学术投稿

从骨髓采集袋残留物可分离扩增大量间充质干细胞

李建新;周宇;周薇;胡艳华;聂李平;张红宇

关键词:骨髓, 间充质干细胞, 分离, 扩增, 鉴定
摘要:目的 探讨从骨髓采集袋残留物分离、扩增间充质干细胞(MSCs)的可行性.方法 分别以DMEM-LG直接冲洗和以DMEM-LG联合0.05 mmol/L EDTA PBS冲洗用过的骨髓采集袋,所获取的细胞悬液以Pereoll密度梯度离心和贴壁法进行MSCs分离和扩增.以细胞免疫表型检测和多向分化潜能鉴定所扩增细胞.结果 与直接冲洗组比较,联合冲洗组每袋可获取更多的单个核细胞(MNC)(2.90×108±0.50×108 VS 1.42×108 ±0.41×108,P<0.001);一定数量的联合冲洗组MNC可形成更多的纤维母细胞克隆形成单位(66.33±8.45/106 VS 24.33±4.84/106,P<0.001);经30 d扩增后,联合冲洗组每袋可获取更多的MSCs(3.70×108±0.70×108 VS 1.19×108±0.38×108,P<0.001).所扩增细胞均表达CD105,CD29,HLA-ABC,不表达CD45,CD34,CD14,HLA-DR和CD31,都可向成骨、脂肪和软骨分化.结论 从用过的骨髓采集袋这一通常丢弃的废物可分离、扩增到大量MSCs,以DMEM-LG联合EDTA冲洗可提高MSCs收获量,这为需要大量MSCs的临床治疗和研究提供了新的潜在的细胞来源.
现代检验医学杂志相关文献
  • 葡萄糖6-磷酸异构酶(GPI)检测在类风湿性关节炎诊治中的应用价值

    目的 探讨葡萄糖6-磷酸异构酶在类风湿性关节炎(rheumatoid arthriti,RA)诊断中的应用价值,以及与类风湿因子(RF)和抗CCP抗体联合检测的意义.方法 检测85例RA患者,44例非RA自身免疫病痛人,40例健康对照者血清GPI浓度,并同时检测RF,抗CCP抗体含量,对各组间结果 进行统计学分析.结果 RA组、非RA自身免疲病组和健康对照组GPI浓度(μg/ml)及阳性率(%)分别为20.37±56.54和44.7,0.82±2.83和15.9,0.073±0.053和0.RA组GPI浓度和阳性率显著高于疾病组和健康对照组(P<0.001).结论 血清GPI检测对RA诊断具有一定价值,可作为RA诊断的一个新的血清学指标,和RF,抗CCP抗体联合检测提高了对RA诊断的灵敏度和特异性.

    作者:张迎梅;林宁;姜玉章;陈滢;杨玉芹;胡玲;王霞 刊期: 2008年第04期

  • 抑郁症患者血清甲状腺激素水平研究

    目的 探讨血清甲状腺激素水平与抑郁症的关系.方法 采用ELISA方法 对40例抑郁症患者治疗前后及对照者血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)和促甲状腺素(TSH)进行检测.结果 抑郁症患者治疗前血清FT3,FT4较对照组低(P<0.05),而TSH与对照组差异无显著性(P>0.05).治疗4 W后两组间差异无显著性(P>0.05).结论 抑郁症患者存在甲状腺功能低下.

    作者:张文亮 刊期: 2008年第04期

  • 女性生殖道链球菌分型与意义研究

    目的 研究无乳链球菌在女性生殖道中的定植和感染机制,提高临床实验室对其检测的认识水平.方法 先将白带涂片检查,再对链球菌为优势菌的患者样本进行细菌培养和鉴定,结合阴道菌群分布、白细胞数量等检测数据进行分析.结果 涂片检查链球菌阳性率5.35%(58/1 085),白细胞阳性率0.28%(3/1 085);细菌培养无乳链球菌阳性率1.75%(19/1 085);链球菌血清分型D型占51.72%,B型(无乳链球菌)占32.76%.结论 无乳链球菌在女性生殖道中的定植与疾病呈密切相关.

    作者:陈华英;何艳;林伟华;聂晓辉;黄云平 刊期: 2008年第04期

  • 肺癌胸腔积液肺耐药相关蛋白(LRP)基因检测及临床意义

    目的 探讨胸腔积液肺耐药蛋白基因检测临床意义.方法 用荧光定量RT-PCR法检测114例肺癌患者胸腔积液标本(腺癌80例,鳞癌17例,差分化癌10例,小细胞癌7例)肺耐药蛋白基因表达,并进行胸腔积液细胞学检测.结果 腺癌、鳞癌、差分化癌及小细胞肺癌胸腔积液LRP mRNA阳性率及中位拷贝数分别为72.94%(62/85),45.45%(5/11),40.00%(4/10),28.57%(2/7);23.58,19.22,20.15,8.36 copies/ml.非小细胞肺癌各种病理类型标本中LRP mRNA阳性率均显著高于小细胞肺癌(P均<0.05),在非小细胞肺癌的各种病理类型中,以腺癌LRP mRNA阳性率高;非小细胞肺癌各种病理类型胸腔积液标本LRP mRNA中位拷贝数无显著性差异(P均>0.05).结论 胸腔积液LRP mRNA检出,不仅明确了肺癌的诊断,也表明该肺癌细胞具有耐药性.

    作者:齐学远;陈余清 刊期: 2008年第04期

  • 库尔特HmX全自动五分类血细胞计数仪精确度欠佳原因及新清洗程序的建立

    介绍了库尔特HmX全自动五分类血细胞计数仪因分类处理器质量、负压滑塞、室内温度、细胞计数分类池的洁净度,致标本测试精确度欠佳原因及处理方法.处理结果表明,无论是细胞计数还是分类,其精密度和准确度都有了明正改观,特别是M%和B%,与手工分类有很好的可比性,更为理想的是即使再多的标本,也没有不分类的现象了.

    作者:胡柏成;吴晓虹;戴群莹 刊期: 2008年第04期

  • 中国北方汉族人乙二醛酶I基因Ala111Glu多态性与糖尿病并发冠心病的关系研究

    目的 探讨中国北方地区汉族人乙二醛酶I(GLO-I)基因Ala111Glu多态性与糖尿病并发冠心病的关系.方法 应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测了161名对照组、99例糖尿病组和71例糖尿病并发冠心病组GLO-I基因Ala111Glu多态性的基因型和等住基因频率分布.分析基因多态性对糖化血红蛋白(HbA1c)、血糖、血脂水平的影响.结果 3组研究对象的GLO-I基因Ala111Glu多态性基因型和等位基因频率分布差异无显著意义,不同基因型亚组间HbAlc、血糖、血脂水平无明显差别.Logistic回归分析显示,年龄、HbA1c是糖尿病并发冠心痛的危险因素,HDL-C则是糖尿病并发冠心病的保护因素(β=-2.708,Exp(β)=0.067,95%CI=0.009~0.488,P=0.008).结论 GLO-I基因Ala111Glu多态性与糖尿病并发冠心病无明显关联性,不是中国北方汉族人糖尿病并发冠心病发病的独立危险因素.

    作者:金勋;夏良裕;宋耀虹;张麟;尹志农;鄢盛恺 刊期: 2008年第04期

  • AC-920EO+血液分析仪常见报警与排除方法

    随着科学技术的迅速发展,传统手工的血细胞检查方法逐渐被高效精密的全自动血液分析仪所代替,我院2001年引进了瑞典产AC-920EO+血液分析仪,经过多年的临床应用与实践,本人对该仪器的使用与维护所遇到的问题不断地加以探索和总结,有效地排除常见报警故障,现将经验介绍如下.

    作者:邓宗奎 刊期: 2008年第04期

  • 奥林帕斯AU400全自动生化分析仪故障排除一例

    奥林帕斯AU400全自动生化分析仪测试速度快、准确性高、重复性好、软件功能也比较完善,适用于医院检验科大批量生化项目的检测.2006年冬天,我市某医院检验科的奥林帕斯AU400突然发生故障不能正常工作,因多年来笔者对仪器维修感兴趣并有一定的经验,故求助于笔者,在参阅仪器使用说明书后也不得而知,因说明书中未标明此故障,后经反复检查,得出症结所在,并给与排除,现介绍给大家,特别是本仪器的使用者.

    作者:马春明 刊期: 2008年第04期

  • TBA120FR生化分析仪的常见故障及处理

    TBA120FR生化仪是由日本东芝公司生产的大型全自动生化分析仪,其检测速度快,重复性好,操作简单.自2001年以来,使用过程中出现了一些故障,现将故障和处理的一些经验介绍如下,供同道参考.

    作者:李晓东 刊期: 2008年第04期

  • 女性性激素与原发性不孕症相关性的研究

    目的 探讨女性性激素的变化规律与原发性不孕症的相关性.方法 选择原发性不孕症患者80例作为观察组,健康对照组20例,以性激素检测为指标.结果 月经周期第10 d观察组E2,P,PRL,P/E2较高,与对照组比较有非常显著性差异(P<0.01);月经周期第20 d现察组P,P/E2较对照组低,两组比较有非常显著性差异(P<0.01);PRL较对照组高,差异性显著(P<0.05);FSH,LH,T,LH/FSH变化不明显(P>0.05).结论 女性性激素的变化与原发性不孕症具有相关性,能够为临床诊断及疗效观察提供依据.

    作者:李文东;康艳丽;李灿东;高碧珍;丁杰;黄熙理 刊期: 2008年第04期

  • 因检验结果互认而进行的补体检测结果校正研究

    目的 探讨利用混合血清制备质控参考品对不同实验室间补体C3,C4检测结果 进行校准的可能性.方法 分别检测单份血清和由这些单份血清制备的混合血清的C3,C4,比较单份血清检测值的均数与混合血清检测值的接近程度;将100份正常人血清(40岁以下成人,男女各半)等量混合为参比血清与1名患者血清同时送6家临床实验室检测,依照同一实验室检测的参比血清检测值和<全国临床检验操作规程(第3版)>给定的各项目的 参考值对患者血清检测值进行校准,观察校准效果.结果 混合血清检测值与单份血清测定值的均数十分接近;患者血清迟6家临床实验室C3,C4检测结果 的CV值分别为10.32%和16.14%,校准后为4.99%和6.53%.结论 依照参比血清检测值和约定真值对待栓血清C3,C4检测值进行校准效果明显.

    作者:刘辉;马悦;张静;袁宏;宫晓红;宗建国;徐维家 刊期: 2008年第04期

  • 酶法与原子吸收法测定血清钾、钠比对实验研究

    目的 探讨酶法测定血清钾、钠的量值溯源性及准确度.方法 分别用全自动生化分析仪和原子吸收分光光度计测定同一份血清的钾、钠值,并进行比对.结果 酶法测定血清钾、钠的精密度,CV值分别为1.116%和0.939%;回收率为99.2%和101.5%;酶法与原子吸收法相关系数,钾r=0.989 1(回归方程Y=0.961 6X+0.312 6),钠r=0.986 1(回归方程Y=1.019 5X+0.682 3).结论 酶法测定血清钾、钠与原子吸收法有较好的一致性,结果 准确可靠.

    作者:陈会海;郝万鹏 刊期: 2008年第04期

  • BS-300全自动生化分析仪常见故障及处理方法

    全自动生化分析仪是具有把生化分析中的取样、加试剂、混合、反应、检测、结果处理等过程自动操作的仪器,大大提高了生化检验的准确性、精密度和工作效率,是医院检验科常用的仪器之一.现将我们在工作中对迈瑞BS-300全自动生化分析仪常见故障及处理方法介绍如下,供同仁参考.

    作者:朱延清 刊期: 2008年第04期

  • 乙肝病毒大蛋白与HBV-DNA相关性研究及在不同性别、年龄群体中的差异分析

    目的 探讨乙型肝炎病毒表面大蛋白用于临床诊断的价值以及与乙肝病毒DNA的相关性,分析各检测方法 在男女群体中以及不同年龄段人群中的差异性.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测712例乙肝病毒携带者血清LHBS和定性PCR跟荧光定量PCR方法 检测HBV-DNA,全自动生化分析仪速率动力法检测ALT.结果 712例乙肝病毒携带者LHBS、HBV-DNA的检测结果 显示:HBeAg(+)模式的HBV-DNA与LHBS检测结果 差别无显著性意义(P>0.05),且不受性别、年龄的影响.HBeAg(-)模式的HBV-DNA与LHBS检测结果 差别具有显著性意义(P<0.05),且男性组HBV-DNA阳性率略高于女性组,年长组大于年轻组,年轻群体LHBS阳性率略高于年长群体.HBeAg(+)模式群体中ALT>40 U/L的比例远大于HBeAg(-)模式群体.结论 在HBeAg(+)模式群体中乙肝病毒大蛋白与HBV-DNA检测有较高符合性,HBeAg(+)模式群体中及年长群体中肝受损程度较明显.在HBeAg(-)模式群体中乙肝病毒大蛋白阳性率高于HBV-DNA.LHBS是反映HBeAg阴性乙肝病毒携带者病毒复制情况的新的血清免疫学指标.

    作者:凌利芬;陆学东;吴正林;钟小强;林广城;王琼 刊期: 2008年第04期

  • 女性迟发性痤疮患者血清性激素水平的研究

    目的 探讨女性迟发性痤疮患者体内性激素水平的改变.方法 采用电化学发光免疫分析(ECLI)法对60例女性迟发性痤疮患者卵泡期血清六项性激素水平进行检测,并以40例相应年龄段的正常女性作对照.结果 女性迟发性痤疮患者血清睾酮水平较相应年龄的正常对照组显著升高(P<0.01);睾酮/雌二醇与对照组相比显著升高(P<0.05);而雌二醇、孕酮、促卵泡素、黄体生成素、催乳素与对照组相比均无显著性差异(P>0.05).结论 女性迟发性痤疮发病的主要原因可能与雄激素分泌增多有关.

    作者:于中蛟;王桂平;薛承岩;陆洁;段昕所;孙立新 刊期: 2008年第04期

  • 单纯疱疹病毒Ⅰ,Ⅱ型抗原gG1,gG2表达产物复性与纯化

    目的 探讨原核表达系统表达单纯疱疹(HSV)Ⅰ,Ⅱ型分型抗原gG1,gG2包涵体的复性与纯化方法 .方法 采用含氧化/还原谷胱甘肽(1:6)透析液透析法复性,并配合Ni2+固相化的HiTrap Chelating HP亲和层析法纯化表达抗原.应用免疫印迹法、动物免疫实验、SDS-PAGE凝胶电泳对复性纯化后的抗原免疫活性、纯度给以鉴定.结果 复性后的表达抗原具有相当于细胞培养法获得的天然抗原的免疫活性和抗原活性,且纯度迭90%以上.结论 建立的gG1,gG2包涵体的复性与纯化方法 可以用于该类原核表达抗原的大量制备工作,获得的高纯度,高活性抗原可以应用于相关病原体感染临床诊断试剂盒的开发.

    作者:ZHANG Xiao-yan;张小艳;杨来智;吴润香;安社刚 刊期: 2008年第04期

  • 朔州市健康成人血清胆红素测定参考范围调查

    目的 调查探讨朔州市区健康体检人群血清胆红素水平.方法 采用回顾分析的方法 ,随机抽取朔州市370名健康体检人群的血清总胆红素(TBIL)和直接胆红素(DBIL)的测定值,编制频数分布表,并按性别进行统计分析比较,并与西安地区、深圳、广东茂名地区人群进行比较,观察胆红素参考值的变化.结果 朔州市区健康体检人群血清TBIL,DBIL水平比原参考值明显升高(P<0.01),TBIL75%(P75)和95%(P95)位点值分别为19.33 μmol/L和25.35 μmol/L,DBIL75%(P75)和95%(P95)位点值分别为2.52 μmol/L和3.38 μmol/L.成年男性>成年女性,差异具有极显著性(P<0.01).朔州市区健康体检人群中女性TBIL与广东茂名地区女性TBIL无显著性差异(P>0.25)外,与其余各地区血清TBIL水平均有极显著性差异(P<0.01).结论 朔州市原血清胆红素参考值已不能客观地反映人群的胆红素水平是否为异常变化,应以新的参考范围用于临床诊断.

    作者:张翠萍;谢怀叶;苍金荣 刊期: 2008年第04期

  • 血清NT-pro BNP水平与NYHA心功能分级的相关性研究

    目的 研究N端B型脑钠肽(NT-pro BNP)与美国纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级的相关性.方法 入选心脏病患者864例,男503例,女36I例;年龄28~89岁(52±22岁),按NYHA分级将病人进行分组.另选择同期健康献血者100名作为对照组.各组病人分别于入院时、出院前各采血一次,对照组则仅采血1次,每次均抽取静脉血3 ml.以免疫电化学发光法检测其血清NT-pro BNP浓度.结果 各组病人NT-pro BNP水平均显著高于对照组NT-pro BNP水平(2.59±0.12 ng/ml),心功能分级升高,NT-pro BNP亦呈升高趋势(P<0.05),出院前NT-pro BNP水平与入院时相比明显下降(P<0.05).结论 心血管疾病患者血清NT-pro BNP水平随心衰严重程度增加而升高,随治疗改善而下降.

    作者:于农;金欣;孙君;陈建魁;宋世平;尹秀云 刊期: 2008年第04期

  • 深圳迈瑞BS-300全自动生化分析仪单向阀故障的判断和处理

    深圳迈瑞BS-300全自动生化分析仪是深圳迈瑞公司的产品,为任选式、多通道、多项目全自动生化分析仪[1].此仪器的清洗系统主要由清洗液桶、单向阀、马达、搅拌棒、样本针、试剂针、清洗池等构成.生化分析仪清洗部分对检验结果影响非常大,单向阀是BS-300全自动生化分析仪清洗部件之一,包括负责内壁清洗的内冲阀,负责外壁清洗的外冲阀,它们的作用主要是对泵的保护,降低泵的压力.

    作者:何文军;陈丽娥;黄永攀 刊期: 2008年第04期

  • 样品保存方式对酶谱法检测食管癌组织MMP-9和MMP-2活性的影响

    目的 研究样品保存方式及上样量对酶谱法检测食管癌组织MMP-9(matrix metalloproteinase-9)和MMP-2(ma-trix metalloproteinase-2)活性的影响.方法 采用酶谱法(zymography)检测食管癌组织中MMP-9和MMP-2蛋白的活性.结果 酶谱法检测食管癌组织MMP-9和MMP-2活性适宜的蛋白上样量是10μg.统计学分析表明,样品的反复冻融和-20℃长期保存并没有引起MMP-9和MMP-2活性的明显降低(P>0.05).结论 酶谱法检测食管癌组织MMP-9和MMP-2的活性所需组织标本用量少,并且不受保存方式的影响,可广泛应用于食管癌活检组织检测和回顾性调查研究.

    作者:韩溟;黄铿;崔华中;蔡新琦 刊期: 2008年第04期

现代检验医学杂志

现代检验医学杂志

主管:陕西省卫生厅

主办:陕西省临床检验中心,陕西省人民医院