严亨秀;张承武;郑煜
目的确定酶解消化法牙髓细胞原代培养的合适条件与时间.方法选取年轻患者因正畸拔除的完整和无龋坏牙齿,取出牙髓,分别采用胶原酶一步法消化牙髓组织30分钟及1、2、3小时,胶原酶分步消化法,组织块法和组织块酶解法进行原代培养.倒置显微镜台盼蓝染色观察细胞解离及存活状况,免疫组化法鉴定细胞来源.结果胰酶消化2小时后,组织块基本未解离.用0.1%胶原酶一步法消化1、2、3小时后组织块均彻底解离为单细胞,基本无残余. 0.1%胶原酶消化30分钟后组织块解离不完全.0.1%胶原酶分步法消化1小时后组织解离彻底.台盼蓝染色表明经胶原酶一步法消化获得的牙髓细胞被台盼蓝着色的比例随消化时间减短而下降.分步法消化细胞着色率低于一步法.组织块酶解法的组织块解离、贴附和细胞游出状况均优于组织块法.结论Ⅰ型胶原酶在37℃,持续振荡条件下消化1小时是彻底酶解消化人牙髓的短时间.分步酶解法能获得比一步酶解法更高的活细胞数量.而从效果、操作难易和耗时多少等多方面因素综合考虑,组织块酶解法是人牙髓组织原代培养的佳方法.
作者:赵瑚;陈治清;白薇 刊期: 2002年第02期
目的研究体外培养大鼠骨髓基质细胞诱导条件下,成骨分化标志骨钙素和Ⅰ型胶原mRNA水平的表达. 方法采用成骨诱导剂(含地塞米松10-8mol/L、β甘油磷酸钠10 mmol/L和抗坏血酸AA 50 μg/ml)对培养状态下的不同代大鼠骨髓基质细胞进行成骨诱导,提取RNA,采用RT-PCR方法,以β-肌动蛋白cDNA为内参照,检测骨钙素和Ⅰ型胶原mRNA的表达. 结果与对照组相比,接受成骨诱导剂作用的大鼠骨髓基质细胞随诱导时间的延长骨钙素和Ⅰ型胶原mRNA出现高表达,且维生素D为诱导骨钙素mRNA表达的必需成分. 结论体外培养的大鼠骨髓基质细胞保持成骨未分化状态,无骨钙素和Ⅰ型胶原mRNA的表达,诱导后可向成骨分化,骨钙素和Ⅰ型胶原mRNA表达升高.
作者:陈槐卿;韩君;李良;卢江华;张文胜;陈锐 刊期: 2002年第02期
目的探讨血管紧张素原(AGT)和血管紧张素I转化酶(ACE)基因变异是否与妊娠高血压综合征(简称妊高征)有关联. 方法采用ACE基因PCR扩增片断长度多态性及AGT基因限制性片断长度多态性方法, 对成都地区81例汉族妊高征及205例正常孕妇对照进行了检测.结果妊高征及正常孕妇等位基因的频率分别为:AGT235T为0.856、0.846;ACE D为0.333、0.364.两组之间各等位基因频率分布无显著差异;与白种人相比,白种人ACE D等位基因频率均高于中国人(P<0.001),而AGT235T等位基因频率白种人(0.350~0.482)及其它非白种人(0.620~0.739)均较中国人(0.846)为低(P<0.01,P<0.001).结论本研究未发现AGT及ACE基因的变异与中国人(成都地区)妊高征发病有关联.
作者:白怀;刘兴会;刘瑞;刘宇;李敏淑;刘秉文 刊期: 2002年第02期
目的观察双倍剂量的雷公藤多甙(TWH)治疗单纯性蛋白尿的疗效.方法 15例单纯蛋白尿患者[7例系膜增生性肾炎(MsPGN),4例IgA肾病(IgAGN),1例微小病变性肾炎(MCGN),3例无肾活检资料]均服用TWH 2mg/(kg*d)4周,观察蛋白尿变化及副反应. 结果 10例表现为选择性蛋白尿的患者完全缓解或好转,总有效率为66.7%,其中MsPGN完全缓解3例,好转3例;IgAGN完全缓解2例; MCGN完全缓解1例;无肾活检资料患者完全缓解1例,其TWH治疗的有效率分别为85.7%,50.0 %,100%和33.3%.5例表现为非选择性蛋白尿的患者无好转.所有患者均能耐受双倍剂量的TWH,消化道反应和肝脏损害的副作用轻微,无一例出现严重白细胞减少.结论双倍剂量的TWH对表现为选择性蛋白尿的、以肾小球系膜增生为特点的单纯蛋白尿患者具有良好的疗效.
作者:付平;雷鸣;周莉;许志忠;苏白海;刘芳 刊期: 2002年第02期
目的探讨猪血清白蛋白检测的常规分析方法.方法利用溴甲酚紫(BCP)法、蛋白电泳法和溴甲酚绿(BCG)方法同时测定猪和人血清标本中白蛋白含量并进行比较;用紫外可见分光光度计检测BCG法和BCP法测定猪和人血清白蛋白的吸收曲线.结果 BCG法、BCP法与电泳法对人血清白蛋白检测结果无显著差异;后二法对猪血清白蛋白测值与BCG法测结果间虽有正相关关系(r分别为0.9503和0.9533),但显著低于BCG法(P<0.05);吸收曲线显示,BCP法吸收峰明显低于BCG法吸收峰.结论在猪血清白蛋白绝对含量的测定中推荐使用BCG法.
作者:张璘;蒋红梅;李萍;彭志英;赵清江;李幼平 刊期: 2002年第02期
目的比较使用pHSVlac/helper 或pHSVlac/helper virus-free两种载体包装系统进行基因转移时所引起的免疫应答.方法分别将两种载体定位注射到大鼠纹状体内,采用免疫组化方法检测并计数包括TCR、CD4、CD8、MHC-Ⅰ和MHC-Ⅱ在内的几种免疫反应阳性细胞.结果两种载体包装系统引起的TCR、CD4和CD8免疫反应阳性细胞浸润高峰出现在基因转移后的第7天,MHC-Ⅰ和MHC-Ⅱ反应高峰在第4天.它们对pHSVlac/helper的反应明显大于对pHSVlac/helper virus-free的反应(P<0.001),前者是后者的3~12倍,并且,pHSVlac/helper virus-free所致的细胞浸润迅速消退接近PBS对照组水平.结论无辅助病毒载体包装系统仅引起较弱的免疫应答.
作者:章为;Alfred Geller 刊期: 2002年第02期
目的观察冠心病患者三种白细胞表面粘附相关蛋白的表达及其与冠心病严重性和冠状动脉狭窄程度的关系.方法采用流式细胞仪免疫荧光法测定中性粒细胞、单核细胞和淋巴细胞表面粘附相关蛋白CD11a和CD11b含量.结果冠心病组淋巴细胞及中性粒细胞表面粘附蛋白CD11b的表达明显高于正常人,尤以不稳定型组增高显著(P<0.01~0.05).尽管在冠脉病变狭窄>80%组,其三种白细胞的CD11b水平高于狭窄程度轻的组,但尚未见统计学差异.结论冠心病存在炎症反应,外周血中性粒细胞、淋巴细胞CD11b表达增高,是冠心病疾病加重的反映.
作者:陈晓平;张定宝;杨庆;黄德嘉;张立;高梅;雷松;黄明慧;刘小菁;魏于全;游桂英 刊期: 2002年第02期
目的探讨部分去传入后猫脊髓背角Ⅱ板层内NGF、BDNF、NT-3及其mRNA的时空变化规律。方法 用免疫组化和原位杂交技术检测部分去传入(切断L1~L5、L7~S2背根,保留L6背根为备用根)3~5天、10~11天后,猫脊髓L3、L5、L6或L7节段背角Ⅱ板层内三种神经营养素及其mRNA的表达变化。结果 ①正常猫NGF及其mRNA分布于Ⅱ板层神经元内;BDNF分布于神经纤维终末、膨体和神经元内,mRNA阴性;NT-3分布于神经元、胶质细胞和少量神经纤维及膨体中,mRNA阴性。②去传入后3~5天,NGF及其mRNA阳性神经元数明显增多,NT-3阳性神经元和胶质细胞数也明显增多,而BDNF含量及阳性膨体数却明显减少;10~11天时,NGF及其mRNA阳性神经元数仍维持高峰水平,NT-3者虽仍高于正常但已有所下降,而BDNF含量除L7节段外已恢复到正常,但阳性膨体数仍未恢复。BDNF和NT-3的mRNA仍呈阴性。③NGF达高峰的时间在L5、L6节段较早,L3较晚;BDNF含量的恢复以L7迟;NT-3阳性胶质细胞数量的变化在各节段一致,唯L5、L7节段的阳性神经元数在10~11天时即降致正常水平,L3节段仍维持较高水平。结论 三种因子均参与部分去传入后脊髓的可塑性反应,但其发挥作用的早晚及维持时间却不尽相同。
作者:周雪;吴良芳;谌宏鸣;王廷华;陈丽华;保天然;廖德阳 刊期: 2002年第02期
目的对比研究3月龄与12月龄大鼠骨髓基质细胞(rMSCs)增殖能力和成骨、成脂肪分化能力.方法体外培养3月龄、12月龄大鼠骨髓基质细胞,用血球计数板描绘生长曲线比较增殖能力;培养液中分别加成骨、成脂肪诱导剂,在不同时间行细胞化学染色,观察两组细胞成骨与成脂肪能力的变化.结果 12月龄rMSCs第4代(P4)及第9代(P9)较3月龄rMSCs同代细胞生长数量均下降.12月龄rMSCs P9较P4生长数量下降.3月龄rMSCs P4、P9之间生长数量无显著差异.成骨诱导1周后,12月龄rMSCs对照与诱导组碱性磷酸酶(ALP)表达阳性率均低于3月龄rMSCs的同组细胞.成骨诱导12天后,3月龄rMSCs先于12月龄rMSCs组有钙化形成.成脂肪诱导第二天12月龄rMSCs先于3月龄rMSCs有脂滴生成.结论 12月龄rMSCs生长能力和成骨能力较3月龄rMSCs降低,成脂肪能力较3月龄rMSCs增高.
作者:药蓉;陈槐卿;邓力;李良 刊期: 2002年第02期
目的探讨红毛五加多糖-Ⅰ的抑癌机制.方法采用DNA电泳和流式细胞术检测红毛五加多糖-Ⅰ对胃癌细胞的影响.结果该多糖作用36小时后,电泳可见胃癌细胞DNA的梯状图谱,流式图上出现凋亡峰.结论表明红毛五加多糖-Ⅰ可能通过诱导胃癌细胞凋亡而起到抑癌作用.
作者:吕晓英;曾令福;蔡亚南;李由;刘新华 刊期: 2002年第02期
目的研究不同天然药物对粘性放线菌生长及产酸的影响,为筛选能有效调理口腔菌群生态平衡的药物奠定基础.方法选用粘性放线菌标准株ATCC 19246作为实验菌株.测定川芎、血藤和五倍子等十一种天然药物的低抑菌浓度(MIC).再以低于MIC的4个浓度配制含药的TPY液体培养基,调定其初始pH为7.4,接种粘性放线菌,厌氧培养后测定其终末pH.结果当药物浓度低于或等于8.000mg/ml时,除三七外,其他药物对粘性放线菌的生长都有一定的抑制作用,且以槟榔和蜂房较强.茶多酚、三七、大黄、蜂房和血藤对粘性放线菌的产酸具有一定的抑制能力,而黄芩、槟榔、川芎、五倍子、白芷和儿茶没有明显的抑制作用.结论茶多酚、大黄、蜂房和血藤对粘性放线菌的生长和产酸都有一定的抑制作用.
作者:肖悦;刘天佳;黄正蔚;周学东;李罡 刊期: 2002年第02期
目的探讨端粒酶在肺癌诊断中的临床意义.方法应用银染-TRAP法检测经纤支镜活检的30例肺组织及其相应支气管冲洗液中的端粒酶活性.结果 30例疑诊为肺癌患者的活检肺组织,病理学检查证实为肺癌的有23例,经支气管冲洗液细胞学检查证实为肺癌有5例,其中2例病理学与细胞学检查均为阳性.在确诊为肺癌的26例患者中,有22例活检肺癌组织的端粒酶表达阳性,有12例支气管冲洗液的端粒酶表达阳性.疑诊为肺癌患者活检肺组织经检测端粒酶活性诊断肺癌的敏感性(84.62%)与病理学检查(88.46%)相似(P>0.05);支气管冲洗液经检测端粒酶活性诊断肺癌的敏感性(46.15%)高于细胞学检查(19.23%)(P<0.05).经病理与细胞学检查排除肺癌的4例患者活检肺组织及支气管冲洗液中,除1例活检肺组织端粒酶表达阳性外,余均为阴性.结论病理与细胞学检查结合端粒酶活性检测有助于提高肺癌诊断的准确性.
作者:毛辉;罗凤鸣;刘春涛;王曾礼;李佳琦 刊期: 2002年第02期
目的探讨不同的熔融渗透时间和温度下,玻璃在氧化铝中的渗透深度.方法制作Vita In-Ceram Alumina 和GI-Ⅱ氧化铝预烧体,分别用A2和IG2色玻璃进行渗透.按渗透时间不同分为30、60、90、120、150和180分钟组,渗透温度1100℃;按渗透温度不同分为1060、1080、1100、1120和1140℃温度组,渗透时间1小时.用带标尺体视镜(×10)分别测量各组的渗透深度.结果渗透深度和时间的平方根呈线性关系,Vita和GI-Ⅱ组相关系数分别为0.9886和0.9932,回归方程分别为d2=0.1122t-0.4955和d2=0.1638t+0.5873;随渗透温度的升高,Vita的渗透速率增加,高于1100℃后下降,GI-Ⅱ的趋势则相反.结论 GI-Ⅱ型玻璃具有较好的渗透性能,在1100℃的渗透温度下,推荐单冠和前牙桥体的渗透时间分别为1小时和3小时.
作者:牟雁东;巢永烈;廖运茂;孟玉坤 刊期: 2002年第02期
尖锐湿疣(Condyloma acuminata, 尖锐湿疣)是由人乳头瘤病毒(HPV)引起的常见的性传播疾病(STD).尖锐湿疣的发生、发展与患者机体免疫功能,尤其是细胞免疫功能关系密切.近年发病率不断增高,妊娠期合并尖锐湿疣亦随之增多.本文就我院7年间经激光治疗的妊娠合并尖锐湿疣113例患者的临床特征、治疗及效果进行回顾分析,并与同期治疗的非妊娠尖锐湿疣患者进行对照,以提高临床对妊娠合并尖锐湿疣的特征、处理和转归的认识.
作者:彭秀琼;徐克惠 刊期: 2002年第02期
目的探讨在调整TiAdapt基桩时,预备程序对种植体和基桩的结合稳定性是否有影响.方法 30个Branemark种植体(10个RP,10个NP,10个WP)分别与10个TiAdapt RP、10个TiAdapt NP和10个TiAdapt WP组成三组,每组的标本再进一步分成A和B两个亚组,A亚组用于进行基桩预备程序,B亚组作为对照组,并记录预备前后基桩和种植体之间的密合度. 结果 RP组和WP组的A和B亚组之间无显著性差异(P值分别为0.180和0.423),预备前后也无显著性差异(P值分别为0.051和0.494),NP组的A和B亚组间差异有显著性(P=0.047),NP组预备前后也有显著性差异(P=0.045).结论基桩预备程序加强了种植体和基桩的结合.
作者:章非敏;赵云凤;王华蓉;Michael E.Razzoog;Brien R.Lang 刊期: 2002年第02期
目的探讨糖尿病性肌梗塞的诊断及治疗.方法回顾性分析了4例糖尿病肌梗塞患者的临床特征、影像学和病理学特点及治疗方法. 结果①4例患者均为2型糖尿病,平均糖尿病病程6.8年,入院时平均血糖13.7mmol/L,平均HbA1C为9.5%;合并视网膜病变4例,糖尿病肾病、周围神经病变、高血压各2例.②发病初期均有疼痛性弥漫性肌肉肿胀,3例在起病1~2周后形成局部肌肉肿块.③检查结果:彩超检查示病灶部位肌肉肿胀增厚,横纹消失,呈不规则强弱相间回声;CT平扫显示受累肌肉明显肿胀,体积增大,肌束间隙及肌周间隙模糊不清;肌肉活检可见肌纤维横纹消失,部分肌纤维萎缩,核链状增生,肌纤维小片状透明变性,部分肌纤维内见空泡变化,小血管壁增厚,个别毛细血管见透明血栓形成,并见个别小血管有血栓机化,间质水肿,灶性肌纤维坏死伴中性粒细胞和淋巴细胞浸润.④治疗及预后:入院后给予对症及抗凝治疗3例,外科清创1例,症状和体征缓解时间平均为22天;随访2月至6年,3例病情稳定, 1例出院3月后猝死.结论糖尿病性肌梗塞是糖尿病的一种罕见且被人们认识不足的并发症;治疗上主要是用胰岛素严格控制血糖及卧床休息,镇痛等对症治疗,辅以抗凝治疗;其短期预后良好.
作者:冉兴无;童南伟;步宏;宋彬;罗燕;文晓蓉;熊萍;谢隆兵;田浩明;李秀钧 刊期: 2002年第02期
目的为结核病新型疫苗研制提供靶基因和靶抗原.方法根据结核杆菌H37Rv株免疫保护性抗原Ag85A的基因序列自行设计一对寡核苷酸引物,以结核杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得具有完整开架读码框(ORF)的Ag85A抗原基因,并将其正向插入真核和原核穿梭表达型载体pBK-CMV构建重组质粒,重组质粒转入大肠杆菌后IPTG诱导表达,并对其表达产物进行Western-blotting分析.结果 PCR扩增获得了具有完整开架读码框的Ag85A抗原基因;构建了Ag85A抗原基因真核和原核穿梭表达型载体;Ag85A抗原基因在大肠杆菌中实现了稳定表达.结论成功地对结核杆菌免疫保护性抗原Ag85A进行了基因克隆与表达,为进一步研究其在结核病新型疫苗研制中的应用奠定了基础.
作者:谢勇恩;鲍朗;胡昌华;张万江;陈炜 刊期: 2002年第02期
目的用B型超声检查探讨无临床症状胆囊结石的预后.方法 217例健康体检中发现的无临床症状的胆囊结石患者,用B型超声对其追踪观察16年,并将胆石的声像图表现与其发生的临床并发症进行对照分析.结果Ⅰ型胆石症47例中仅2例(4.3%)出现需择期手术切除的临床并发症;Ⅱ型胆石症98例中36例(36.7%)出现各类临床并发症,其中19例(19.4%)出现了需急诊手术治疗的严重临床并发症;Ⅲ型结石症45例中25例(55.5%)出现各类临床并发症,但仅2例(4.4%)属于需急诊手术治疗的严重并发症;Ⅳ型结石症27例中仅6例(22.2%)因一般临床症状而择期手术切除治疗.结论 B型超声通过对无临床症状胆囊结石的大小、数量和胆结石在胆汁中的比重等分析,可初步推导这类胆石症的预后.
作者:赵元全 刊期: 2002年第02期
目的探讨丹参和川芎嗪对尿道瘢痕成纤维细胞生长的影响.方法建立尿道瘢痕成纤维细胞的体外培养,并以此为模型研究丹参和川芎嗪对其生长的影响及其作用机理.结果①丹参和川芎嗪能使尿道瘢痕成纤维细胞形态发生明显改变,细胞由梭形变为椭圆形.②丹参和川芎嗪均可抑制尿道瘢痕成纤维细胞的增殖,当抑制率为50%时,药物浓度分别为2.5mg/ml和75μg/ml.其机制与药物抑制细胞分裂密切相关,而并非是使细胞产生坏死和降解.结论丹参和川芎嗪可望成为有效的瘢痕抑制剂,在尿道瘢痕狭窄的治疗中发挥作用.
作者:黄翔;申吉泓;李虹;王坤杰;魏大鹏;杨宇如 刊期: 2002年第02期
目的探讨儿童及青少年甲状腺癌的临床特点、外科手术方式及其预后.方法回顾性分析我院1982年至2000年收治的20岁以下甲状腺癌73例.结果乳头状癌48例,滤泡状癌22例,髓样癌3 例.Ⅰ期64例,Ⅱ期9例.均行手术治疗,患侧腺叶加峡部切除24例,再加对侧腺叶近全(或大部)切除32例,甲状腺全切17例;单侧功能性颈淋巴结清扫术41例,双侧颈清扫术3例.术后病理示颈淋巴结转移39例.术后131I治疗14例;术后均长期口服甲状腺素片.平均随访8年(1~17年),无一例死亡.结论儿童及青少年甲状腺癌预后较好.选择合理手术方式及术后辅助治疗,可取得满意疗效.
作者:龚日祥;黄军;徐惠珍 刊期: 2002年第02期