李从荣;黄俊;吕霞;彭少华
血气分析对于临床诊断、治疗、预后起着重要作用,尤其被广泛用于急慢性呼吸功能衰竭的诊断、治疗、心肺复苏、外科手术和监护等方面.但血气分析易受诸多因素的影响,尤其是分析前的因素可直接影响到血气分析结果的准确性、可靠性,因此做好血气分析前的质量控制,是为临床提供准确可靠结果的前提.现就有关做好血气分析前的质量控制作一探讨.
作者:段宝生;曹贤;段宇宏 刊期: 2007年第03期
检验医学的重要任务是为临床提供科学、准确、及时的实验诊断依据;为临床发展较多的测定项目;与临床沟通并开展咨询服务.检验医学实验室的产品是要获得准确可靠的检测结果,为了保证结果的科学准确,必须进行全面的质量控制管理,即从临床医师申请检验开始至完成检测以及登记、审核、发出报告等全过程中一系列保证检验质量的方法和措施,包括检验前、检验中和检验后质量管理三个方面.
作者:张勇棋;王伦;德吉 刊期: 2007年第03期
目的 研究和建立从大量全血标本中提取基因组DNA的有效方法 ,以应用于Luminex HLA流式磁珠基因分型.方法 使用自动工作站(瑞士TECAN公司)从600 μl全血中提取基因组DNA,提取的DNA样本用紫外分光光度仪测定其浓度和纯度,DNA的完整性用琼脂糖凝胶电泳检测,并统计分析每一DNA样本流式磁珠HLA-A,B和DRB1基因扩增产物经探针分子杂交后的荧光信号强度.结果 从600 μl全血中提取基因组DNA,含量平均为10.052±0.824 μg,样本的A260nm/A280nm值平均为1.821±0.201.琼脂糖电泳法测得DNA的分子量约为21kb,HLA-A,B和DRB1位点PCR产物杂交后的平均荧光信号强度分别为2 183.84±478.12(exon2),2 168.28±338.59(exon3);2 057.27±397.41(exon2),1959.78±283.24(exon3);3 643.38±327.85.结论 此方法适用于从大量全血样本中快速提取基因组DNA,所得基因组DNA适用于高通量HLA流式磁珠基因分型等下游的分子生物学实验.
作者:王大明;唐斯;邹红岩;邓志辉;李桢 刊期: 2007年第03期
引进意大利AUTOLAB-18全自动生化分析仪六年多来,严格按照仪器操作规程使用并认真保养,在仪器的使用过程中,其检测结果的准确性、重复性、稳定性等方面均很理想.室内质量控制检测结果及参加陕西省室间质量控制的全部生化检验项目均由该仪器完成,并取得优良成绩.但在近的使用中发生了二次故障,影响到正常工作,现将故障原因及处理情况作以下报道,为同行遇到同类问题时借鉴.
作者:王秦芳;安银东;余妍 刊期: 2007年第03期
目的 分析经日立-罗氏检测系统(A系统)量值传递后的新鲜混合血清作临时酶校准品的可行性.方法 先用日立-罗氏检测系统将c.f.a.s的酶的量值传递给新鲜混合血清作临时酶校准品,然后用A系统、Roehe Modular P分析仪与科华-东菱试剂(B系统)、Dade Dimension RxL分析仪与配套试剂(C系统)、Dade Dimension RxL分析仪与科华-东菱试剂(D系统)、Beckman CX9分析仪与配套试剂(E系统)、Hitachi 7170A分析仪与Randox试剂(F系统)、Olympus 640分析仪与北京中生试剂(G系统)测定50份新鲜血清和临时酶校准品的ALT,AST,CK,LDH,ALP,γ-GT活性,后用临时酶校准品标示值与测定值之比作为校正因子,校正50份新鲜血清的测定结果,并进行校正前后的结果 比较和临时酶校准品互通性分析.结果 校正前各检测系统测定结果 间有较大的差异(CV4.99%~13.98%),校正后差异变小(CV1.30%~10.34%),其中B,C,E,F系统中ALT,AST,CK,LDH,ALP,γ-GT和D,G系统中ALT,AST,CK与A系统结果偏差明显变小,并且仪器与试剂配套的C,E系统间为备检测系统间小;但D,G系统中LDH,ALP,γ-GT差异改变不明显.结论 采用新鲜混合血清作临时酶校准品有一定的应用价值,但使用前必须进行酶校准品互通性检验,才能保证每项酶的测定结果 的准确和可靠.
作者:顾国龙;谢智光;梁景云;唐芳玫;徐文丽;冯玉清;李颖;黄冬梅 刊期: 2007年第03期
目的 了解西安地区葡萄球菌对红霉素和克林霉素的不同耐药表型及其诱导型克林霉素耐药的发生率.方法 采用K-B法检测葡萄球菌对红霉素和克林霉素的耐药性,头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌,D试验检测诱导型克林霉素耐药表型.结果 所有204株葡萄球菌中,90株(44.12%)为结构型耐药(cMLS),即对红霉素和克林霉素同时耐药;57株(27.94%)为诱导型耐药(iMLS),即对红霉素耐药对克林霉素敏感,但D试验阳性;32株(15.69%)为MS表型,即对红霉素耐药,对克林霉素敏感,但D试验阴性(MS);其中在红霉素耐药、克林霉素敏感体外表型中,显示诱导型克林霉素耐药在MRSA,MSSA,MRCNS和MSCNS中的比例分别为65.22%,58.33%,67.65%和60%;在所有耐红霉素菌株所占比例分别为31.25%,36.84%,31.94%和30%.结论 西安地区耐红霉素葡萄球菌中诱导型克林霉素耐药的发生率处于相对较高水平,临床细菌室应重视D-试验以指导临床合理选择抗生素.
作者:耿燕;王香玲;赵丽华;刘军;张毅;高宁 刊期: 2007年第03期
目的 提高实验室内部生化项目的 可比性.方法 用cfas校准的日常检测系统对新鲜混合人血清定值,将该血清作为急诊系统的校准品对病人标本测定.结果 校准后的两个系统间尿素检测结果 的允许误差EA=0.31 mmol/L,小于美国CLIA88尿素系统误差标准允许限值SE=0.50 mmol/L.结论 用赋值的新鲜混合人血清校准的急诊生化系统与日常生化系统两者间的生化结果 具有可比性.
作者:李鑫;王德梅 刊期: 2007年第03期
PCR技术即聚合酶联链式反应,它是直接测定生物体的特定的遗传物质DNA、RNA的分子生物学方法,该技术自美国mulis教授于1985年发明,并因此获1995年诺贝尔奖以来,其操作简单、快速、特异性强、敏感性高等优点在疾病的诊断、治疗、疗效的观察中具有十分重要的意义.但也正因为其某一些优点,反而隐含了它某种程度上的不可避免的缺点.
作者:赵涌胜;熊玲 刊期: 2007年第03期
我院于2004年购进美国雅培公司的AXSYM全自动免疫发光分析仪,它采用微粒子酶免分析(MEIA)、荧光偏振免疫分析(FPIA)、离子捕捉免疫分析(ICIA)三种技术,可以对血清或血浆中的蛋白质、病毒抗原、血药浓度、激素等进行测定,具有极高的灵敏度、特异性和稳定性,至此运行两年多,也得到了临床科室的认可.但是,我们在使用过程中遇到了一些问题,得到一些体会,特将常见的几种故障排除及应用体会报告如下,以期与同行共同探讨.
作者:刘紫强 刊期: 2007年第03期
我科2004年9月引进该款仪器,该仪器为日本SYSMEX生产,可提供21个参数,具中英文操作系统,仪器操作简便、结果准确可靠,具较高的性价比.现将我们在工作中常见故障和处理方法报告如下,供同行们参考.
作者:罗晓璐 刊期: 2007年第03期
目的 分析肺炎克雷伯菌临床分离株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的主要基因型.方法 用表型确定的临床分离产ESBLs的肺炎克雷伯菌34株,分别用TEM,SHV,CTX-M-1,CTX-M-2和CTX-M-9扩增引物进行聚合酶链反应(PCR)扩增,并对PCR产物进行序列分析.结果 PCR扩增结果 显示TEM,SHV,CTX-M-1,CTX-M-2和CTX-M9的阳性率分别为47.06%,85.29%,26.47%,32.35%和52.94%,CTX-M型总阳性率为88.24%,序列分析证实扩增为目的产物.结论 34株ESBLs肺炎克雷伯菌的主要基因型是CTX-M型和SHV型,且同时携带2种以上基因的菌株占所测菌株的82.35%,需引起临床的高度重视.
作者:韦洁宏;黄烈;林广城;刘键;杨来智;陆学东 刊期: 2007年第03期
我科于1999年引进一台日立公司生产的日立7170S自动生化分析仪,该仪器操作简便,采用触屏电脑操作控制,为分立式生化仪,小加样量可达到2μl,具有340~800 nm的12个波长(单波长或双波长),处理能力达800次测定/h,自引进该仪器大大提高了工作效率,更快地提供及时准确的检验结果,但是在实际应用中也会出现一些报警,参照说明书即可解决,但是前段时间却遇到一例未曾遇到的报警,现将解决过程总结如下:
作者:刘丹 刊期: 2007年第03期
目的 建立一种快速预检ELISA预包被板条的实验室方法.方法 利用现代优质酶联免疫检测仪的基础酶联软件对预包被板条基础空白比色,并与以预包被板条模拟未包被板条批检的标准方法(参考方法)进行比较.结果 模拟前后,总体方差齐(F检验P>0.05,a=0.05),相应的行预检与模拟A平均值的离均差与行模拟净显色A平均值的离均差均无显著性差异(配对计量资料比较t检验:P>0.05,a=0.05).结论 利用基础酶联软件直接预检预包被板条是简便实用的,具有评价预包被板条质量和选板设置数据复核的双重功效;试剂生产单位或厂家也可以对预包被板条二次批检.
作者:李宏杰;祖华;王元桂;王良玲 刊期: 2007年第03期
目的 探讨乙肝患者外周血单个核细胞和血清中HBV-DNA含量及其与HBVM之间的关系.方法 62例乙肝患者为检测对象,20例健康献血者为对照组,分别用FQ-PCR定量测定,内对照法定量测定血清HBV-DNA,免疫荧光定量测定HBVM.结果 外周血单个核细胞HBV-DNA检出阳性率为72.6%(45/62),与血清的符合率为87.1%,但慢性乙肝患者外周血单个核细胞HBV-DNA检出率高于血清,且与病情呈正相关.结论 三个指标的联合检测有助于反映肝细胞病毒复制情况,对进一步指导抗病毒治疗有一定意义.
作者:毛丽萍;王惠民;王陆军;吴月平;凌勇武;鞠少卿;王跃国 刊期: 2007年第03期
目的 探讨哮喘患儿血清中sIL-2R,IL-2,IL-4,IL-13的水平变化及其与哮喘发病机制的关系.方法 每例患儿及正常对照组均取空腹静脉血并即时分离血清1 ml,用ELISA法检测血清中sIL-2R,IL-2,IL-4,IL-13的水平,并对检测结果 进行医学统计学分析处理.结果 哮喘急性发作组、哮喘缓解组的患儿血清中sIL-2R,IL-2,IL-4,IL-13的测定结果与正常对照组相比较经统计学分析均存在极其显著的差异(P<0.05).其中患儿哮喘急性发作组、哮喘缓解组血清中sIL-2R,IL-4,IL-13的测定结果 要明显高于正常对照组,而IL-2则明显低于正常对照组.此外,哮喘急性发作组与哮喘缓解组血清中IL-2,IL-4,IL-13的测定结果 相比较经统计学分析均存在显著的差异(P<0.05),而sIL-2R则无显著差异.结论 哮喘患儿血清中sIL-2R,IL-2,IL-4,IL-13的水平均存在显著的变化,说明它们在哮喘的发病机制中起着重要的作用.
作者:张国祥;许文龙 刊期: 2007年第03期
目的 探讨磁珠法提取核酸和巢式核酸扩增HIV1 RNA在HIV感染诊断中的应用价值.方法 对HIV1+2抗体阴性的梅毒感染者、有输血/手术史的住院患者和HIV1+2抗体阳性的AIDS患者、HIV携带者、健康体验者采用上述方法 检测血清HIV1 RNA.结果 24例HIV1+2抗体阴性者血清中未检出HIV1 RNA;4例AIDS和1例HIV携带者血清HIV1RNA呈阳性,2例健康体检者血清中未检出HIV1 RNA.结论 磁珠法提取核酸结合巢式核酸扩增能检出AIDS和HIV携带者血清中的HIV1 RNA及排除假阳性.
作者:吴月平;罗文明;陈育凤;倪丽萍 刊期: 2007年第03期
目的 研究国产鞘液的自主配方及其在SE-9000全自动血液分析仪上的应用.方法 优选国产鞘液的配方组成;以国产鞘液与进口原装鞘液对进口配套的全血质控物、新鲜血液标本作系统的比对实验.结果 国产鞘液与进口原装鞘液的各项检测结果 基本一致,无显著性差异,P>0.05;两者间的相关系数均大于0.983,相关性良好;各检测项目的 回归方程中,斜率均大于0.981,且截距非常小.结论 国产鞘液实验结果 准确、重复性良好、质量稳定,能替代进口原装鞘液用于SE-9000全自动血液分析仪的配套使用.
作者:刘更夫;龚永启;饶平妹;骆明波 刊期: 2007年第03期
目的 探讨肝炎病毒感染与自由基及肿瘤坏死因子的关系.方法 用ELISA、显色、比色法检测肝炎病毒感染者、肝炎患者血液中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、脂质氧化物(LPO)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、肿瘤坏死因子(TNF)的含量.结果 肝炎病毒感染者、肝炎患者血中LPO,MDA,TNF含量明显高于对照组(P<0.05,P<0.01);而SOD,GSH-PX,CAT的含量明显低于对照组(P<0.05,P<0.01),与肝炎病毒感染的种类及肝炎发生的程度密切相关.结论 肝炎病毒感染者、肝炎患者的SOD,GSH-PX,CAT,LPO,MDA,TNF的含量检测,对了解肝脏损伤及肝炎的防治有一定意义.
作者:崔相法;卢志明;王红霞 刊期: 2007年第03期
临床生化分析仪自20世纪50年代诞生以来,经过不断发展完善,目前已经成为临床实验室常用的分析仪器.由于它应用了多个学科的尖端技术和概念,所以如果不熟练掌握整个分析系统的使用和维护,会对日常工作的正常进行带来一些困难.我院2004年初购进了一台日立7180全自动生化分析仪,该系列仪器有相对完善的报警系统和报警处理检索系统,大部分故障都可以参照说明书进行处理,但是也有一些异常结果和错误报告不会出现在报警系统中或提示不够具体,这就需要在日常工作中根据经验去发现和排除这些因素.以下是日立7180使用过程中的一些体会供参考.
作者:周炳烨;孙延河;李六红 刊期: 2007年第03期
目的 探讨各型乙肝患者病毒复制指标(HBV-DNA)分别与其它血清标志物以及肝功能的关系.方法 采用荧光标记探针定量聚合酶链反应(PCR)技术,酶联免疫吸附测定法,肝功能检验用常规法.对500例各型乙肝病毒感染者血清HBV-DNA含量及血清学标志物检测,同时测定了各型乙肝时血清TBIL,ALT,AST,ALP,γ-GPT,AST/ALT及胆红素的含量变化.结果 大三阳组的HBV-DNA含量显著高于小三阳组的HBV-DNA含量,差异有统计学意义(P<0.01),小三阳与其它各型之间比较差异较明显(P<0.05).临床各型HBV-DNA阳性组和阴性组之间肝功能无显著性差异(P>0.05),结论 HBeAg与HBV-DNA含量明显相关,HBeAg阴性或HBeAg/抗HBe血清转换,不表明病毒停止复制.通过相关性分析HBV-DNA含量与肝功能指标之间没有明显的相关性(P>0.05),肝功能的损害程度与HBV-DNA含量之间无揶相关性,定量检测HBV-DNA可以直接反映HBV在血液中的复制情况,并能准确地解释感染HBV后的传染性.
作者:石晓霞;任超杰;张秀华;陈秀生;汪建军 刊期: 2007年第03期