RPF基因,其序列与GenBank中报道完全一致;SDS-PAGE分析表明,RPF基因在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达了重组蛋白,表达的蛋白量约占菌体蛋白的33.8%.结论 成功克隆了藤黄微球菌RPF基因,并在大肠埃希菌中获得了高效表达,为进一步研究该蛋白的生物学活性及其功能奠定基础.
作者:苏明权;岳乔红;杨柳;王薇;刘家云;郝晓柯 刊期: 2007年第03期
目的 研究超高倍显微分析仪在诊断泌尿生殖系感染中的应用价值.方法 用清华同方多媒体超高倍显微分析仪检测3 544例门诊妇科和泌尿科患者阴道或尿道分泌物,并对部分标本与PCR法和培养法作对照分析.结果 一种病原体感染者占54.56%,两种至四种病原体混合感染者占41.49%.超高倍显微分析仪病原体检出率占96.05%.超高倍显微分析仪对沙眼衣原体和解脲支原体的检出率与培养法和PCR法比较无显著性差异(P>0.05).结论 超高倍显微分析仪可同时动态观察多种病原体,对于多重混合感染患者可避免漏检.方法 简便、快速、准确、直观,为泌尿生殖系感染的诊断、指导用药和疗效观察提供了可靠依据.
作者:李志清;魏瑞全;李彤;李旭光;高西娥;倪颖 刊期: 2007年第03期
目的 探讨磁珠法提取核酸和巢式核酸扩增HIV1 RNA在HIV感染诊断中的应用价值.方法 对HIV1+2抗体阴性的梅毒感染者、有输血/手术史的住院患者和HIV1+2抗体阳性的AIDS患者、HIV携带者、健康体验者采用上述方法 检测血清HIV1 RNA.结果 24例HIV1+2抗体阴性者血清中未检出HIV1 RNA;4例AIDS和1例HIV携带者血清HIV1RNA呈阳性,2例健康体检者血清中未检出HIV1 RNA.结论 磁珠法提取核酸结合巢式核酸扩增能检出AIDS和HIV携带者血清中的HIV1 RNA及排除假阳性.
作者:吴月平;罗文明;陈育凤;倪丽萍 刊期: 2007年第03期
目的 研究不同的定标方式对免疫透射比浊法测定免疫球蛋白、补体结果 的影响.方法 使用OLYMPUS AU640自动生化分析仪和立德曼免疫透射比浊法试剂,采用不同的定标方法 对40例血清的IgG,IgA,IgM,C3和C4进行测定.结果 使用多标准POLYGONAL和SPLINE方法 拟合定标曲线后测定结果 表现良好的一致性,多点定标与单点定标测定结果 具有显著性差异.结论 免疫透射比浊测定,应当根据仪器情况,选择适当的非线性曲线拟合方式建立标准工作曲线.
作者:朱铭 刊期: 2007年第03期