谢勇恩;鲍朗;胡昌华;张万江;陈炜
目的比较使用pHSVlac/helper 或pHSVlac/helper virus-free两种载体包装系统进行基因转移时所引起的免疫应答.方法分别将两种载体定位注射到大鼠纹状体内,采用免疫组化方法检测并计数包括TCR、CD4、CD8、MHC-Ⅰ和MHC-Ⅱ在内的几种免疫反应阳性细胞.结果两种载体包装系统引起的TCR、CD4和CD8免疫反应阳性细胞浸润高峰出现在基因转移后的第7天,MHC-Ⅰ和MHC-Ⅱ反应高峰在第4天.它们对pHSVlac/helper的反应明显大于对pHSVlac/helper virus-free的反应(P<0.001),前者是后者的3~12倍,并且,pHSVlac/helper virus-free所致的细胞浸润迅速消退接近PBS对照组水平.结论无辅助病毒载体包装系统仅引起较弱的免疫应答.
作者:章为;Alfred Geller 刊期: 2002年第02期
目的揭示二期骨折愈合中Ⅰ、Ⅱ型胶原表达的变化规律,加深对骨愈合机制的认识.方法利用大鼠股骨二期骨折愈合模型,分别于骨折后3天和1、2、3、4周取材,制片,HE、阿尔新蓝染色及Ⅰ、Ⅱ型胶原免疫组化染色.结果 1周时,免疫组化染色显示Ⅰ、Ⅱ型胶原均有表达.Ⅱ型胶原表达第3周时达峰值,Ⅰ型胶原表达3周后急剧上升,第4周达较高水平.结论在骨折愈合的不同时期,软骨痂内软骨细胞的组织形态变化以及不同类型胶原的表达均与其修复功能密切相关.
作者:张晛;王凡;蒋红梅;李瑞祥 刊期: 2002年第02期
目的探讨用游离兔耳廓软骨修复广泛气管前壁缺损的可行性,并观察自体移植与异体移植的差异.方法取新西兰大耳白兔20只,分为自体移植组(n=10)与异体移植组(n=10),取右耳游离耳廓软骨行自体或异体移植修复8~10环气管前壁缺损,术后1、2、4、8和12周每组分别处死1~2只行内窥镜检查、生物力学测试及组织学观察.结果 18只兔存活,内窥镜发现气管狭窄不明显,以瘢痕增生为主.生物力学测试发现,移植软骨单位大应力在0、4、8、12周分别为2.54±0.19、1.31±0.21、1.72±0.22和1.96±0.08kPa/mm.组织学观察发现移植软骨部分发生变性和坏死,但存活软骨、新生软骨在术后12周时分别占62.0%±3.45%、65.8%±9.48%(自体移植组),60.1%±3.98%、55.2%±7.57%(异体移植组).自体移植与异体移植的炎性反应差异不大,免疫排斥反应较轻.结论游离耳软骨可用来修复广泛的气管前壁缺损,也可用作同种移植.
作者:张瑞林;梁传余;秦廷武;李秀群;刘军 刊期: 2002年第02期
目的制备葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxin A,SEA)脂质体,研究其在体内的分布特性,为SEA脂质体治疗肝癌提供依据.方法用125I标记SEA,逆相蒸发法制备SEA脂质体,考察其包封率及粒径,观察125I-SEA及SEA脂质体静脉注射后不同时间小鼠体内的分布.结果 5批SEA脂质体样品平均粒径为505±34 nm,平均包封率为44.4%±4.8%.SEA脂质体主要分布于肝、脾,尤以肝脏中分布多,而在血中清除加快,在其他组织中分布显著减少,与游离SEA比较具有显著差异(P<0.05).结论逆相蒸发法制备SEA脂质体简单、重复性好,可获得较高的包封率和符合肝靶向要求的脂质体;SEA脂质体具有一定的肝靶向性,可为减轻SEA的毒副作用以及肝癌的治疗提供新途径.
作者:李志宇;何生;薛华;苏敏;汪现 刊期: 2002年第02期
目的探讨睾酮对血管内皮生长因子(VEGF)及其受体之一(FLK-1)在前列腺组织中表达的影响.方法分别在摘取大鼠睾丸后7天及以后注射不同剂量的睾酮 ,HE染色观察前列腺的组织学变化,免疫组化SP法检测VEGF和FLK-1在大鼠前列腺腹侧叶的蛋白表达.结果正常大鼠前列腺可见多种生长状态上皮,VEGF和FLK-1蛋白在增生活跃上皮及间质的血管内皮上有阳性表达;去势可导致大鼠前列腺腹侧叶重量减轻(P<0.05),组织学表现为上皮组织萎缩,VEGF和FLK-1在前列腺上皮中的蛋白表达明显降低(P<0.05);注射睾酮后,前列腺重量逐渐增加(P<0.05),组织学表现为上皮增生逐渐活跃,VEGF和FLK-1在前列腺上皮中的蛋白表达逐渐增强(P<0.05).结论睾酮是维持大鼠前列腺腹侧叶生长和发育所必需的,睾酮可能通过正向调节VEGF及其受体(FLK-1)的蛋白表达来刺激前列腺组织的生长.
作者:刘孝东;董强;卢一平;肖邦良;杨秀英;杨宇如 刊期: 2002年第02期
目的探讨从不同年龄人获得的牙髓组织与细胞游出之间的关系,以提高牙髓细胞原代培养的成功率.方法采用组织块酶解法对20个来自不同年龄志愿者的恒牙牙髓进行牙髓细胞的原代培养.结果牙髓年龄与其原代培养时细胞游出率之间有负相关关系(r=-0.78987),年轻恒牙牙髓细胞游出率高.结论在人牙髓细胞的原代培养时尽量采用年轻恒牙.
作者:董伟;周学东;李继遥 刊期: 2002年第02期
目的探讨内皮细胞缺血再灌注损伤及中药益生注射液对其的拮抗机理.方法用无糖培养基在无氧条件下培养使人脐静脉内皮细胞株ECV304缺氧1.5小时,然后以含糖培养基,在5%CO2和37℃条件下给氧培养5小时,建立内皮细胞缺氧再给氧模型,以模拟体内缺血再灌注对血管内皮细胞的损伤,并用益生注射液干预其缺氧再给氧过程,荧光染色显示胞内钙离子与线粒体,细胞化学染色显示胞内琥珀酸脱氢酶(SDH)和乳酸脱氢酶(LDH)活性,并检测细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)浓度.结果缺氧再给氧使ECV304细胞变圆、收缩、脱落,细胞内钙离子含量增高,线粒体膜电位减弱,SDH活性下降,LDH活性增高,培养液中SOD与NO含量减少,而MDA浓度增高;用益生注射液干预后,ECV304细胞形态基本恢复正常,上述多项检测指标的改变得以逆转.结论缺氧再给氧导致ECV304细胞发生脂质过氧化,胞内钙离子超载、SOD活性及NO水平降低、线粒体功能受损,益生注射液可使上述变化得以逆转,从而拮抗内皮细胞缺氧再给氧损伤.
作者:李胜富;蒋红梅;李幼平;吴大蓉;张立;张璘;程惊秋 刊期: 2002年第02期
目的探讨儿童及青少年甲状腺癌的临床特点、外科手术方式及其预后.方法回顾性分析我院1982年至2000年收治的20岁以下甲状腺癌73例.结果乳头状癌48例,滤泡状癌22例,髓样癌3 例.Ⅰ期64例,Ⅱ期9例.均行手术治疗,患侧腺叶加峡部切除24例,再加对侧腺叶近全(或大部)切除32例,甲状腺全切17例;单侧功能性颈淋巴结清扫术41例,双侧颈清扫术3例.术后病理示颈淋巴结转移39例.术后131I治疗14例;术后均长期口服甲状腺素片.平均随访8年(1~17年),无一例死亡.结论儿童及青少年甲状腺癌预后较好.选择合理手术方式及术后辅助治疗,可取得满意疗效.
作者:龚日祥;黄军;徐惠珍 刊期: 2002年第02期
目的探讨抑癌基因p53 codon 72多态性与宫颈癌的关系.方法应用聚合酶链反应法分别对15例卵巢浆液性囊腺癌、15例宫颈鳞状细胞癌和20例正常妇女的p53 codon 72 多态性进行检测.结果 p53 Arg 纯合子、p53 Pro 纯合子和p53 Arg/p53 Pro杂合子在正常妇女对照组分别为38%、6% 和56%;而在卵巢癌组分别为38%、5%和57%;在宫颈癌组分别为78%、8% 和14%.上述人群中,宫颈癌p53 Arg 纯合子明显高于卵巢癌组和正常妇女对照组(P<0.05).结论 p53 Arg 纯合子可作为与HPV感染有关的宫颈癌的危险因素.
作者:郄明蓉;张燕华;吴俊梅 刊期: 2002年第02期
目的评价胃癌术前介入治疗、术中区域性动脉灌注化疗及全身化疗的疗效.方法对97例经病理学确诊的胃癌患者进行回顾性分析,其中术前经介入插管化疗33例,术中经供应肿瘤的区域动脉行插管化疗40例,术中全身性化疗24例.所用药物为氟尿嘧啶脱氧核苷(FuDR)、阿霉素和丝裂霉素.结果采用前两种方法治疗后,病理检查结果显示原发灶中的癌细胞均有不同程度地变性坏死,其近期有效率为95%,而后一种方法的有效率仅为41.67%(P<0.05).术中区域性动脉灌注化疗选择性强,近远期抗癌效果好,且较第一种方法更能减少和防止术中癌细胞的医源性扩散、种植及术后复发,同时毒副作用更小,患者住院费用更低. 结论术中区域性动脉灌注化疗具有更多的优点,值得推广.
作者:彭兵;肖乾虎;王向东;赖毅;程中;庄文;张尚福;陈代云 刊期: 2002年第02期
目的了解影响老年人生存质量的老年性白内障的现状和分布特点。方法 用整群随机抽样方法选取成都城乡1016例60岁及其以上老年人,进行问卷调查和体检。结果 老年性白内障城市患病率为52.3%,农村患病率为51.3%,女性患病率高于男性,且患病率随年龄增加而上升。既往诊断率低于现患率,农村尤为显著。结论 应加强老年性白内障的防治工作。
作者:刘春玲;侯川;刘谊;栾荣生;严密;王静思;李幼平;刘东磊;黄建华;张天德 刊期: 2002年第02期
目的探讨部分去传入后猫脊髓背角Ⅱ板层内NGF、BDNF、NT-3及其mRNA的时空变化规律。方法 用免疫组化和原位杂交技术检测部分去传入(切断L1~L5、L7~S2背根,保留L6背根为备用根)3~5天、10~11天后,猫脊髓L3、L5、L6或L7节段背角Ⅱ板层内三种神经营养素及其mRNA的表达变化。结果 ①正常猫NGF及其mRNA分布于Ⅱ板层神经元内;BDNF分布于神经纤维终末、膨体和神经元内,mRNA阴性;NT-3分布于神经元、胶质细胞和少量神经纤维及膨体中,mRNA阴性。②去传入后3~5天,NGF及其mRNA阳性神经元数明显增多,NT-3阳性神经元和胶质细胞数也明显增多,而BDNF含量及阳性膨体数却明显减少;10~11天时,NGF及其mRNA阳性神经元数仍维持高峰水平,NT-3者虽仍高于正常但已有所下降,而BDNF含量除L7节段外已恢复到正常,但阳性膨体数仍未恢复。BDNF和NT-3的mRNA仍呈阴性。③NGF达高峰的时间在L5、L6节段较早,L3较晚;BDNF含量的恢复以L7迟;NT-3阳性胶质细胞数量的变化在各节段一致,唯L5、L7节段的阳性神经元数在10~11天时即降致正常水平,L3节段仍维持较高水平。结论 三种因子均参与部分去传入后脊髓的可塑性反应,但其发挥作用的早晚及维持时间却不尽相同。
作者:周雪;吴良芳;谌宏鸣;王廷华;陈丽华;保天然;廖德阳 刊期: 2002年第02期
目的探讨血管紧张素原(AGT)和血管紧张素I转化酶(ACE)基因变异是否与妊娠高血压综合征(简称妊高征)有关联. 方法采用ACE基因PCR扩增片断长度多态性及AGT基因限制性片断长度多态性方法, 对成都地区81例汉族妊高征及205例正常孕妇对照进行了检测.结果妊高征及正常孕妇等位基因的频率分别为:AGT235T为0.856、0.846;ACE D为0.333、0.364.两组之间各等位基因频率分布无显著差异;与白种人相比,白种人ACE D等位基因频率均高于中国人(P<0.001),而AGT235T等位基因频率白种人(0.350~0.482)及其它非白种人(0.620~0.739)均较中国人(0.846)为低(P<0.01,P<0.001).结论本研究未发现AGT及ACE基因的变异与中国人(成都地区)妊高征发病有关联.
作者:白怀;刘兴会;刘瑞;刘宇;李敏淑;刘秉文 刊期: 2002年第02期
目的探讨糖尿病性肌梗塞的诊断及治疗.方法回顾性分析了4例糖尿病肌梗塞患者的临床特征、影像学和病理学特点及治疗方法. 结果①4例患者均为2型糖尿病,平均糖尿病病程6.8年,入院时平均血糖13.7mmol/L,平均HbA1C为9.5%;合并视网膜病变4例,糖尿病肾病、周围神经病变、高血压各2例.②发病初期均有疼痛性弥漫性肌肉肿胀,3例在起病1~2周后形成局部肌肉肿块.③检查结果:彩超检查示病灶部位肌肉肿胀增厚,横纹消失,呈不规则强弱相间回声;CT平扫显示受累肌肉明显肿胀,体积增大,肌束间隙及肌周间隙模糊不清;肌肉活检可见肌纤维横纹消失,部分肌纤维萎缩,核链状增生,肌纤维小片状透明变性,部分肌纤维内见空泡变化,小血管壁增厚,个别毛细血管见透明血栓形成,并见个别小血管有血栓机化,间质水肿,灶性肌纤维坏死伴中性粒细胞和淋巴细胞浸润.④治疗及预后:入院后给予对症及抗凝治疗3例,外科清创1例,症状和体征缓解时间平均为22天;随访2月至6年,3例病情稳定, 1例出院3月后猝死.结论糖尿病性肌梗塞是糖尿病的一种罕见且被人们认识不足的并发症;治疗上主要是用胰岛素严格控制血糖及卧床休息,镇痛等对症治疗,辅以抗凝治疗;其短期预后良好.
作者:冉兴无;童南伟;步宏;宋彬;罗燕;文晓蓉;熊萍;谢隆兵;田浩明;李秀钧 刊期: 2002年第02期
目的确定酶解消化法牙髓细胞原代培养的合适条件与时间.方法选取年轻患者因正畸拔除的完整和无龋坏牙齿,取出牙髓,分别采用胶原酶一步法消化牙髓组织30分钟及1、2、3小时,胶原酶分步消化法,组织块法和组织块酶解法进行原代培养.倒置显微镜台盼蓝染色观察细胞解离及存活状况,免疫组化法鉴定细胞来源.结果胰酶消化2小时后,组织块基本未解离.用0.1%胶原酶一步法消化1、2、3小时后组织块均彻底解离为单细胞,基本无残余. 0.1%胶原酶消化30分钟后组织块解离不完全.0.1%胶原酶分步法消化1小时后组织解离彻底.台盼蓝染色表明经胶原酶一步法消化获得的牙髓细胞被台盼蓝着色的比例随消化时间减短而下降.分步法消化细胞着色率低于一步法.组织块酶解法的组织块解离、贴附和细胞游出状况均优于组织块法.结论Ⅰ型胶原酶在37℃,持续振荡条件下消化1小时是彻底酶解消化人牙髓的短时间.分步酶解法能获得比一步酶解法更高的活细胞数量.而从效果、操作难易和耗时多少等多方面因素综合考虑,组织块酶解法是人牙髓组织原代培养的佳方法.
作者:赵瑚;陈治清;白薇 刊期: 2002年第02期
目的探讨对氨基苯甲酸(PABA)对牙根面龋致病菌之一的粘性放线菌生长的影响.方法在加入不同浓度PABA的改良Carlsson培养基中采用厌氧培养技术(80%N2, 10%H2, 10%CO2)培养细菌48小时,通过UV-1601紫外可见分光光度仪测定细菌浓度OD值(λ=540nm);并用平板倾注法对细菌进行计数及琼脂平板培养观察细菌生长的情况.结果 10-10~10-4g/L浓度的PABA有促进粘性放线菌生长的能力,且当PABA浓度增加到10-6g/L时,促进生长的作用达强;当PABA浓度增加到10-3g/L时,对粘性放线菌的生长无明显的促进作用.结论 PABA可促进粘性放线菌的生长,在PABA浓度为10-6g/L时,促进生长的能力达强.
作者:郭斌;周学东;肖晓蓉;李蕾;朱吵 刊期: 2002年第02期
目的观察急性胰腺炎时炎症性细胞因子和抗炎症性细胞因子的分泌变化,并探讨生长抑素(思他宁)对急性胰腺炎的治疗机理.方法实验选用SD大鼠,分为正常对照组(n=6)、急性胰腺炎组(采用开腹胰管注射5%牛黄胆酸钠1.0ml/kg诱导急性胰腺炎,不治疗)和生长抑素治疗组(胰腺炎诱导成功后0.5小时静脉注射思他宁20μg/kg).后两组动物分别在术后2小时(n=6)、6小时(n=6)和24小时(n=8)处死抽血,用Bioassay法检测血中炎症性细胞因子IL-1、TNFα和IL-6;用ELISA检测血中抗炎症性细胞因子IL-10和TGF-β;作血清淀粉酶及胰腺湿重测定.结果对照组血中IL-1为0.56±0.06ng/ml,TNFα为23.50±1.871 IU/ml,IL-6为69.0±6.40 IU/ml,IL-10为32.05±14.87 pg/ml,TGF-β为66.4±13.20 pg/ml.急性胰腺炎组成模后24小时其血中IL-1为1.15±0.13ng/ml,TNFα为55.33±12.79 IU/ml,IL-6为127.17±13.91 IU/ml,IL-10为68.13±19.90 pg/ml,TGF-β为103.77±28.95 pg/ml,与正常对照组比较明显升高(P<0.05).生长抑素治疗组在生长抑素治疗后24小时,其血中IL-1为0.83±0.12ng/ml,TNFα为33.00±7.40 IU/ml,IL-6为71.83±6.34 IU/ml,IL-10为42.2±14.55 pg/ml,TGF-β为45.98±18.10 pg/ml,与胰腺炎组比较,其各种细胞因子均明显下降(P<0.05),血清淀粉酶和胰腺湿重均明显好转.结论急性胰腺炎时血中炎症细胞因子和抗炎症细胞因子均升高,提示急性胰腺炎病程中免疫过激和免疫抑制并存,而生长抑素对这一免疫异常有双向调节作用.
作者:陈晓理;吴浩;黄兴兰;吴晓娟 刊期: 2002年第02期
目的探讨细胞凋亡检测用于卵巢癌化疗药物敏感性试验的可行性.方法采用末端标记法直接检测顺氯胺铂等6种化疗药物诱导4例卵巢癌实体瘤细胞凋亡的结果,并与三磷酸腺苷生物发光法(ATP法)检测结果进行对比.结果同一种化疗药物对不同来源的癌细胞的细胞凋亡诱导程度不同,与ATP法比较二者的检测结果存在一致性(P0=0.75).结论上述结果提示,细胞凋亡检测能直接用于了解药物诱导肿瘤细胞凋亡的程度,若作为一种药物敏感性试验方法与ATP法组合应用,将有可能提高临床应用效果.
作者:楼江燕;王和;刘珊玲;彭芝兰 刊期: 2002年第02期
目的研究用钙通道阻滞剂硝苯地平抑制宫缩、防治早产的临床效果及其副作用.方法将84例先兆早产患者随机分为3组,每组28例.A组给予硝苯地平10 mg,B组给予硝苯地平20 mg,C组为同期未用药对照组.观察推迟分娩时间,推迟分娩效果与宫颈开大情况及孕周的关系,妊娠结局等.结果硝苯地平能有效抑制子宫收缩,延长孕周,从用药两组可看出,其抑制强度与剂量相关,且在宫颈尚未开大之前,越早治疗,效果越好,本组病例中尚未发现其对母体及胎儿有明显毒副作用.结论硝苯地平防治早产效果好,值得临床上进一步观察应用.
作者:张晓琴;刘蒙娜 刊期: 2002年第02期
目的探讨丹参和川芎嗪对尿道瘢痕成纤维细胞生长的影响.方法建立尿道瘢痕成纤维细胞的体外培养,并以此为模型研究丹参和川芎嗪对其生长的影响及其作用机理.结果①丹参和川芎嗪能使尿道瘢痕成纤维细胞形态发生明显改变,细胞由梭形变为椭圆形.②丹参和川芎嗪均可抑制尿道瘢痕成纤维细胞的增殖,当抑制率为50%时,药物浓度分别为2.5mg/ml和75μg/ml.其机制与药物抑制细胞分裂密切相关,而并非是使细胞产生坏死和降解.结论丹参和川芎嗪可望成为有效的瘢痕抑制剂,在尿道瘢痕狭窄的治疗中发挥作用.
作者:黄翔;申吉泓;李虹;王坤杰;魏大鹏;杨宇如 刊期: 2002年第02期