学术投稿

样品保存方式对酶谱法检测食管癌组织MMP-9和MMP-2活性的影响

韩溟;黄铿;崔华中;蔡新琦

关键词:基质金属蛋白酶-9, 基质金属蛋白酶-2, 食管癌, 酶谱法
摘要:目的 研究样品保存方式及上样量对酶谱法检测食管癌组织MMP-9(matrix metalloproteinase-9)和MMP-2(ma-trix metalloproteinase-2)活性的影响.方法 采用酶谱法(zymography)检测食管癌组织中MMP-9和MMP-2蛋白的活性.结果 酶谱法检测食管癌组织MMP-9和MMP-2活性适宜的蛋白上样量是10μg.统计学分析表明,样品的反复冻融和-20℃长期保存并没有引起MMP-9和MMP-2活性的明显降低(P>0.05).结论 酶谱法检测食管癌组织MMP-9和MMP-2的活性所需组织标本用量少,并且不受保存方式的影响,可广泛应用于食管癌活检组织检测和回顾性调查研究.
现代检验医学杂志相关文献
  • 前S1抗原与HBV五项标志物的关系及检测意义

    目的 通过对前S1抗原的检测,探讨与乙型肝炎病毒(HBV)血清五项标志物(乙肝五项)的关系及检测前S1抗原的意义.方法 采用ELISA法检测前S1抗原和HBV标志物,并将前S1抗原与HBV五项标志物的十种不同模式进行比较.结果 176例HBsAg阳性血清前S1抗原阳性113例,而176例HBsAg阴性血清前S1抗原全部阴性;HBsAg阳性的三种模式,即模式1:HBsAg(+)HBeAg(+)HBeAb(+),模式2:HBsAg(+)HBeAb(+)HBcAb(+),模式3:HBsAg(+)HBcAb(+),前S1抗原阳性率分别为71.43%(15/21),63.50%(87/137),61.11%(11/18),经χ2检验,P>0.05,三种模式之间差异无统计学意义;在HBsAg阳性血清中,HBeAg阳性率为11.93%(21/176),前S1抗原阳性率为64.20%(113/176),经χ2>检验,P<0.01,差异有非常显著性意义.结论 前S1抗原与HBV五项标志物之间有一定的关系,只存在于HBsAg阳性血清中,其阳性率明显高于HBeAg阳性率,是反映HBV复制的重要指标,因此,检测前S1抗原在流行病学调查和临床上都有重要的意义.

    作者:王晓蓉;姬晓红;张中伟;郭欣;孙玲 刊期: 2008年第04期

  • 改良石墨炉原子吸收法直接测定血液中的铅

    目的 建立一种改良石墨炉原子吸收法直接测定血液中铅的方法 .方法 以氯化钯、硝酸铵和Trionx-100作为基体改进剂,血液样品经稀释后直接用石墨炉原子吸收法测定.结果 氯化钯、硝酸铵和Trionx-100基体改进剂的使用,可将灰化温度提高到1 000℃,降低血液成分对测定结果 的影响.线性范围为0~80μg/L,相关系数在0.9980以上,相对偏差为55%~12.2%,回收率为90.1%~106.2%,方法 的检出限为1.1 μg/L.结论 此方法 具有准确可靠、简便快速、样品不需要消化、污染小等优点,可适用于血铅的测定.

    作者:上官淑芳;黄峰 刊期: 2008年第04期

  • 老年呼吸道感染者菌群失调的研究

    目的 以健康老年人群呼吸道菌群为研究基础,在此基础上研究老年呼吸道感染过程中随着疾病的发展呼吸道菌群的变化趋势及感染治疗过程中呼吸道菌群的变化趋势.方法 采集2003年7月~2005年12月间老年人(年龄大于60岁)健康组60例在不同季节的咽拭子进行需氧培养、厌氧培养、二氧化碳培养;同时采集60例门诊呼吸道感染的老年患者(未使用抗生素治疗)咽拭子及120例呼吸道反复感染老年患者(使用5 d广谱抗生素后)的咽拭子进行同样的培养.通过数据分析在不同季节老年人群组的咽部正常菌群的分布及感染状态下呼吸道菌群数量变化和失调.结果 健康老年人群之间咽拭子的细菌菌群分布和数量是无明显差异的(P>0.05);而老年感染组的咽拭子细菌菌分布和数量与老年健康组有明显差异(P<0.05);对于120例老年呼吸道反复感染患者(在使用5 d广谱抗生素后)其咽拭子细菌菌群分布和数量与老年健康组有明显差异(P<0.05);广谱抗生素应用后主要的致病菌为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌和白假丝酵母菌等.结论 呼吸道菌群在健康老年人群之间保持着一定的菌群数量稳定,但在呼吸道感染时其菌群可失调导致呼吸道感染.而且随着广谱抗生素的应用会选择出呼吸道高耐药的条件致病菌,尤其是铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌.

    作者:张利侠;詹颉;刘波;归巧娣;任健康;孙莉;杨淑梅 刊期: 2008年第04期

  • 深圳地区婴幼儿人类杯状病毒感染状况及基因型分析

    目的 了解深圳地区婴幼儿人类杯状病毒(HuCV)感染状况和对HuCV阳性病毒株进行基因型分析.方法 采集连续二个秋冬季腹泻流行期间来深圳儿童医院就诊的临床检验已排除寄生虫、细菌性腹泻和轮状病毒检测结果 为阴性的3岁以下腹泻患儿粪便标本226份,应用分型引物RT-PCR法检测HuCV的诺如病毒(norovirus,NoV)G Ⅰ和G Ⅱ群和扎如病毒(sappovirus,SaV),扩增产物通过1.5 g/dl琼脂糖凝胶电泳鏊定.部分阳性标本测序,结合GenBank参考株相应棱苷酸序列进行进化和型别流行特点分析.结果 HuCV阳性率11.06%(25/226),其中NoV阳性率10.62%(24/226),SaV阳性率0.44%(1/226),检测出NoV阳性株GⅡ/4群18株,G Ⅰ/3群5株,1株尚不能确定所属群(占4.17%,1/24).1株SaV为SG Ⅱ/1群.7月~24月龄为NoV高发年龄段.结论 HuCV是深圳地区婴幼儿冬季腹泻的重要病原体之一,流行株为NoV的G Ⅱ/4群,同时,还发现SaV的SG Ⅱ/1群存在.

    作者:金玉姬;岳丽杰;李蔷;邓芳梅;李德发 刊期: 2008年第04期

  • 不稳定型心绞痛患者冠状动脉支架置入术后血清sCD40L及hs-CRP水平的动态观察

    目的 动态观察52例不稳定型心绞痛患者冠状动脉支架置入术后血清可溶性CD40配体(sCD40L)及超敏C-反应蛋白(hs-CRP)的水平变化.方法 用ELISA法检测血清sCD40L水平;在Olympus AU2700全自动生化分析仪上采用免疫透射比浊法检测血清hs-CRP水平.结果 与冠状动脉支架置入前相比,sCD40L及hs-CRP水平在支架置入后7,14,21,30,90和180 d均明显降低(P<0.0001);支架置入后7,14,21,30,90和180 d五个组之阀相互比较,sCD40L及hs-CRP水平差异无显著性(P>0.05).结论 在支架置入前,不稳定型心绞痛患者血清sCD40 L及hs-CRP的水平均明显偏高,在支架置入后随之降低.sCD40L及hs-CRP水平变化对评价临床药物干预效果具有一定作用.

    作者:徐邦牢;马为;贝春花;王蓉;雷秀霞 刊期: 2008年第04期

  • 从骨髓采集袋残留物可分离扩增大量间充质干细胞

    目的 探讨从骨髓采集袋残留物分离、扩增间充质干细胞(MSCs)的可行性.方法 分别以DMEM-LG直接冲洗和以DMEM-LG联合0.05 mmol/L EDTA PBS冲洗用过的骨髓采集袋,所获取的细胞悬液以Pereoll密度梯度离心和贴壁法进行MSCs分离和扩增.以细胞免疫表型检测和多向分化潜能鉴定所扩增细胞.结果 与直接冲洗组比较,联合冲洗组每袋可获取更多的单个核细胞(MNC)(2.90×108±0.50×108 VS 1.42×108 ±0.41×108,P<0.001);一定数量的联合冲洗组MNC可形成更多的纤维母细胞克隆形成单位(66.33±8.45/106 VS 24.33±4.84/106,P<0.001);经30 d扩增后,联合冲洗组每袋可获取更多的MSCs(3.70×108±0.70×108 VS 1.19×108±0.38×108,P<0.001).所扩增细胞均表达CD105,CD29,HLA-ABC,不表达CD45,CD34,CD14,HLA-DR和CD31,都可向成骨、脂肪和软骨分化.结论 从用过的骨髓采集袋这一通常丢弃的废物可分离、扩增到大量MSCs,以DMEM-LG联合EDTA冲洗可提高MSCs收获量,这为需要大量MSCs的临床治疗和研究提供了新的潜在的细胞来源.

    作者:李建新;周宇;周薇;胡艳华;聂李平;张红宇 刊期: 2008年第04期

  • 酶法与原子吸收法测定血清钾、钠比对实验研究

    目的 探讨酶法测定血清钾、钠的量值溯源性及准确度.方法 分别用全自动生化分析仪和原子吸收分光光度计测定同一份血清的钾、钠值,并进行比对.结果 酶法测定血清钾、钠的精密度,CV值分别为1.116%和0.939%;回收率为99.2%和101.5%;酶法与原子吸收法相关系数,钾r=0.989 1(回归方程Y=0.961 6X+0.312 6),钠r=0.986 1(回归方程Y=1.019 5X+0.682 3).结论 酶法测定血清钾、钠与原子吸收法有较好的一致性,结果 准确可靠.

    作者:陈会海;郝万鹏 刊期: 2008年第04期

  • 血清NT-pro BNP水平与NYHA心功能分级的相关性研究

    目的 研究N端B型脑钠肽(NT-pro BNP)与美国纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级的相关性.方法 入选心脏病患者864例,男503例,女36I例;年龄28~89岁(52±22岁),按NYHA分级将病人进行分组.另选择同期健康献血者100名作为对照组.各组病人分别于入院时、出院前各采血一次,对照组则仅采血1次,每次均抽取静脉血3 ml.以免疫电化学发光法检测其血清NT-pro BNP浓度.结果 各组病人NT-pro BNP水平均显著高于对照组NT-pro BNP水平(2.59±0.12 ng/ml),心功能分级升高,NT-pro BNP亦呈升高趋势(P<0.05),出院前NT-pro BNP水平与入院时相比明显下降(P<0.05).结论 心血管疾病患者血清NT-pro BNP水平随心衰严重程度增加而升高,随治疗改善而下降.

    作者:于农;金欣;孙君;陈建魁;宋世平;尹秀云 刊期: 2008年第04期

  • RNA干扰技术及应用

    RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)介导的细胞内双链mRNA特异性降解现象,属于转录后的基因沉默机制.RNAi是生物界普遍存在的抵抗病毒入侵、调控基因表达的监控机制.目前已成功用于基因功能和信号转导的研究,在基因治疗方面也显现出良好前景.

    作者:林盛国;张嵘;王家庆 刊期: 2008年第04期

  • 女性迟发性痤疮患者血清性激素水平的研究

    目的 探讨女性迟发性痤疮患者体内性激素水平的改变.方法 采用电化学发光免疫分析(ECLI)法对60例女性迟发性痤疮患者卵泡期血清六项性激素水平进行检测,并以40例相应年龄段的正常女性作对照.结果 女性迟发性痤疮患者血清睾酮水平较相应年龄的正常对照组显著升高(P<0.01);睾酮/雌二醇与对照组相比显著升高(P<0.05);而雌二醇、孕酮、促卵泡素、黄体生成素、催乳素与对照组相比均无显著性差异(P>0.05).结论 女性迟发性痤疮发病的主要原因可能与雄激素分泌增多有关.

    作者:于中蛟;王桂平;薛承岩;陆洁;段昕所;孙立新 刊期: 2008年第04期

  • 如何提高生化仪Konelab-60检测速度

    一台生化分析仪怎样在单位时间内完成大批体检任务,这是每个检验操作者共同关心的话题.生化室因为送检标本不能及时送检,而经常加班加点,工作人员怨声载道,如何制定好计划,在现有条件下完成上午的工作量,笔者在日常工作中总结出一套行之有效的办法.

    作者:周艺峰 刊期: 2008年第04期

  • 西安幼儿园827名儿童血中微量元素含量分析

    目的 通过对幼儿园儿童全血中微量元素的含量检测,了解各元素的缺乏情况以及和年龄、性别、身高、体重的关系.为儿童进一步平衡膳食,合理补充提供依据.方法 对在园827名儿童晨起空腹采静脉血,测定全血中锌、钙、铁、镁、铜的含量,同时测量身高、体重,用WHO 0~6岁儿童年龄、性别、身高、体重9分法评价,分为均值上、均值下两组,将数据进行统计分析.结果 各元素的缺乏率由高至低依次为锌(51.5%)、钙(26.1%)、铁(19.6%),而镁、铜的缺乏率为0%;分析了锌、钙、铁的结果 发现男孩、女孩,日托、全托均没有显著性差异,但年龄组有显著性差异,4岁组的锌(71.5%)、钙(33.2%)、铁(23.4%)缺乏率均高,其次是3岁组,5岁组缺乏率低.身高均值上、均值下各微量元素无显著性差异,体重均值上、均值下的儿童血中钙含量有显著性差异,均值下幼儿钙的缺乏率为30.4%,均值上的为24.0%.结论 全因幼儿血中锌、钙、铁均有不同程度的缺乏,尤其是4岁组幼儿,需要针对锌、钙、铁的缺乏制定食谱,更加合理安排膳食,进一步加强对儿童家长、教师的膳食营养知识、儿童保健知识的宣传教育.

    作者:范昕 刊期: 2008年第04期

  • 单纯疱疹病毒Ⅰ,Ⅱ型抗原gG1,gG2表达产物复性与纯化

    目的 探讨原核表达系统表达单纯疱疹(HSV)Ⅰ,Ⅱ型分型抗原gG1,gG2包涵体的复性与纯化方法 .方法 采用含氧化/还原谷胱甘肽(1:6)透析液透析法复性,并配合Ni2+固相化的HiTrap Chelating HP亲和层析法纯化表达抗原.应用免疫印迹法、动物免疫实验、SDS-PAGE凝胶电泳对复性纯化后的抗原免疫活性、纯度给以鉴定.结果 复性后的表达抗原具有相当于细胞培养法获得的天然抗原的免疫活性和抗原活性,且纯度迭90%以上.结论 建立的gG1,gG2包涵体的复性与纯化方法 可以用于该类原核表达抗原的大量制备工作,获得的高纯度,高活性抗原可以应用于相关病原体感染临床诊断试剂盒的开发.

    作者:ZHANG Xiao-yan;张小艳;杨来智;吴润香;安社刚 刊期: 2008年第04期

  • BS-300全自动生化分析仪常见故障及处理方法

    全自动生化分析仪是具有把生化分析中的取样、加试剂、混合、反应、检测、结果处理等过程自动操作的仪器,大大提高了生化检验的准确性、精密度和工作效率,是医院检验科常用的仪器之一.现将我们在工作中对迈瑞BS-300全自动生化分析仪常见故障及处理方法介绍如下,供同仁参考.

    作者:朱延清 刊期: 2008年第04期

  • 细胞因子对小鼠结核分枝杆菌感染的免疫保护作用

    目的 研究细胞因子IFN-γ和TNF对小鼠结核分枝杆菌感染的免疫保护作用.方法 小鼠结核分枝杆菌感染后第5 d给予IFN-γ和/或TNF治疗,观察治疗后半数死亡时间、一定时间内的死亡率、脾内活菌数,检测脾细胞分泌IFN-γ和IL-4水平(ELLSA法)及MΦ产生NO水平(用Griess试剂).结果 IFN-γ和TNF联用组与单纯攻毒组比较明显延长感染小鼠丰数死亡时间、降低感染小鼠35 d内的死亡率、显著减少感染小鼠脾内活菌数,脾细胞IFN-γ分泌水平明显升高,IL-4分泌水平显著降低,MO产生NO水平明显增加.结论 IFN-γ和TNF联合诱导MΦ产生NO,促进Th1细胞反应,抑制Th2细胞反应,改变了Th1/Th2平衡,对小鼠结核分枝杆菌感染产生保护效应.

    作者:汤红明;刘君炎 刊期: 2008年第04期

  • 全自动免疫透射比浊法测定血清免疫球蛋白应考虑的问题及解决方法

    血清免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)水平测定以对很多血液和免疫方面的疾病诊断和疗效观察具有重要的临床参考价值而愈来愈被重视,逐渐成为临床实验室的常规项目.免疫比浊测定法(im-munoturbidimetry)因同时具备生化检测的快速性和免疫反应的特异性,可进行血清Ig的快速、准确定量,临床实验中应用较广泛.

    作者:罗浔阳;孙兵;胡金曹;张葵;顾光煜 刊期: 2008年第04期

  • 肺炎克雷伯菌中质粒介导耐喹诺酮类耐药基因qnr的流行现状及耐药特征

    目的 了解肺炎克雷伯菌中质粒介导喹诺酮类耐药基因qnrA,qnrB,qnrS基因的流行情况以及其耐药特征.方法 PCR法对37株肺炎克雷伯菌进行qnrA,qnrB,qnrS基因检测.K-B纸片法检测对15种抗菌药物的体外抗菌活性.琼脂平皿二倍稀释法检测阳性菌株对环丙沙星的MIC值.结果 37株肺炎克雷伯菌中,共检测出含qnr基因阳性菌株7株(18.92%),均为qnrS基因.阳性株菌均对亚胺培南敏感且对多种抗生素耐药.结论 湖北地区肺炎克雷伯菌中存在qnr基因的流行,qnr阳性菌株呈多重耐药,应加强对该类基因的监测.

    作者:李娟;李从荣;黄俊;李艳 刊期: 2008年第04期

  • AC-920EO+血液分析仪常见报警与排除方法

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    作者:邓宗奎 刊期: 2008年第04期

  • β-内酰胺类抗生素对凝血功能影响的研究

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    作者:刘云芳;杨舒 刊期: 2008年第04期

  • 抑郁症患者血清甲状腺激素水平研究

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    作者:张文亮 刊期: 2008年第04期

现代检验医学杂志

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主管:陕西省卫生厅

主办:陕西省临床检验中心,陕西省人民医院