学术投稿

HPLC法测定末梢血中苯丙氨酸与酪氨酸及在苯丙酮尿症中的应用

莫喜明;唐爱国

关键词:高效液相色谱, 苯丙氨酸, 酪氨酸, 苯丙酮尿症, 新生儿筛查
摘要:目的 建立一种简单、快速的反相高效液相色谱法测定末梢血液中的苯丙氨酸(Phe)与酪氨酸(Tyr)并用于苯丙酮尿症(PKU)的筛查.方法 末梢血标本与等量5%(v/v)高氯酸溶液混合处理去除蛋白后离心取上清液20 μl直接进样分析.用Hypersil C8色谱柱(6.0mm×300mm,10μm)分离,流动相为乙腈-水(体积比5:95),流速1.5 ml/min,紫外检测波长210 nm,室温下测定.结果 末梢血中Tyr和Phe均分离良好,保留时间分别为5.88 min和8.43 min.102例健康儿童指血Phe浓度67.7±15.4/μmol/L,Tyr浓度为62.2±13.9μmol/L,Phe/Tyr比值为1.15±0.27.32例正常新生儿足跟血Phe浓度为66.2±20.5 μmol/L,Tyr浓度为59.5±18.8/μmol/L,Phe/Tyr比值为1.12±0.24.结论 该法灵敏度高,特异性好,方法 简便快速,成本低康,适合于末梢血中Phe和Tyr的同时测定及PKU的筛查与监控.
现代检验医学杂志相关文献
  • 乙肝病毒大蛋白与HBV-DNA相关性研究及在不同性别、年龄群体中的差异分析

    目的 探讨乙型肝炎病毒表面大蛋白用于临床诊断的价值以及与乙肝病毒DNA的相关性,分析各检测方法 在男女群体中以及不同年龄段人群中的差异性.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测712例乙肝病毒携带者血清LHBS和定性PCR跟荧光定量PCR方法 检测HBV-DNA,全自动生化分析仪速率动力法检测ALT.结果 712例乙肝病毒携带者LHBS、HBV-DNA的检测结果 显示:HBeAg(+)模式的HBV-DNA与LHBS检测结果 差别无显著性意义(P>0.05),且不受性别、年龄的影响.HBeAg(-)模式的HBV-DNA与LHBS检测结果 差别具有显著性意义(P<0.05),且男性组HBV-DNA阳性率略高于女性组,年长组大于年轻组,年轻群体LHBS阳性率略高于年长群体.HBeAg(+)模式群体中ALT>40 U/L的比例远大于HBeAg(-)模式群体.结论 在HBeAg(+)模式群体中乙肝病毒大蛋白与HBV-DNA检测有较高符合性,HBeAg(+)模式群体中及年长群体中肝受损程度较明显.在HBeAg(-)模式群体中乙肝病毒大蛋白阳性率高于HBV-DNA.LHBS是反映HBeAg阴性乙肝病毒携带者病毒复制情况的新的血清免疫学指标.

    作者:凌利芬;陆学东;吴正林;钟小强;林广城;王琼 刊期: 2008年第04期

  • 配合性血小板输注的临床应用

    目的 研究配合性血小板输注的临床效果.方法 选择36例反复输注血小板的患者,随即分为2组,包括交叉配合组及对照组,其中交叉配合组18例.应用单克隆抗体固相血小板抗体实验(MASPAT)进行血小板交又配合实验,对照组18例采用血小板随即输注.并于输注前及输注后1 h和24 h检测血小板计数,并以血小板校正计数增值(CCI)判断输注效果 结果 交叉配合组与对照组输注有效率分别为83.3%和36.6% 两组间差异有统计学意义(p<0.01) 结论 经MASPT进行血小板配合输注能显著提高血小板临床输注效果.

    作者:荣保平;张献清;霍保平 刊期: 2008年第04期

  • 随机扩增多态性DNA分型技术在肠球菌基因分型及耐药性的研究

    目的 建立随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA,RAPD)分型技术,对肠球菌进行基因分型,探讨其在肠球菌基因分型及耐药性中的应用.方法 对医院临床标本中分离的64株肠球菌进行RAPD基因分型,并分析基因型与耐药性的关系,同时对实验数据进行分析处理.结果 RAPD分型技术能有效地对肠球菌进行基因分型,分型率为100%.64株肠球菌根据扩增片段的差异分为8种基因型,均有共同的697bp扩增片段.结论 RAPD分型技术可有效地对肠球菌进行基因分型,并且肠球菌的RAPD分型与其耐药性有一定关系.

    作者:廖慧芳 刊期: 2008年第04期

  • 西安幼儿园827名儿童血中微量元素含量分析

    目的 通过对幼儿园儿童全血中微量元素的含量检测,了解各元素的缺乏情况以及和年龄、性别、身高、体重的关系.为儿童进一步平衡膳食,合理补充提供依据.方法 对在园827名儿童晨起空腹采静脉血,测定全血中锌、钙、铁、镁、铜的含量,同时测量身高、体重,用WHO 0~6岁儿童年龄、性别、身高、体重9分法评价,分为均值上、均值下两组,将数据进行统计分析.结果 各元素的缺乏率由高至低依次为锌(51.5%)、钙(26.1%)、铁(19.6%),而镁、铜的缺乏率为0%;分析了锌、钙、铁的结果 发现男孩、女孩,日托、全托均没有显著性差异,但年龄组有显著性差异,4岁组的锌(71.5%)、钙(33.2%)、铁(23.4%)缺乏率均高,其次是3岁组,5岁组缺乏率低.身高均值上、均值下各微量元素无显著性差异,体重均值上、均值下的儿童血中钙含量有显著性差异,均值下幼儿钙的缺乏率为30.4%,均值上的为24.0%.结论 全因幼儿血中锌、钙、铁均有不同程度的缺乏,尤其是4岁组幼儿,需要针对锌、钙、铁的缺乏制定食谱,更加合理安排膳食,进一步加强对儿童家长、教师的膳食营养知识、儿童保健知识的宣传教育.

    作者:范昕 刊期: 2008年第04期

  • 深圳地区婴幼儿人类杯状病毒感染状况及基因型分析

    目的 了解深圳地区婴幼儿人类杯状病毒(HuCV)感染状况和对HuCV阳性病毒株进行基因型分析.方法 采集连续二个秋冬季腹泻流行期间来深圳儿童医院就诊的临床检验已排除寄生虫、细菌性腹泻和轮状病毒检测结果 为阴性的3岁以下腹泻患儿粪便标本226份,应用分型引物RT-PCR法检测HuCV的诺如病毒(norovirus,NoV)G Ⅰ和G Ⅱ群和扎如病毒(sappovirus,SaV),扩增产物通过1.5 g/dl琼脂糖凝胶电泳鏊定.部分阳性标本测序,结合GenBank参考株相应棱苷酸序列进行进化和型别流行特点分析.结果 HuCV阳性率11.06%(25/226),其中NoV阳性率10.62%(24/226),SaV阳性率0.44%(1/226),检测出NoV阳性株GⅡ/4群18株,G Ⅰ/3群5株,1株尚不能确定所属群(占4.17%,1/24).1株SaV为SG Ⅱ/1群.7月~24月龄为NoV高发年龄段.结论 HuCV是深圳地区婴幼儿冬季腹泻的重要病原体之一,流行株为NoV的G Ⅱ/4群,同时,还发现SaV的SG Ⅱ/1群存在.

    作者:金玉姬;岳丽杰;李蔷;邓芳梅;李德发 刊期: 2008年第04期

  • 样品保存方式对酶谱法检测食管癌组织MMP-9和MMP-2活性的影响

    目的 研究样品保存方式及上样量对酶谱法检测食管癌组织MMP-9(matrix metalloproteinase-9)和MMP-2(ma-trix metalloproteinase-2)活性的影响.方法 采用酶谱法(zymography)检测食管癌组织中MMP-9和MMP-2蛋白的活性.结果 酶谱法检测食管癌组织MMP-9和MMP-2活性适宜的蛋白上样量是10μg.统计学分析表明,样品的反复冻融和-20℃长期保存并没有引起MMP-9和MMP-2活性的明显降低(P>0.05).结论 酶谱法检测食管癌组织MMP-9和MMP-2的活性所需组织标本用量少,并且不受保存方式的影响,可广泛应用于食管癌活检组织检测和回顾性调查研究.

    作者:韩溟;黄铿;崔华中;蔡新琦 刊期: 2008年第04期

  • 血清S100β蛋白及超敏C-反应蛋白含量与急性脑梗死患者病情及预后关系的研究

    目的 探讨急性脑梗死(ACI)患者血清S100β蛋白及超敏C-反应蛋白(hs-CRP)水平变化与预后的关系.方法 采用双抗体夹心ELISA法测定33例脑梗死患者及25例健康对照组的血清S100β蛋白水平;用散射比浊法测定血清超敏C-反应蛋白含量.现察并比较ACI患者在不同程度病情、不同梗死面积时,血清S100β蛋白和hs-CRP含量变化,采用Pearson法进行相关性分析.结果 脑梗死组患者血清S1006蛋白(0.025±0.017μg/L)和hs-CRP(7.147±10.503 mg/L)水平均显著高于正常对照组(0.017±0.009 μg/L,2.679±1.678 mg/L),均P<0.05,并且随着神经功能损伤程度的增高和梗死面积的增加,血清S100β蛋白和hs-CRP含量亦明显升高;S100蛋白水平和hs-CRP水平呈正相关(P<0.05).结论 急性脑梗死患者血清s100β和hs-CRP浓度均明显增高.S100β蛋白和hs-CRP蛋白浓度高低不仅可以给神经元和神经胶质细胞的损伤程度提供定量信息,而且也是判断病情,评估预后的重要指标.

    作者:王菁;郝晓柯;张小宁;余妍;程晓东;彭道荣 刊期: 2008年第04期

  • RNA干扰技术及应用

    RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)介导的细胞内双链mRNA特异性降解现象,属于转录后的基因沉默机制.RNAi是生物界普遍存在的抵抗病毒入侵、调控基因表达的监控机制.目前已成功用于基因功能和信号转导的研究,在基因治疗方面也显现出良好前景.

    作者:林盛国;张嵘;王家庆 刊期: 2008年第04期

  • 肝硬化患者交叉配血结果异常的解决方案研究

    目的 对肝硬化患者的交叉配血异常结果 进行分析,提出此情况下准确发布实验结果 和及时解决问题的方案.方法 收集了4例肝硬化患者的交叉配血结果 异常的病例,ABO血型以外抗体筛查和自身对照实验采用抗人球蛋白法,采用盐水法、聚凝胺法和抗人球蛋白法进行交叉配血试验,流式细胞术检测红细胞表面抗原抗体的反应情况,密切观察输血前后的临床症状及各项生化指标的变化.结果 ABO血型以外抗体筛查和自身对照实验为阴性,4例病例均出现聚凝胺法的主侧凝集,而盐水法和抗人球蛋白法的主侧不凝集,三种实验方法 次侧均不凝集的情况,流式细胞术结果 显示患者血中无针对献血员红细胞的抗体,输血后未出现急性输血反应.结论 在肝硬化患者的配血实验中,遇到异常的实验结果 时,应以抗人球蛋白法为准.

    作者:郭康社;陆华;邢荷香;蒋媛媛;张建耕;徐华 刊期: 2008年第04期

  • 葡萄糖6-磷酸异构酶(GPI)检测在类风湿性关节炎诊治中的应用价值

    目的 探讨葡萄糖6-磷酸异构酶在类风湿性关节炎(rheumatoid arthriti,RA)诊断中的应用价值,以及与类风湿因子(RF)和抗CCP抗体联合检测的意义.方法 检测85例RA患者,44例非RA自身免疫病痛人,40例健康对照者血清GPI浓度,并同时检测RF,抗CCP抗体含量,对各组间结果 进行统计学分析.结果 RA组、非RA自身免疲病组和健康对照组GPI浓度(μg/ml)及阳性率(%)分别为20.37±56.54和44.7,0.82±2.83和15.9,0.073±0.053和0.RA组GPI浓度和阳性率显著高于疾病组和健康对照组(P<0.001).结论 血清GPI检测对RA诊断具有一定价值,可作为RA诊断的一个新的血清学指标,和RF,抗CCP抗体联合检测提高了对RA诊断的灵敏度和特异性.

    作者:张迎梅;林宁;姜玉章;陈滢;杨玉芹;胡玲;王霞 刊期: 2008年第04期

  • 尿红细胞位相检测在肾脏疾病鉴别诊断中的应用

    目的 探讨尿红细胞位相检查对血尿原因鉴别诊断的临床意义.以尿红细胞>8 000个/ml,其中畸形红细胞>70%;Gl红细胞≥5%,作为肾小球性血尿的诊断标准,评估其准确性及临床应用价值.方法 研究238例血尿患者,其中120例(经肾活检证实)为肾小球疾病,118例为非肾小球性疾病.通过评估患者肾脏活检与连续三次不同时间尿红细胞位相显微镜检查达到肾小球性血尿诊断标准与肾小球疾病的符合率,计算出其灵敏度和特异度.结果 此诊断标准的灵敏度为93.10%,特异度为90.16%.结论 尿红细胞位相检查对肾小球性血尿定位诊断准确可靠,操作简便,适于临床应用.

    作者:罗福东;廖焕兰;吴新忠;邓云飞 刊期: 2008年第04期

  • 库尔特HmX全自动五分类血细胞计数仪精确度欠佳原因及新清洗程序的建立

    介绍了库尔特HmX全自动五分类血细胞计数仪因分类处理器质量、负压滑塞、室内温度、细胞计数分类池的洁净度,致标本测试精确度欠佳原因及处理方法.处理结果表明,无论是细胞计数还是分类,其精密度和准确度都有了明正改观,特别是M%和B%,与手工分类有很好的可比性,更为理想的是即使再多的标本,也没有不分类的现象了.

    作者:胡柏成;吴晓虹;戴群莹 刊期: 2008年第04期

  • BS-300全自动生化分析仪常见故障及处理方法

    全自动生化分析仪是具有把生化分析中的取样、加试剂、混合、反应、检测、结果处理等过程自动操作的仪器,大大提高了生化检验的准确性、精密度和工作效率,是医院检验科常用的仪器之一.现将我们在工作中对迈瑞BS-300全自动生化分析仪常见故障及处理方法介绍如下,供同仁参考.

    作者:朱延清 刊期: 2008年第04期

  • 因检验结果互认而进行的补体检测结果校正研究

    目的 探讨利用混合血清制备质控参考品对不同实验室间补体C3,C4检测结果 进行校准的可能性.方法 分别检测单份血清和由这些单份血清制备的混合血清的C3,C4,比较单份血清检测值的均数与混合血清检测值的接近程度;将100份正常人血清(40岁以下成人,男女各半)等量混合为参比血清与1名患者血清同时送6家临床实验室检测,依照同一实验室检测的参比血清检测值和<全国临床检验操作规程(第3版)>给定的各项目的 参考值对患者血清检测值进行校准,观察校准效果.结果 混合血清检测值与单份血清测定值的均数十分接近;患者血清迟6家临床实验室C3,C4检测结果 的CV值分别为10.32%和16.14%,校准后为4.99%和6.53%.结论 依照参比血清检测值和约定真值对待栓血清C3,C4检测值进行校准效果明显.

    作者:刘辉;马悦;张静;袁宏;宫晓红;宗建国;徐维家 刊期: 2008年第04期

  • 急性心肌梗死患者纤溶活性变化及药物干预效果评价

    目的 讨论急性心肌梗死(AMI)患者凝血与纤溶指标变化及其药物的干预作用.方法 用酶联免疫法(ELISA)及免疫法等定量分析47例AMI患者入院即刻及治疗14 d后血浆vWF,FIB,DD,t-PA,PAI等相关指标变化,并观察治疗14d后AMI患者中氯吡格雷组与常规治疗组血浆vWF,FIB,DD,t-PA,PAI水平变化.结果 AMI患者急性发作期血液处于高凝状态,血浆vWF,FIB水平明显高于健康对照组(P<0.01),纤溶活性指标t-PA较健康组明显降低(P<0.01),PAI,DD水平升高(P<0.01).治疗14 d后血浆vWF,FIB,t-PA水平接近健康对照组(P>0.05);治疗14 d后氯吡格雷组与常规治疗组血浆t-PA,FIB,PAI有显著性差异(P<0.05).结论 AMI患者有明显凝血、纤溶功能异常,氯吡格雷与阿司匹林联用能明显改善凝血、纤溶功能异常.

    作者:吕晓莉;党小军;刘丹萍;王华;苍金荣 刊期: 2008年第04期

  • 四种TRAIL受体在隐球菌性脑膜炎中的表达及临床意义

    目的 研究建立实时荧光定量(RFQ)-PCR法测定四种TRAIL受体DcR1,DcR2,DR4,DR5 mRNA含量的方法 ,探讨其在隐球菌性脑膜炎患者外周血单个核细胞中表达的检测价值,并分析隐球菌性脑膜炎患者免疫指标与四种TRAIL受体的相关性.方法 设计特异性的引物和探针,以人基因GAPDH为内参照,用实时定量PCR的方法 检测35例健康人和35例隐球菌性脑膜炎患者外周血单个核细胞中TRAIL受体mRNA的表达水平,采用全自动特定蛋白分析仪检测IgG,IgA,IgM,C3,C4.结果 与健康人比较,隐球菌性脑膜炎患者外周血单个核细胞中TRAIL受体DcR1 mRNA的表达显著升高(P<0.01),受体DcR2,DR4,DR5 mRNA的变化无统计学意义.隐球菌性脑膜炎患者血清中的C3和IgG显著下降(P<0.01),且与DcR1的变化成负相关,结论 隐球菌性脑膜炎患者TRAIL受体DcR1 mRNA的表达明显升高,提示TRAIL受体DcR1可能参与隐球菌性脑膜炎的疾病进程,这为有效治疗隐球菌性脑膜炎提供了新的线索.

    作者:周晔;邓安梅;陈燕;谷明莉;吴传勇;陈波;陈孙孝;仲人前 刊期: 2008年第04期

  • 单纯疱疹病毒Ⅰ,Ⅱ型抗原gG1,gG2表达产物复性与纯化

    目的 探讨原核表达系统表达单纯疱疹(HSV)Ⅰ,Ⅱ型分型抗原gG1,gG2包涵体的复性与纯化方法 .方法 采用含氧化/还原谷胱甘肽(1:6)透析液透析法复性,并配合Ni2+固相化的HiTrap Chelating HP亲和层析法纯化表达抗原.应用免疫印迹法、动物免疫实验、SDS-PAGE凝胶电泳对复性纯化后的抗原免疫活性、纯度给以鉴定.结果 复性后的表达抗原具有相当于细胞培养法获得的天然抗原的免疫活性和抗原活性,且纯度迭90%以上.结论 建立的gG1,gG2包涵体的复性与纯化方法 可以用于该类原核表达抗原的大量制备工作,获得的高纯度,高活性抗原可以应用于相关病原体感染临床诊断试剂盒的开发.

    作者:ZHANG Xiao-yan;张小艳;杨来智;吴润香;安社刚 刊期: 2008年第04期

  • 不稳定型心绞痛患者冠状动脉支架置入术后血清sCD40L及hs-CRP水平的动态观察

    目的 动态观察52例不稳定型心绞痛患者冠状动脉支架置入术后血清可溶性CD40配体(sCD40L)及超敏C-反应蛋白(hs-CRP)的水平变化.方法 用ELISA法检测血清sCD40L水平;在Olympus AU2700全自动生化分析仪上采用免疫透射比浊法检测血清hs-CRP水平.结果 与冠状动脉支架置入前相比,sCD40L及hs-CRP水平在支架置入后7,14,21,30,90和180 d均明显降低(P<0.0001);支架置入后7,14,21,30,90和180 d五个组之阀相互比较,sCD40L及hs-CRP水平差异无显著性(P>0.05).结论 在支架置入前,不稳定型心绞痛患者血清sCD40 L及hs-CRP的水平均明显偏高,在支架置入后随之降低.sCD40L及hs-CRP水平变化对评价临床药物干预效果具有一定作用.

    作者:徐邦牢;马为;贝春花;王蓉;雷秀霞 刊期: 2008年第04期

  • 奥林帕斯AU400全自动生化分析仪故障排除一例

    奥林帕斯AU400全自动生化分析仪测试速度快、准确性高、重复性好、软件功能也比较完善,适用于医院检验科大批量生化项目的检测.2006年冬天,我市某医院检验科的奥林帕斯AU400突然发生故障不能正常工作,因多年来笔者对仪器维修感兴趣并有一定的经验,故求助于笔者,在参阅仪器使用说明书后也不得而知,因说明书中未标明此故障,后经反复检查,得出症结所在,并给与排除,现介绍给大家,特别是本仪器的使用者.

    作者:马春明 刊期: 2008年第04期

  • 老年呼吸道感染者菌群失调的研究

    目的 以健康老年人群呼吸道菌群为研究基础,在此基础上研究老年呼吸道感染过程中随着疾病的发展呼吸道菌群的变化趋势及感染治疗过程中呼吸道菌群的变化趋势.方法 采集2003年7月~2005年12月间老年人(年龄大于60岁)健康组60例在不同季节的咽拭子进行需氧培养、厌氧培养、二氧化碳培养;同时采集60例门诊呼吸道感染的老年患者(未使用抗生素治疗)咽拭子及120例呼吸道反复感染老年患者(使用5 d广谱抗生素后)的咽拭子进行同样的培养.通过数据分析在不同季节老年人群组的咽部正常菌群的分布及感染状态下呼吸道菌群数量变化和失调.结果 健康老年人群之间咽拭子的细菌菌群分布和数量是无明显差异的(P>0.05);而老年感染组的咽拭子细菌菌分布和数量与老年健康组有明显差异(P<0.05);对于120例老年呼吸道反复感染患者(在使用5 d广谱抗生素后)其咽拭子细菌菌群分布和数量与老年健康组有明显差异(P<0.05);广谱抗生素应用后主要的致病菌为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌和白假丝酵母菌等.结论 呼吸道菌群在健康老年人群之间保持着一定的菌群数量稳定,但在呼吸道感染时其菌群可失调导致呼吸道感染.而且随着广谱抗生素的应用会选择出呼吸道高耐药的条件致病菌,尤其是铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌.

    作者:张利侠;詹颉;刘波;归巧娣;任健康;孙莉;杨淑梅 刊期: 2008年第04期

现代检验医学杂志

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主管:陕西省卫生厅

主办:陕西省临床检验中心,陕西省人民医院