王菁；郝晓柯；张小宁；余妍；程晓东；彭道荣
目的 探讨乙型肝炎病毒表面大蛋白用于临床诊断的价值以及与乙肝病毒DNA的相关性,分析各检测方法 在男女群体中以及不同年龄段人群中的差异性.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测712例乙肝病毒携带者血清LHBS和定性PCR跟荧光定量PCR方法 检测HBV-DNA,全自动生化分析仪速率动力法检测ALT.结果 712例乙肝病毒携带者LHBS、HBV-DNA的检测结果 显示:HBeAg(+)模式的HBV-DNA与LHBS检测结果 差别无显著性意义(P>0.05),且不受性别、年龄的影响.HBeAg(-)模式的HBV-DNA与LHBS检测结果 差别具有显著性意义(P<0.05),且男性组HBV-DNA阳性率略高于女性组,年长组大于年轻组,年轻群体LHBS阳性率略高于年长群体.HBeAg(+)模式群体中ALT>40 U/L的比例远大于HBeAg(-)模式群体.结论 在HBeAg(+)模式群体中乙肝病毒大蛋白与HBV-DNA检测有较高符合性,HBeAg(+)模式群体中及年长群体中肝受损程度较明显.在HBeAg(-)模式群体中乙肝病毒大蛋白阳性率高于HBV-DNA.LHBS是反映HBeAg阴性乙肝病毒携带者病毒复制情况的新的血清免疫学指标.
作者：凌利芬；陆学东；吴正林；钟小强；林广城；王琼 刊期： 2008年第04期
目的 克隆、表达核心链霉亲和素(core-strepavidin,core-SA)基因.方法 人工合成核心链霉亲和素基因;克隆到pET22b原核表达载体中,转化大肠埃希氏菌BL21,IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE分析;目的 蛋白经Ni-NTA亲和层析纯化,采用改良过碘酸钠法标记HRP,ELISA法检测比较HRP-SA与商品化HRP-SA的活性.结果 人工合成的354bp DNA片段经测序确证为核心链霉亲和素基因.将构建的重组表达质粒pET 22b-core SA转化大肠埃希氏菌BL21,经IPTG诱导后得到可溶性的表达产物.SDS-PAGE显示目的 蛋白相对分子质量为14 000,与理论值相符.在非变性条件下纯化目的 蛋白,经HRP标记后用ELISA法检测,结果 表明自制的HRP-SA与商品化HRP-SA的活性相当.结论 成功克隆和表达了核心链霉亲和素基因.
作者：彭佳；王国华；陈坤；宋晓国；张贺秋；周见远；何竞 刊期： 2008年第04期
目的 探讨血清锌、铁、铜水平与小儿肺炎支原体肺炎的关系.方法 取肺炎支原体肺炎患儿急性期用药前血清标本,使用罗氏PS00全自动生化分析仪,检测其锌、铁、铜离子含量,与正常儿童对照组比较.其中锌离子测定采用比色法,铁、铜离子测定采用终点法.结果 肺炎支原体肺炎患儿血清锌(6.85±1.36 μmol/L)、铁(3.90±0.41μmol/L)离子水平明显低于对照组(锌13.30±1.75μmol/L,铁5.61±0.52μmol/L),P<0.01;血清铜(14.40±2.91μmol/L)离子水平与对照组(铜14.80±2.96μmol/L)相比无明显差异,P>0.05.结论 血清锌、铁、铜离子含量与小儿肺炎支原体关系密切,可通过调节三者在血清中的含量来预防和辅助治疗小儿肺炎支原体肺炎.
作者：朱飞；周育栀；邱群芳 刊期： 2008年第04期
深圳迈瑞BS-300全自动生化分析仪是深圳迈瑞公司的产品,为任选式、多通道、多项目全自动生化分析仪[1].此仪器的清洗系统主要由清洗液桶、单向阀、马达、搅拌棒、样本针、试剂针、清洗池等构成.生化分析仪清洗部分对检验结果影响非常大,单向阀是BS-300全自动生化分析仪清洗部件之一,包括负责内壁清洗的内冲阀,负责外壁清洗的外冲阀,它们的作用主要是对泵的保护,降低泵的压力.
作者：何文军；陈丽娥；黄永攀 刊期： 2008年第04期
血清和尿液中免疫球蛋白游离轻链(FLC)是鉴定和监控许多B细胞恶性增殖疾病的重要标记,其测定在临床应用上非常重要.国际上常用的方法 主要有两种一电泳法和免疫法,它们在测定的精密性和敏感性上各有优劣.FLC测定方法 的关键在于提高其准确性和精密性.该文就FLC常用的几种测定方法 和存在的问题进行综述.
作者：田迎；张春妮 刊期： 2008年第04期
目的 研究无乳链球菌在女性生殖道中的定植和感染机制,提高临床实验室对其检测的认识水平.方法 先将白带涂片检查,再对链球菌为优势菌的患者样本进行细菌培养和鉴定,结合阴道菌群分布、白细胞数量等检测数据进行分析.结果 涂片检查链球菌阳性率5.35%(58/1 085),白细胞阳性率0.28%(3/1 085);细菌培养无乳链球菌阳性率1.75%(19/1 085);链球菌血清分型D型占51.72%,B型(无乳链球菌)占32.76%.结论 无乳链球菌在女性生殖道中的定植与疾病呈密切相关.
作者：陈华英；何艳；林伟华；聂晓辉；黄云平 刊期： 2008年第04期
目的 评估高效液相色谱法(HPLC)检测血红蛋白对珠蛋白生成障碍性贫血诊断的效能.方法 应用根据HPLC原理的D-10离子交换层析仪,对56例临床疑诊为珠蛋白生成障碍性贫血的患者进行血红蛋白分析;同时应用单管多重PCR法和PCR/RDB技术分别检测其α,β珠蛋白基因突变.结果 基因分析共检出32例阳性(27例β珠蛋白基因突变,5例α珠蛋白基因缺失),以HbA2 > 4.0%或HbF>10.0%(1岁～成人)作为血红蛋白分析对β珠蛋白生成障碍性贫血的诊断标准,以HbA2<1.5%作为对α珠蛋白生成障碍性贫血的筛查标准,则血红蛋白分析与基因分析对β珠蛋白生成障碍性贫血诊断一致率迭92.2%;β基因突变中纯合子(双重杂合予)与杂合子HbF含量有显著性差异.结论 采用HPLC技术的血红蛋白分析,与基因分析有良好的符合性,可用于珠蛋白生成障碍性贫血的筛查诊断.
作者：唐宁；夏汛生；张碧玉 刊期： 2008年第04期
目的 调查探讨朔州市区健康体检人群血清胆红素水平.方法 采用回顾分析的方法 ,随机抽取朔州市370名健康体检人群的血清总胆红素(TBIL)和直接胆红素(DBIL)的测定值,编制频数分布表,并按性别进行统计分析比较,并与西安地区、深圳、广东茂名地区人群进行比较,观察胆红素参考值的变化.结果 朔州市区健康体检人群血清TBIL,DBIL水平比原参考值明显升高(P<0.01),TBIL75%(P75)和95%(P95)位点值分别为19.33 μmol/L和25.35 μmol/L,DBIL75%(P75)和95%(P95)位点值分别为2.52 μmol/L和3.38 μmol/L.成年男性>成年女性,差异具有极显著性(P<0.01).朔州市区健康体检人群中女性TBIL与广东茂名地区女性TBIL无显著性差异(P>0.25)外,与其余各地区血清TBIL水平均有极显著性差异(P<0.01).结论 朔州市原血清胆红素参考值已不能客观地反映人群的胆红素水平是否为异常变化,应以新的参考范围用于临床诊断.
作者：张翠萍；谢怀叶；苍金荣 刊期： 2008年第04期
目的 建立人Her2/neu基因mRNA荧光定量检测方法 ,评价该方法 的准确性及稳定性.方法 基于TaqMan荧光探针技术,构建克隆栽体pGEM-T-Her2/neu作为定量模板,通过荧光强度达到一定阈值时的循环数来定量起始模板,以建立实时荧光定量RT-PCR方法;并且在GeneAmp 5700型检测议上测定10例经免疫组织化学法证实Her2/neu表达卅的乳腺癌组织标本,同时对大值及小值重复测量.结果 Her2/neu动态检测范围为103～107拷贝/μg RNA(r≥0.996),内参β-actin的动态检测范围为103～108拷贝/μg RNA(r>0.998).10例检测癌组织的Her2/neu表达范围为6.6×104～4.7×106拷贝/μg,大值10次重复测量值为(4.65±0.55)×106>拷贝/μg,小值10次重复测量值为(7.36±0.75)×104拷贝/μg.结论 成功建立人Her2/neu基因表达RT-PCR检测方法 ,具有较高的准确性和稳定性,可用于检测Her2/neu基因表达水平,为进一步应用于乳腺癌预后判断及术后治疗方案的选择奠定了基础.
作者：陆慧琦；耿红莲；孙静；徐毅；韩焕兴 刊期： 2008年第04期
目的 探讨实现非配套检测系统常规生化结果 的溯源性和可比性的方法 .方法 将cfas校准品中的定值转移至新鲜患者血清,并以该血清为临时校准品,校准非配套检测系统,在非配套检测系统上对cfas校准品进行赋值,将cfas校准品的标示值转化为校准非配套检测系统的实际校正值,再用此值校准非配套检洲系统,判断偏倚是否可以接受.结果 非配套检测系统与配套检测系统不具有可比性的六个项目包括总胆红素(TBIL)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)、无机磷(P),经校准后与配套检测系统的偏倚均小于CLIA'88允许误差(TEa)的1/4,临床可以接受.结论 对校准品通过配套试剂检测系统量值传递后重新赋值是实现非配套检测系统可比性的有效途径.
作者：殷昌斌；刘巍；李家伟；吴立山；宋克征 刊期： 2008年第04期
目的 研究样品保存方式及上样量对酶谱法检测食管癌组织MMP-9(matrix metalloproteinase-9)和MMP-2(ma-trix metalloproteinase-2)活性的影响.方法 采用酶谱法(zymography)检测食管癌组织中MMP-9和MMP-2蛋白的活性.结果 酶谱法检测食管癌组织MMP-9和MMP-2活性适宜的蛋白上样量是10μg.统计学分析表明,样品的反复冻融和-20℃长期保存并没有引起MMP-9和MMP-2活性的明显降低(P>0.05).结论 酶谱法检测食管癌组织MMP-9和MMP-2的活性所需组织标本用量少,并且不受保存方式的影响,可广泛应用于食管癌活检组织检测和回顾性调查研究.
作者：韩溟；黄铿；崔华中；蔡新琦 刊期： 2008年第04期
目的 建立随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA,RAPD)分型技术,对肠球菌进行基因分型,探讨其在肠球菌基因分型及耐药性中的应用.方法 对医院临床标本中分离的64株肠球菌进行RAPD基因分型,并分析基因型与耐药性的关系,同时对实验数据进行分析处理.结果 RAPD分型技术能有效地对肠球菌进行基因分型,分型率为100%.64株肠球菌根据扩增片段的差异分为8种基因型,均有共同的697bp扩增片段.结论 RAPD分型技术可有效地对肠球菌进行基因分型,并且肠球菌的RAPD分型与其耐药性有一定关系.
作者：廖慧芳 刊期： 2008年第04期
目的 研究利用床边血气分析仪与检验科大型全自动生化分析仪测定血钾、血钠、乳酸和血糖浓度的相关性与偏倚,并探讨其差异.方法 分别用GEM Premier3000血气分析仪与OLYMPUS AU2700生化分析议对34例呼吸内科ICU患者的动脉和静脉血样进行血钾、血钠、乳酸和血糖浓度的检测,对检测结果 进行Pearson相关分析、Bland and Ahman偏倚分析和配对t检验.结果 2种仪器测定血钾、血钠、乳酸和血糖浓度均有显著相关性(P<0.01),2种仪器测定血钾、血钠的结果 无显著性差异(P>0.05),GEM Premier3000测定乳酸的结果 显著高于OLYMPUS AU2700的乳酸测定值(P<0.05).结论 GEM Premier3000床边血气分析仪能替代传统生化分析仪测定血电解质,但其测定的乳酸浓度比传统生化仅的测定值高.
作者：包安裕；李艳 刊期： 2008年第04期
目的 动态观察52例不稳定型心绞痛患者冠状动脉支架置入术后血清可溶性CD40配体(sCD40L)及超敏C-反应蛋白(hs-CRP)的水平变化.方法 用ELISA法检测血清sCD40L水平;在Olympus AU2700全自动生化分析仪上采用免疫透射比浊法检测血清hs-CRP水平.结果 与冠状动脉支架置入前相比,sCD40L及hs-CRP水平在支架置入后7,14,21,30,90和180 d均明显降低(P<0.0001);支架置入后7,14,21,30,90和180 d五个组之阀相互比较,sCD40L及hs-CRP水平差异无显著性(P>0.05).结论 在支架置入前,不稳定型心绞痛患者血清sCD40 L及hs-CRP的水平均明显偏高,在支架置入后随之降低.sCD40L及hs-CRP水平变化对评价临床药物干预效果具有一定作用.
作者：徐邦牢；马为；贝春花；王蓉；雷秀霞 刊期： 2008年第04期
目的 探讨女性性激素的变化规律与原发性不孕症的相关性.方法 选择原发性不孕症患者80例作为观察组,健康对照组20例,以性激素检测为指标.结果 月经周期第10 d观察组E2,P,PRL,P/E2较高,与对照组比较有非常显著性差异(P<0.01);月经周期第20 d现察组P,P/E2较对照组低,两组比较有非常显著性差异(P<0.01);PRL较对照组高,差异性显著(P<0.05);FSH,LH,T,LH/FSH变化不明显(P>0.05).结论 女性性激素的变化与原发性不孕症具有相关性,能够为临床诊断及疗效观察提供依据.
作者：李文东；康艳丽；李灿东；高碧珍；丁杰；黄熙理 刊期： 2008年第04期
目的 对肝硬化患者的交叉配血异常结果 进行分析,提出此情况下准确发布实验结果 和及时解决问题的方案.方法 收集了4例肝硬化患者的交叉配血结果 异常的病例,ABO血型以外抗体筛查和自身对照实验采用抗人球蛋白法,采用盐水法、聚凝胺法和抗人球蛋白法进行交叉配血试验,流式细胞术检测红细胞表面抗原抗体的反应情况,密切观察输血前后的临床症状及各项生化指标的变化.结果 ABO血型以外抗体筛查和自身对照实验为阴性,4例病例均出现聚凝胺法的主侧凝集,而盐水法和抗人球蛋白法的主侧不凝集,三种实验方法 次侧均不凝集的情况,流式细胞术结果 显示患者血中无针对献血员红细胞的抗体,输血后未出现急性输血反应.结论 在肝硬化患者的配血实验中,遇到异常的实验结果 时,应以抗人球蛋白法为准.
作者：郭康社；陆华；邢荷香；蒋媛媛；张建耕；徐华 刊期： 2008年第04期
目的 探讨氧化苦参碱(oxymatrine,OM)干预实验性急性出血坏死性胰腺炎(acute hemorrhagic necrotizing pan-creatitis,AHNP)大鼠TNF-α mRNA和IL-1βmRNA的表达.方法 以5 g/dl牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射建立Sprague-Dewley(SD)大鼠AHNP,将SD大鼠随机分为SO组、AHNP-NS组及AHNP-OM组.检洲血清TNF-α和IL-1β含量及胰腺组织中TNF-α tuRNA和IL-1β mRNA的表达.结果 AHNP-NS组和AHNP-OM组血清TNF-α水平3 h与6 h分别为286.5±50.3pg/ml和150.3±40.7 pg/ml及500.5±45.3 pg/ml和240.5±60.3 pg/ml(P<0.05);AHNP-NS组和AHNP-OM组3 h与6 h血浆IL-1β分别为:293.8±46/3 pg/ml,388.0±44.5 pg/ml和150.2±47.5 pg/ml,182.7±30.6pg/ml(P<0.05);AHNP-OM组造模3 h与6h胰腺组织TNF-α mRNA和IL-1β mRNA的表达较AHNP-NS组显著减弱(P<0.05).结论 OM预处理能够显著减少牛磺胆酸钠SD大鼠AHNP模型炎症细胞因子IL-1β和TNF-α,从而改善胰腺炎痛变的严重程度.
作者：庄建伟；房栋；张红光 刊期： 2008年第04期
全自动生化分析仪是具有把生化分析中的取样、加试剂、混合、反应、检测、结果处理等过程自动操作的仪器,大大提高了生化检验的准确性、精密度和工作效率,是医院检验科常用的仪器之一.现将我们在工作中对迈瑞BS-300全自动生化分析仪常见故障及处理方法介绍如下,供同仁参考.
作者：朱延清 刊期： 2008年第04期
目的 研究建立实时荧光定量(RFQ)-PCR法测定四种TRAIL受体DcR1,DcR2,DR4,DR5 mRNA含量的方法 ,探讨其在隐球菌性脑膜炎患者外周血单个核细胞中表达的检测价值,并分析隐球菌性脑膜炎患者免疫指标与四种TRAIL受体的相关性.方法 设计特异性的引物和探针,以人基因GAPDH为内参照,用实时定量PCR的方法 检测35例健康人和35例隐球菌性脑膜炎患者外周血单个核细胞中TRAIL受体mRNA的表达水平,采用全自动特定蛋白分析仪检测IgG,IgA,IgM,C3,C4.结果 与健康人比较,隐球菌性脑膜炎患者外周血单个核细胞中TRAIL受体DcR1 mRNA的表达显著升高(P<0.01),受体DcR2,DR4,DR5 mRNA的变化无统计学意义.隐球菌性脑膜炎患者血清中的C3和IgG显著下降(P<0.01),且与DcR1的变化成负相关,结论 隐球菌性脑膜炎患者TRAIL受体DcR1 mRNA的表达明显升高,提示TRAIL受体DcR1可能参与隐球菌性脑膜炎的疾病进程,这为有效治疗隐球菌性脑膜炎提供了新的线索.
作者：周晔；邓安梅；陈燕；谷明莉；吴传勇；陈波；陈孙孝；仲人前 刊期： 2008年第04期
目的 了解深圳地区婴幼儿人类杯状病毒(HuCV)感染状况和对HuCV阳性病毒株进行基因型分析.方法 采集连续二个秋冬季腹泻流行期间来深圳儿童医院就诊的临床检验已排除寄生虫、细菌性腹泻和轮状病毒检测结果 为阴性的3岁以下腹泻患儿粪便标本226份,应用分型引物RT-PCR法检测HuCV的诺如病毒(norovirus,NoV)G Ⅰ和G Ⅱ群和扎如病毒(sappovirus,SaV),扩增产物通过1.5 g/dl琼脂糖凝胶电泳鏊定.部分阳性标本测序,结合GenBank参考株相应棱苷酸序列进行进化和型别流行特点分析.结果 HuCV阳性率11.06%(25/226),其中NoV阳性率10.62%(24/226),SaV阳性率0.44%(1/226),检测出NoV阳性株GⅡ/4群18株,G Ⅰ/3群5株,1株尚不能确定所属群(占4.17%,1/24).1株SaV为SG Ⅱ/1群.7月～24月龄为NoV高发年龄段.结论 HuCV是深圳地区婴幼儿冬季腹泻的重要病原体之一,流行株为NoV的G Ⅱ/4群,同时,还发现SaV的SG Ⅱ/1群存在.
作者：金玉姬；岳丽杰；李蔷；邓芳梅；李德发 刊期： 2008年第04期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
